西藏小型猪H-FABP基因的PCR-RFLP研究

目的研究西藏小型猪心脏脂肪酸结合蛋白（H-FABP）基因5’-上游区和第二内含子内的遗传变异。方法应用PCR-RFLP技术测定30头西藏小型猪H-FABP的基因型。结果（1）在5’-上游区的Hinf I-RFLP位点上,西藏小型猪表现出多态性,等位基因h的频率为0．80;（2）在在第二内含子内的Hae Ⅲ-RFLP位点上,西藏小型猪均为DD纯合子;（3）在第二内含子内的Hinf I＊-RFLP位点上,除一头猪表现为bb基因型外,其余猪都表现为BB基因型,等位基因B的频率为0．97;（4）除Hae Ⅲ-RFLP位点外,在其余位点上西藏小型猪均处于Hardy-weinberg不平衡状态。（5）在Hinf I-RFLP中,西藏小型猪表现为中度多态性（0．25〈PIC〈0．5）,而在其他位点的RFLP中表现为低度多态（PIC〈0．25）。结论可以利用西藏小型猪H-FABP基因5’-上游区的多态遗传标记来分析其与肌内脂肪的关系。     

体细胞核移植生产转ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1克隆猪

转ω-3脂肪酸去饱和酶基因猪在优质猪培育及研究ω-3不饱和脂肪酸预防心血管和癌症疾病中的作用方面有着重大的应用．本研究首次通过体细胞核移植制备了转线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1猪．将sFat—1基因转染到大白猪胎儿成纤维细胞,获得转基因阳性细胞克隆,然后以转基因细胞为核供体、体外成熟的猪卵母细胞为核受体构建克隆胚胎,胚胎体外培养或进行移植．先后移植了1889枚1-4细胞期克隆胚胎到10头受体母猪的输卵管内,28天B超检测9头受体母猪妊娠（90％）,7头妊娠足月（70％）分娩产下21头仔猪,体细胞克隆猪的效率为1．1％（出生仔猪／移植胚胎）．体细胞克隆猪效率的提高,主要是对克隆胚胎的移植环节进行了改进,比较了受体母猪排卵状况对胚胎移植效率的影响．当受体母猪卵泡发育处于即将排卵或正在排卵阶段,能够获得较高的妊娠率和妊娠足月率（100％）,而排卵后移植妊娠足月率为0％．对健康存活15头克隆猪进行了PCR和Southern检测,证实13头为转基因猪,转基因阳性率为87％．RT—PCR检测13头转基因猪,12头表达sFat—1基因．以上结果表明,利用优化的体细胞转基因结合核移植技术,可以成功地批量生产转sFat-1基因的克隆猪．     

鸬鹚的繁殖习性及人工饲养

鸬鹚（Phalacrocorax）为鹈形目（Pelecaniformes）、鸬鹚科（Phalacrocoracidae）、鸬鹚属（Phalacrocorax）的鸟类,是世界各地极为常见的大型水禽,除南北极外各地均有分布。鸬鹚在世界有30种,我国有5种,为普通鸬鹚（P．carbo）、斑头鸬鹚（P.filamentosus）、黑颈鸬鹚（P．niger）、红脸鸬鹚（P．urile）和海鸬鹚（P．pelagicus）。鸬鹚在我国遍及全国,但以东南沿海各省为多,我国常见的为普通鸿虬因为它生来喜欢吃鱼,所以人们称它“鱼老鸦”。鸬鹚的全身几乎都是黑色并带有金属光泽,只有两顿和喉部是白色,但繁殖期的亲鸟,头…     

新疆鼠尾草的化学成分研究

从新疆鼠尾草（Salvia deserta Schang0根中分离得到8个单体成分,根据化学和光谱方法鉴定为：正三十三烷（Tritriacontane)[Ⅰ]、6,7－去氢罗列酮（6,7－SDehydroroyleanone)[Ⅱ],7,β-羟基罗列酮（Taxochinon）[Ⅲ]、二十六烷酸（Hexaconsanoic acid）[Ⅳ]、3－乙酰剂墩果酸（3－Acetoxy-oleanolic acid)[Ⅴ]、β－谷甾醇（β-Sitosterol)[Ⅵ]、熊果酸（Ursolic acid)[Ⅶ],D-甘露醇（Mannitolum）[Ⅷ]。     

猪CACNA1S基因部分序列的克隆、测序及SNP检测

CACNA1S是钙离子通道主效亚基α1亚单位的编码基因,该基因突变会导致人（Homo sapiens）低钾性周期性麻痹和恶性高温综合征．目前CACNAIS基因的研究主要集中在人和模式动物上,而在家畜中的研究少见报道．本研究以金华猪（115头）、皮特兰猪（30头）、金华猪与皮特兰猪杂交产生的金皮F2代杂种猪（126头）、大约克猪（23头）为研究对象,根据人CACNA1S基因序列设计引物,对猪基因组DNA进行PCR扩增、克隆测序,并与人相应序列作同源性比较,然后采用PCR-SSCP技术检测序列中可能存在的单核苷酸多态（single nucleotide polymorphism,SNP）位点,并对有合适内切酶存在的突变点应用PCR-RFLP技术进行验证．结果表明：（i）用6对引物对猪基因组DNA进行扩增,共克隆得到猪CACNAIS基因约5211bp的DNA序列,其中外显子区域,猪与人同源性为82．6％,序列已递交GeneBank收录（登录号DQ767693）;（ii）在克隆得到的DNA序列中,共检测到57个单核苷酸突变点,其中外显子区域存在24个;（iii）突变位点的PCR-RFLP验证与PCR-SSCP检测结果一致,经与GenBank公布的猪CACNAIS基因EST小片段（Bx914582,Bx666997）比较,相应长度核酸序列内本实验检测到的11个SNP位点中,有8个位点的碱基突变与2个EST片段间存在的碱基差异相同．     

小型猪急性心肌梗死模型的建立及其评价

目的探索结扎小型猪冠状动脉左前降支（LAD）建立急性心肌梗死模型及进行血流评价的方法。方法小型猪20头全麻下开胸暴露心脏,预阻断LAD（第二对角支）15min,后予结扎,术中心电图动态监测,术后进行冠状动脉造影,心肌酶学监测以确定模型建立情况,冠状动脉造影以及^13N-NH3 PET心肌血流测定评价手术后血流改变。结果20头小型猪中有16头存活4周,成活率80％,开胸手术中1头因麻醉意外死亡,3头死于术后呼吸不畅。结扎后心电图呈动态变化,24h后血清心肌酶谱（CK,CK—MB,cTnI）较术前明显增高,差异有统计学意义（P〈0．05）,冠状动脉造影显示LAD血流中断,TIMI分级为0级,^13N—NH3 PET检查显示手术后缺损面积百分比（27．0±5．0）较手术前（4．0±3．2）有显著性差异,证实心梗模型建立成功。结论本实验中开胸手术成功率高,术后血流评价方法可用于手术前后冠脉血流和心肌血流的比较以及对心肌梗死后治疗效果进行评价。     

戊巴比妥钠联用速眠新Ⅱ对西藏小型猪麻醉效果观察

目的观察联合应用速眠新Ⅱ和戊巴比妥钠对西藏小型猪的麻醉效果。方法采用速眠新Ⅱ（0.1mL/kg）肌内注射和3%戊巴比妥钠生理盐水溶液（0.2 mL/kg）静脉注射联合麻醉方法对15头行胚胎移植术的西藏小型猪进行麻醉,观察动物麻醉维持时间、镇痛效果、呼吸频率和心率变化及术后苏醒情况。结果80%（12头/15头）西藏小型猪初始量麻醉状态维持45 min以上,20%（3头/15头）西藏小型猪手术过程中追加麻醉。麻醉期间肌肉松弛效果好,动物呼吸和心率平稳。手术过程中西藏小型猪呼吸频率为（12-22）次/min,心率为（63-85）次/min,麻醉过程中未出现麻醉死亡,术后苏醒时间为30-60 min。结论速眠新和戊巴比妥钠混合麻醉效果好,且麻醉剂量较以往大幅减少,术后苏醒快。戊巴比妥钠联用速眠新复合麻醉对西藏小型猪是一种较理想的麻醉方法,且动物麻醉安全性高。     

封闭群五指山小型猪主要脏器重量与体重的相关性分析

目的测定封闭群五指山小型猪主要脏器重量和脏器系数,对脏器重量与体重的相关性进行分析,并计算出相应的直线回归方程和多元回归方程。方法实验选用6-10月龄普通级封闭群五指山小型猪30头（其中♂16头、♀14头）,分别测定体重和7个主要脏器重量,计算脏器系数,通过SAS软件进行脏器系数的性别间比较和各脏器重与体重间的相关与回归分析。结果性别间比较,小型猪仅有心脏的脏器系数差异有显著性（P〈0.05）。除公猪的胃脏和母猪的肺脏外,所测脏器重量与体重间均有明显的正相关线性关系;多因素分析显示公猪的肝脏和肾脏,母猪的心脏、肝脏和肾脏对各自体重有影响。结论封闭群五指山小型猪主要脏器系数性别间差异较小,其体重与某些脏器重量存在一定的线性关系。     

湖南沙子岭猪内源性逆转录病毒的研究

为评价从猪到人异种移植的生物安全性提供依据,从湖南沙子岭猪的保种群内随机采集31头个体的耳样组织,应用PCR和RT-PCR技术分别检测这些组织中内源性逆转录病毒（porcine endogenous retrovirus,PERV）的前病毒DNA和mRNA,并对PCR扩增的灵敏性进行评估。多组织RT-PCR检测3头沙子岭猪肾、心、肝、肺、脾 等组织中PERV的表达情况,了解其在各组织中的分布情况;最后,扩增、测序该猪种的env基因,结果用NCBI中的BLAST软件进行分析。PCR和RT-PCR结果表明,所检测的31头沙子岭猪均带有PERV前病毒DNA,耳样组织中均有PERV mRNA表达,其中有2头个体携带 env-A、env-B、env-C 3种囊膜蛋白基因,而其余的29头个体只带有env-A、env-B 两种囊膜蛋白基因,未检测到env-C基因。多组织RT-PCR扩增结果表明,3头沙子岭猪的肾、心、肝、肺、脾等组织中,pol、gag、env-A、env-B 基因均有表达,未检测到env-C基因表达。测序沙子岭猪的env基因,结果发现,沙子岭猪env-B 和env-C基因与其他猪种序列比较分别存在2 和10个碱基的差异,而env-A基因序列没有差异,说明不同的猪种之间 env基因存在多态性。以上结果表明,沙子岭猪种群携带PERV,其亚型主要以PERV-A,B为主;PERV在该猪种肾、心、肝、肺、脾等多种组织中的分布没有明显组织特异性,且93.5 % (29/31)个体表现为 env-C 基因缺失,提示沙子岭猪作为候选猪种可能在异种移植中具有较好的应用前景。     

猪巨吻棘头虫的核型和C带分析

在研究动物细胞染色体中,寻求和发现染 色体数目少、体积大的类型,对细胞遗传学的研 究有着重要意义。猪巨吻棘头虫（Macranthorynchvs hirvainaceus）的染色体恰是此种类型。 Robinson [21认为猪巨吻棘头虫的染色体数目是 2n - 6,国内何麟等［Ell报道为2n - 12。但用 显带技术的分析,尚未见报道。     

马科在中国的分布与现状

蒙古野驴(Asinus h．hemionus)分布于内蒙和甘肃西北角、新疆东北部至准噶尔盆地西部。1982年航调,卡拉麦里山保护区内有356头,O.02头／平方公里;1986年调查为O.03头／平方公里。估计目前我国境内不超过2000头。西藏野驴(Asinus k.kiang)分布于西藏西部、新疆南缘山地;A.k.holdereri分布于除湟水河谷外青海全境、四川西北角、甘肃祁连山。1984年调查,阿尔金山保护区内有41,262头,0.917头／平方公里。估计我国境内种群约在20万头上。多年考察未发现野马(Equus przewalskii),目前可能在北塔山以东尚有少数残存。     

五指山小型猪两种股动脉穿刺方法的比较

目的比较五指山小型猪在急性心肌梗死造模前行股动脉穿刺所使用的两种方法的成功率和并发症发生率以及所花费时间,为动物实验时行股动脉穿刺提供依据。方法拟行股动脉穿刺的五指山小型猪16头随机分为两组即切开直视穿刺组（n：8）和超声引导穿刺组（n=8）,比较两组穿刺的成功率、并发症发生率以及穿刺所花费时间。结果切开直视穿刺组的成功率及感染发生率均无差异,但出血发生率前者显著低于后者（P〈0．05）,且花费时间也明显少于后者（P〈0．05）。结论切开直视股动脉穿刺术是一种成功率高,安全性好,花费时间相对较少的方法。     

转基因猪肉激起国家政策辩论

目前,在美国基因工程牛成了新闻,但要向公众讲清为什么加入基因能达到预期效果还为期过早.在澳大利亚则不是这样,那里世界第一头转基因猪已有了五年多的经历,该猪的生长加快17%,饲料转化率达30%,并可在肉店买到这种肉. 把猪生长激素基因的额外拷贝插入动物的一项“超级猪”计划提供了53头猪供人们消费.其中一头其外加的生长激素基因不起作用,因此脱离这项研究,它生出了53头小猪.负责超能级试验的Metrotec Pty.Ltd.(Wasleys,澳大利亚,Netro Meat Ltd和     

长白仔猪血常规及生化指标正常值探讨

目的探讨2-3月龄长白仔猪的血常规及生化指标的正常值,为长白仔猪用于实验研究提供实验依据。方法采用实验室评价方法对40头长白仔猪的主要血常规和生化指标进行检测,并与巴马小型猪的参考值进行对比。结果长白仔猪的血常规及生化指标无性别差异（P〉0．05）,长白仔猪的WBC、ALT、Ca^2＋的平均值与巴马小型猪相似,两者之间差异无显著性（P〉0．05）,其RBC、HGB、HCT、PLT、TP、Alb、BUN、AMY的平均值均低于巴马小型猪的相应值,而AST、TBIL、DBIL、Crea、CK-MB明显高于巴马小型猪,具有显著性差异（P〈0．01）。结论长白仔猪有其独特的生理生化特性。     

贵州小型香猪基因组DNA的AFLP检测研究

报道了AFLP标记在研究贵州小型香猪遗传多性方面的应用和该品系猪个体基因组DNA的AFLP扩增结果,分析了贵州小型香猪的群体遗传结构。实验应用10条AFLP引物,用PstⅠ酶切,对17头猪基因组DNA进行AFLP反应,共获得116个AFLP标记,单引物获得的标记数在2－22间,贵州小型香猪群体相似系数AFLP研究结果为0．866（0．760－0．967）,该研究为贵州小型香猪的遗传稳定性提供了相关的参数,准确评价尚待和其它品种猪对研究后确定。     

甲虫体内定居猪巨吻棘头虫微生态学初步研究

本文报告了１９８４年大连地区甲虫体内定居猪巨吻棘头虫的幼虫（棘头体）情况。大牙锯天牛的成虫定植率为１０．２％,低于１９７４年的３８．８％。本次调查发现铜绿丽金龟、蒙古丽金龟和灰粉锶金龟,共４种金龟体内都有棘头体定居,其定植率依次是２３．８％,２３．８％,１６．１％和３３．３％。前３种金龟体内定居着棘头体为大连地区首次报告。调查证明上述天牛和金龟６种甲虫也是本地区流行的猪巨吻棘头虫病的重要媒介,如采     

宁乡花猪原代和第一代血液生理生化指标比较

目的比较原代宁乡花猪与其第一代仔猪血液生理生化指标的变化。方法常规方法测定宁乡花猪F0代16头,F1代16头血液18项生理指标和13项生化指标。结果F0代与F1代部分血液生理指标如白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞积压（HCT）等13项有显著性差异（P〈0．05）;部分血液生化指标如总胆红素（TBIL）,尿素氮（BUN）,总蛋白（TP）,白／球蛋白（ALB／GLB）,葡萄糖（GLU）,有显著性差异（P〈0．05）;其他指标均无统计学差异。结论2代宁乡花猪之间部分血液生理生化指标有显著性差异。得到的数据可以为实验动物化研究提供相应的基础生理参考数据。     

猪产仔数性状基因效应与有效因数的研究

利用太湖猪（Ｐ１）、长白猪（Ｐ２）、杂交一代（Ｆ１）、杂交二代（Ｆ２）、杂交三代（Ｆ２）和回交一代（Ｂ２）等６个世代产仔数的材料,分析了猪产仔性状的基因效应和基因数,结果表明上位效应不显著,猪产仔数性状符合加性－显性遗传模式,受一个有效基因控制。太湖猪产仔数性状基因加性值比长白猪高１．３９头,太湖猪高产仔在因对长白猪等位基因呈显性,显性度为０．８１。     

多根乌头生物碱成分的研究

从新疆产多根乌头AconitumkarakolicumRap.块根中分得五个二萜生物碱,经理化常数测定和光谱分析,分别鉴定为：乌头碱、脱氧乌头碱、新乌碱、准噶尔乌头碱和12-表-欧乌碱。其中12-表-欧乌碱系首次从该植物中获得。     

转基因猪体内外源基因的整合鉴定

外源猪生长激素基因被导入湖北白猪．为避免羊、猪之间在金属硫蛋白启动上的同源性而造成PCR检测结果的假阳性,分别将PCR合成反应的两个引物设计在羊金属硫蛋白基因启动子一侧和猪生长激素一侧,使PCR合成反应的结果特异地反映外源基因的整合性,准确地鉴定出转基因猪．DNA印迹分析结果表明,43头待检仔猪中有6头呈外源基因整合阳性．