决明子营养价值分析及蛋白提取工艺研究

以大决明子为原材料,基于氨基酸比值系数法,对决明子的营养价值进行了分析;并以碱性缓冲液为提取剂,进行决明子蛋白提取工艺研究,探讨了缓冲液浓度及pH值、料液比、浸泡时间对蛋白提取率的影响,最后用正交试验确定大决明子蛋白的最佳提取工艺。结果表明决明子的营养价值高于大豆和紫花苜蓿,与南瓜接近略低于鸡蛋;提取工艺条件最佳为50 mmol/L、pH值=8.0的KH2PO4-NaOH缓冲液,料液比1 g：50 mL,浸泡提取时间12h。此条件下决明子蛋白的提取率为93.3%。     

响应面法优化乌骨藤中白桦脂酸提取工艺

为优化乌骨藤(Marsdenia tenacissima)中白桦脂酸的提取工艺,在单因素实验的基础上,采用Box-Behnken中心组合设计方法,研究超声功率、提取时间、料液比及提取次数等因素及其交互作用对白桦脂酸提取率的影响。利用Design Expert 8.06软件对数据进行回归分析,得到二次多项式回归方程的预测模型,并通过响应曲面优化方法得到白桦脂酸最佳提取工艺。结果表明,乌骨藤中白桦脂酸的最佳提取工艺为超声功率150 W,提取时间20 min,料液比(g/mL)为1:25,提取2次,白桦脂酸提取率预测值为0.314%,验证值为0.311%。     

鹰嘴豆铁蛋白提取工艺优化研究

本研究以鹰嘴豆为原料,研究了缓冲液种类、缓冲液pH值、料液比、盐析盐种类、盐浓度等因素对鹰嘴豆铁蛋白提取率、总蛋白提取率及干重的影响。在单因素实验的基础上,以L9(34)正交实验方法优化鹰嘴豆铁蛋白提取工艺。结果表明:各因素对鹰嘴豆铁蛋白提取率的影响顺序依次为:料液比盐浓度温度pH。最优提取工艺为:料液比1∶4,浓度为70 mmol/L MgCl2盐析,温度50℃,KH2PO4-NaOH缓冲液pH 7.5,最优提取率为0.002643%。     

正交设计优化微波辅助测定延胡索叶总生物碱含量

通过微波辅助提取的方式,以延胡索叶总生物碱含量为考察指标,通过单因素试验和正交试验对总生物碱提取方法进行优化。重点考察了微波提取温度、时间、料液比、提取缓冲液pH值等因素对延胡索叶总生物碱得率的影响。各因素对延胡索叶总生物碱提取量的影响大小依次为:提取缓冲液pH值料液比提取温度。其最佳的提取方法为:提取缓冲液pH值为1. 0,料液比1∶100,提取温度60℃,提取时间20 min。在此条件下,叶总生物碱含量为25. 910 mg/g。利用微波辅助提取延胡索叶中总生物碱,不仅耗时短,效率高,而且操作简单、稳定,为延胡索叶总生物碱含量测定提供一定的技术支持。     

魔芋飞粉总生物碱的提取工艺研究

目的:研究魔芋飞粉总生物碱提取的最佳条件。方法:以盐酸小檗碱为对照,采用酸性染料比色法测定总生物碱含量;通过单因素试验,考察乙醇浓度、料液比、pH、温度、时间、提取次数等对总生物碱提取效果的影响;通过正交实验确定最佳工艺条件。结果:影响魔芋飞粉总生物碱提取效果的因素的主次顺序是:pH>乙醇浓度>料液比>提取温度,其中pH对魔芋飞粉总生物碱提取效果影响显著(P<0.05)。魔芋飞粉总生物碱最佳提取工艺条件为:料液比为1:15,温度为50℃,乙醇浓度为70%,pH值为1。在此工艺条件下,总生物碱提取量可达到89.79mg/100g。结论:本文建立的优化方法简单可行,可为魔芋飞粉的总生物碱提取工业提供理论依据。     

黄芪多糖的闪式提取技术研究

目的:建立黄芪多糖的闪式提取技术.方法:对黄芪多糖闪式提取技术中提取温度、提取时间、提取电机电压、pH值、料液比、乙醇浓度进行了单因素实验,以多糖得率为指标确定提取工艺,并与传统碱水提取法进行了比较,最后用该工艺对8种不同产地或级别的黄芪原料进行多糖提取和含量测定.结果:初步确定提取工艺为温度65℃、提取时间2 min、pH值为10、提取电机电压200V、料液比1:10、乙醇浓度为5%(V/V),提取所得黄芪多糖总量达到123.46mg/g,比碱提法多糖得率提高了近30%,该法检测不同黄芪原料多糖含量在87.44～187.74mg/g.结论:闪式提取技术能大大提高黄芪多糖提取率,不同产地或级别的黄芪原料在黄芪多糖含量上有较大差异.     

落叶松树皮原花青素提取工艺的研究

本文考察了落叶松树皮原花青素的料液比、乙醇浓度、提取温度、超声时间对原花青素提取效果的影响。采用正交实验,对提取工艺进行了优化。结果表明各因素对原花青素的提取效果的影响程度为提取温度>提取时间>乙醇浓度>料液比。从而确定落叶松树皮中原花青素的最佳工艺条件为:提取温度为35℃,提取时间为0.5 h,乙醇浓度为50%,料液比为1∶15(g/mL)。     

响应曲面法优化小牛胸腺肽提取工艺

目的:为了模拟并且优化小牛胸腺肽提取工艺,获得良好的活性肽提取效果.方法:在单因素试验的基础上,采用响应曲面法对影响胸腺肽提取率的四个因素即料液比、匀浆时间、匀浆液pH值和冻融次数进行优化.利用Design Expert7.0软件对胸腺肽提取率的二次多项数学模型分析.结果:在液料比1.94:1、匀浆时间3.38min、pH值3.23、冻融次数7次时,胸腺肽提取率达最大值,最佳提取率预测值为8.874mg/g,实测值为8.349mg/g.结论:采用响应曲面法能有效地优化小牛胸腺肽提取工艺,获得理想的提取效果.     

杜梨叶黄酮的提取工艺研究及其初步定性分析

目的:优化杜梨叶总黄酮提取的工艺及其初步定性分析.方法:研究了浸提温度、乙醇浓度、提取时间、料液比等因素对杜梨叶中黄酮类化合物提取效果的影响,和正交试验进行优化,所得结果采用方差分析.采用颜色反应的方法进行杜梨叶中黄酮的初步定性分析.结果:确定了最佳单因素水平,正交实验确定了以乙醇为浸提荆的最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数60%,料液比1:22,温度80℃,浸提时间1h,在此条件下黄酮含量为5.03%.结论:杜梨叶中含黄酮类化合物,颜色反应试验表明,其成分主要集中在黄酮醇类和二氢黄酮类.     

响应面优化丙酮粉法提取金银花多酚氧化酶

对丙酮粉法提取金银花多酚氧化酶的工艺进行研究,结果表明,缓冲液p H、料液比、提取时间对PPO比活力影响显著。缓冲液p H与料液比交互作用极其显著,回归模型拟合性良好(R2=99.31%);影响显著顺序为:静置时间缓冲液p H值料液比;最优化工艺参数为:缓冲液p H7.5,料液比为1∶120,提取时间为14.5 min。在此条件下,酶比活力为137.389 U/mg。     

桦褐孔菌三萜类物质的提取与含量测定

以桦褐孔菌发酵菌丝体为材料,通过对溶剂乙醇(95%)、甲醇、乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、正己烷和氯仿的提取效果比较表明,提取三萜类化合物的最佳溶剂为异丙醇,提取时间为24h,每个样品所需溶剂量(6mL)和菌丝体样品量(100mg)较少,并可同时对大量样品进行有效提取。以白桦脂醇为标准品,对香草醛-冰醋酸-高氯酸分光光度法进行评价,证明该方法简单快速、准确度高、试验误差小、重复性好。利用此方法对桦褐孔菌的野生菌核和发酵菌丝体内三萜类化合物含量进行测定,结果表明野生菌核(59.86mg/g)和发酵菌丝体(94.92mg/g)中都含有很高的三萜类化合物,且发酵菌丝体中三萜类化合物含量高于野生菌核。因此在桦褐孔菌产品开发中,发酵菌丝体可代替野生菌核进行大工业化生产。     

斜生褐孔菌多糖诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的研究

研究了斜生褐孔菌多糖对人类肝癌HepG-2细胞凋亡的诱导作用。采用噻唑蓝法(MTT法)观察了斜生褐孔菌多糖对HepG-2细胞生长的影响,用透射电镜观察了细胞形态,用DNA Ladder检测了细胞凋亡,用流式细胞仪检测了细胞凋亡率;同时采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR法)研究了不同浓度斜生褐孔菌多糖作用后HepG-2细胞中Bax和Bcl-2基因mRNA转录水平的变化。结果表明斜生褐孔菌多糖能抑制HepG-2细胞增殖,并呈时间剂量依赖关系;电镜观察、DNALadder和流式细胞仪检测均证实了斜生褐孔菌多糖能够诱导HepG-2细胞凋亡;经斜生褐孔菌多糖处理后,HepG-2细胞中Bax基因mRNA转录水平增强,而Bcl-2基因mRNA无明显变化。证明了斜生褐孔菌多糖具有抑制HepG-2细胞生长及诱导HepG-2细胞凋亡的作用,这可能与调节Bcl-2和Bax基因表达水平有关。     

蛹虫草中虫草素、虫草多糖综合提取工艺研究

以蛹虫草为材料．采用超声波水提法、超声波醇提法、水热回流法和醇热回流法4种提取方法选择虫草素和虫草多糖的最优提取办法．并用正交试验方法考察水热回流法中提取温度、提取次数、提取时间、料液比4个因素对虫草素、虫草多精综合提取效率的影响．以确定从蛹虫草中综合提取虫草素、虫草多糖最佳工艺。结果表明．水热回流法是提取虫草多糖和虫草素的最优提取方法．其最佳工艺条件为：用10倍量的水于80℃热回流提取3次．每次90min。     

双水相超声法提取桦褐孔菌三萜

通过单因素实验和正交实验对影响桦褐孔菌三萜提取的异丙醇体积浓度、硫酸铵质量浓度、料液比和超声时间等因素进行探讨,旨在建立桦褐孔菌Inonotus obliquus菌丝体三萜类化合物的提取工艺。结果表明,提取桦褐孔菌三萜的最佳条件为：异丙醇体积浓度40%,硫酸铵质量浓度0.125g/mL,料液比（W/V）0.9:1,超声时间为35min,三萜提取率为6.18%,提取效率明显高于常规超声波提取法（5.38%）。利用该方法获得的三萜具有较强清除自由基的能力。通过正交实验获得的桦褐孔菌三萜的提取工艺是一种经济、有效的方法。     

麻栎叶黄酮的提取及其抗氧化活性研究

在单因素试验的基础上,对麻栎叶黄酮提取工艺进行优化,并研究了麻栎叶黄酮类化合物的抗氧化活性.结果显示,麻栎叶黄酮提取的最佳工艺是以60％乙醇为提取剂,提取物固液比1∶20,提取温度60℃,提取次数2次,微波功率640W、微波时间2 min,提取时间60 min,黄酮提取率为6.06 mg/g,回收率为96.5％.麻栎叶黄酮类化合物对自由基DPPH·、·OH以及亚硝酸盐的清除率分别达到97.7％、97.6％和94.4％.试验结果表明提取工艺合理,黄酮提取率高,麻栎叶黄酮提取液具有很好的抗氧化活性.     

一氧化氮对桦褐孔菌抗氧化酚类化合物积累的影响

本研究探讨了NO对深层培养的桦褐孔菌积累抗氧化酚类化合物的影响。在桦褐孔菌的培养基中分别加入0.01mmol/L、0.1mmol/L以及1mmol/L的NO供体硝普钠,并测定总酚的含量及其抗氧化活性。发酵产物的抗氧化活性以清除DPPH和羟自由基活力表示。加入0.1mmol/L的硝普钠可使桦褐孔菌胞内外酚类化合物分别达到最高水平67mg/g和677mg/L。不同培养时期产生的胞内外酚类化合物都具有抗氧化活性,尤其是添加0.1mmol/L硝普钠的菌丝体。因此NO可用于上调深层发酵培养的桦褐孔菌酚类化合物的积累。     

车前草粗多糖提取及抗氧化试验

采取热水浸提-醇沉法探讨了车前草中可溶性粗多糖的提取工艺,研究了提取温度、提取时间、提取次数与料液比4因素对多糖提取的影响。单因素试验发现,在80℃,120 min,料液比1:20,提取2次条件下多糖提取较好。正交试验优化提取方案为90 min、80℃和料液比1:25,在此条件下,多糖提取率可以达到29.88 mg.g-1。同时还研究了体外条件下对.OH和O2-.自由基的清除效果。研究发现,多糖与.OH自由基清除呈良好的线性量效关系(y=5.48x+31.34,r=0.9823),与O2-.清除也呈现良好的线性量效关系(y=4.334x+34.134,r=0.9979)。IC.OH-50%为114.57 mg.L-1,ICO2--50%为172.85 mg.L-1,试验结果充分表明车前草多糖在体外有较强的自由基清除能力。     

Extraction and purification of a lectin from small black kidney bean (Phaseolus vulgaris) using a reversed micellar system

Lectin from crude extract of small black kidney bean (Phaseolus vulgaris) was successfully extracted using the reversed micellar extraction (RME). The effects of water content of organic phase (W_o), ionic strength, pH, Aerosol-OT (AOT) concentration and extraction time on the forward extraction and the pH and ionic strength in the backward extraction were studied to optimize the extraction efficiency and purification factor. Forward extraction of lectin was found to be maximum after 15 min of contact using 50 mM AOT in organic phase with W_o 27 and 10 mM citrate-phosphate buffer at pH 5.5 containing 100 mM NaCl in the aqueous phase. Lectin was backward extracted into a fresh aqueous phase using sodium-phosphate buffer (10 mM, pH 7.0) containing 500 mM KCl. The overall yield of the process was 53.28% for protein recovery and 8.2-fold for purification factor. The efficiency of the process was confirmed by gel electrophoresis analysis.     

真菌激发子对桦褐孔菌多酚积累的影响

作者旨在阐明真菌激发子对桦褐孔菌多酚积累的影响。以摇瓶法培养桦褐孔菌,在其培养液中加入真菌激发子和一氧化氮合酶抑制剂氨基胍,观察桦褐孔菌多酚和一氧化氮的积累并测定菌丝体内一氧化氮合酶和苯丙氨酸解氨酶的活性。多酚以Folin-Ciocalteu法测定,一氧化氮的积累量用硝酸还原酶法测定,一氧化氮合酶和苯丙氨酸解氨酶活性均以分光光度计法测定。结果表明,添加45μg/mL的激发子可使桦褐孔菌菌丝体多酚的积累量达到46.5mg/g,显著地高于正常培养的菌丝体多酚积累量34.6mg/g;同时加入45μg/mL的激发子和10mmol/L氨基胍则使菌丝体多酚积累的最高水平降为34.8mg/g。此外,激发子的加入显著促进了一氧化氮的产生并提高了苯丙氨酸解氨酶活性,而这种促进和提升作用为氨基胍所抑制。这表明真菌激发子能显著地提升桦褐孔菌多酚类化合物的积累,而一氧化氮可能是这种提升作用的信号传导分子。