稻瘟净（Blasticidin S）脱氨酶基因的克隆

从一株抗稻瘟净（ＢＳ）的Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒｅｕｓ菌中克隆到一个ｂｌａｓｔｉｅｉｄｉｎＳ脱氨酶基因,命名为ｂｓｒＡＳ。ＤＮＡ序列分析表明ｂｓｒＡＳ不含内含子。编码区长３９０ｂｐ,编码１３０个氨基酸。将ｂｓｒＡＳ转化到稻瘟菌中,能使受体菌表达出ＢＳ脱氨酶的活性,从而产生抗药性。该基因可作为抗药标记基因使用,建立稻瘟菌的基因转化系统。     

直接作用于DNA修复的抗癌蛋白

1994年科学家首次认识到ＢＲＣＡ1基因突变可引起遗传性乳癌 ,后来别的科学家发现某些有该缺陷基因的妇女并无乳癌的家族史。现在科学家估计所有遗传性乳癌中约有 5 0 %是由ＢＲＣＡ1基因突变引起的 ,而几乎所有兼有卵巢癌与乳癌家族史的家族成员都携带ＢＲＣＡ1基因。ＢＲＣＡ1基因在正常时编码一个肿瘤抑制蛋白ＢＲＣＡ1。先前的遗传学研究提示该蛋白质抵抗癌症是靠其帮助修复损伤的ＤＮＡ。新近有遗传学证据证明 ,缺乏该蛋白质的小鼠暴露于放射线后便发生高比率ＤＮＡ突变。而且ＢＲＣＡ1基因在哺乳类基因组中的位置靠近其他的ＤＮＡ修复…     

RNA酶对前列腺癌生长的影响

最近科学家在研究有数名男子罹患前列腺癌的家族中 ,鉴定了一个位于 1号染色体的肿瘤抑制基因 .虽然最近才发现这个与前列腺癌相关的基因 ,但对该基因的研究从 2 0世纪 70年代就开始了 .该基因编码 1个称为ＲＮａｓｅＬ的酶 ,其降解ＲＮＡ .该基因的缺陷与前列腺癌的关系是首例与ＲＮＡ有关的肿瘤抑制事件 .研究者称自 1996年以来 ,他们一直在追踪遗传性前列腺癌的基因 .现在已找到该基因位于 1号染色体上 .研究者已经在受前列腺癌困扰的 2个家族中找到ＲＮａｓｅＬ的基因遗传突变 .现在将他们的发现披露于 2 0 0 0年 2月的ＮａｔｕｒｅＧｅ…     

文摘

010 0 93人可溶性肿瘤坏死因子受体Ｉ型基因在黑曲霉中的表达[中 ]/李敏… / /科学通报 .- 2 0 0 1,4 6( 1) .- 5 7～ 60将人可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ型 (ｓＴＮＦＲＩ)基因插入黑曲霉 (Ａ .ｎｉｇｅｒ)融合蛋白基因的表达质粒 ｐＩＧＦ中 ,融合之处设计类胰蛋白酶 (ＫＥＸ2 )加工位点 ,构建融合表达载体ｐＨＢＣ。以 ｐＨＢＣ转化黑曲霉胞外蛋白酶缺失株Ａ .ｎｉｇｅｒ3 .795 - 1- 2 3 ,通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定阳性克隆Ａ .ｎｉｇｅｒ3 .795 - 1- 2 3重组菌株的蛋白电泳显示有特异表达带 ,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ证实该分泌…     

与提高糖尿病危险率相关的基因

科学家新近鉴定了一个称为ＣＡＰＮ10的基因 ,该基因发生某些普遍的变异 ,便明显提高了成年发作型 ,即ＩＩ型糖尿病的危险性。该基因位于第 2号染色体上 ,它编码钙蛋白酶 10 ,该酶是蛋白水解酶 ,目前对它了解甚少。在 2 0 0 0年 10月份的ＮａｔｕｒｅＧｅｎｅｔｉｃｓ上 ,科学家报道了在墨西哥 美国人中 ,ＣＡＰＮ10的变异可能使糖尿病的危险率提高 3倍。ＣＡＰＮ10的变异可以产生 3个特异性变异的译本 ,或在基因ＤＮＡ序列内部含有单个核苷酸多态性 (ＳＮＰｓ)。4年前 ,科学家检查墨西哥 美国人中 346对患有糖尿病的同胞兄弟姐妹的染色…     

GHcDNA克隆在大肠杆菌中表达将有望应用于水生鱼类动物

猪生长激素 (ＧＨ)为单一的多肽 ,无亚基 ,不要糖基化修饰 ,只含 2个硫键 ,有重复的特性 ,并能在大肠杆菌体内进行表达 ,其表达量为 2 0 .5 %。但在构建鲑鱼ＧＨ、鲤鱼ＧＨ的表达载体分别为 ｐＢＶｓＧＨＩ8和ｐＢ ＶｃＧＨ8时 ,其表达量分别是 10 %和 2 9.2 %。当猪ＧＨ基因同用大肠杆菌、鲑、鲤进行表达 ,其表达载体均为ｐＢＶ2 0 0时 ,各个表达量仍有很大差异。这主要是外源基因在同一表达载体中所表达的水平不同有关 ,亦即外源基因 5′端ＡＵＧ附近的ＲＮＡ二级能量的大小、ＡＵＧ与ＳＤ序列之间的距离大小 ,外源基因 3′测翼稳定性的强…     

地中海拟无枝菌酸菌U-32的3-氨基5-羟基苯甲酸合成酶(AHBAS)基因的克隆与序列分析

地中海拟无枝菌酸菌（Ａｍｙｃｏｌａｔｏｐｓｉｓｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｉ）Ｕ３２是一种临床上重要的抗生素———力复霉素ＳＶ的产生菌。研究表明,在地中海拟无枝菌酸菌的力复霉素生物合成过程中,３氨基５羟基苯甲酸合成酶（ＡＨＢＡＳ）是合成中间体Ｃ７Ｎ母核（又称ＡＨＢＡ）的关键酶。通过筛选以广宿主粘粒（Ｃｏｓｍｉｄ）ｐＬＡＦＲ３为载体构建的地中海拟无枝菌酸菌Ｕ３２的基因文库,获得６个阳性克隆子。将含有ＡＨＢＡＳ基因的约２５ｋｂ的片段克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ和ＫＳ上,进行酶谱分析得到其在染色体上的初步定位。序列测定表明地中海拟无枝菌酸菌Ｕ３２中的ＡＨＢＡ合成酶基因,由１１６７ｂｐ组成,起始密码子为ＡＴＧ,终止密码子为ＴＧＡ,共编码３８８个氨基酸,所克隆到的ＡＨＢＡ合成酶基因在大肠杆菌的启动子控制下获得诱导表达,蛋白分子量约为４３ｋＤ。     

ACC合酶基因（ACSG）可能是黄瓜雌性系的分子标记

利用本实验室根据已知序列分离得到的ＡＣＣ合酶基因（ＡＣＳＧ）为探针对不同黄瓜（Ｃｕｃｕｍｉｓ ｓａｔｉｖｕｓ Ｌ．）品种（系）的基因组ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交,初步分析了该基因与黄瓜性别表型之间的相关性。发现在所检测的１０个不同品系中,ＡＣＳＧ与雌性系表型之间存在明显的相关关系,而且这种相关关系在不同的实验中具有良好的重复怀。ＡＣＳＧ基因可能是鉴定黄瓜雌性系的一个分子标记。     

苏云金芽胞杆菌YBT1520杀虫晶体蛋白基因的属性

通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交发现高毒力苏云金芽胞杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）ＴＢＴ－１５２０菌株含有两个杀虫晶体蛋白基因片段,其５’＝末端所在ＨｉｎｄⅢ片段分别为６．８ｋｂ和４．６ｋｂ,它们对应的基因分别命名为ｃｒｙ２１８和ｃｒｙ４．６。经ＰＣＲ鉴定,该菌含有ｃｒｙ１Ａａ、ｃｒｙ１Ａｂ和ｃｒｙ１Ａｃ基因,以及ｃｒｙ２基因,其中ｃｒｙ２１８属于ｃｒｙ１Ａｃ。分析了ｃｒｙ１Ａｃ基因     

第四军医大学实验动物中心SPF实验部向国内外上等级课题开放公告

第四军医大学实验动物中心是一个集繁育、科研、教学及成果转化为一体的在编单位。中心ＳＰＦ饲育部可提供包括裸鼠、Ｃ57、ＢＡＬＢ/ｃ、昆明小鼠、Ｗｉｓｔａｒ、ＳＤ大鼠等 2 0个品系不同等级的实验动物 ,其中裸鼠月供量为 5 0 0只 ,年供量 6 0 0 0 80 0 0只。特设恒河猴、     

低VEGF水平可能导致肌萎缩

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮｅｗｓ ,2 0 0 1年 2 1卷 15期报道 :ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＬｅｕｖｅｎ(Ｌｅｕｖｅｎ ,Ｂｅｌｇｉｕｍ)的研究者在揭开引起肌萎缩 (ＡＬＳ)的原因中取得了进展。他们根据线索集中研究血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)与ＡＬＳ的关系。如果ＶＥＧＦ是ＡＬＳ的主要原因之一 ,那么治疗方法将会接踵而至。此外 ,这还使人们警惕针对ＶＥＧＦ的频繁的癌症治疗会对人产生潜在的神经副作用。虽然ＡＬＳ导致 1/10 0 0的死亡率 ,科学家并不清楚 98%病人发病的原因 ;剩余的 2 %病人发病的原因是过氧化物歧化酶 (ＳＯ…     

乙肝病毒表面抗原抗体可变区基因的克隆及人－鼠嵌合抗体重链基因的表达

本文采用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,从鼠抗乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）单克隆细胞中克隆到了该抗体重、轻链可变区（Ⅴ区）基因,并分别将其与人的恒定区基因Ｃγ３,Ｃｋ相拼接,构建人－鼠嵌合抗体基因。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ分析结果证实嵌合抗体重链基因在Ｅ．ｃｏｌｉ中得到了表达。间接ＥＬＩＳＡ法免疫测定的结果表明该表达产物具有与乙肝表面抗原结合的能力。     

人类黄体组织抑制素与激活素构型的研究

本文观察了抑制素／激活素α、βＢ与βＢ亚基基因在人早（３天）、中（３天）及晚（１５天）期黄体组织的表达。α－ｍＲＮＡｓ在早期黄体最高;βＡ－ｍＲＮＡｓ仅在早期出现,而βＢ－ｍＲＮＡｓ从黄体早期至晚期逐步增高。提示人黄体抑制素可能为抑制素Ｂ。晚期黄体可能有激活素Ｂ的生成。     

抗σ因子

Ｔ4噬菌体的ＡｓｉＡ可以抑制大肠杆菌的σ70 因子 ,因而称为抗σ70 因子 ,调节Ｔ4噬菌体早期基因的转录。细菌中的ＦｌｇＭ ,是抗σ2 8因子在细菌鞭毛形成过程中起调控作用。ＦｌｇＭ比较特殊 ,天然形式是未折叠的。枯草杆菌(Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ)的ＳｐｏＩＩＡＢ可抑制芽孢形成过程的专一性σ因子σＦ 和σＧ。该菌中的另一个抗σ因子是ＲｓｂＷ可以抑制应急反应中基因转录所需的σＢ 因子。此外 ,在真细菌类中 ,发现一类新的具内膜接合特性的抗σ因子 ,调控着具有胞外功能蛋白的基因表达 ,因而被分作抗σ因子的细胞外因子 …     

抑制肺癌及乳癌的基因

许多基因编码抑制细胞生长的蛋白质 ,这些基因中的某些基因抑制肿瘤生长 .以前发现ＢＲＣＡ1基因抑制乳癌生长 ,现发现基因ＲＡＳＳＦ1Ａ也是这种基因 .在 2 0 0 1年 5月 2日的ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＣａｎｃｅｒＩｎｓｔｉｔｕｔｅ上报道的一项研究确认 ,许多肺癌与乳癌缺乏有功能的ＲＡＳＳＦ1Ａ .研究者发现 ,将恢复ＲＡＳＳＦ1Ａ功能的人癌细胞移植到小鼠体内 ,可防止小鼠发生肿瘤 .研究者用外科手术从肺癌和乳癌病人身上取得癌细胞来创建可在实验室生长的细胞系 .从小细胞肺癌病人取得的 32个细胞系中的ＲＡＳＳＦ1…     

BRCA1在非遗传性癌症中的作用

ＢＲＣＡ１在非遗传性癌症中的作用ＢＲＣＡ１是新近发现的肿瘤抑制基因,乳房或卵巢细胞若缺少它所产生的蛋白质便会生长失控。去秋科学家宣告它与某些遗传性乳癌和卵巢癌有关。今年４月的《ＮａｔｕｒｅＧｅｎｅｔｉｃｓ》则报道：有两个研究组认为,至少有１０％非遗传...     

NIH新闻

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮＥＷＳ 2 0 0 1年 2 1卷 2 8期第 5页报道 :上周从美国国立卫生研究院 (ＮＩＨ ,Ｂｅｔｈｅｓｄａ ,马里兰州 )传来了令干细胞和基因治疗研究者们兴奋的好消息 ,该院在其网站上公布了研究者们期待已久的人类胚胎干细胞注册表和相关基金申请的信息 ,ＮＩＨ还将在基因载体实验室提供免费的毒理学研究项目 ,这使基因治疗研究者深受鼓舞。ＮＩＨ将受理的研究对象是注册表中所列干细胞系方面的基金申请 ,并将在接下来的几个月里发布申请要求 (ＲＦＡｓ)和程序通告 (ＰＡｓ)。在注册表中有 72个可用的干细胞系 ,包括…     

不同籼稻品种的矮生性与内源ABA水平及其结合蛋白的关系

试验研究了内源脱落酸及其结合蛋白与含有不同矮秆主基因的籼稻矮生性状的关系。结果表明：籼稻的矮生性也受内源ＡＢＡ及其结合蛋白协同调控。矮秆品种幼苗内源ＡＢＡ及其幼芽膜上ＡＢＡ结合蛋白水平显著高于离秆品种,且含有强矮化效应的ｓｄ－ｇ基因的新桂矮、双矮的内源ＡＢＡ及其结合蛋白水平又明显高于含ｓｄ－１半矮秆基因的广场矮。外源ＡＢＡ能显著抑制籼稻幼苗伸长,苗高下降率与ＡＢＡ结合蛋白水平有一定的关系,且矮秆品     

昆虫杆状病毒基因工程研究新进展

80年代出现的昆虫杆状病毒载体表达系统 ,在国内外研究与应用发展很快 ,笔者就这一方面的新进展作一综述。1　杆状病毒基因的原核及真核系统表达粉纹夜蛾 (Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａｎｉ)颗粒体病毒 (ＴｎＧＶ)编码的病毒增强因子 (ｖｉｒａｌｅｎｈａｎｃｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＶＥＦ)基因是第一个被克隆、测序的昆虫病毒增效基因[1] ,该基因含有 3,5 5 6ｂｐ (ＧｅｎＢａｎｋＤ12 6 17) ,Ｇ +Ｃ为 46 5 % ,编码的增效蛋白由 90 1ａａ(ＧＶｅｎＰｅｐｔＢＡＡ0 2 141)组成。 1998年Ｒｉｎｃｏｎ -Ｃａｓｔｒｏ等该基因插入苜蓿尺蠖 (Ａｕｔ…     

昆虫杆状病毒晚期启动子在大肠杆菌中启动CAT基因表达

将油桐尺蠖（Ｂｕｚｕｒａｓｕｐｐｒｅｓｓａｒｉａ）核多角体病毒晚期基因──多角体蛋白基因启动子及５′端编码区,以两种不同方式置于缺乏启动子的氯霉素乙酰基转移酶（ＣＡＴ）基因上游,使其分别终止在不同翻译终止位点,其宿主菌具有明显不同的氯霉素抗性,最高达２００ｍｇ／Ｌ　ＬＢ培养基以上,表明昆虫病毒启动子能启动原核基因表达。对多角体蛋白基因启动子能在大肠杆菌中有效工作的原因进行了讨论。