一种快速有效的741杨离体叶片再生芽方法

在对杂交品种741杨(Populus alba(P.davidiana×P.simonii)×P.tomentosa)进行农杆菌介导法转基因的试验中发现了一种快速有效的叶片再生芽的方法.首先叶片外植体在培养基Ⅰ(MS培养基添加0.5 mg/L BA和1.0 mg/L 2,4-D)上培养2～3 d,再转移到培养基SH(MSmedium containing 2.0 mg/L of BA and 0.1 mg/L of NAA)上培养10 d,然后再转移到培养基Ⅱ(MSmedium with 0.5 mg/L of BA)上,培养大约5 d之后86.7%的叶片外植体产生的芽,每片叶片外植体(1 cm×1 cm)可产生40～50个芽.但是,如果叶片外植体在培养基Ⅰ上培养的时间长于5 d,再依次转移到培养基SH和Ⅱ上,则叶片会产生大量根.     

施钾与蚜害处理后马铃薯叶片中多酚氧化酶活性的变化

蚜虫危害是影响马铃薯Solanum tuberosum产量和品质的重要因素之一, 而多酚氧化酶（polyphenol oxidase, PPO）与植物的抗性密切相关。为了阐明施钾条件下马铃薯与桃蚜Myzus persicae的关系, 本实验通过比色法、 iTRAQ技术和蛋白免疫印迹法研究了对照（不施钾, 不接虫）、 接虫、 施钾以及施钾＋接虫4种处理后马铃薯叶片中多酚氧化酶活性的变化。结果表明： 施钾显著降低桃蚜种群数量。随着桃蚜发育期延长, 桃蚜的种群数量显著低于对照, 且6 g/株施钾量对桃蚜种群数量的抑制效果最强。以6 g/株作为施钾量, 对不同处理后马铃薯叶片中多酚氧化酶活性研究显示, 施钾、 接虫+施钾处理均使马铃薯叶片中PPO活性显著提高, 分别比对照增加了44%和67%。通过液相色谱 质谱/质谱联用仪（LC-MS/MS） 分析, 接虫、 施钾、 接虫+施钾处理均不同程度上调了PPO蛋白表达量。Western杂交结果显示： 施钾、 接虫+施钾处理显著增加了PPO的相对表达量, 且接虫+施钾处理使该相对表达量达到最高。结果说明, 施钾、 接虫+施钾处理通过诱导马铃薯叶片中的PPO活性, 从一个侧面提高了马铃薯抗蚜虫能力。