胰岛素作用原理的研究 Ⅶ.不同种属红细胞胰岛素受体与胰岛素的相互作用

参照Gambhir等人的报告建立了分离豚鼠、兔和鸡红细胞的方法。比较了豚鼠、兔和鸡红细胞胰岛素受体与猪胰岛素的相互作用,初步观察到不同种属动物的红细胞含胰岛素受体的数目似乎与其自身的胰岛素活力成反比。     

去B链羧端七肽胰岛素的免疫活性及受体结合能力

测定了胰岛素类似物去B 链羧端七肽胰岛素(DHPI)的免疫活性和它与受体的结合能力。DHPI 能与豚鼠抗胰岛素血清反应,生成免疫沉淀条纹。经放射免疫测定,它的免疫活力是胰岛素的1.8%。DHPI 在低剂量时不能和胰岛素受体(大白鼠脂肪细胞和豚鼠红细胞)结合,高剂量时有明显结合。DHPI 与豚鼠红细胞胰岛素受体的结合不显示负协同效应,而胰岛素与它的结合显示负协同效应。     

去B链羧端七肽胰岛素的免疫活性及受体结合能力

测定了胰岛素类似物去B链羧端七肽胰岛素(DHPI)的免疫活性和它与受体的结合能力。DHPI能与豚鼠抗胰岛素血清反应,生成免疫沉淀条纹。经放射免疫测定,它的免疫活力是胰岛素的1.8%。DHPI在低剂量时不能和胰岛素受体(大白鼠脂肪细胞和豚鼠红细胞)结合,高剂量时有明显结合。DHPI与豚鼠红细胞胰岛素受体的结合不显示负协同效应,而胰岛素与它的结合显示负协同效应。     

胰岛素及其类似物与受体结合的负协同效应

本文结果表明除用豚鼠红细胞在15℃观察到负协同效应外,用脂肪细胞和豚鼠红细胞在其生理温度均未观察到负协同效应。比较了某些胰岛素类似物在15℃引起豚鼠红细胞胰岛素受体负协同效应的能力。     

胰岛素及其类似物与受体结合的负协同效应

本文结果表明除用豚鼠红细胞在15℃观察到负协同效应外,用脂肪细胞和豚鼠红细胞在其生理温度均未观察到负协同效应。比较了某些胰岛素类似物在15℃引起豚鼠红细胞胰岛素受体负协同效应的能力。     

不同种属红细胞胰岛素受体与胰岛素的相互作用

前文报道的两种主要胰岛素靶组织——肝和脂肪——的受体分析方法,由于取材困难不适宜应用于临床研究。近年来,Gambhir 等和Ginsberg 等分别证明在人类和火鸡的红细胞上具有胰岛素受体。虽然红细胞不是胰岛素的典型靶细胞,对于红细胞胰岛素受体的生理意义还不清楚,但由于取材方便,生理条件下存活时间长以及对红细胞膜的研究已经比较深入等有利条件,红细胞是研究胰岛素受体比较好的材料,尤其适合于临床胰岛素受体的研究。     

不同种属红细胞胰岛素受体与胰岛素的相互作用

前文报道的两种主要胰岛素靶组织——肝和脂肪——的受体分析方法,由于取材困难不适宜应用于临床研究。近年来,Gambhir等和Gingberg等分别证明在人类和火鸡的红细胞上具有胰岛素受体。虽然红细胞不是胰岛素的典型靶细胞,对于红细胞胰岛素受体的生理意义还不清楚,但由于取材方便,生理条件下存活时间长以及对红细胞     

不同年龄红细胞(人)的增溶胰岛素受体和胰岛素结合以及依赖于胰岛素的磷酸化反应

1.我们研究了人的不同年龄红细胞的胰岛素受体从膜上增溶后和胰岛素相结合的特征。结果表明,随着红细胞年龄的增加,增溶胰岛素受体和胰岛素的最大结合能力下降;ED_(50)降低,同时受体结合位点数减少。青年红细胞的增溶胰岛素受体数比去年的高一倍,但其亲和性不论在结合平衡状态或动力学状态都基本一致。 2.利用γ-~(32)P-ATP的~(32)P参入量研究了胰岛素对不同年龄红细胞增溶蛋白质及外源蛋白质的磷酸化的影响。在胰岛素存在时,磷酸化分别增加2.3—2.9倍,及3.4—4.4倍。胰岛素刺激青年红细胞的增溶蛋白质的磷酸化的敏感性为老年的2.4倍。 3.研究结果表明,单个人的血样可用来研究胰岛素受体的结合及激酶的性质。     

鹅胰岛素的免疫交叉反应性、与受体的结合能力及生物活性

本文测定了结晶鹅胰岛素的免疫交叉反应性、与受体的结合能力及生物活性。鹅胰岛素能与豚鼠抗猪胰岛素血清反应,经放射免疫测定,它的交叉反应性是猪胰岛素的38.5%。用人胎盘细胞膜胰岛素受体与鹅胰岛素进行结合实验,鹅胰岛素与胰岛素受体的结合能力是猪胰岛素的56.4%。小白鼠惊厥法测出其生物活力是26.8I.U/毫克。     

明日叶查尔酮对2型糖尿病大鼠红细胞胰岛素受体亲和力的影响

目的:研究明日叶查尔酮对2型糖尿病大鼠红细胞胰岛素受体亲和力的影响.方法:将高脂喂养加链脲佐菌素注射诱发的2型糖尿病大鼠随机分为4组,每组10只.糖尿病对照组和高、中、低剂量组喂饲高脂饲料分别经口灌胃明日叶查尔酮0、30、10、5mg (kg·bw)-1,正常对照组为正常大鼠喂饲普通饲料,连续4周.测定空腹血糖、血清胰岛素与MDA、红细胞胰岛素受体结合常数与结合容量等指标.结果:高剂量组的高亲和力与低亲和力胰岛素受体结合常数高于糖尿病对照组,血糖、胰岛素和MDA含量则降低,差异均有显著性(P＜0.05).结论:明日叶查尔酮能提高2型糖尿病大鼠红细胞胰岛素受体亲和力,改善胰岛素抵抗.     

[B2-Lys]-胰岛素的制备与性质

本文报道了用化学半合成途径从天然猪胰岛素制备[B2-Lys]-胰岛素的过程。人胎盘细胞膜胰岛素受体结合试验表明:[B2-Lys]-胰岛素的受体结合能力只有天然胰岛素的80％,降兔血糖作用与时间关系的结果表明它没有长效作用。本文还对这些结果进行了讨论。     

三齿草藤(Vicia bungei Ohwi)凝集素的细胞表面受体研究

应用亲和层析法从三齿草藤(Vicia bungei Ohwi)种子中纯化的三齿草藤凝集素(VBL),可以凝集兔和豚鼠的红细胞,也可凝集人、牛和羊的精细胞,说明这些细胞表面存在有VBL的受体。用FITC和~(125)I进行标记,可得到FITC-VBL和~(125)I-VBL,其生物学活性不受影响。氯胺T法的标记率可达55％;应用FITC-VBL研究牛精细胞和兔红细胞膜上VBL受体的分布,发现二者由胞膜上受体分布据不一致。VBL与牛精细胞结合条件的正交试验表明细胞浓度的影响最大。用不同量的未标记的VBL对~(125)I-VBL与兔红细胞和人精细胞的结合实验,以Scatchard法作图,兔红细胞得一类似于双曲线的凹形曲线,提示该细胞膜上受体的性质有所不同,而人精细胞却有很大差异。若以兔红细胞膜上存在有高低亲和力两种受体进行计算,可求得结合常数和每个细胞上的受体数。应用几种单糖和外源凝集素影响~(125)I-VBL与兔红细胞的结合,当单糖(D-Man,D-Glc)浓度为0.01M时,相对结合率开始急剧下降,单糖浓度若增至0.1M时,其相对结合率仅为40％,而PHA-P和SML浓度为1mg/ml时,相对结合率开始下降,当浓度达10mg/ml时,相对结合率下降至30％左右。     

Ⅱ型糖尿病人红细胞胰岛素受体及红细胞膜流动性的观察

本文采用配对分析,测定了15例Ⅱ型糖尿病人(NIDDM)和15名正常人的红细胞胰岛素受体和红细胞膜微粘度,发现NIDDM红细胞胰岛素受体位点减少(86±85对215±116sites/RBC,P<0.002),而红细胞膜微粘度显著升高(2.6706±0.2813对2.2717±0.1578泊,P<0.001)。二变量间呈有意义的负相关(r=-0.328,P<0.05),提示细胞膜流动性的下降可能是NIDDM胰岛素受体和/或受体后缺陷的原因之一。     

胰岛素作用原理的研究 Ⅵ.胰岛素片段与胰岛素受体的相互作用

研究了用胰凝乳蛋白酶限制性酶解和化学合成方法所获得的若干胰岛素片段与脂肪细胞胰岛素受体的结合。它们在低浓度时几乎观察不出与胰岛素受体结合,而在高浓度时除五肽HTyr·Thr·Pro·Lys·AlaOH外都有明显的专一性结合。说明它们具有部分与胰岛素受体的结合部位。与前文关于胰岛素结合部位设想是一致的。讨论了胰岛素结合部位的性质,并讨论了五肽HArg·Gly·Phe·Phe·TyrOH加强胰岛素与其受体亲合力的可能性。     

胰岛素作用原理的研究 Ⅵ.胰岛素片段与胰岛素受体的相互作用

研究了用胰凝乳蛋白酶限制性酶解和化学合成方法所获得的若干肤岛素片段与脂肪细胞胰岛素受体的结合。它们在低浓度时几乎观察不出与胰岛素受体结合,而在高浓度时除五肽HTyr·Thr·Pro·Lys·AIaOH 外都有明显的专一性结合。说明它们具有部分与胰岛素受体的结合部位。与前文关于胰岛素结合部位设想是一致的。讨论了胰岛素结合部位的性质,并讨论了五肽HArg·Gly·Phe·Phe·TyrOH 加强胰岛素与其受体亲合力的可能性。     

牦牛肠毒素型大肠杆菌的分离鉴定和某些生物学特性的研究

从西藏地区腹泻死亡牦牛中分离出 1株肠毒素型大肠杆菌并对其某些生物学特性进行了研究。结果表明 ,该菌在形态特征、培养特性和生化特性方面与大肠杆菌基本一致。血清学试验表明 ,该菌株O抗原属O14 8,K88,K99,987P单因子血清均不能凝集本菌 ;该菌不产生溶血素 ;对绵羊、豚鼠、马、鸡的红细胞表现强凝集 ,而K88,K99,987P抗血清均不能抑制其对绵羊、豚鼠、马、鸡红细胞的凝集 ;该菌株在营养肉汤中经 37℃ ,4 8h培养表达菌毛 ;肌肉接种兔、腹腔接种小白鼠均具有高致病性 ;乳鼠胃内投服试验和兔回肠结扎试验证明 ,该菌能产生热稳定肠毒素和热敏性肠毒素 ;分离菌株对恩诺沙星、环丙沙星、阿莫西林、羧苄青霉素等高度敏感 ,而对链霉素、四环素、土霉素等表现耐药性。     

胰岛素对去甲肾上腺素的心脏肌力效应的影响

在离体灌流豚鼠心脏的实验中已证实胰岛素有正性肌力作用。在人和实验动物上,大剂量儿茶酚胺引起心肌病理性变化及心功能损害,胰岛素可保护心肌免受儿茶酚胺引起的损害,在β受体阻断剂的作用下,胰岛素的正性肌力作用明显增强。胰岛素缺乏(糖尿病)时,心脏对儿茶酚胺的敏感性显著提高。     

胰岛素受体的研究进展

胰岛素受体是靶细胞膜表面固有的糖蛋白、由两个α亚单位和两个β亚单位组成、亚单位间由二硫键连结的大分子物质。其中α亚单位为结合亚单位,β亚单位为效应/调质亚单位。胰岛素与受体结合后引起β亚单位磷酸化,可能是胰岛素发挥一系列生理功能的早期现象。受体与胰岛素结合后一起内移,在细胞内分别以不同途径代谢。激素-受体复合物的内移及受体降解使细胞表面受体数减少,这是胰岛素对受体数进行减数调节的原因。     

衣霉素对胰岛素受体结合胰岛素及内吞作用的影响

本文研究了人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１的胰岛素受体与＾１２５Ｉ－胰岛素结合的条件,并比较了衣霉素处理和对照细胞的结合动力学和内吞作用。结果表明：４℃和ＰＨ８是研究胰岛素受体与配体结合的较佳条件,当０．１ｕｇ／ｍｌ衣霉素处理１８小时,Ｓｃａｔｓｈａｒｄ作图分析指出,胰岛素受体的结合容量降低,每个细胞上的受体位点数减少。Ｈｉｌｌ作图分析说明,胰岛素和受体的亲和力（胰岛素半饱和浓度和表观解离常数）及结合     

胰岛素对βTC-3细胞胰岛素受体表达的作用

目的：观察外源性胰岛素对小鼠胰岛β细胞瘤细胞株βTC-3细胞胰岛素受体表达的影响。方法：采用免疫荧光细胞化学技术结合激光扫描共聚焦显微镜观察高浓度胰岛素（100 IU/ml）刺激不同时间（0 min、30 min、60 min、120 min、240 min）,培养的βTC-3细胞胰岛素受体的表达,用Image pro plus软件对胰岛素受体的荧光强度进行了半定量分析。结果：与0 min比较,胰岛素孵育30 min、60 min、120 min、240 min时胰岛素受体荧光强度均明显下降（P〈0.05）。结论：高浓度胰岛素孵育βTC3细胞后,可明显下调胰岛素受体的表达,这可能是高胰岛素血症导致胰岛素抵抗产生的机制之一。