中国对虾（Penaeus chinensis）酚氧化酶的分离纯化及其部分生物化学性质

以中国对虾 (Penaeuschinensis)的血淋巴为材料 ,利用凝胶过滤和离子交换等方法 ,对酚氧化酶 (phe noloxidase ,E .C .1 .1 0 .3.1 )进行了分离纯化和生物化学性质研究。实验发现 ,酚氧化酶原 (prophenoloxidase)的分子量为 87.5kD左右 ,在实验操作过程中极易发生降解或自身降解 ,变成有活性的大小约 77kD的酚氧化酶 ,1 0g/LSDS可使该酶原全部被激活而成为有活性的酚氧化酶。以L 二羟苯丙氨酸 (L DOPA)为特异性底物对酚氧化酶活性进行研究发现 ,其最适pH值为 6 .0左右 ,最适温度为 4 0℃ ,Km 值约为 1 .99mmol/L。利用多种氧化酶抑制剂对酚氧化酶纯化样品的酶活性进行研究 ,发现抗坏血酸 (ascorbicacid)、半胱氨酸 (cysteine)和二硫苏糖醇(dithiothreitol)对酚氧化酶活性具有很强的抑制作用 ,硫脲 (thiourea)对酚氧化酶活性也具有较强的抑制作用 ,而酚氧化酶对苯甲酸 (benzoicacid)、柠檬酸 (citricacid)和亚硫酸钠 (sodiumsulfite)不敏感 ,而且该酶对酪氨酸等单酚还具有高特异性的酚氧化酶活性 ,表明它可能是一种酪氨酸酶型的酚氧化酶 ;此外 ,该酶对EDTA和金属离子非常敏感 ,其活性能被Cu2 强烈抑制 ,被Mg2 强烈激活 ,表明该酶很可能是一种金属酶 (metalloenzyme)     

日本对虾野生种群和养殖群体的同功酶遗传变异

ＰｅｎａｅｉｄｓｈｒｉｍｐＰｅｎａｅｕｓｊａｐｏｎｉｃｕｓ ,ｃｏｍｍｏｎｌｙｎａｍｅｄａｓＦｌｏｗｅｒｙＳｈｒｉｍｐｏｒＢａｎｄｅｄＳｈｒｉｍｐ ,ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏｓｔｃｏｍｍｅｒ ｃｉａｌｌｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｓｐｅｃｉｅｓｏｆｍａｒｉｎｅｃｒｕｓｔａｃｅａｎｆｉｓｈｅｒｙｉｎＣｈｉｎａ .Ｂｅｉｎｇｏｆｔｈｅｗａｒｍ ｗａｔｅｒｓｐｅｃｉｅｓｃｏｎｄｕｃｔｉｎｇｓｈｏｒｔｄｉｓｔａｎｃｅｍｉｇｒａ ｔｉｏｎ,ｔｈｅａｎｉｍａｌｉｓｍａｉｎｌｙｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄｉｎｔｈｅｃｏａｓｔａｌｗａ…     

真鲷野生群体和人工繁殖群体的同工酶遗传差异

采用水平淀粉凝胶电泳技术对采集于黄海海州湾海域的真鲷野生群体和经过2代人工繁育的养殖群体进行了同工酶遗传变异研究。分析检测了2个群体各50个样本肌肉和肝脏组织的13种同工酶共20个基因位点,其中MDH_a、GPI、PGM等10个位点为多态位点,ME和EST-b为变异程度比较高的位点。野生群体和人工繁殖群体的多态位点比例分别为45%和25%（P _0.95）;群体平均观察杂合度分别为0.141±0.044和0.095±0.043。结果表明,真鲷的野生群体和养殖群体拥有较高程度的遗传变异水平,但是养殖群体的遗传变异水平比野生群体有一定程度的降低。养殖群体遗传变异水平的降低在一定程度上是由于亲鱼数量少所致。比较了同工酶分析和RAPD分析的结果。将此两种技术相结合在鱼类群体遗传多样性分析中具有比较实际的意义。     

斑节对虾两个野生亲虾种群遗传多样性

采用RAPD和mtDNA 16S rRNA基因序列分析方法对海南和马来西亚斑节对虾(Penaeus monodon)种群进行了遗传多样性和遗传分化研究.结果表明:15个RAPD随机引物共检测到82个位点,海南和马来西亚种群的多态位点比例分别为75.90％和76.83％,杂合度分别为0.199和0.218,遗传多样性指数分别为0.276和0.288,种群间的遗传距离为0.015;16S rRNA基因检测的种内遗传变异较低,马来西亚和海南种群的核苷酸多样性分别为0.011和0,种群之间的遗传距离为0.008;马来西亚种群比海南种群的遗传变异水平要高得多,且海南种群可能起源于马来西亚种群;进行遗传选育时可考虑引进马来西亚亲虾作为奠基群体.     

不同地理种群小菜蛾的遗传多样性分析

采用水平切片淀粉凝胶电泳方法,分析了北京、河北、云南和武汉4个不同地理种群的小菜蛾的等位酶,得到了3个酶系统（甘油醛磷酸脱氢酶（GPD）、苹果酸酶（ME）和苹果酸脱氢酶（MDH-1,MDH-2和MDH-3）5个基因位点的资料。用Biosys2.0软件计算了不同地理种群的遗传变异指标（N、A、P、H0和He）,结果表明小菜蛾各种群内的基因多样性大于各种种群间的基因多样性（约15倍）,武汉种群小菜蛾的遗传性最大。并计算了遗传距离D和相似性系数,并由此得出聚类图,分析了小菜蛾不同地理种群间的遗传关系。     

短沟对虾两个野生群体遗传多样性的RAPD分析

利用RAPD标记技术检测了厦门和汕头沿海2个短沟对虾群体基因组DNA的多态性,并对其遗传多样性进行了分析。从40条随机引物中筛选出13个10bp引物。共扩增出65条清晰可重复的DNA片段,片断长度为100—2200bp,在2个群体间没有检测到特异的片段。厦门和汕头群体的多态片段比例分别为87．69％和89．23％,杂合度分别为0．212和0．218,遗传多样性指数分别为0．2847和0．2913,两群体间的遗传距离为0．018,FST值为0．004。可见两野生群体种质资源仍然维持在良好水平,遗传分化程度很低,可能是同一种群,具有进一步开发的潜力。     

西藏和埃塞俄比亚大麦6个同工酶位点遗传变异的对比分析

我们对比分析了埃塞俄比亚(简称埃)和西藏共777份栽培大麦材料在6个同工酶位点(Est1、Est2、Kst3、Est4、Acp1和Got1)的遗传变异。结果表明,无论是从单个位点上分析还是在多位点基因组合形式上评价,埃大麦与西藏大麦群体在遗传组成和多位点基因结构上都有着很大的差异。遗传多样性对比分析表明,从单个位点基因类型看,西藏大麦与埃大麦遗传变异程度大致相当,但从多位点基因组合形式看,西藏大麦遗传多样性程度极显著地高于埃大麦。     

日本囊对虾4个地理群体线粒体16S rRNA序列及遗传结构分析

对我国东南沿海日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)的4个地理群体广东群体(GD)、台湾群体(TW)、福建群体(FJ)和浙江群体(ZJ)的线粒体16S rRNA基因片段进行PCR扩增,对产物进行测序后分析。经比对获得470bp的核苷酸分析序列,发现了16个变异位点,得到了10种单倍型。广东、台湾、福建和浙江群体的核苷酸多样性依次分别为0.0008、0.0010、0.0051、0.0015,各群体均存在独有的单倍型和共有单倍型。群体遗传距离分析表明各群体间保持着一定的遗传差异,其中福建群体与其他群体之间存在着较远的遗传距离并保持了较高的遗传多样性。另外,利用其423bp的16S rRNA同源序列探讨了对虾科6个属共12种对虾的系统进化关系,囊对虾属与沟对虾属亲缘关系较近聚为一支,其他4个属的10种对虾聚为一支。     

温度对中国对虾（Penaeus orientalis）越冬亲虾性腺发育与存活率的影响

本文根据１１ａ来中国对虾越冬亲虾生产性培育试验资料的统计分析结果得出：亲虾性腺发育的起点温度为７．９±０．３℃,性腺发育成熟的有效积温为２５０．４±３３．６日度,预测性腺发育成熟所需日期公式为。升高或降低越冬期间的基础水温可控制亲虾产卵时间迟早。产卵期间间歇升降温或连续升温,可控制亲虾集中产卵的次数和亲虾产卵持续时间。亲虾越冬期间,有利于提高亲虾存活率的水温,宜控制在８．０－１３．０℃,不宜超过１３．５℃,升降温幅度不宜超过１．５℃,以１．０℃左右为好。亲虾产卵期间,有利于亲虾存活率、产后卵子孵化率和亲虾再次产卵率的适宜水温为１２．０－１５．０℃,不宜超过１６．０℃,升降温幅度不宜超过１．０℃,以１．０℃以下为好。     

真鲷野生群体和人工繁殖群体的同酶遗传差异

采用水平淀粉凝胶电泳技术对采集于黄海海州湾海域的真鲷野生群体和经过 2代人工繁育的养殖群体进行了同工酶遗传变异研究。分析检测了 2个群体各 50个样本肌肉和肝脏组织的 1 3种同工酶共 2 0个基因位点 ,其中MDH_a、GPI、PGM等 1 0个位点为多态位点 ,ME和EST_b为变异程度比较高的位点。野生群体和人工繁殖群体的多态位点比例分别为 45%和 2 5% (P0 .95) ;群体平均观察杂合度分别为 0 .1 41± 0 .0 4 4和 0 .0 95± 0 .0 4 3。结果表明 ,真鲷的野生群体和养殖群体拥有较高程度的遗传变异水平 ,但是养殖群体的遗传变异水平比野生群体有一定程度的降低。养殖群体遗传变异水平的降低在一定程度上是由于亲鱼数量少所致。比较了同工酶分析和RAPD分析的结果。将此两种技术相结合在鱼类群体遗传多样性分析中具有比较实际的意义。     

中国对虾继饥饿后的补偿生长研

1999年7至8月份,在25.0±0.5℃条件下对中国对虾（湿重,1.454±0.150g）进行了不同时间的饥饿处理后再供食的恢复生长实验。对照组C连续饱食投喂32d;处理组S4、S8和S12分别饥饿4、8和12d后再饱食投喂28、24和20d。主要结果如下饥饿结束时各处理组的干重和湿重显著低于对照组（P<0.05）;实验结束时S4组和对照组间的干重和湿重差异不显著（P>0.05）,而S8和S12两组的干重和湿重仍显著低于对照组（P<0.05）;恢复生长后各处理组的湿重摄食率显著高于对照组（P<0.05）。实验结果表明,中国对虾继饥饿后再恢复喂食出现完全或部分补偿生长效应,且这种补偿生长效应主要是通过恢复生长阶段食欲增大,摄食水平提高实现的。     

夏腊梅的遗传多样性及其保护

夏腊梅（Sinocalycanthus chinensis)是国家二级保护的珍稀濒危植物,夏腊梅属（Sinocalycanthus)的唯一代表,仅间断分布于我国浙江省临安市天台县极狭小的范围内,本文采用等位酶淀粉凝胶电泳技术对采自上述两地的天然居群和天目山自然保护区引种的人工居群的553个样品进行了遗传多样性检测,并与浙江腊梅（Chimonan-thus zhejiangensis)作对比,检测结果表明夏腊梅的遗传多样性极低,从14个酶系统检测到的23个位点看,在物种水平上每位点的等位基因平均数（A）为1.2,多态位点（P）占21.7%,观察杂合度（Ho)为0.010。在居群水平上,A=1.0-1.1,P=0-13.0%,Ho=0-0.014。而对照种浙江腊梅杭州植物园人工居群的上述指标分别为A=1.5,P=39.1%,Ho=0.071。夏腊梅的2个自然居群之间在Mdh-4,Pgd-3和Sod-1发生显著的分化,但居群内亚居群间几乎没有分化,在天目山自然保护区引种的人工居群中没有检测到多态性,说明作为迁地保护的天目山自然保护区人工居群并没能有效地保护夏腊梅的遗传多样性,由于目前自然保护区基本上采用不加人为干预的经营方式,划人龙塘山自然保护区内的自然亚居群会因为森林的自然演替而灭绝,所以,自然保护区目前的这种经营方式不适合对夏腊梅的保护,夏腊梅的例子说明,当我们对保护对象的生物学特性缺乏认识时,我们既不知道应该保护什么,也不知道应该如何保护。     

Effects of eyestalk ablation and limb amputation on the moult cycle of the shrimp Penaeus chinensis

The shrimp Penaeus chinensis at moult stage D_o were subjected to one of the three following treatments: bilateral eyestalk ablation, amputation of the fifth pair of pereiopods, and both of the above treatments. Two consecutive ecdyses after treatments were followed. Intact animals served as control. Precocious moulting was exhibited in all treated groups. Eyestalk ablation shortened the time to the first ecdysis more than does limb amputation. Additive effect was found in shrimps receiving both treatments. The duration between the first and second ecdyses in treated shrimps was shorter than that of intact animals, but the durations in the three treated groups were not significantly different from one another. Regenerates of limbs appeared after the second ecdysis following limb amputation. Further, change of body colour from black and green to red and white was observed in shrimps with eyestalk ablation.     

中国对虾呼肠孤样病毒感染的电镜观察

呼肠孤病毒在自然界广泛存在于脊椎动物、无脊椎动物和植物中.水产动物呼肠孤病毒感染曾见于鱼、贝、蟹.近几年随着对对虾病毒病害研究的日益重视,在对虾中也发现呼肠孤病毒的感染.Tsing等[1]最早于1987年在法国南部养殖的日本对虾(P.japonicus)幼虾中发现呼肠孤病毒感染.Krol等[2]于1990年在试验感染的南美白对虾(P.vannamei)中发现呼肠孤样病毒与对虾杆状病毒混合感染.中国大陆养殖的中国对虾自1993年全面暴发流行病以来,许多学者进行了对虾流行病的病原学、流行病学及诊断和防治方法的研究,部分学者曾在中国对虾(P.chinensis)中观察到呼肠孤样病毒颗粒[3],但未报道较详细的电子显微镜观察资料.     

Isozyme variation among four species of the catfish genus Clarias

Native Thai species of Clarias catfishes and one species introduced from Africa can be easily distinguished by horizontal starch gel electrophoresis of allozymes. An undescribed species of Clarias was collected from Thailand and found to possess several fixed allelic differences from the Clarias previously studied.     

中国对虾球状病毒垂直传播的初步研究

应用透射电镜技术在越冬中国对虾雌性亲虾体内检测出一种球状病毒,直径为80nm左右。人工感染实验证实该病毒颗粒具有感染性。对带毒亲虾在室内隔离条件下进行了暂养催产,并对其所产的卵子、幼虫和的虾进行了隔离培育。带毒亲虾的卵子孵化率、幼虫成活率和幼虾生长速度均明显低于不带毒亲虾的子代。电镜观察发现．在带毒亲虾卵巢、各期幼虫和幼虾的细胞内存在球状病毒颗粒,在刚产的卵子的卵黄颗粒中可看到一种似球状病毒颗粒。研究表明：带球状病毒的对虾呈隐性感染,在胁迫条件下带毒幼虾可暴发病害,带毒亲虾可正常发育产卵,病毒可能通过卵巢、卵子进行垂直传播。     

Genetic structure among Thai populations of Aedes aegypti mosquitoes

Thirty‐one field populations of Aedes aegypti (L.) were compared using isozyme starch gel electrophoresis to characterize genetic variation between populations. Ae. aegypti were collected from seven provinces in Thailand. Thirty‐one isozyme encoding loci, including 19 polymorphic loci, were characterized. Only small levels of genetic differentiation were observed among the 31 district populations in the seven provinces. Isolation by distance among populations from the seven provinces showed no correlation between genetic variation and geographical distance.     

灵芝栽培菌株酯酶同工酶的酶谱多样性

采用酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法,对灵芝属(GanodermaKarst.)9株灵芝进行品系间鉴定,并采用非加权组平均法(UPGMA)进行聚类分析。试验结果表明:在9个菌株(16 d)中共检测到40条酶带,各个菌株分别具有3至6条酶带,9个菌株共有4种酶谱类型。在相异系数为0.62时所有供试菌株归为1个群,在相异系数为0.81时,把9个菌株分为5个群。酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定方法可有效应用于灵芝属真菌品种鉴定及亲缘关系分析。