食源性致病菌检测免疫传感器研究进展

食源性致病菌是造成食品安全事件的主要原因之一,因此其检测方法已成为人们研究的热点.食源性致病菌的检测方法主要有病原体培养法、免疫学方法、核酸检测和生物传感器等.其中,免疫传感器基于抗原抗体特异性结合,整合光学、电化学等多学科交叉技术,具有特异性强、检测速度快等特点.本文对比食源性致病菌传统检测方法,综述了近年来免疫传感...     

甲型肝炎病毒的提取及免疫学性质分析

目的建立甲型肝炎病毒(hepatitis A virus, HAV)的提取方法,了解和掌握HAV的免疫学性质。方法利用人胚肺二倍体细胞培养并收获HAV,用层析纯化等方法提取HAV,然后通过抗原检测、免疫电镜检查以及小鼠免疫试验对HAV的免疫学性质进行检测和分析。结果利用层析纯化等方法提取HAV,抗原回收率达84%以上,蛋白去除率达97%以上,电镜及免疫电镜检查可以观测到典型的HAV以及HAV+IgM抗原抗体免疫复合物和HAV+IgG抗原抗体免疫复合物,免疫小鼠抗体阳转率为100%。结论利用层析纯化等方法可以对HAV进行有效提取,提取的HAV具有良好的免疫反应性和免疫原性。     

染色质免疫共沉淀实验方法

染色质免疫共沉淀(ChIP)技术是一种检测蛋白质与DNA结合的实验技术。该方法可以先进行样品交联, 然后将蛋白质与DNA复合物进行随机DNA切断, 再借助免疫学方法特异性富集与目的蛋白相结合的DNA片段, 从而检测转录因子等目的蛋白质与DNA的结合情况, 鉴定基因启动子或其它DNA结合位点。该方法同时也可应用于研究基因组特定位点的组蛋白修饰情况。该文介绍了依赖交联固定的常规免疫共沉淀(X-ChIP), 以及适用于10³细胞级别微量实验材料的基于微球菌核酸酶非交联免疫共沉淀(ULI-NChIP)具体操作过程和注意事项。     

染色质免疫共沉淀实验方法

染色质免疫共沉淀(ChIP)技术是一种检测蛋白质与DNA结合的实验技术。该方法可以先进行样品交联,然后将蛋白质与DNA复合物进行随机DNA切断,再借助免疫学方法特异性富集与目的蛋白相结合的DNA片段,从而检测转录因子等目的蛋白质与DNA的结合情况,鉴定基因启动子或其它DNA结合位点。该方法同时也可应用于研究基因组特定位点的组蛋白修饰情况。该文介绍了依赖交联固定的常规免疫共沉淀(X-ChIP),以及适用于10~3细胞级别微量实验材料的基于微球菌核酸酶非交联免疫共沉淀(ULI-NChIP)具体操作过程和注意事项。     

酶联免疫法和胶体金法在胃镜检查前检测乙肝表面抗原的结果观察

目的:比较酶联免疫法和胶体金法在胃镜检查前检测乙肝表面抗原的结果,以探讨酶联免疫法和胶体金法在检验与病理科乙肝表面抗原检测中的应用价值。方法:选择2017年1月~2019年12月我院进行胃镜检查的100例上消化道疾病患者,均在胃镜检查前检测乙肝表面抗原,对照组使用胶体金法进行检测,观察组使用酶联免疫法进行检测。比较酶联免疫法和胶体金法在胃镜检查前检测乙肝表面抗原的阳性率、敏感度以及特异度。结果:酶联免疫法和胶体金法在胃镜检查前检测乙肝表面抗原的阳性率分别为35.00%(35/100)和33.00%(33/100),两种方法相比较没有明显的差异(P>0.05);酶联免疫法在胃镜检查前检测乙肝表面抗原的敏感度(97.34%)与特异度(98.12%)均明显高于胶体金法(P<0.05)。结论:酶联免疫法和胶体金法在胃镜检查前对乙肝表面抗原均有比较高的阳性检测率,但是酶联免疫法具有更高的敏感度以及特异度,仍然是现今检测乙肝表面抗原的主要方法,胶体金法由于检测方法更加简便和直观、方便携带、结果更加快捷,而且不需要特殊的仪器设备,更加适用于临床上紧急状态下患者的检测以及感染者初筛等情况。     

吖啶酯发光免疫分析技术的研究与发展

目的:为了对吖啶酯发光免疫分析技术的研究与发展有更深入地了解,更加知晓吖啶酯发光免疫分析技术的发展前景。方法:通过对采用吖啶酯发光免疫分析技术治疗的疾病进行分析研究,以及参考最近几年几十篇有关吖啶酯发光免疫分析技术的文献,深入研究近期的20多篇文献。分析吖啶酯发光免疫分析技术在免疫学上的研究及重大突破,整理数据分析吖啶酯发光免疫分析技术在很多领域重大应用。结果:吖啶酯发光免疫分析技术在现今医学有着巨大的贡献,尤其在对测定血清中癌胚抗原(CEA)含量的检测方法和检测人体血清中促甲状腺激素含量的酶促化学发光免疫分析方法中效果显著,值得大力推广。结论:现今社会高速发展,一般的医学检测技术已无法满足日益精进的免疫学技术,于是吖啶酯发光免疫分析技术应运而生,为现今免疫学贡献自己的一份力量,提高人类各个领域技术。     

2种方法在血清β2-微球蛋白检测中的效果对比

目的:探讨散射免疫法和荧光免疫层析法在血清β2-微球蛋白中的检测效果对比观察及精确度。方法:选取2016年10月-2017年8月我院收治的肝肾功能损伤患者88例,对患者分别应用散射免疫法以及荧光免疫层析法进行检测。对比两组方法血清β2-微球蛋白的检测结果、灵敏度、特异性以及精确度。结果:检测结果方面,荧光免疫分析法患者的检测率明显高于散射免疫法,漏检率明显低于散射免疫法(P0.05);荧光免疫层析法的灵敏度、特异性以及诊断符合率明显高于散射免疫法(P0.05);各项指标水平方面,患者血清β2-微球蛋白、肌酐、尿酸以及尿素等指标的水平明显高于正常水平(P0.05);精确度方面,荧光免疫层析法批间、批内的精确度明显高于散射免疫法(P0.05)。结论:对患者应用荧光免疫层析法检测血清β2-微球蛋白,有较高的检测符合率、灵敏度以及准确度,能够满足临床检测过程中的要求,进而有利于患者的诊断和治疗,临床上应当进一步推广应用。     

圆弧青霉菌毒素-青霉酸人工抗原的合成与鉴定

为建立圆弧青霉毒素-青霉酸的免疫学检测方法, 研究了青霉酸(PA)的人工抗原合成。通过碳二亚胺法将青霉酸(PA)分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)联结, 得到青霉酸人工抗原PA-BSA和PA-OVA。采用紫外扫描光谱法、SDS-PAGE和动物免疫试验对合成的抗原进行鉴定。结果显示联结后的人工抗原特征性吸收峰出现偏移, PA与BSA的偶联比为23.2:1, PA与OVA的偶联比为10.4:1。以PA-BSA为免疫抗原免疫小鼠, PA-OVA为包被抗原, 采用间接ELISA检测抗血清, 其效价达到1:12 800。表明青霉酸的人工抗原已合成, 为建立有效的免疫检测方法提供了基础。     

植物病害免疫学诊断技术

植物病害免疫学诊断技术将以抗原和抗体的特异性反应为基础的传统免疫学继承并发展,应用于植物病害的诊断上.最近10几年,植物病害免疫学诊断技术已广泛应用到病原真菌的检测中.免疫学诊断方法分为非标记免疫分析方法和标记免疫分析方法两大类.着重介绍了应用于植物病害免疫学诊断技术中的酶联免疫吸附测定、免疫胶体金快速诊断技术.     

莱姆病的实验室检验

对莱姆病的实验室检验有3种方法:组织中直接分离检测病原菌、免疫学检验、分子生物学检验。对于典型初期和二期EM(移行性红斑),并不需要实验室证实。从皮肤样本分离培养伯氏疏螺旋体可以在临床相应时间内完成。非疫源区非典型的EM和EM样皮损也应考虑作分离培养。高度怀疑患皮肤外莱姆病的病人可以用免疫学方法检验。CDC(美国疾病控制和预防中心)推荐用两步法进行免疫血清学检验。分子生物学的方法较快捷,RCR的结果可以区别持续性关节炎中活动期感染和非活动性感染。