中国临床球形孢子丝菌菌丝相药物敏感性分析

目的检测我国临床球形孢子丝菌菌丝相对5种抗真菌药物的体外敏感性,同时对比我国不同地区菌株药物敏感性的差异。方法将重庆、吉林、北京地区既往基因鉴定为球形孢子丝菌的100株临床菌株接种于2%马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上,25℃恒温培养7d获得菌丝相。依据美国临床与实验室标准化委员会(CLSI)制定的M38-A2方案,采用微量液基稀释法检测菌丝相对碘化钾、伊曲康唑、特比萘芬、氟康唑、两性霉素B的体外最低抑菌浓度(MIC)。质控菌株为近平滑念菌ATCC22019。结果碘化钾体外无抗真菌活性,特比萘芬MIC几何均值为0.14μg/mL,伊曲康唑和两性霉素B MIC几何均值分别为0.79μg/mL和0.63μg/mL,氟康唑MIC几何均值为45.89μg/mL。发现7株对伊曲康唑耐药菌株,吉林地区相对较多,但不同地区菌株的药物MIC值差异无统计学意义(P0.05)。结论碘化钾无体外抗真菌活性,我国临床球形孢子丝菌对特比萘芬最敏感,其次为伊曲康唑和两性霉素B,对氟康唑敏感性最差,不同地区菌株对抗真菌药物的敏感性没有明显差异。     

特比萘芬治愈儿童鼻翼孢子丝菌病1例

目的报道1例发生在4岁儿童鼻翼的孢子丝菌病。方法刮取病变组织接种到沙堡弱培养基培养,并对培养出的病原菌进行形态学鉴定和ITS区序列分析。结果病变组织在沙堡弱培养基25℃培养长出黑褐色菌落,25℃小培养后光镜及扫描电镜下见菌丝细长,分枝分隔,合轴式产孢形成的成簇和沿菌丝两侧排列,分生孢子卵圆形。提取真菌总DNA用PCR方法扩增ITS序列,测序后登录GeneBank进行比对,该菌与申克孢子丝菌菌株KMU3360ITS区碱基序列一致性达99%,鉴定为申克孢子丝菌。内服联合局部应用特比萘芬治疗6个月后皮损完全消退。结论确诊1例儿童鼻翼的孢子丝菌病,内服联合局部应用特比萘芬治疗儿童孢子丝菌病疗效良好。     

鼻部固定型孢子丝菌病1例

报道1例猫抓后引起的固定型孢子丝菌病.患者男,16岁,皮损表现为鼻翼部位的增生物,其上覆有脓痂.临床上易与细菌感染混淆,但根据患者的病史、临床表现、病理、真菌镜检及培养诊断为申克孢子丝菌引起的孢子丝菌病.患者在应用7个月的碘化钾结合特比萘芬软膏外用治疗后,皮损完全消失.     

1株多重耐药申克孢子丝菌感染的治疗

报道1例由多重耐药申克孢子丝菌引起的面部孢子丝菌病。患者61岁男性,面部皮疹2 a余,先后口服伊曲康唑、特比萘芬和氟康唑治疗16个月无效。患者皮损经真菌镜检和培养确诊为孢子丝菌病,分离的申克孢子丝菌体外药敏试验显示其菌丝相和酵母相对上述三种药物均不敏感。给予患者口服10%碘化钾溶液治疗3个月获得痊愈。     

特比萘芬联合伊曲康唑治疗孢子丝菌病失败1例

伊曲康唑和特比萘芬治疗孢子丝菌病（sporo-trichosis）有效安全,目前已成为孢子丝菌病治疗指南中的推荐用药[1].但少数患者单用伊曲康唑或特比萘芬不能有效控制病情,研究显示两药分别联合碘化钾溶液或两药联合治疗皮肤型孢子丝菌病显示疗效增强2-6].最近,我们诊治1例由球形孢子丝菌引起的皮肤固定型孢子丝菌病患者,采用特比萘芬联合伊曲康唑治疗失败,之后经特比萘芬联合碘化钾溶液治疗才获得痊愈.鉴于该病例治疗过程的特殊性,我们对其分离菌株进行了一些相关的实验研究,现报道如下.     

伊曲康唑联合卡泊芬净或特比萘芬对球形孢子丝菌体外抑菌作用的研究

目的探讨伊曲康唑联合卡泊芬净或特比萘芬时对球形孢子丝菌酵母相和菌丝相的体外抑菌作用。方法参照标准的微量液基稀释法及棋盘微量稀释法对33株球形孢子丝菌行药敏试验,结果使用抑菌浓度指数(FICI)判定"协同""不相关"和"拮抗"。结果伊曲康唑与卡泊芬净联合对球形孢子丝菌酵母相菌株的协同率为93.94%(31/33),与特比萘芬联合的协同率为60.61%(20/33);伊曲康唑与卡泊芬净或特比萘芬联合对菌丝相菌株协同率分别为96.97%(32/33)、84.5%(28/33)。对所有受试菌株均未观察到上述药物的拮抗作用。结论体外联合药敏试验结果显示伊曲康唑与卡泊芬净或特比萘芬联合有较好的协同作用。     

伊曲康唑联合特比萘芬治疗孢子丝菌病疗效及其对病原真菌体外抗菌活性研究

目的 初步探讨伊曲康唑和特比萘芬联合治疗孢子丝菌病的疗效,评价两药体外联合对申克孢子丝菌菌丝相和酵母相的抗菌活性.方法 口服伊曲康唑200mg/d和特比萘芬250mg/d治疗孢子丝菌病;体外联合药敏试验采用棋盘微量稀释法,计算分数抑菌浓度(FIC)指数判定两药相互作用具有协同、拮抗或无关作用.结果 伊曲康唑和特比萘芬联...     

沈阳地区孢子丝菌病48例临床分析

目的探讨孢子丝菌病的发病原因、特点、诊断及治疗。方法对48例孢子丝菌病病例进行调查分析,全部行真菌学检查,部分行病理检查,采用碘化钾、特比萘芬或以碘化钾为基础的联合治疗。结果48例患者有明确外伤史,蚊虫叮咬病史者占总发病人数66.67%。单纯应用碘化钾或以碘化钾为基础的联合治疗8~12周,治愈率均达100%。结论外伤及昆虫叮咬、动物抓伤为本病的重要致病诱因,单纯应用碘化钾或特比萘芬均可治愈,但联合用药起效更快,效果更好。     

不同方法治疗皮肤型孢子丝菌病

皮肤型孢子丝菌病首选口服抗真菌药物治疗,如碘化钾、伊曲康唑、特比萘芬和氟康唑等[1].由于个体差异及疾病情况的复杂性,患者对每种抗真菌药物治疗的反应不同,最近我们应用不同的方法治愈了4例皮肤型孢子丝菌病患者,报道如下.1临床资料1.1病例1患者男,68岁,北京市延庆县农民.因右侧面部皮损8个月于2008年12月8日就诊.8个月前患者右侧面部出现米粒大小皮损,之后皮损破溃、增多,伴疼痛.否认外伤史.皮肤科情况:右面颊部可见8个1 ～1.5 cm大小皮损,基底红肿,其上有厚的结痂,无脓液渗出,可触及多数皮下结节(见图1a).皮损痂屑KOH湿片真菌镜检阴性,皮损组织真菌培养为申克孢子丝菌.皮损组织病理显示表皮角化不全,有脓痂,表皮呈假上皮瘤样增生;真皮全层弥漫淋巴细胞、组织细胞、多核巨细胞、浆细胞、嗜中性粒细胞浸润,伴少许嗜酸粒细胞;PAS染色未见真菌成分.诊断:皮肤淋巴管型孢子丝菌病.     

国内首例阴囊伪膜样星形毛孢子菌感染

目的报道1例由星形毛孢子菌感染引起的伪膜样阴囊感染。方法患者,男,25岁,阴囊白色膜样附着物6周。通过对患者皮损进行真菌镜检、真菌培养,并对获得菌株进行科玛嘉显色培养基鉴定、尿素酶试验、放线菌酮耐受试验和分子生物学分析等实验研究。结果皮损真菌镜检可见大量透明分隔菌丝,真菌培养和分子生物学鉴定为星形毛孢子菌。小培养镜下不但见典型关节菌丝还见典型的多分生细胞。该临床菌株在科玛嘉显色培养基上呈淡蓝色菌落,尿素酶试验阳性,对放线菌酮不敏感。患者口服特比萘芬和外用特比萘芬乳膏,连续2周。停药时皮损消退,真菌学检查阴性。结论由星形毛孢子菌感染引起的伪膜样阴囊感染临床罕见报道,通过对该病例的深入研究,为临床诊疗提供参考依据。     

Fonsecaea monophora所致着色芽生菌病1例及其相关实验研究

目的 报道1例由Fonsecaea monophora所致的着色芽生菌病.方法 患者女,60岁,主因左手背皮损1 a余就诊,取皮损痂屑进行真菌直接镜检和培养,取皮损组织进行组织病理学检查和真菌培养.对培养获得菌株进行形态学和分子生物学鉴定,并进行药物敏感性检测.结果 真菌直接镜检阳性,可见较多圆形、厚壁、棕色的硬壳细胞.组织病理学显示为慢性肉芽肿样改变;HE和PAS染色均可见到圆形、厚壁、棕色的硬壳细胞.真菌培养阳性,菌落生长缓慢,呈橄榄色到黑色.小培养及扫描电镜检查可见枝孢型和喙枝孢型产孢,分生孢子单细胞性,呈椭圆形或卵圆形.ITS区序列分析鉴定为Fonsecaea monophora.药敏试验显示伊曲康唑对F.monophora的最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）为1.0 μg/mL,特比萘芬的MIC为0.015 6μg/mL.给予患者口服特比萘芬250 mg/d治疗,皮损缓慢好转;6周后加服伊曲康唑200 mg/d治疗,14周后皮损消退呈瘢痕化修复.结论 依据临床及实验室检查确诊该病例为Fonsecaeamonophora所致着色芽生菌病,伊曲康唑联合特比萘芬治疗本病例显示较好疗效.     

特比萘芬对24株黑酵母样真菌的体外药敏试验研究

目的 评价特比萘芬对7个属24株刺盾霉目（Chaetothyriales）黑酵母样真菌体外敏感性.方法 应用美国国家临床和实验室标准研究所（CLSI）的M38-A2方案.菌悬液终浓度为（0.4 ～5）＆#215;104 CFU/mL,30℃孵育5～7d,测定最低有效浓度（MEC）和最低抑菌浓度（MIC）.结果 特比萘芬对24株黑酵母样真菌MEC范围：0.125 ～4μg/mL,MEC90∶2μg/mL,MEC50∶0.25 μg/mL,GM∶0.392 9 μg/mL,特比萘芬对5株暗色真菌100％生长抑制,MIC范围：1～4 μg/mL,MIC50∶2μg/mL,MIC90∶4μg/mL.结论 特比萘芬对刺盾霉目（Chaetothyriales）中的黑酵母样真菌有较强的抑制作用,50％抑菌作用明显.     

8种中药单体抗球形马拉色菌的体外药敏实验

目的观察8种中药单体对球形马拉色菌的体外抑菌效果。方法参照美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)制订的M27-A方案中酵母菌微量稀释法,测定各中药单体体外抗球形马拉色菌的敏感性。结果 8种中药单体中,苦参碱、氧化苦参碱、麝香草酚、丁香酚有较强的抗马拉色菌作用(M IC<0.98～1.96μg/mL)。结论苦参碱、氧化苦参碱、麝香草酚、丁香酚有较强的抗马拉色菌作用,CLSI-M27A方案可用于抗马拉色菌敏感性测定。     

Evaluation of the Origin of a Sample of <Emphasis Type="Italic">Sporothrix Schenckii</Emphasis> that Caused Contamination of a Researcher in Southern Brazil

We report a case of a researcher from a laboratory of Mycology in Rio Grande do Sul, Brazil that presented a clinical evidence of sporotrichosis. The researcher had an accident while manipulating the microculture slides of chromoblastomycosis agents and presented a clinical evidence of sporotrichosis. As the laboratory has some cultures of Sporothrix schenckii, it was suggested that it might be a laboratory contamination. In order to test this hypothesis, the genotypic characterization of the samples was performed by means of the random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis method. In addition, we evaluated the in vitro antifungal activity of four antifungal agents against the isolated fungus. The sample obtained from the researcher was not genetically similar to any of the samples kept in the laboratory and showed the minimum inhibitory concentrations of 0.5 μg/mL for itraconazole and ketoconazole, >64 μg/mL for fluconazole and 0.125 μg/mL for terbinafine. It is suggested that the contamination had an environmental origin.     

Successful Treatment of Canine Sporotrichosis with Terbinafine: Case Reports and Literature Review

Sporotrichosis occurs worldwide, and the metropolitan region of Rio de Janeiro, Brazil, is a main endemic area, with a large number of human and animal cases in the last 19 years. This mycosis is more frequently described in cats rather than in dogs. There are a limited number of oral antifungal agents for the treatment of sporotrichosis in animals. In this context, the effectiveness of terbinafine in the treatment of sporotrichosis in humans, as well as the promising results of in vitro susceptibility tests, inspired us to use this drug in the therapy of this mycosis in dogs. We reported for the first time the use of terbinafine in the treatment of two dogs with sporotrichosis caused by Sporothrix brasiliensis. Moreover, we provided an overview of therapeutic features of canine sporotrichosis cases reported since the 1960s. One of the dogs presented the fixed cutaneous form of the disease, while the other patient presented hyperemia of the nasal mucosa and respiratory signs only. Terbinafine showed high antifungal activity in vitro against the canine Sporothrix isolates. The dogs were successfully treated with terbinafine, with remission of all clinical signs initially presented. The current reports indicate that this drug can emerge as a therapeutic option for canine sporotrichosis.     

耐氟康唑念珠菌和耐伊曲康唑烟曲霉对泊沙康唑的敏感性测定

目的：测定耐氟康唑念珠菌和耐伊曲康唑烟曲霉临床分离株对泊沙康唑的敏感性。方法参照美国临床实验室标准化研究所制定的 M27-A3和 M38-A2方案,测定从临床获得的11株耐氟康唑的念珠菌和3株耐伊曲康唑烟曲霉对泊沙康唑的 MIC 值。结果对于氟康唑耐药的念珠菌,泊沙康唑的 MIC 范围是0.125-1μg/ mL。对于伊曲康唑耐药烟曲霉,泊沙康唑的 MIC 范围是0.06-0.5μg/ mL。结论11株耐氟康唑的念珠菌和3株耐伊曲康唑烟曲霉均对泊沙康唑有效。     

特比萘芬与其他抗真菌药物对外阴阴道念珠菌病病原菌的体外相互作用研究

目的 了解特比萘芬( TEB)分别与氟康唑(FLU)、伊曲康唑(ITR)、咪康唑(MCZ)、克霉唑(CMZ)及制霉菌素(NYS)联合对外阴阴道念珠菌病患者分离的念珠菌体外相互作用.方法 受试念珠菌株46株,包括白念珠菌(20株)、热带念珠菌(15株)、光滑念珠菌(4株)、克柔念珠菌(3株)、近平滑念珠菌(3株)和季也蒙念珠菌(1株).方法参考CLSIM27-A3方案中的微量液基稀释法,观察各药单独和联合后的MIC,并计算FICI.结果 TEB、FLU、ITR、MCZ、CMZ和NYS 的单药MIC范围分别为0.5～256μg/mL、0.5～ 128 μg/mL、0.5 ～ 32.0 μg/mL,0.125 ～ 16μg/mL、0.03 ～ 4.0 μg/mL和2～8μg/mL.当TEB与FLU、ITR、MCZ和CMZ联合时,对白念株菌表现为协同作用的分别为100％ (20/20),80％ (16/20),55％ (11/20)和90％ (18/20);对1株季也蒙念珠菌均显示为协同作用;对热带念珠菌,TEB分别与上述4种唑类药物联合时,显示有协同作用的分别为67％ (10/15),60％ (9/15),20％(3/15)和20％ (3/15);TEB与唑类药物联合对光滑念珠菌、克柔念珠菌和近平滑念珠菌均无协同作用;TEB与NYS联合时对所有菌株均无协同作用.结论 TEB与唑类药物联合对不同种的念珠菌显示有不同的效应,但对外阴阴道念珠菌病主要的致病菌白念珠菌显示有良好的协同作用.TEB与NYS联合对念株菌均无协同作用.     

来自中国北方部分地区33株孢子丝菌菌株的表型和基因型鉴定

孢子丝菌病是一种临床常见的真菌感染疾病,近期有研究认为其致病菌是由多个同形种构成的复合体。为明确我国孢子丝菌病致病菌的生理学以及分子生物学方面的特点,对33株分离自我国孢子丝菌病患者组织的病原菌进行了研究,首先检测其在37℃是否生长以及PDA培养基上生长21d的菌落直径,其次检测其糖同化特点,最后对其钙调蛋白(Calmodulin,CAL)基因进行PCR扩增、序列测定以及系统进化分析。结果显示,这些菌株全部为球形孢子丝菌Sporothrix globosa,说明我国孢子丝菌病的病原菌可能以球形孢子丝菌为主。