家族性高胆固醇血症患者管理策略的近况

家族性高胆固醇血症(FH)是一种常染色体显性遗传性疾病,是脂质代谢疾病中最严重的一种.FH引起动脉粥样硬化(As)病变,导致早期发生较为严重的冠心病(CAD).初步估计.目前世界范围内FH患者约10 000 000例,将其作为重点目标人群进行早期针时性干预对于CAD预防至关重要.FH已经成为世界性健康问题,国外已经制定相应的诊断、治疗指南来规范管理FH患者,而我国这方面的研究工作极为缺乏.因此,制定我国FH患者相应的管理指南迫在眉睫,本文综述FH患者管理相关的研究进展.     

使用仙台病毒载体的在体FH基因治疗的开发

大阪大学细胞生物工程中心助教金田安史、第二内科教授松泽佑次,医务室小林一史、第四内科教授荻原俊男,医务室森下龟一等研究人员开发了使用HVJ-核糖载体(使用仙台病毒(HVJ)提高了向细胞导入基因效率)的家族性高血脂症(FH)的在体基因治疗技术。FH的离体基因治疗,美国Michigan大学James M.Wilson等1993年就开始临床应用。并在Nature Genetics杂志上发表了其方法和成果的详情。但是,发表在体的研究成果还是第一次。金田等于8月30～31日在名古屋召开的日本动脉硬化学会上     

家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因新突变位点的鉴定

家族性高胆固醇血症(hypercholesterolemia familial,FH)是由于低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)基因突变导致的常染色体显性遗传性疾病,临床上表现为多发黄色瘤、高水平血浆LDL、早发性冠心病及有阳性家族史。本研究通过临床症状结合血脂测定诊断出一个FH家系,其纯合子FH患者的血浆总胆固醇水平高达19．05mmol／L,LDL达17．06mmol／L,并有黄色瘤;而杂合子FH患者的血浆总胆固醇水平为7．96mmol／L,LDL为5．55mmol/L,并有心绞痛症状和黄色瘤。我们对该FH家系患者LDLR基因的PCR扩增DNA片段进行测序,发现纯合子FH患者LDLR基因Exon4区域内发生了GAG683GCG突变,即编码LDLR第683位的谷氨酸被丙氨酸替换,而杂合子FH患者该位点呈现杂合突变。此基因型与临床诊断遗传谱完全一致。同时,利用获得Epstein-Barr(EB)病毒转化型人永生淋巴细胞株(EBV-Ls)与荧光探针DiI标记的LDL结合反应,再通过流式细胞仪检测结果显示,具有功能性LDLR的EBV-Ls细胞比例,在纯合子FH患者(7．02％)和杂合子FH患者(62．64％)均比健康对照者(84．69％)低,纯合子FH患者LDLR活性仅为健康对照者的8．29％、而杂合子FH患者LDLR活性约为健康对照者的73．96％,前者呈现非常显著的降低。这些EBV-Ls细胞LDLR的功能变化分析,有力地支持了该FH家系的临床诊断和DNA测序结果。经查阅最新的UMD-LDLR完全版证实,本研究发现鉴定的GAG683GCG突变是人LDLR基因的新突变位点。     

家族性高胆固醇血症样表型遗传异质性的分子基础

家族性高胆固醇血症(FH)是由于低密度脂蛋白受体(LDL—R)基因突变,致使细胞表面LDL-R蛋白功能缺陷,导致血浆低密度脂蛋白(LDL)大幅度增高,并可导致早发冠心病。“FH”已经成为携带LDL-R基因突变患者的同意词,但日益增多的研究证实,其他6种基因突变也可通过不同机制导致FH样表型。这些致病基因的发现．促进胆固醇代谢的研究进入新领域,有助于深入探讨胆固醇代谢的调节机制,并将为FH样表型的诊断和治疗提供新的理论依据。文章就有关FH样表型遗传异质性的分子基础研究的近况作一简要综述．以引起人们的关注。     

青少年家族性高胆固醇血症患者血浆同型半胱氨酸和高敏C 反应蛋白水 平的临床价值及与血脂相关性研究

目的:探讨血浆同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)、高敏C反应蛋白(Hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)在家族性高胆固醇血症(FH)的纯合子和杂合子患者中的水平及其与临床生化指标的相关性。方法:入选在2013.10~2015.7期间在动脉硬化门诊随访、确诊的家族性高胆固醇患者34人(纯合子14例,杂合子20例)。根据FH纯合子、杂合子、健康体检者分成三组,分别测定其总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖(Glu)、Hcy、hs-CRP水平,并比较FH患者血浆LDL-C、非高密度脂蛋白(non-HDL)水平Hcy、hs-CRP水平的相关性。结果:FH组的TC、LDL-C、non-HDL、Hcy水平显著高于正常对照组(P0.05)。FH根据基因型亚组分析中,青少年纯合子组HDL-C[(0.78±0.21)vs(1.25±0.40)mmol/L]小于杂合子组(P0.001),而TC[(16.11±2.66)vs(7.30±2.54)mmol/L]、LDL-C[(14.06±2.22)vs(5.25±2.16)mmol/L]、non-HDL[(15.33±2.60)vs(6.05±2.61)mmol/L]、Hcy[(19.3±11.58)vs(11.29±3.42)μmol/L]水平显著高于杂合子组(P0.05)。Pearson相关性分析显示,FH患者血浆LDL-C、non-HDL水平与Hcy水平呈正相关(P0.05),而与hs-CRP无相关性。结论:FH患者,特别是青少年的纯合子患者,与对照组相较,具有较高的TC、LDL-C和Hcy水平,并且与血浆LDL-C、non-HDL水平呈正相关。FH患者hs-CRP的水平高于健康人,但差异无统计学意义,与血浆LDL-C、non-HDL水平也无明显相关性。     

中国人群家族性高胆固醇血症LDLR基因突变研究进展

家族性高胆固醇血症(Familial hypercholesterolemia,FH)主要是由于低密度脂蛋白受体(Low-density lipoprotein receptor,LDLR)基因突变导致的单基因显性遗传性疾病。FH患者LDLR基因突变导致细胞膜表面LDLR减少或缺如,机体代谢胆固醇能力降低,血浆胆固醇增高并沉积在不同的组织和器官,常伴有全身黄色瘤和早发冠心病,因此FH也是最常见的严重代谢性疾病。世界范围内对LDLR基因突变的报道总共有1741种,经整理我国目前报道的140例FH指示病例,包括108种LDLR基因突变类型。文章对已报道的中国FH患者LDLR基因突变特点进行系统分析和综述,旨在为FH诊断治疗提供参考依据。     

骨髓干细胞的多能性及其应用

《成年人骨髓干细胞研究》在上期《生物工程学报》(2 0 0 2 ,Ｎｏ .3)已作了简介 ,这里再作些补充。骨髓干细胞的多能性 ,可以说是组织工程种子细胞的重要来源 ,对它的研究开发有着非常重要的实用价值。 (1)具有分化为骨骼的潜力 :日本奈良县医科大学与日本产业技术研究所研究人员用骨髓干细胞 (指间质干细胞 )于体外培养再生骨骼 ,并首次用于移植手术实验取得成功 ,未发生排异反应 ;在日本 ,也有用非骨髓干细胞即蚕茧的丝蛋白高效率培养软骨细胞的报道。 (2 )培育并分化为神经细胞 :德国埃森大学一个科研小组成功地从人体骨髓中培育神经细…     

酸性硫酸盐土中硫形态转化过程的水分制约作用

分别设土壤田间持水量的30%恒定(FH1)、土壤田间持水量的70%恒定(FH2),一直淹水(INU)、风干后放置(DRY,作为对照)、自然风干(NAD)5个处理进行酸性硫酸盐土室内模拟实验。实验结果显示,水分条件对酸性硫酸盐土中水溶性硫、交换性硫和黄铁矿硫的形态转化有显着的制约作用。淹水环境和过分干燥环境都不利于黄铁矿的氧化及水溶性硫和交换性硫的形成,潮湿但含水量不饱和环境有利于黄铁矿硫向水溶性硫和交换性硫的转换。模拟试验期内,水溶性硫含量的增加速度排列为:FH2>FH1>INU,交换性硫含量的增加速度排列为:FH1>FH2>INU,黄铁矿硫含量的下降速度排列为:FH2>FH1>INU,原状土自然风干(NAD)过程中,水溶性硫、交换性硫和黄铁矿硫之间发生了明显的转化。对不同处理中黄钾铁矾硫、有机硫和元素硫的动态变化也进行了分析。     

重组葡激酶和水蛭素融合蛋白的血栓靶向性机制

为解释以凝血因子Xa(FXa)的识别序列为连接肽的葡激酶和水蛭素的融合蛋白(命名为SFH)在体内的强溶栓和低出血的特征,研究分析了SFH的两个血栓靶向性作用机理.首先采用ELISA和免疫组化的方法在体外分析了由水蛭素游离的C末端赋予的SFH对血栓的靶向性,结果显示SFH对凝血酶和富含凝血酶的血栓具有更高的亲和力.为阐明SFH抗凝活性在血栓部位的靶向性释放,构建表达了仅在水蛭素N末端连接FXa识别序列的水蛭素衍生物(命名为FH).体外试验结果表明完整的FH无抗凝活性,在体内FH可以发挥抗栓作用,且出血副作用较低,这些结果说明FXa的识别序列可以封闭水蛭素的抗凝活性,在体内FH可以由于FXa的成功裂解而释放其抗凝活性,且其抗凝活性可能仅局限于血栓局部.这就间接说明了SFH的抗凝活性可以在血栓局部进行靶向性释放.以上两个血栓靶向性作用机理是SFH在体内发挥更高溶栓效率和降低出血副作用的重要机制.     

家族性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体第13外显子突变分析

目的:探讨本课题组收集家族性高胆固醇血症(FH)患者中存在低密度脂蛋白受体(LDLR)第13外显子(E13)基因突变患者临床生化和心血管系统损害特点.方法:对9例临床诊断为FH、基因检测到LDLR基因E13突变的患者进行回顾性分析.结果:(1)临床诊断FH纯合子患者7名,其总胆固醇(TC)水平15.12～26.14 mmol/L,杂合子患者2名,TC水平11.30～11.75 mrnol/L.(2)均可见不同程度黄色瘤;(3)FH纯合子3例心电图出现ST-T改变;4例儿童和1例青年患者出现瓣膜损害,冠脉血流储备(CVFR)减低;杂合子心电图检查均正常,1例出现瓣膜损害,CVFR均正常.(4)核苷酸序列分析证实:9例E13突变患者中,A606T纯舍突变3名;D601Y纯合突变2名;A606T+、W462X和A606T+D601Y复合杂合突变各1名;A606T和D601Y杂合突变各1名.结论:FH严重损害患儿心血管系统和皮肤,LDLR基因E13出现的A606T和D601Y突变可能成为中国FH人群的高频突变位点.     

7-脱氢胆甾醇合成功能模块与底盘细胞的适配性

利用合成生物技术生产7-脱氢胆甾醇的挑战性在于获得合成功能模块与底盘细胞的适配关系。从更换不同调控强度的启动子和不同改造的酵母底盘两方面,对二者的适配性进行研究,以增加7-脱氢胆甾醇产量:过表达酵母固醇合成途径中的内源基因tHMGR和ERG1,敲除非必需基因ERG6和ERG5以抑制酵母固醇向麦角固醇的转化,得到改造后的酵母底盘SyBE_000956;利用由强到弱依次为TDH3p、PGK1p和TDH1p的启动子,引入人源C-24还原酶基因DHCR24,构建3种强度的外源功能模块,并分别导入3种底盘中,得到9种人工合成细胞。结果表明,TDH3p调控的功能模块与底盘细胞SyBE_000956具备较好的适配性,实现7-脱氢胆甾醇产量的提高。为后续的适配性研究提供了理性设计的依据。     

应用气-质联用仪测定三种螺旋藻中的甾醇成分

应用GLC/MS联用仪对室内培养的钝顶螺旋藻(Spirulina platensis (Nordstedt) Geitler)、极大螺旋藻(S.maxima (Stechell & Gardiner) Geitler)和盐泽螺旋藻(S.subsalsa Oerst)的甾醇成分进行了测定。从钝顶螺旋藻和盐泽螺旋藻中共分出11个相同的甾醇组分:胆甾醇、胆甾烷醇、芸苔甾醇、麦角甾醇、海绵甾醇、菜子甾醇、豆甾醇、24-乙基-Δ~(5,7,22)-胆甾醇、β-谷甾醇、异岩藻甾醇和4α,23,24-三甲基Δ~(5,22)-胆甾醇;从极大螺旋藻中只分离出8个甾醇组分。其中胆甾醇含量最高。4α,23,24-三甲基-Δ~(5,22)-胆甾醇为蓝藻中首次报导。     

hVEGF165 和嵌合水蛭肽融合基因的构建、表达和活性检测

根据抗 PTCA 或支架后再狭窄的基因治疗需要多基因治疗的特点,用基因重组技术构建了 hVEGF165 和嵌合水蛭肽 (fused hirudin , FH) 融合基因,并克隆到真核表达载体 pcDNA3.0 中,通过脂质体介导将 pcDNA3.0/hVEGF165 - FH 转染到人内皮细胞株 (ECV304) 中, RT-PCR 及蛋白质印迹证明融合基因 hVEGF165 - FH 在 ECV304 细胞中得到表达 ( 分子质量为 24 ku 左右 ). 通过体外活性检测——— MTT 法检测 hVEGF165 - FH 对 ECV304 细胞增殖的影响,通过体外血管生成分析 hVEGF165 - FH 对内皮细胞株 ECV304 增殖的影响 . 通过体外抗栓活性检测,表明表达产物具有促进内皮细胞株增殖及加快血管生成的作用,同时显著抑制了 ADP 诱导的血小板聚集率 (P < 0.05) 并显著延长 APTT 和 TT (P < 0.05) . 实验结果表明,融合基因在内皮细胞株中得到表达,表达的融合蛋白具有 hVEGF165 和嵌合水蛭肽 (FH) 的双重活性,这为以后的融合基因治疗再狭窄的动物实验打下了良好基础 .     

滤泡辅助性T细胞分化和功能的研究进展

滤泡辅助性T细胞(follicular helper CD4 T cell,T_(FH))是一类专门为B细胞提供帮助的CD4 T细胞。T_(FH)的分化依赖主要调控因子Bcl6的表达,细胞表面高表达趋化因子受体CXCR5,并能分泌细胞因子IL-21。T_(FH)对生发中心(germinal center,GC)的形成很重要,并调控B细胞亲和力成熟、抗体同型转换、浆细胞分化和记忆B细胞产生等重要生物过程,因此,对机体产生抗体的保护性免疫十分重要。现主要总结了目前对T_(FH)分化过程的认识、T_(FH)中起重要调控作用的分子,并讨论了T_(FH)在体液免疫中的功能。     

丹参川芎嗪注射液治疗脑供血不足性眩晕30例疗效观察

我院神经内科应用丹参川芎嗪注射液(血通注射液)治疗30例脑供血不足性眩晕,取得良好的效果,现报道如下。1临床资料1·1一般资料60例眩晕患者,男36例,女24例,年龄58~76岁。全部行TCD、头颅CT、颈椎正侧片和血脂检查,结合病史及临床体征,确诊为脑供血不足性眩晕。将患者随机分为治疗组30例,对照组30例。并进行观察比较疗效。1·2治疗方法对照组:给予低分子右旋糖酐500 ml,每日1次静脉点滴。治疗组在对照组基础上给予血通注射液5ml加入5%葡萄糖250 ml中静滴,每日1次,10天为1个疗程。两组均应用抗血小板、降血脂、控制血压及控制血糖等治疗。1…     

农业其它

甘醇酸醋氧化酶是一种与尿草酸盐过多症(hyperoxaluria)有关的酶,尿草酸盐过多症是一种由于草酸过量产生而引起草酸钙大量沉淀的遗传性疾病。在植物中甘醇醋氧化酶是光呼吸作用中的一种关键酶。报道了     

一种新的延胡索酸水合酶抗体的制备及功能研究

延胡索酸水合酶(fumarate hydratase,FH)是三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle,TCA)中的一个关键性酶。FH的基因突变将导致延胡索酸合酶缺乏症、遗传性平滑肌瘤和肾细胞癌(hereditary leiomyomatosis and renal cell carcinoma,HLRCC)等疾病。FH缺失导致HLRCC分子的确切生物学机制尚不明确。作者将FH基因片段克隆到原核表达载体上,在大肠杆菌中表达GST-FH(400-510)融合蛋白。该融合蛋白为抗原免疫小鼠获得抗体,通过免疫印迹实验证明了该抗体的特异性并发现FH在心脏和肝脏中的含量较高。通过免疫共沉淀实验发现,在大鼠肝脏组织中FH可能与多个蛋白形成蛋白复合物。     

高胆固醇血症的基因治疗;试验已扩展到一些年轻患者

密歇根大学医药中心(Ann Arbor,MI)的 James Wilson 在进行基因治疗时似乎具有一种 Midastouch。他的最后一项治疗囊性纤维变性的方法已获得重组 DNA 咨询委员会(RAC)的批准,其治疗罕见的血胆固醇疾病的方法给 RAC 留下了极深的印象,致使该委员会允许 Wilson 在此项研究中对4名患者进行试验。该新闻大概是基因治疗的暂短发展史中最有意义的事件。Wilson 在家族性高胆固醇血症(FH)的研究过程中积累了15或更多例基因治疗的原始记录,第一次证实了“基因疗法”能够真正地治疗人类疾     

日本同志社大学松藤和人教授等访问中国

2009年5月9日至14日,应中国科学院古脊椎动物与古人类研究所李超荣研究员的邀请,日本同志社大学的松藤和人(Matsufuji,Kazuto)教授和岩手县大学的菊池强一(Kjkuchi)讲师访问了中国.     

家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因复合杂合突变分析

目的:对1例临床确诊为纯合型家族性高胆固醇血症(FH)先证者及其核心家系成员进行基因检测分析,探讨患儿发病的分子病理基础.方法:收集先证者及父母血标本及临床资料,酚氯仿法提取基因组DNA,DNA直接测序方法检测低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因18个外显子和启动子及载脂蛋白B(ApoB100)R3500Q位点,核苷酸序列分析结果与Gen Bank比对寻找突变.结果:(1)先证者三尖瓣轻度关闭不全,先证者父母双侧颈总动脉内-中膜增厚,先证者母亲左侧颈内动脉起始处后壁多发混合回声斑块(2)该家系排除ApoB100基因R3500Q突变;(3)先证者LDL-R基因第13外显子发生A606T和D601Y复合杂合突变,前者第1879位G→A碱基置换,导致丙氨酸改变为苏氨酸,后者为1864位G>T碱基置换,导致天冬氨酸改变为酪氨酸,其父为携带A606T突变的杂合子,其母为携带D601Y突变的杂合子.结论:先证者LDL-R基因存在A606T和D601Y复合杂合突变,它们分别来源于父系及母系遗传.