发菜类囊体膜色素蛋白复合物分离及其光谱性质的研究

采用改进的Ａｌｌｅｎ’ｓ的绿胶系统,首次对陆生蓝藻发菜（Ｎｏｓｔｏｃ ｆｌａｇｅｌｌｉｆｏｒｍｅ Ｂｏｒｎ．ｅｔ Ｆｌａｈ．）类囊体膜色素蛋白复合物进行了分离,共分离出了１１条绿色的色素蛋白复合物条带。两条浅黄色的条带。其中７条绿色条带属于ＰＳⅠ组分,４条绿色条带属于ＰＳⅡ组分,１条浅黄色条带经光谱分析初步认定为类胡萝卜素蛋白复合物,而另一条浅黄色条带为游离色素。     

一种简便的叶绿体色素纸层析的点样方法

“叶绿体色素的提取与分离”实验中 ,“点样”是用毛细管在滤纸上划滤液线的方法来完成的。现介绍一种用玻璃片“盖印”的点样法 ,优于毛细管点样方法。1　点样玻璃片制作挑选无缺损的载玻片 (75 mm× 2 5 mm× 1mm) ,用玻璃刀横向裁成 10 mm宽的小玻片 (2 5 mm× 10 mm×1mm ) ,此玻片即可用作点样。制成的点样玻片宽的一侧要保证平直无缺损 ,其宽度要小于滤纸条的宽度。因此 ,玻璃片的宽度为 10 mm,滤纸条的宽度可裁成 15 mm为宜。2　操作　　从小漏斗流出的滤液不要用试管收集 ,可直接滴1～ 2滴在 1块干净的载玻片上 ,用点样玻片宽的一侧…     

"叶绿体色素分离"的探究教学尝试

“叶绿体中色素的提取和分离”的实验教学中尝试探究教学的学习模式 ,取得的实验结果如下 :实验材料滤液颜色 (特点 )实验结果菠菜叶片绿色能看到 4条色素带 ,但第 2条黄色带不太清楚青菜叶片绿色 4条色素带清晰、明显红薯叶片粘度过大 ,色素不被丙酮溶解提取收集不到色素滤液 ,无法分离色素宽叶生菜 (莴苣 )叶片浅黑色 能看到 4条色素带 ,但第 2条色素带不太清楚 ,滤液变黑 ,不影响分离结果小白菜叶片绿色能看到 4条色素带 ,但第 2条色素带欠清晰葱叶片 粘度大 ,色素难被丙酮溶解提取 ,滤液以丙酮为主 ,呈黄色只见到胡萝卜素和叶绿素 a两条…     

用SDS-PAGE研究NaHCO3处理后西伯利亚蓼不同部位蛋白表达的变化

利用酚抽提法分别提取对照、3% NaHCO₃处理5 d和10 d的西伯利亚蓼地茎、茎和叶部蛋白,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和分析软件(Labw ork 3.0)对提取蛋白进行分离和定量分析。结果表明,地茎蛋白图谱在34.1和25.0×10³D位置处出现了两条明显受正向调控的蛋白条带,茎部蛋白图谱在58.1×10³D、47.8×10³D和9.6×10³D位置处出现三条正向调控的条带,叶组织蛋白图谱在25.0×10³D处出现一受正调控的条带。除地茎和叶组织在25.0×10³D处同时出现受正向调控的蛋白条带外,盐处理后其它组织间表达受正向调控的蛋白条带间存在差异,说明西伯利亚蓼不同部位对外界盐胁迫应答存在多样性。     

"叶绿体中色素的提取和分离"实验的改进

按照高中《生物》教材中“叶绿体中色素的提取和分离”实验的方法和步骤操作,据许多中学老师反映实验效果不很理想。存在的问题有:①采用毛细吸管吸取滤液,画线很难达到“细、齐”的要求;②制备滤纸条时剪去两角,不容易把握;③层析液容易没及滤液细线。④层析后容易出现色素带分离不够充分,或色素带分离过度而造成胡萝卜素在滤纸条上消失的现象。⑤用菠菜作为实验材料,易受季节性限制,此外, 色素提取液呈黄绿色,色素带颜色浅,实验效果差。对该实验我们做了一些改进,在此提出。     

用研磨过滤器进行"叶绿体中色素提取"实验

在做“叶绿体中色素提取和分离”实验时,试剂挥发严重,影响师生身心健康,污染实验室空气,实验结果不明显等问题困扰了很多中学生物学教师．尤其是丙酮挥发常常使得教师上完几节实验课会感到头晕。我们对研磨过滤器和研钵进行了不同方法、不同实验材料(干材料和鲜材料)的比较,比较后发现使用研磨过滤器大大减少了丙酮的挥发,试剂和材料的使用量也减少了,而且还省去了过滤的步骤,简化了实验;而且仪器中的配套产品点样器使用非常方便,可以避免毛细管使用中可能造成的一些问题,如伤到学生,点样不均匀影响实验结果等,利用层析瓶进行层析,只需将点好样的滤纸条放入已加入层析液的层析瓶中就可以直接观察实验结果了。     

在"叶绿体中色素的提取和分离" 实验中观察荧光现象

叶绿素溶液在透射光下呈绿色 ,而在反射光下呈红色 ,这种现象叫做荧光现象。在叶绿体中色素的提取和分离的实验中 ,如加上观察荧光现象 ,将会提高学生的学习兴趣。如何才能清楚地观察到荧光现象呢 ?1　色素提取液的处理1 )量取 2 m L色素提取液倒入 1支洁净的试管中。 2 )再向试管中加入 1 m L丙酮溶液。 3)然后再往试管中加入3m L石油醚。经过以上处理使色素溶解在上层的石油醚中。2　观察荧光现象手持试管 ,使试管中色素层与人眼同高 ,人的视线与光源的光线方向一致。在试管与光源连线的方向上 ,以试管为中心 ,人的眼睛在逆时针 0°～ 9…     

对华东师大主编《植物生理学实验指导》中几个方法的改进

自1980年以来,我校的植物生理实验课程一直使用华东师范大学生物系植物生理教研组主编的《植物生理学实验指导》一书,该书很适合师范院校使用。但是在教学过程中我们发现此书有些实验内容及方法存在一些问题,按教材指导学生进行实验时,结果不很理想。据此,我们结合本实验室情况对教材中的一些内容作了修改,效果较好。现简述如下,供参考。且用纸展析法分离叶绿体色素的改进教材上的实验方法是滤纸条点样后,固定于盛有溶剂系统的大试管中,待分层（图1－a）。其缺点是试管内壁易被溶液搞湿影响滤纸条的固定,滤纸条边缘易接触内壁被浸…     

利用同工酶和SDS-PAGE技术对一些兰属(Cymbidium)品种的分析(简报)

利用同工酶和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ技术对兰属（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ）５个种和２个变种的１１个品种进行了分类研究,酯酶和细胞色素氧化酶的同工酶共出现２４条带,其中２３条具有多态性;ＳＤＳ－ＰＡＧＥ有３０条带,其中２５条带为多态性。根据同工酶和ＳＤＳ－蛋白质标记进行聚类分析,生化水平与传统的形态学分类结果基本一致,但某些兰属品种的分类地位与传统的分类有一些差异。     

PCR方法在HSF1基因敲除小鼠基因型分析中的应用

目的　为HSF1基因敲除鼠探索快速、简单的基因型PCR检测方法。方法　设计两对引物扩增野生型HSF1基因和HSF1缺陷突变基因的DNA片段 ,用PCR仪梯度方案测试最佳退火温度 ,并将所得基因型结果与经典的Southernblot方法比较。结果　野生型仅在 5 6 2bp处有一条条带 ,突变纯合子仅在 377bp处有一条条带 ,杂合子则在377bp和 5 6 2bp处出现两条条带。用PCR方法获得的HSF1基因分析结果与经典的Southernblot方法获得的结果完全一致。结论　用PCR方法分析HSF1基因敲除鼠的基因型具有快速、简单、廉价和适用的特点     

变性梯度凝胶电泳在实验小鼠细菌检测中的应用

目的 研究变性梯度凝胶电泳(denatured gradient gel electrophoresis, DGGE)在实验小鼠细菌检测中的应用。方法 根据16S rDNA V3区引物,PCR扩增3种实验小鼠(KM小鼠、NIH小鼠和BALB/c小鼠)呼吸道和盲肠段的细菌基因组DNA;扩增产物运用DGGE进行电泳检测,并分析条带数量间差异的统计学意义。结果 KM小鼠盲肠段条带12~18条,呼吸道条带5~10条;NIH小鼠盲肠段条带15~20条,呼吸道条带4~10条;BALB/c小鼠盲肠段条带10~15条,呼吸道条带0~7条。统计分析结果显示,KM小鼠和NIH小鼠在盲肠和呼吸道电泳条带数量上的差异无统计学意义( P >0.05);BALB/c小鼠与KM小鼠、NIH小鼠间的差异均有统计学意义( P <0.05)。结论 DGGE 在实验小鼠盲肠和呼吸道细菌检测中能较好地反映菌群的物种多样性。     

基于ISSR标记的62个朱顶红品种的遗传关系分析及指纹图谱构建

采用ISSR标记方法分析了62个朱顶红(Hippeastrum spp.)品种(包含60个引自荷兰的品种和2个苏州本地品种)的遗传多样性,并采用UPGMA法对62个朱顶红品种进行聚类分析.在此基础上,通过特异性条带的比较及筛选,采用黑白方格示意图法构建了供试品种的ISSR指纹图谱.扩增结果显示:用11条引物从62个朱顶红品种的基因组DNA中共扩增出118条带,其中多态性条带109条,多态性条带百分率达92.4％,有5条引物扩增条带的多态性条带百分率达100.0％.62个品种间的遗传相似系数变幅较大,为0.371 4～0.842 9,表明各品种间存在丰富的遗传变异和遗传多样性.聚类分析结果显示:在遗传相似系数0.63处62个品种被分为7组,多数形态相似的品种被聚在一起;其中形态相似的白色单瓣品种间遗传相似系数较高(约0.8),大多聚在一起,表明它们同源性较高;而2个苏州本地品种间遗传相似系数最高(0.842 9),表明它们可能具有同一来源.品种‘小红星’在引物UBC873扩增图谱的450 bp处有1条特异性条带,而品种‘精灵’在引物UBC835扩增图谱的3 000 bp处有1条特异缺失条带,这2条特异性条带可分别用于品种‘小红星’和‘精灵’的鉴定.基于引物UBC835和UBC873的ISSR扩增条带组合构建了供试的62个朱顶红品种的ISSR指纹图谱,采用这一指纹图谱可对供试的所有朱顶红品种进行鉴定.     

小麦返白系返白阶段叶片蛋白质变化与叶绿素含量的关系

小麦返白系春天出现白色心叶。白叶中有脱辅基蛋白存在,但含量很低。白叶复绿时色素条带中ＣＰⅡ出现先于ＣＰＩ;叶绿素含量的增加与色素蛋白的出现呈正相关,同时影响蛋白含量,但２１、２５ｋＤ蛋白即使在全白叶中也有较高水平。白叶中ＲｕｂｉｓｃｏＬＳ含量极低,而ＳＳ仅略有降低。复绿初期蛋白质合成速率随叶绿素含量增加而显等提高,ＬＳ也迅速增加。     

植物生理学中荧光现象概念之我见

光合色素受激发光照射产生荧光（fluorescence）是叶绿体色素的光学特性之一。许多教材中都将荧光现象的概念表述为＂叶绿素溶液在透射光下呈绿色,（而）在反射光下呈红色,这种现象称为荧光现象＂（潘瑞炽2008;李合生2006;王宝山2004;张继澍1999）。我们认为,这一表述容易令人产生歧义,学生也容易产生误解。     

薄层色谱法在叶绿体色素分离实验中的有效应用

介绍了一种简便易行且效果较好的分离叶绿体色素的方法。采用硅胶作为吸附剂,将石油醚、苯和丙酮作为混合展开剂,用薄层色谱法代替传统的纸色谱法进行叶绿体色素的分离。实验装置简单,易于操作,特别是各色素条带集中、明显,分离灵敏度高。大大提高叶绿体色素分离实验的成功率。     

绿藻假根羽藻色素-蛋白复合物的分离及其特性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和蔗糖密度梯度超速离心方法分离了假根羽藻(Bryopsis corticulans)的色素-蛋白复合物,并对其特性进行分析。结果表明:采用PAGE分离得到7条色素-蛋白复合物带,分别是CPⅠa1、CPⅠa2、CPⅠ、LHCP₁、LHCP₂、CPa、LHCP₃₊₃,和2条游离色素(free pigment,FP)FCa、FC。用改进的不连续蔗糖密度梯度离心法分离到五条带。区带Ⅰ是FP;区带Ⅱ主要是小分子量的PSⅡ捕光复合物LHCP₃₊₃;区带Ⅲ以PSⅡ捕光复合物的聚集体LHCP1为主,区带Ⅱ和Ⅲ的吸收光谱中除了Chla外,还含有大量的Chlb和管藻黄素,是管藻黄素-Chla/b-蛋白质复合物;区带Ⅳ在PAGE中只显示一条带,光谱中有Chlb吸收肩峰,含有66和56kDa两种多肽,是较小的PSⅠ复合物CPⅠa。     

“绿叶中色素的提取和分离”实验的改进

对于"绿叶中色素的提取和分离"实验,学生实验的成功率较低,存在诸如色素带不分离、无色素带等问题。在对实验材料、研磨方法、画线方法和实验装置等进行改进后,实验现象明显,学生实验成功率有较大提高。     

红掌品种亲缘关系SRAP分析

利用相关序列扩增多态性（SRAP）分子标记,从100对引物组合中筛选出 26对多态性高、条带清晰的SRAP引物,对33个红掌品种进行遗传多样性和亲缘关系分析。结果如下：（1）26对引物共扩增出366条条带,其中有314条多态性条带,多态性比率为85.79%。引物组合产生的条带数在9～23之间,平均每对引物组合扩增出14.1条和12.1条多态性条带。（2）根据SRAP扩增结果,利用UPGMA法进行聚类分析,33份材料的遗传相似系数在0.55～0.94之间,在遗传相似系数0.786处可将33个红掌品种分为5个类群。结果表明,供试品种遗传多样性丰富,本研究为品种鉴定和杂交育种提供了参考信息。     

8份广西产绞股蓝种质的RAPD引物筛选及其遗传多样性分析

本研究的目的在于筛选合适的RAPD随机引物,应用RAPD技术对药用植物绞股蓝进行遗传多样性分析,并构建DNA指纹图谱。研究结果表明,我们利用生物信息学方法挑选出的20条引物中有19条引物的扩增条带清晰且多态性好;在清晰稳定出现的354条带中,294条具有多态性;其中有3条引物的扩增条带可清楚区分绞股蓝与混淆品种乌蔹莓,可建立其DNA指纹图谱。按UPGMA法进行聚类分析,计算其遗传相似系数,结果显示,8份绞股蓝供试材料聚为两类,聚类结果与其地理区域远近和生长环境一致。本研究中筛选出的19条引物适用于绞股蓝遗传多样性分析,且获得的DNA指纹图谱可用于鉴别绞股蓝。     

叶绿体中色素分离方法的改进

提取高等植物叶绿体中的色素，可以用圆形滤纸层板法。此方法与滤纸条层析法原理相似，但更简便易操作。其方法是：取一预先干燥过的圆形定性滤纸，用毛细吸管吸取少量色素滤液（色素滤液的制取与课本同），滴在其中央，待滤液风干后，再重复２～３次。然后对着滤液点处，用滴管慢慢滴加层析液，几分钟后，滤纸上就会出现４条环形色素带，从里到外依次为：黄绿色（叶绿素ｂ）、蓝绿色（叶绿素ａ）、黄色（叶黄素）、橙黄色（胡萝卜素）。叶绿体中色素分离方法的改进@霍文高$东明县第一中学!山东东明274500