不同时间睡眠干扰所致小鼠的类抑郁样行为

目的研究不同时间睡眠干扰后所致的小鼠类抑郁样行为学表现。方法使用滚筒睡眠干扰仪对小鼠进行不同时间(5、10、15 d)睡眠干扰后,分别对各组动物进行自主活动测试实验、强迫游泳实验和悬尾实验。结果干扰5 d组与对照组比,自主活动总路程、平均速度、运动总时间减少(P<0.05),干扰10 d组与对照组比,自主活动总路程、平均速度、运动总时间减少(P<0.05)。干扰5 d后,小鼠强迫游泳、悬尾实验中各指标与对照组比无差异,干扰10 d组小鼠的游泳不动时间[(143.92±9.48)s]和悬尾不动时间[(127.89±6.33)s]均较对照组小鼠游泳不动时间[(128.50±6.63)s]和悬尾不动时间[(102.64±9.57)s]长(P<0.05),干扰15 d组小鼠的游泳不动时间[(143.08±8.13)s]和悬尾不动时间[(119.10±10.43)s]均较对照组小鼠游泳不动时间[(113.00±7.28)s]和悬尾不动时间[(89.55±9.07)s]长(P<0.05)。干扰5 d组、10 d组、15 d组与对照组比,体重均降低(P<0.05)。结论滚筒法睡眠干扰10、15 d可引起小鼠的类抑郁样行为学表现。     

兴奋或抑制汗液分泌对小鼠汗腺水通道蛋白5免疫定位的影响

目的 探讨兴奋或抑制汗液分泌过程中水通道蛋白-5（AQP5）在汗腺组织的分布及表达变化。方法应用硅橡胶印模及免疫荧光技术测定小鼠在毛果芸香碱或阿托品处理后不同时间点的泌汗功能状态及AQP5在汗腺组织的分布和表达。结果静息状态下,汗腺分泌细胞及导管细胞中的AQP5几乎只分布于管腔侧胞膜;在毛果芸香碱刺激后小鼠汗液分泌的高峰期（15min）、衰退期（1h）及刺激后静息期（6h）,AQP5在汗腺组织的亚细胞分布及表达量均未有明显变化;阿托品处理后10或20min,小鼠汗腺的分泌反应完全被抑制,但AQP5在汗腺组织的表达分布未受明显影响。结论在光镜水平,兴奋或抑制汗液分泌并不改变AQP5在活体小鼠汗腺的分布及表达。     

不同品系小鼠在三种常见抑郁检测方法中的行为学表现

目的探讨4种不同品系小鼠在3种实验（空场实验、悬尾实验及强迫游泳实验）中的行为学差异,为抗抑郁新药研究中的实验动物选择提供参考。方法利用空场实验检测C57BL/6、BALB/c、ICR、和昆明小鼠的自主活动能力和对新奇环境的探索能力;利用悬尾实验和强迫游泳实验检测它们在应激刺激下的行为绝望状态。结果在空场实验中,BALB/c、ICR和昆明小鼠的运动总路程、运动速度和运动时间明显高于C57BL/6小鼠（P〈0.05）,ICR和昆明小鼠的直立次数也明显高于C57BL/6小鼠（P〈0.05）;悬尾实验C57BL/6小鼠的不动时间显著长于其他3种品系小鼠（P〈0.05）,但是4种品系小鼠在强迫游泳实验中的不动时间差异无显著性。结论 C57BL/6小鼠自发活动量低,对新奇环境的探索能力差,并且在急性应激刺激下容易造成行为绝望,因此C57BL/6小鼠可能适合作为急性应激抑郁模型动物。     

福建柏树林环境对小鼠自发行为的影响

采用旷场试验,通过连续6 d的试验观察,结合林内生态保健因子,分析昆明种小白鼠经福建柏树林环境处理后其行为指标的变化,结果表明:1)处理组小鼠运动总路程大于对照组,表明经过树林环境处理可增强小鼠的兴奋性;2)中央格运动总路程,除第1天处理组小于对照组外,其余时间均是处理组大于对照组,表明经树林环境处理后小鼠兴奋性增强,认知能力提高;3)从中央格进入次数来看,第1、6天处理组稍小于对照组,其余4 d均是处理组大于对照组;此外,6 d试验中,处理组小白鼠进入中央格时间均高于对照组。说明小白鼠经过林内环境处理后焦虑状况得到改善,探究能力有所提高;4)6 d试验中,处理组小鼠体重一直高于对照组,粪便粒数一直少于对照组,说明经林内环境处理的小白鼠食欲旺盛,紧张感有所降低;5)通过典型轨迹可以看出,处理组小鼠在中央格区域涉足频率较高,总路程相对较大,说明经林内环境处理的小鼠运动量增大,精神状态得到改善;6)对比林内外保健因子:两者差距较大,福建柏林明显优于室内,适合人体保健功能的开发和利用。     

经鼻吸入复方精油提神醒脑的药效、作用机制及初步安全性研究

评价复方精油吸嗅对小鼠提神醒脑的功效、作用机制及安全性。采用昆明小鼠经鼻吸嗅复方精油,通过自主活动行为学测试、戊巴比妥钠诱导睡眠实验综合评价复方精油提神醒脑的功效;采用酶联免疫法(ELISA)检测小鼠血、脑内神经递质多巴胺(DA)和谷氨酸(GLU)含量,Western blot研究复方精油对小鼠不同脑区多巴胺受体D1R蛋白水平的影响,阐明提神醒脑作用机制;单次高剂量吸嗅给药急性毒理学实验考察复方精油安全性,采用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)分析复方精油化学成分。动物实验结果表明,与对照组相比,复方精油低、中、高剂量组小鼠吸嗅3 d,每日均能显著提高运动距离(P<0.01)、平均速度(P<0.01),缩短休息时间(P<0.01),显著提高小鼠自主活动;连续吸嗅精油3 d,能显著缩短睡眠总时长(P<0.01),具有提神醒脑的作用。ELISA结果表明,与对照组相比,复方精油显著提高小鼠血、脑内DA、GLU的含量(P<0.05,P<0.05);Western blot结果表明,复方精油均显著上调小鼠海马、下丘脑、前额皮层和其他脑组织D1R蛋白水平(P&l...     

联体小鼠在联体状态下的生理变化

该研究旨在建立联体小鼠模型并评估小鼠应对联体状态时的生理变化。选取13对同基因联体小鼠,在两只小鼠肘关节远端4～5mm处,沿着肱骨和肋骨侧面直到腰围线末端,连接皮肤和皮下组织,建立联体模型,术后观察联体小鼠运动变化、体重、粪便皮质酮活性及血液交换率等。结果发现:术后联体小鼠出现兴奋、焦虑等特征性运动失常,随后数周小鼠活动逐渐适应联体状态,120天内无一死亡;术后三天体重下降,术后一月恢复至正常;术后粪便中皮质酮代谢物水平快速升高,至第75天降至正常;检测术后其中三对联体小鼠之间的血液交换率,结果基本正常,第12周血液完全交换率分别为63、46和107min。该结果提示小鼠能够很好地适应联体状态,该模型具有广泛的应用前景。     

心肌单细胞兴奋模式转迁规律和转迁过程中延迟后去极化、早后去极化的生成

实验观察了培养心肌单细胞自发性兴奋节律的不同模式以及兴奋模式的转迁规律。结果表明,单细胞在正常灌流条件下可处于不同的兴奋状态,产生不同的兴奋节律,包括延迟后去极化、早后去极化现象。不同的兴奋模式在膜电流改变条件下可规律地相互转迁。随外向电流的逐渐减弱、内向电流的逐渐加强,同一细胞顺序历经“极化”静息状态、含延迟后去极化电位的节律、连续兴奋节律、含早后去极化电位的节律和“去极化”静息状态的兴奋节律动态转迁过程,形成心肌单细胞自发兴奋的哗律谱系”。其中延迟后去极化节律介于“极化”静息状态和连续放电节律之间,是连续放电节律向“极化”静息过渡的一种表现形式。而早后去极化节律则介于连续放电节律和“去极化”静息状态之间,是连续放电向“去极化”静息过渡的一种表现形式。哗律谱系”的概念在延迟后去极化、早后去极化现象和正常节律之间建立了内在联系。     

组合行为学实验方法检测东莨菪碱制作小鼠谵妄模型

目的用组合行为学实验方法检测东莨菪碱制作小鼠谵妄模型。方法比较两组小鼠行为学变化:谵妄组(n=12)和对照组(n=8)小鼠分别腹腔注射15 mg/kg东莨菪碱和等容量的生理盐水,在注射后30～60 min之间对两组小鼠顺序进行黑白箱实验10 min,旷场实验10 min和非选择性非持续性注意力实验10 min—组合行为实验法,比较两组小鼠的5项行为学指标以检测谵妄状态。结果与对照组相比,谵妄组小鼠5项行为学指标差异均有显著性,小鼠在白箱中停留的时间显著缩短,P0.05;小鼠的活动速度显著增快,P0.05,在沿壁区活动时间显著增多,P0.05,僵住时间显著减少,P0.05;小鼠"注意力"水平显著下降,P0.05。结论组合行为实验法能反映谵妄诊断要素,更好地反映谵妄状态,且用时较短。     

p53基因敲除对小鼠神经行为及桶状皮层神经元数目的影响

目的探究p53基因在小鼠神经行为活动中的作用及对桶状皮层神经元数目的影响。方法 45只8～12周龄C57BL/6背景的p53基因敲除(KO)小鼠为实验组,38只同年龄同背景的野生型(WT)小鼠为对照组。通过旷场实验、Y迷宫实验和纹理辨别实验测试小鼠焦虑样行为、自发运动、工作记忆能力及触须敏感性。用尼氏染色法观察桶状皮层II/III层神经元数目变化。结果与WT小鼠相比,p53基因敲除小鼠在旷场中心活动的时间(P 0.05)、旷场中总运动路程(P 0.05)和Y迷宫中自发交替率(P 0.05)、进入臂的总次数(P 0.05)均无显著差异,但对新纹理目标物的探索百分比显著减少(P0.01); p53基因敲除小鼠桶状皮层II/III层的神经元数目较野生型小鼠显著减少(P0.01)。结论 p53基因缺失不会导致小鼠出现焦虑样行为、也不影响其自发运动及工作记忆能力,但损伤了小鼠对新纹理的辨别能力,即触须敏感性,可能与桶状皮层II/III层神经元数目减少有关。     

合欢皮总皂苷急性毒理学研究

本文采用常规急性毒理学研究的方法探究合欢皮总皂苷对小鼠的毒性剂量。HE染色观察其主要器官形态学变化,玻璃毛细管法测定血液凝固时间,生化法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-PX)活性。合欢皮总皂苷的最小致毒量为7.5 mg/kg,近似致死量为1500 mg/kg,半数致死量(LD50)为2164 mg/kg。毒性表现为动物活动减少、1500 mg/kg以上剂量使小鼠食欲下降、2250 mg/kg剂量使小鼠体重明显下降;给药后1 d、7 d和14 d给药组血液凝固时间缩短;主要器官形态学明显改变,明显降低主要器官SOD和GSH-PX活性。结果表明合欢皮总皂苷对小鼠有一定的毒性作用。     

难治性抑郁症治疗前后血浆单胺类神经递质代谢产物的变化

目的：探讨难治性抑郁症患者抗抑郁剂治疗前后的单胺类神经递质代谢产物的改变。方法：随机入组30例难治性抑郁症患者,进行汉密尔顿抑郁量表（HAMD）的临床评定。用酶联免疫吸附方法对这30例患者进行5-HIAA,MHPG检测,并与随机选取的经汉密尔顿抑郁量表（HAMD）临床评定的30名普通抑郁症患者进行比较。综合治疗8周后对难治性抑郁症患者进行治疗前后对比。结果：难治性抑郁症组治疗前血浆5-HIAA,MHPG浓度低于普通对照组（p〈0.05）,经5-羟色胺重摄取抑制剂治疗的难治性抑郁症患者,5-HIAA和MHPG含量与治疗前比较均有所升高,差异有显著性（p〈0.05）;结论：难治性抑郁症患者存在中枢5-羟色胺和去甲肾上腺素功能低下;个体化合理使用SSRIs类药物辅以心理治疗能有效地提高难治性抑郁症患者的外周单胺类递质水平,减轻患者的抑郁程度。     

多发性硬化和视神经脊髓炎的体液免疫机制及其干预策略

多发性硬化(multiple sclerosis,MS)和视神经脊髓炎(neuromyeltis optica,NMO)是两个独立的中枢神经系统炎性脱髓鞘疾病,B细胞和体液免疫在二者发生发展中发挥了重要作用。越来越多证据显示,针对B细胞和/或抗体的治疗有可能同时对抗MS和NMO。就B细胞及其体液免疫在MS和NMO发生发展及治疗中的作用做一综述。     

多发性硬化疾病及模型小鼠中疾病相关细胞因子和转录因子研究进展

多发性硬化症（multiple sclerosis,MS）是一种原发于中枢神经系统的炎症性脱髓鞘疾病。实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）与MS有相似的临床症状和病理特征,是被广泛应用于人类疾病研究的动物模型。MS确切的发病机制尚不清楚,但普遍认为是在易感基因的基础上,受环境因素触发,由CD4＋T细胞介导的中枢神经系统（centralnervous system,CNS）自身免疫性疾病。初始CD4＋T细胞在T细胞受体介导下活化,继而可分化为至少4个主要亚型,分别为TH1、TH2、TH17和iTreg细胞,参与不同类型的免疫应答。细胞因子和转录因子网络对CD4＋T细胞分化和效应细胞因子产物有重要意义。该文综述了各相关细胞因子和转录因子在CD4＋T细胞向不同亚型分化及MS/EAE发病过程中的相互作用和调控,揭示各因子在这些过程中的作用,有助于进一步研究和治疗MS。     

斯氏新小绥螨以神泽氏叶螨为猎物的发育与实验种群生命表研究

本研究进行了斯氏新小绥螨Neoseiulus swirskii （Athias-Henriot）以神泽氏叶螨Tetranychus kanzawai（Kishida）为猎物时,在15℃、18℃、20℃、25℃、30℃和35℃下的发育历期和实验种群生命表的研究,结果表明15℃时斯氏新小绥螨不能完成发育,18℃时仅少量个体能完成发育.在18～35℃之间,雌螨的发育历期为7.15～18.70 d,雄螨的发育历期为4.00～16.20 d.在20℃～35℃之间,斯氏新小绥螨的雌雄性比（♀∶♂）随着温度的升高而变小,20℃时性比最大（1.77）,25℃时净增殖率（R0）最大（36.497）,35℃时世代生长周期最短（15.433）,30℃时内禀增长率（rm）和周限增长率（λ）均最大,分别为0.197和1.218,种群倍增时间（t）最短（3.513）;随着温度的增加,斯氏新小绥螨的平均寿命逐渐变短,20℃时最长（73.40±1.26 d）,35℃时最短（25.10±1.20d）;25℃时每雌平均产卵量最高（60.44±1.51粒/雌）,35℃时日平均产卵量最高（2.06±0.09粒/雌/d）.     

大猿叶虫交配行为的观察

大猿叶虫Colaphellus bowringi Baly是十字花科上的重要害虫,一生能多次交配。本试验在25℃,光周期L∶D=12∶12条件下观察了大猿叶虫成虫连续7d的交配行为。结果表明:(1)每日平均交配(5.67±0.26)次,最高可达11次,不同日龄间的交配次数存在显著差异。(2)平均每日用于交配的时间为(238±10)min,占总时间的33.5%,最长可达493min,占总时间的68.5%,不同日龄间的交配时间有极显著差异。(3)交配持续时间最短8min,最长达289min,平均为(48±2)min;同一日内,随着交配次数增加,交配持续时间逐渐缩短;不同日龄间的交配持续时间存在显著差异。(4)相邻两次交配之间的间隔时间最短5min,最长300min,平均交配间隔(75±3)min;交配间隔时间随日龄的增加而明显延长。     

饮食诱导代谢综合征小鼠模型的建立

目的建立以高脂纯化饲料诱导的、遗传背景和环境因素共同起作用的C57BL/6J小鼠代谢综合征（MS）模型,为研究营养因素与代谢综合征的关系提供周期较短、稳定性好、可重复性、与人类发病可比性高的动物模型。方法雄性3周龄C57BL/6J小鼠30只适应性喂养10d后随机分为2组,其中一组（10只）给予普通生长饲料（对照组）,另一组（20只）给予高脂纯化饲料（模型组）。喂养期间对空腹血糖（FBG）、体重进行连续监测,同时监测体重指数（BMI）、血清胰岛素（FINS）、血清甘油三脂（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）,实验期10周。实验结束时取内脏脂肪和肝脏称重,取肝胰做病理分析。结果分组喂养1周时,模型组小鼠体重出现显著性升高（P〈0.001）,并表现为中心型肥胖。4周时FBG显著性升高（P〈0.05）,5周时FINS开始升高但无显著性差异。8周时血清TC、HDL-C显著性升高（P〈0.001）,10周时TG、TC、HDL-C、LDL-C均升高（P〈0.01）。HE染色显示肝脏中度脂肪变,胰岛细胞无明显改变。结论单纯施以高脂饲料10周即可建立MS小鼠模型。并且该模型造模方法简单易行、周期较短、稳定性好、可重复性高,与人类MS自然发病过程类似,是MS较理想的动物模型。     

置管溶栓联合自体外周血干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎

目的观察置管溶栓联合自体外周血干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎（TAO）的疗效。方法回顾性分析昆明医科大学第四附属医院血管外科2009年4月至2013年4月期间收治的64例TAO患者（68条患肢）,随机均分为两组,其中32例行置管溶栓联合自体外周血干细胞移植术（A组）,32例单纯采用自体外周血干细胞移植术（B组）,采用主观指标包括患肢疼痛、冷感以及客观指标包括跛行距离、踝肱指数、足部溃疡变化、皮温、截肢率进行疗效评价。采用t检验和Х^2检验分析两组疗效指标的差异。结果移植1个月后,两组64例患者（68条患肢）小腿疼痛均不同程度缓解,小腿冷、凉感觉消失;干细胞移植3个月后,A、B组两组间歇性跛行距离[（311.24±124.56）m,220.38±45.53）m,t=6.01,P=0.01],下肢皮温[（30.29±0.42）℃,（29.50±0.46）℃,t=28.05,P=0.00]、ABI（0.64±0.02,0.51±0.02,t=26.00,P=0.00）差异均具有统计学意义。A组中2例（2条患肢）,B组中4例（4条患肢）术后3个月由于小腿中段以下出现坏死导致膝下截肢,截肢率A组为：5.9﹪（2/34）;B组为：11.8﹪（4/34）;所有患者经肿瘤标记物、B超或CTA检查,均未发现恶性肿瘤、视网膜增生、动脉瘤等并发症。结论置管溶栓联合自体外周血干细胞移植治疗TAO是一种可供选择的新的治疗途径。     

取食不同寄主植物的桃小食心虫飞行能力

【目的】评测取食不同寄主植物的桃小食心虫Carposina sasakii飞行能力,为该虫预测预报和防控提供参考。【方法】使用飞行磨装置测定了取食不同寄主植物(海棠、苹果和杏)的桃小食心虫雌雄成虫的飞行能力,比较了取食同一寄主植物的雌雄成虫间和取食不同寄主植物的同一性别个体间平均飞行距离、平均飞行时间、平均飞行速度和最大飞行速度4个飞行参数。【结果】在12 h的飞行测试中,桃食心虫成虫最长飞行距离为24.54 km,最长飞行时间接近12 h,最大飞行速度为5.88 km/h,飞行11~12h的个体占比最高(36.98%)。取食同一寄主的雌成虫各飞行参数值均大于雄成虫。取食苹果和海棠的成虫的平均飞行距离在雌雄间存在显著差异,取食苹果的雌成虫的平均飞行距离显著大于取食杏的个体,取食苹果的雌成虫平均飞行速度和最大飞行速度显著大于取食另外两种寄主的个体;但是取食不同寄主植物的雄成虫间各飞行参数值差异不显著。【结论】桃小食心虫成虫飞行能力较强,取食同一寄主植物的雌雄成虫间以及取食不同寄主植物的雌成虫间飞行能力存在差异。     

滇南小耳猪精液的直接冷冻保存

目的建立滇南小耳猪精液冷冻保存方法,加速云南省特有小型猪种的小型化选育。方法利用脉冲电刺激模式诱导公猪输精管自助收缩排精。利用直接冷冻新技术（DFM）研究不同冷冻方案对精子的运动度、精子顶体完整性和体内授精胚胎发育能力的影响。结果在直接冷冻方法中,3%甘油防冻剂的作用下,60 s植冰时间和1.5 mm/s的冷冻降温参数对精子运动度保护良好,精子运动复苏率达到61.7%。但是,3%乙二醇虽然与甘油一样对精子的顶体完整性都有很好的保护作用,对精子运动度保护能力较差。此外,3%甘油、60 s植冰、1.5mm/s冷冻速度的直接冷冻的冻精解冻,移植到超数排卵的母猪子宫颈口实施人工授精,获得卵的受精和胚胎发育潜能尚可。结论玻璃管直接冷冻可以完成滇南小耳猪精子的冷冻保存。