家蚕后部丝腺遗传物质的研究

家蚕(Bombyx mori)后部丝腺的脱氧核糖核酸(DNA)和信使核糖核酸(mRNA)直接关系到丝心蛋白(fibroin)的合成,因此引起人们较大的重视。我们从本省蚕丝生产中常用的蚕体后部丝腺中分离纯化了DNA和mRNA,并观察了它们的重要理化性质。     

家蚕后部丝腺遗传物质的研究

家蚕(Bombyx mori)后部丝腺的脱氧核塘 核酸（DNA）和信使核糖核酸（mRNA）直接关 系到丝心蛋白一（fibroin)的合成,因此引起人们 较大的重视。我们从本省蚕丝生产中常用的蚕 体后部丝腺中分离纯化了DNA和mRNA,并观 察了它们的重要理化性质。     

蜕皮激素与丝蛋白合成:植源性蜕皮激素对家蚕后部丝腺核酸代谢的影响

给家蚕五龄幼虫添食植源性蜕皮激素(以下简称MH),对后部丝腺的核酸代谢都有直接影响,但由此引起的效应却是复杂的,与添食的时期和剂量以及蚕品种等因素有关。五龄每天低剂量(夏蚕0.5微克/头,春蚕2微克/头)连续添食和前期一次添食(2—4微克/头)对后丝腺RNA的合成都有明显的促进作用,并且RNA含量增长高峰是在五龄中期以后;每天较高剂量连续添食和中期一次添食,都表现为抑制作用。添食MH对后部丝腺DNA合成的影响与RNA的变化不尽一致;在每天0.5微克/头连续添食区表现出强烈的促进作用,而其余各处理区都出现明显的抑制。由此认为MH能直接作用于遗传物质DNA,通过调节有关基因的复制或者转录速度,从而对丝蛋白的生物合成产生某种影响。     

家蚕后部丝腺线粒体DNA的制备

本文首次报道了制备家蚕,五龄初期幼虫后部丝腺线粒体DNA的结果。后丝腺匀浆后,以600g和15,000g差速离心,得到完整离体线粒体。在高渗条件下,以牛胰 DNase Ⅱ处理污染的核DNA。碱性SDS裂解线粒体后,经RNase处理,并通过Sepharose 2B凝胶柱分部,便得到可供电镜分析与限制性内切酶消化的线粒体DNA制品。初步结果表明,家蚕后丝腺mtDNA为环状分子。分子量较大,约为11×10~6d的2倍、3倍和4倍。每条丝腺约含0.5微克。每个线粒体约含3×10~(-3)微克,大概有2—4个拷贝。     

蜕皮激素对家蚕后部丝腺谷氨酸-丙酮酸转氨酶活力的影响

本文报道了β-蜕皮激素(简称MH)对家蚕后丝腺谷氨酸-丙酮酸转氨酶(简称GPT)活力以及产丝量的影响。对五龄不同时期一次添食MH和每日连续添食MH以及MH剂量变化的研究结果表明:无论何种处理,MH都能促进GPT的活力;但不同的处理,其效果不一样。其中以五龄前期添食MH和五龄每日低剂量(夏蚕每头0.5微克和春蚕每头2微克)连续添食的处理,效果最佳;不但能促进GPT的活力,而且能提高丝蛋白合成能力。此外,还发现添食MH的浓度与GPT活力并不相关;MH对GPT活力的影响,因蚕品种而有差异,春蚕多丝量品种较夏蚕少丝量品种效果显著;MH低剂量多次添食比高剂量一次添食可避免产生不良后果。     

蓖麻蚕后部丝腺体核酸及丝蛋白含量的变化

五龄蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricina)后部丝腺体在大量合成丝蛋白前其中的DNA,RNA以及tRNA即开始大量增加,直至蓖麻蚕上簇。在合成丝心蛋白的最旺盛时期,tRNA^Aia和tRNA^Gty含量的增加最为明显,可分别达到总tRNA置的37.3%和33.5%。这与丙氨酸和甘氨酸在丝心蛋白中的含量(分别为43.2%和33.5%)有对应关系。     

家蚕后部丝腺GPT的分离纯化与动力学性质

本文用丝腺匀浆抽提液经硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥ－纤维素柱层析和羟基磷灰石柱层析等步骤分离纯化了家蚕后部丝腺谷丙转氨酶（ＥＣ２．６．１．２,ＧＰＴ）,并研究了它的动力学性质。该酶由两种不同亚基组成,分子量分别是５４０００和２１０００;对丙酮酸、α－酮戊二酸、Ｌ－丙氨酸和Ｌ－谷氨酸的Ｋｍ值分别是２．５×１０－４、４．２×１０－４、９．６×１０－３和１２．５×１０－３ｍｏｌ／Ｌ;最适温度５０℃,最适ｐＨ８．５;Ｋ＋、Ｍｇ２＋和Ｃａ２＋等离子对酶有激活作用,Ｎａ＋、Ｍｎ２＋、Ｃｕ２＋和Ｚｎ３＋等离子对酶有抑制作用;酶的活性中心含有巯基或咪唑基。     

昆虫保幼激素类似物对家蚕后部丝腺谷氨酸-丙酮酸转氨酶活性的影响

1.多化性蚕种南农七号五龄中期喷布保幼激素类似物(734-Ⅱ)的剂量为0.05微克/克幼虫体重,二化性蚕种为0.08微克/克幼虫体重。将使龄期延长18—24小吋,增加茧丝量12—24%。 2.正常情况下,五龄期后部丝腺转氨酶的活性以饷食后72小时为最大,以后渐次下降,熟蚕前又稍有回升。二化性蚕种的茧层量较多化性蚕种多一倍左右,同样它的转氨酶最大活性亦较多化性蚕种多70%。 3.用734-Ⅱ号处理后12—24小时内,后部丝腺的转氨酶活性较对照区明显下降,48小时后又回升并超过对照区,以后虽渐次下降,仍明显地高于对照区,熟蚕前则又有所回升。喷布734-Ⅱ号后使二化性蚕种的茧层量增加10—16%,而转氨酶活性增加10—25%。同样,多化性蚕种的茧层量增加18-24%,而转氨酶活性增加20—40%。可以认为734-Ⅱ号促进转氨酶活性的提高,是增产茧丝的生理上的原因之一.     

20-羟蜕皮素对家蚕后部丝腺细胞超微结构的影响

应用超薄切片和电镜技术,详细观察了蜕皮激素(MH)对家蚕Bombyx mori后部丝腺细胞超微结构的影响.电镜观察表明,家蚕后部丝腺细胞对MH处理极为敏感.一经MH处理,其细胞核的形态结构和细胞质中各种细胞器的发生、发展都呈现出明显的变化,并且与MH处理时期及剂量有关:五龄前期适量MH(4μg/头)处理,能促进与丝蛋白合成有关细胞器的形成与发展,加速腺细胞的成熟生长;较高剂量(8—16μg/头)处理,则导致自噬体的过早发生.五龄中、后期MH处理,一方面促进了粗面内质网等细胞器的进一步发达,另一方面也提高了自噬体的发生数量;处理剂量越高,后一种倾向越突出.这些结果证明,后部丝腺细胞超微结构的变化受MH调节.     

家蚕后丝腺亚细胞组分中核酸和蛋白质的分布

丝心蛋白是家蚕后丝腺的分泌产物。在家蚕五龄早期,后丝腺细胞中迅速形成丝心蛋白合成所必需的一些亚细胞结构,在后丝腺细胞质中粗糙内质网迅速增多,平滑内质网迅速形成空泡状或管状。而且生化测定表明,在五岭早期后丝腺中DNA,RNA、蛋白质和脂肪的含量皆迅速增加,这些为在五龄后期丝心院的合成,即为丝心蛋白信息的转录和翻译,提供亚细胞结构和生化代谢的物质基础(Tashiro等1968;赤井弘1973)。因此有必要对家蚕后丝腺亚细胞组分如细胞核、线粒休、微粒体和105,000g上清液中核酸和蛋白质代谢进行研究。本文初步建立一种分离家蚕后丝腺亚细胞组分的差级离心方法,并测定各亚细胞组分中核酸和蛋白质的含量。     

氟化物对桑蚕幼虫中肠ATP酶活性影响的电镜细胞化学定位

氟化物对桑蚕幼虫中肠ＡＴＰ酶活性影响的电镜细胞化学定位陈玉银,包焕盛,吴玉澄（浙江农业大学杭州３１００Ｎ）桑蚕Ｂｏｍｂｙｘｍｏｒｉ（Ｌ．）氟中毒导致蚕茧严重减产是目前蚕业界最为关切的问题,有关桑蚕幼虫氟中毒的机理研究也从各方面展开［１１］。已知桑蚕氟...     

半胱胺对肝细胞代谢油酸过程中ROS生成和ATPase活性的影响

目的 研究了半胱胺（CS）对油酸（0A）代谢过程中自由基（ROS）生成和ATP酶（ATPase）活性的影响。方法 通过培养体外小鼠原代肝细胞,添加不同浓度的OA作用24h,通过luminol化学发光法,TBA法、DTNB法、无机磷比色法分别测定ROS、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）和Na^＋-K＋-ATP酶活性;选取OA（0,150,250taM／L）三个梯度,添加CS（-,50,100,150,200,250,300,350,400,450,500taM／L）,测定相同的指标。结果 添加OA大于150μM／L时,ROS、MDA生成量急剧升高,ATPase活性显著降低（P〈0．05）。添加CS能提高GSH,减少ROS和MDA的生成,提高ATPase的活性,且作用的效果显著（P〈0．05）。但大量添加CS（350-500μM／L）则效果相反。结论 大量添加OA会引起肝细胞氧化应激;添加CS能清除ROS,提高ATPase活性;并伴随OA添加量的增加,CS的最佳需要量也增加。     

家蚕不同地理品种分子系统学研

利用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)标志,在DNA分子水平上对不同系统、化性和眠性共六类59个家蚕Bombyx mori品种及野蚕且mandarina之间的遗传差异进行了研究。在34个随机引物中有12个(35.29%)引物出现稳定的扩增带,扩增总带数为103条,其中86条具多态性,占83.5%,平均每个引物7.2条。利用单匹配相似系数和UPGMA聚类法对结果进行分析,发现其RAPD不但具有品种特异性,而且具有系统特异性,证明中国一化性四眠种为最早从野蚕中分化出来的系统,中国一化性三眠种与中国一化性四眠种在进化上属有显著差异的两个类群。     

家蚕后丝腺细胞的超微结构

本文描述了家蚕幼虫后丝腺细胞的超微结构,并讨论了保幼激素类似物(JH—3)的作用。观察到染色质块移向核内膜及核内物质通过核孔流进细胞质的现象。核仁内布满许多小颗粒体。内腔膨大的颗粒内质网充满着细胞质,它们是丝心蛋白合成和暂时贮留的主要细胞器。丝心蛋白经由高尔基复合体或直接形成丝心蛋白体,它们汇集于细胞顶端,以细胞外排作用,将丝心蛋白放入腺腔。自噬体与溶酶体出现于老熟幼虫后期。 经JH—3处理的幼虫,其后丝腺细胞的超微结构与正常的相近似。     

EFFECT OF GIBBERELLIC ACID ON ELONGATION AND NUCLEIC ACID SYNTHESIS IN ETIOLATED ALASKA PEA EPICOTYL

The following results were obtained using etiolated Alaska pea epicotyls. Gibberellic acid (GA) had the remarkable effect on the elongation in part I (elongating region) of epicotyls, whereas it had little effect on that in part II (mature region) of epicotyls. In cortex of part I and II of epicotyls, the cell number in longitudinal direction was hardly affected by GA. On the increase in width of epicotyls, GA was hardly effective in any parts of epicotyls. In both part I and II GA enhanced the incorporation of ³²P into all nucleic acid fractions prepared by methylated albumin kieselguhr (MAK) columns, i.e. sRNA, DNA and rRNA + mRNA. In part I the net increase in DNA and RNA content during the incubation period was slightly promoted by GA, whereas in part II the net decrease in both nucleic acids content was slightly promoted by GA. The relationship between GA-induced growth and nucleic acid synthesis is discussed.     

THE THERAPEUTIC INDEX OF CHEMOTHERAPEUTIC AGENTS: THE EFFECT OF NUCLEIC ACID ON DIMIDIUM BROMIDE

SUMMARY: The complexes of dimidium bromide with nucleic acids are less toxic and bactericidal than dimidium bromide itself, but the toxicity is reduced more than the antibacterial activity. The therapeutic activity is, therefore, raised.