布氏杆菌属内种和生物型的鉴定(续完)

<正> (1)布氏杆菌噬菌体的特性 形态学:电镜观察具有多角形头(二十面体),直径约为65nm;(?)形尾,长约23nm。(其范围:头直径为59～70nm;尾长为16～30nm)。 热稳定性:耐受50℃至少1小时,在60℃部分灭活,而在70℃1小时则完全灭活。 pH:这种噬菌体在肉汤中于37℃和pH     

布氏杆菌属内种和生物型的鉴定(续一)

<正> 三、布氏杆菌属的特性1.布氏杆菌属内的变异布氏杆菌生长于培养基中时,易倾向于变异。这种变异伴有抗原性的改变、丧失毒力、改变对噬菌体的敏感性以及菌落形态和其他的改变等。这种趋势是如此的显著,以至在讨论任何不同特性时都必须予以考虑。培养物在液体培养基中比在固体培养基上变异的更快。如果初次分离系采用液体培养基进行的,那末当检查时培养物可能已高度变异。因此,建议应迅速移植于固体培养基上。当进行任一培养物的分型前,均需检查其纯度和菌落形态。如果出现变异株,则需     

布氏杆菌属内种和生物型的鉴定

<正> 一、属的特性 布氏杆菌属的微生物是哺乳动物的兼性细胞内寄生菌和病原菌,具有相当广泛的包括人在内的宿主范围。它引起各种家畜例如牛、猪、绵羊、山羊,驯鹿和狗的感染和明显的动物流行性流产。 这些微生物系球杆状或革兰氏阴性短杆状,大小为0.5—0.7×O.6～1.5μm,单个存在,偶见短链。无动力,不形成内生芽胞或荚膜。 布氏杆菌严格需氧。有些菌株的生长,特别在初次分离时需加入5～10％CO_2。最适生长温度为37℃。过氧化氢酶为阳性,氧化酶阳性(除B.ovis和 B.neotomae外),不需要X因子(正铁血红素),也不需要Ⅴ因子(菸酚胺腺嘌呤二核苷酸,NAD)。水解尿素至不同的程度;还原硝酸盐为亚硝酸盐(除B。ovis外);不利用枸橼酸盐;不产生靛基质;甲基红和VP试验阴性。     

分枝杆菌(续二)

<正>鉴定分枝杆菌有几个试验,首先是筛选试验,先从典型的分枝杆菌中迅速地区别人型和牛型分杆枝菌。 分枝杆菌染色 分枝杆菌有抗酸性并可被酒精脱色,是由于这些细菌胞壁有大量类脂,对普通染色方法也具有抵抗力。 涂片染色液:     

立克次体病的检疫和诊断(续二)

<正> (三)血清学鉴别诊断 血清学是鉴别诊断细菌、病毒、立克次体等微生物及其疾病的重要力法。熟练而准确地运用血清学技术才能做出正确、可靠的实验诊断。应用于立克次体和立克次体病的血清学诊断方法很多,最常用的有:补体结合试验、立克次体凝集及外斐氏凝集试验、间接血凝和反相血凝及其抑制试验、中和试验等。近年来免疫萤光抗体染色、酶免疫吸附及细胞免疫试验也常被采用。本文着重立克次体学上最常用的几种方法做一介绍。 血清学诊断的基本原则:(1)是应用已知的某种病原体或抗原去测知未知抗体的存在和滴度,以确定系由何种病原体而感染。当人或动物被某种病原体感染后,常在患者     

哺乳动物的基因工程(续二)

四、外源基因在哺乳动物细胞中的表达 本节所讨论的内容将涉及外源基因在哺乳动物受体细胞染色体上的整合作用以及加强外源基因表达的主要途径,即通过强启动子和增强子的作用或使外源基因在受体细胞中获得放大。     

未完成的回忆录(续二)

昆明八载一、初到昆明1938年夏，我由美国学习归来时，抗日战争已开始，日本军仍在继续入侵。我国的大学均迁入内地。如当时在北京、天津的北大、清华、南开组成的长沙临时大学，也已经转移到昆明，改组为国立西南联合大学。我应北京大学及清华大学之聘，直接由美去昆明。当时我的家人仍在北京，电函约到香港，同去昆明。母亲年迈，二弟久病，不能远行。我的妻子儿女由我的三弟陪同乘船到香港。我接到他们后，即由西南联合大学人员及旅行社协助，乘船到海防。再转客轮、火车三天经河内、河口、开远到昆明，暂住招待所。后来在昆明市大西门内…     

白色杆菌属一新种的分离鉴定及其系统发育学分析

从热带土壤中分离到一株好氧、革兰氏阳性、不产芽孢的杆状菌株F8,该菌株含有MK11为主要醌组份;细胞壁肽聚糖的氨基酸组分为2,4氨基丁酸和γ氨基丁酸等;细胞壁糖组分为鼠李糖、半乳糖和葡萄糖;DNA的G+C含量为68mol%。16SrRNA基因测序和系统发育学分析的结果表明,菌株F8与驹形白色杆菌(Leucobacter komagatae)亲缘关系最近,其16S rRNA基因的同源率为96%。两者的总DNA杂交率为62%,生理生化特征也有差异,故可把菌株F8定为一个新种,即热带白色杆菌(Leucobacter tropicalissp.nov.)。     

破伤风毒素近况(续二)

<正> 毒素的化学性质下面简述一下破伤风毒素的物理化学行质并用最近的资料澄清一些过去混乱的结果。 破伤风毒素可能存在着两个不同的分子状态,即细胞内和细胞外毒素。细胞外毒素因带有肽链刻痕而与细胞内毒素不同。然而,两个被刻痕的毒素片段被一个二硫键连接在一起。所以,虽然两种毒素的结构不同,但他们的物理化学性质基本相同。物理、化学性质破伤风毒素是一个150,000中等分子量的完全蛋白质(14、63、85)。许多关于氨基酸组成的报告,结果相当一致(5、21、52、     

免疫诊断细胞方法(续二)

<正> (一)皮肤试验 皮肤对抗原阳性反应说明存在过敏,如果抗原材料不引起类似反应说明该个体对该抗原不存在过敏。过敏反应的强度不仅决定于淋巴细胞的致敏程度,而且决定于皮肤组织生理学、血管反应和其他因素。广泛存在着对PPD和某些细菌抗原的过敏性。所以过敏试验可以用于评价免疫活性,对全部被试抗原不呈阳性反应说明免疫反应性被抑制(不是对所有的人)。读取4-6小时和24-48小时出现的超敏反应直径。根据充血颜色、出血,浸润的mm~2等程度打0-4个加号。 用抗原作皮肤试验必须在采血为采血作体外试验之后进行,因为甚至给机体注射微量抗原都会改变淋巴细胞反应性。     

卡介苗对癌症和白血病的应用(续二)

<正> 六、BCG来源 几篇报导叙述某些BCG亚林对肿瘤比另一些菌株更有效。Mathe实验室报导了世界范围BCG菌株的比较(法国,英国、芝加哥、巴西、马德拉斯、日本、丹麦)。试验包括溶血斑形成的T和B淋巴细胞试验,T淋巴细胞的移植物抗宿主反应(GVHR)和小鼠对三种鼠肿瘤的免疫予防法。他们指出新鲜法国株在全部试验中都有效,而冻干伪所有菌株,包括法国菌株只对某些实验模型有效。然而,活菌数没进行比较,因而结果不能肯定。比较了Pasteur Phipps,Ticer Rostnthal和Glaxo亚株对豚鼠肝癌的作用,这些菌苗是分散生长并冻干制造的(活菌数相同)头3个菌株具有相等的肿瘤抑制特性而Glgxo亚株的肿瘤抑制作用差。液体-冻干Phipps与Glaxo。冻干菌苗相比较在大田鼠移植 SV 40肿瘤系统中使用BCC与照射肿瘤细胞联合使用,结果Glaxo菌株比Phipps亚株对肿瘤的抑制能力差的     

氨基酸的气相色谱(续二)

<正> 用三甲基甲硅烷基(TMS group)取代质子(通常称为甲硅烷基化作用),已经成功地用于制备一些生物学上重要的化合物的挥发性衍生物。这些重要的化合物有糖类、嘌呤和嘧啶碱、核苷类和核苷酸类、类固醇类、胺类、和氨基酸类。现在已有各式各样的试剂和大量的方法可用于甲硅烷基化作用,任何一种特殊的方法的选择,取决于该化合物和进行反应的规模。近来对这些方法已有评论。     

实验室感染的预防(续二)

<正> 五、排气保护橱 这种装置也称为“微生物学安全橱”、“接种罩”或简称为“罩”。在美国则称为“生物学安全橱”。我们不赞成“安全橱”这个词,因为它意味着任何时候都能提供安全工作的条件(错觉)。事实上不可能;如果安装欠妥,维修不善或使用不当,则不可能完全“安全”。使用“排气保护橱”这词较为正确。这表明了它的基本功能:控制并排除在某种实验室驿作过程中释放出的气溶胶和空气传播性传染微粒,以及保护实验室工作人员免于由吸入而可能导致的感染。 这种排气保护橱起不了向工作面输送过滤空气装置的作用;它的设计在于保护无菌操作者(如膜滤空气无菌橱)。而应把它视为无菌操作橱。     

血浆蛋白质的分级(续二)

<正>V各个血浆蛋白质的纯化方法 各个血浆蛋白质的纯化方法和步骤摘要列于表Ⅺ（所有参考文献详见原著一译者注）。     

微生物的保存方法(续二)

<正> (11)冷冻干燥法: 1.冻干法的原理及适用范围 (1)冻干法的原理 冻干法的原理简单,即首先使微生物冻结,然后在负压下进行升华、除水。菌体的水分大部分被除掉之后,则细胞的生活反应事实上即将停止,从而得以长期保持其生活状态。冻干有各种方式,这里将包括水升华过程的干燥法统称冻干法。 做为除水的手段,冻干法是个缓和的方法,但对于敏感的生物细胞,如果不加以充分注意,大部分细菌都有可能因冻干处理而死亡。关于菌种保存,可能被认为只要有一点菌活存下来就行了,但这只能是在万不得已的情况下的说法,而要想保持菌株的性质不发生变化,就必须设法尽量使更多的细胞活存下来。特别脆弱的菌另当别论,一般说来都希望活存率能保持在10％以上。 (2)适用范围 冻干法适用于大多数细菌及放线菌,同时病毒、噬菌体、立克次体、霉菌、酵母等,大部分约可用此法保存。     

值得注意的中国植物(续二)

继续报道了大戟科等10个分类单位:发表了防城巴豆(Crotonhanceivar.tsoiH.S.Kiu)和七星毛桐(Mallotusbarbatusvar.wuiH.S.Kiu)两个新变种;补充了合柱金莲木(Siniarhodoleuca)广东的标本;柳叶钝果寄生(Taxillusdelavayi)广西及贵州的标本;香港巴豆(Crotonhancei)的标本;小黄珠子草(Phyllanthuswilfordii)的标本;茎花守宫木(Sauropusbonii)为海南新记录;山麻杆(Alchorneadavidii)为广东新记录;分布于广东、广西、香港、云南的卵叶石岩枫(Mallotusrepandusvar.scabrifolius)的代表性标本;论述了毛果巴豆(CrotonlachnocarpusBenth.)为中国特有种。     

不常见的革兰氏阴性无芽胞杆菌的鉴定(续二)

<正> 色素杆菌属(Chromobacterium) 本属细菌以具有紫色素为特点,但也可能不显色,即使经若干日培养也不出现。它们在普通培养基上生长良好,菌落呈奶油或淡黄色,边缘变紫色。证明色素的最好的培养基是马铃薯。色素可溶于乙醇但不溶于氯仿和水,培养基中加入甘露醇和肉膏可使色素增强。在基本合成培养基中利用枸椽酸但不利用丙二酸,过氧化氢酶试验阳性,脲酶试验阴性。氨可形成。明胶液化。氧化酶试验阳性但对形成色素好的菌做起来困难。本属细菌有动力。     

应用单克隆抗体鉴定光滑型布氏杆菌A和M位点的分布

<正> 检查了有毒和无毒布氏菌的表面大分子脂肪、蛋白质、肽聚糖以及脂多糖(LPSs)的含量和结构,光滑型菌种之间的主要区别在于表面的脂多糖部份.已发现光滑型布氏杆菌含有A和M两种不同抗原.在光滑布氏菌株中,两种抗原的相关量不同,而在粗糙型菌株中缺乏。在牛种布氏菌2208、19和1119株中发现了A-LPS。在羊种布氏菌16M和15M株中发现了M-LPS。而牛种Ⅳ,猪种Ⅳ的A和M-LPS两者的量几乎相等。     

基因分子扩增的操作方法(续二)

<正> D.扩增用 DNA的分离和提取 绝大部分DNA的纯化提取,可用去污剂使细菌溶解,用石炭酸和/或旦白水解酶处理除去旦白,用核糖核酸酶除去RNA以及乙醇沉淀等操作进行。许多来源的SDS去污剂含有能破坏DNA生物学活性的物质。 Matheson、 Coleman 和 Bell的 SDS质量合乎要求。能破坏DNA或带有颜色的SDS在使用前应通过炭柱或用乙醇再沉淀。用Marmur 法在有机溶媒中振摇,能引起DNA的极大破坏,应防止。 提取细胞质中细胞器的DNA,应从提纯过的细胞器中分离以防染色体DNA的污染。超螺旋DNA如细胞器中存在的或许多病毒的中间复制体,可用染料浮力密度离心法提取。和提取全部DNA或细胞器DNA不同,从混合DNA中分离特异基因则较为困难。 1.藉物理学上的差异从混合DNA中分离特异基因 有些基因的硷基组成与混合DNA存在     

内芽孢杆菌属细菌(Paenibacillus daejeonensis)SS02抗菌蛋白的分离纯化和其性质的研究

内芽孢杆菌属细菌（Paenibacillus daejeoneusis）SS02,是一株能强烈抑制玉米纹枯菌（Rhizoctonia cerealis）、白色念珠菌（Candidal vaginitis）等病害真菌的拮抗菌株。SS02菌株培养液经硫酸铵分级盐析,SephadexG-75凝胶柱层析和DEAE-32纤维素柱层析分离纯化出一种抗菌蛋白,命名为SD22。蛋白电泳分析结果表明,此蛋白分子量为56000,等电点为6．4。此蛋白对热和紫外线稳定,对蛋白酶部分敏感。纯化后的SD22对玉米纹枯菌（Rhizoctonia cerealis）、油菜菌核病（Sclerotinia sclerotiorum）、苹果轮纹病菌（Physalospora piricala）、绿色木霉（Triclwdema viride）、绿色粘帚霉（Gliocladium viride）、弯孢霉菌（Curvula rialeafspot）、镰刀霉菌（Fusarium sp．）、赤霉菌（Fusarium headblight）、球孢白僵菌（Beauveria bassiana）、大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylo-coccus aureus）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、白色念珠菌（Candidal vaginitis）、冬瓜枯萎菌（Fusarium oxysporum Schl．emend,Snyder＆Hause）等菌有很强的抑制作用。