秦巴山区及毗邻地区野生百合的形态多样性研究

通过对采集于秦巴山区及其毗邻地区的野生百合形态的详细观察,表明不同种类的野生百合在鳞茎、茎干、叶片及花等器官上具有形态多样性。野百合和宜昌百合同种内不同生态型也存在形态多样性。在宜昌百合上首次发现了黄色花的生态类型。此区域内野生百合丰富的形态多样性,为进一步开发利用这些种质资源奠定了基础。     

胚抢救技术在核果类果树育种上的应用

胚抢救技术在核果类果树早熟品种育种及获得远缘杂种、阻止胚早期退化、提高早熟品种种子萌发率和缩短育种周期等方面具有重要作用。对胚抢救技术及其在核果类果树育种上的应用、注意问题进行了综述。     

萝卜-芥蓝杂种F1代创制及杂种鉴定

以萝卜为母本,以芥蓝为父本,采用人工去雄授粉的方法进行杂交,然后通过胚抢救（embryo rescue）得到F1代植株,并利用RAPD技术对杂种F1代幼苗进行了鉴定。RAPD鉴定结果表明：杂种表现出亲本的特异带或者亲本不具备的新谱带,有的还遗失了亲本的特异带或者共有带。     

百合(Lilium spp)的组培快速繁殖技术研究

用百合的鳞茎和根尖作为外植体进行组培快速繁殖实验:选用MS培养基为基本培养基,添加不同浓度的激素,接种后进行对照试验。结果表明:鳞茎在所有的外植体中愈伤组织的诱导率最高;百合鳞茎愈伤组织的最佳培养基为MS 6-BA 1.0mg/L NAA 0.5 mg/L。     

东方百合系内杂交授粉技术与胚抢救技术研究

研究了东方百合系内杂交授粉技术及胚抢救技术。结果表明:(1)在组合‘Justina’בShela’中,采用柱头直接授粉,花粉管在花柱中向下定向生长,在子房中向胚珠定向生长;采用切花柱授粉,花粉管在花柱切口及子房中发生不同程度无向性生长;残留花柱越长,进行胚珠定向的花粉管数量越多,获得的饱满种子越少,采用柱头直接授粉获得的饱满种子最多。(2)采用柱头直接授粉对东方百合系内56个组合进行杂交实验,仅1个组合未获得饱满胚珠、3个组合获得胚珠少于10个,其余52个组合获得大量饱满胚珠,初步表明此法可作为东方百合系内杂交通用授粉技术。不同胚抢救技术试验结果显示,授粉约70d后采用切胚珠接种比胚珠直接接种的杂种胚萌动快、萌发率高,而且前者的胚抢救效率也明显高于授粉40d后的"剥胚式接种"。研究认为,授粉约70d后采用"切胚珠接种"可作为东方百合系内杂交通用胚抢救技术。     

野生淡黄花百合的引种栽培研究

阐述了淡黄花百合的生物学特性和药用价值,重点介绍了引种繁殖与栽培技术,为开发利用野生药用百合资源提供参考。     

东北地区野生百合数量分类研究

对中国东北地区6种3变种30份野生百合的23个形态性状进行了研究。结果表明,我国东北地区野生百合种质资源的主要数量性状均有明显差异,其中花柱长和叶宽的变异系数较大,分别为59.49%和54.03%。基于形态性状,把30份野生百合聚类并划分为两大类:第1类为茎粗壮、花朵较大的种类,包括卷丹和毛百合;第2类为花朵相对较小的种类,包括有斑百合、大花百合、细叶百合、垂花百合、大花卷丹、东北百合和朝鲜百合。通过主成分分析,前4个主成分代表了形态分化的82.51%,即叶长和宽、外轮花瓣宽、内轮花瓣长和宽、花蕾长、花柱长、花药长8个性状是其形态分化的主要指标。     

丁香(Syringa L.)种间杂交幼胚离体培养研究

采用幼胚离体培养方法克服幼胚败育从而直接获得杂种实生苗,对影响丁香幼胚培养成功的各种因子作了较系统的研究.结果表明,丁香幼胚培养的最适培养基为Monnier;最佳糖浓度为50g·L^-1;幼胚在50～60d胚龄时培养最容易成功;加入适量的椰乳、谷氨酰胺或谷氨酸及活性炭可以促进幼胚的萌发和生长.低浓度(0.01mg·L^-1)BA的加入可以提高幼胚的萌发率;NAA浓度以0.01mg·L^-1为最佳.     

21种野生百合亲缘关系的ISSR分析

该研究选用7条ISSR标记引物对百合属21种野生百合的亲缘关系进行分析,使用POPGEN1.32和MEGA5.1数据处理软件分析数据。结果表明：7条引物扩增出149条条带,其中136条为多态性条带,多态性条带比率为91.06％,平均有效等位点数为1.7624,平均Nei’ s基因多样度为0.4214,平均Shanon信息指数0.6085。遗传距离变化范围为0.3075~0.8873,紫脊百合和尖被百合的遗传距离最大,均值为0.8873,表明21份材料中二者亲缘关系最远;紫脊百合和宜昌百合遗传距离最小,均值为0.3075,表明二者亲缘关系最近。聚类结果与形态学分类大致吻合,21个供试材料可被分成5个类群,大理百合、宝兴百合、卷丹百合、紫斑百合、乳头百合、川百合、兰州百合、山丹百合、绿花百合和毛百合为第Ⅰ类群;紫脊百合、宜昌百合、岷江百合、通江百合和淡黄花百合为第Ⅱ类群;野百合和百合为第Ⅲ类群;青岛百合为第Ⅳ类群;第Ⅴ类群包括玫红百合、有斑百合和尖被百合。毛百合与卷瓣组百合亲缘关系较近,钟花组百合与卷瓣组百合存在基因交流,说明不能仅仅依靠形态学对野生百合进行分类。聚类分析结果中野百合与百合单独聚为一类,这说明是否具叶柄对野生百合的分类是一个重要的形态学特性。 ISSR分子标记适合用于百合属植物的亲缘关系分析。     

3种野生百合在关中平原的光合表现研究

目的：探究几种典型野生百合在关中平原的适应性。方法：以卷丹百合、川百合和野百合为材料,对3种野生百合在关中平原的光合特征、水分利用效率、叶绿素含量、氮含量和生长情况进行了测定。结果：卷丹百合的净光合速率显著高于川百合和野百合,分别是川百合和野百合的1.76倍和1.41倍;卷丹百合水分利用效率>野百合>川百合,分别是野百合和川百合的1.20倍和1.68倍;3个百合品种间的蒸腾速率、胞间二氧化碳浓度和气孔导度没有显著差异;卷丹百合和野百合的叶绿素含量和氮含量显著高于川百合;卷丹百合的地上生物量显著高于川百合和野百合,分别是川百合和野百合的2.62倍和2.93倍。结论：隶属函数分析表明,3个野生百合品种综合表现排序为：卷丹百合>野百合>川百合。     

百合LbKCS5和LbKCS17基因的克隆与表达分析

β 酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)是超长饱和脂肪酸链(VLCFAs)生物合成中的限速酶,该研究以百合(Lilium brownii var. viridulum Baker.)‘黄天霸’cDNA为模版, 采用RT PCR方法克隆了LbKCS5和LbKCS17基因的CDS序列,并进行序列分析,采用qRT PCR方法分析其基因表达以及胁迫诱导特征。结果表明：(1)LbKCS5和LbKCS17分别包含689和1 238 bp完全阅读框(ORF), 编码186和291个氨基酸;进化分析显示, LbKCS5与油棕KCS5、LbKCS17与莲KCS17序列相似性最高,分别为82.61%和77.62%。(2)基因表达分析结果显示, LbKCS5和LbKCS17 在百合营养器官中均有表达,二者在叶中表达量最高,在根中最少;在花器官中,LbKCS5的表达量在雄蕊中最高,LbKCS17在花药中最高,在花瓣中二者的表达量最低;在花蕾生长发育过程中,花瓣中2个基因的表达均先升高后下降,并于黄蕾期达到峰值;叶中LbKCS5表达量在黄蕾期达到最高,而LbKCS17在叶中的表达整体较低。(3)失水胁迫能提高这2个基因的转录表达,低温诱导LbKCS5表达量的增加,但却降低了LbKCS17的表达。研究表明,LbKCS5和LbKCS17在百合不同器官中均有表达,且均响应失水和低温胁迫,这为研究百合耐失水和低温胁迫以及新品种选育提供了理论支持。     

部分中国野生百合的核型分析

采用常规压片法,对野生百合6个种、20个居群的染色体进行了核型分析,结果显示:(1)中国野生百合20个居群中有1个居群的染色体数为2n=22,其他19个居群的染色体数均为2n=24。(2)20个居群中有4个居群含有B染色体,有12个居群含有数目不等的随体。(3)核型类型中有17个为"3B"型,2个为"3A"型,1个为"4B"型。(4)20个居群的核型不对称系数在77.16%～83.83%之间,最长染色体/最短染色体臂比值介于1.85～3.07之间;同一个种下面的不同变种或居群的核型变异也较大。研究表明,中国野生百合不同种或居群的遗传多样表现在染色体数量、是否含有B染色体、不同类型染色体数量以及它们在核型中的排序位置、随体的位置等方面的差异。     

石蒜与萱草远缘杂交育种研究

目的：为培育石蒜属植物新品种（系）提供参考依据。方法：以石蒜属（Lycoris）、朱顶红属（Hippeastrum）、萱草属（Hemerocallis）植物为试材,采用花粉离体培养、田间杂交、胚拯救等方法,研究了石蒜属植物在远缘杂交过程中的生殖隔离。结果：1、在花粉活力测定中,所得最适宜朱顶红花粉萌发的培养基组成为：70 g/L蔗糖+5 mg/L硼酸+0.01 g/L氯化钙+50 g/LPEG-4000;萱草组花粉的最适培养基组成为：100 g/L蔗糖+0.3 mg/L硼酸+0.4 mg/L氯化钙。2、以石蒜属植物作母本,设计8个杂交组合试验,结果表明子房膨大率随杂交组合的不同而呈现差异性,其中与四倍体萱草杂交组合所得平均子房膨大率为59.81%,高于二倍体萱草组（33.12%）。3、胚拯救初期,各组合获得胚珠0～44个,其中鹿葱×萱草‘金娃娃’组合最多,中国石蒜×萱草‘金娃娃’组合最少。胚珠膨大率随杂交组合的不同出现差异,7个杂交组合的胚珠均发生膨大,膨大率在1.79%～96.15%之间。其中鹿葱×’Custard Candy’组合胚珠膨大率较高（96.15%）,稻草石蒜×’Cust...     

百合LbCAT和LbGPX基因的克隆与表达分析

以切花百合(Lilium brownii var. viridulum)‘卡瓦纳’cDNA为模板,克隆了过氧化氢酶(LbCAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(LbGPX)基因。序列分析表明,这2个基因分别包含1 479 bp和519 bp的开放阅读框(ORF),编码492个和172个氨基酸。进化分析结果表明,LbCAT蛋白与岷江百合CAT蛋白的氨基酸序列相似性最高(99.19%),且亲缘关系最近;LbGPX蛋白与油棕GPX蛋白的氨基酸序列相似性最高(78.61%),亲缘关系最近。qRT PCR结果显示,LbCAT和LbGPX在百合根、鳞茎、叶和花中都有表达。LbCAT在叶中表达量最高,LbGPX在花中表达量最高。这2个基因在百合花蕾的生长发育过程中均有表达,且表达量逐渐增加;在PEG处理后2个基因的转录水平升高,但独角金内酯(SLs)处理却显著降低了这2个基因的转录水平;该结果为百合抗逆性机理研究以及抗逆育种奠定了基础。     

秦巴山区重楼属的核型研究

本文报道了陕西秦巴山区几种重楼属植物的核型研究结果。在秦岭(太白山)地区,北楼(Paris verticillata)具有一种核型,其核型公式为 2n=4 x=20=10m+2sm+4st+4t;狭叶重楼(P.polyphylla var.stenophylla)在一个居群内不同的个体间具有两种不同的核型,核型公式分别为2n=2x=10=5m+1sm+4t和2n=2x=10+2B=6m+4t+2B。在秦岭和巴山两地,宽叶重楼(P.polyphylla var.latifolia)和球药隔重楼(P.fargesii)分别具有两种不同的核型,前者的核型公式为2n=2x=10+3B=6m+3t+3B和2n=2x=10=5m+1sm+4t,后者的核型公式为2n=2x=10+2B=4m+2sm+4t+2B和2n=2x=10+2B=6m+4t+2B。这些材料均属2A核型,在核型结构及B染色体的有无和数目上与前人报道的结果不完全相同。     

东方百合LoABI1基因的克隆及表达分析

该研究以东方百合‘索邦’为材料,采用RT-PCR扩增方法克隆ABI1基因,对其进行了生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR检测其组织表达特性和低温处理过程及定植后的表达特征,以明确ABI1基因的功能特性,为解析百合ABA信号转导途径及其调控低温解除休眠过程的机理奠定基础。结果表明：(1)成功克隆得到东方百合LoABI1基因,其编码序列长度为1 341 bp,共编码446个氨基酸;LoABI1氨基酸序列中含有1个蛋白磷酸酶2C(PP2C)保守结构域。(2)系统进化分析显示,LoABI1蛋白与水稻PP2C家族成员OsPP2C06的同源进化关系最近,且与拟南芥AtABI1聚为一支,同属于PP2C基因家族中的A亚群。(3)亚细胞定位发现,LoABI1蛋白定位于烟草表皮细胞的细胞核和细胞质。(4)qRT-PCR荧光定量分析显示,LoABI1基因在百合茎生根、嫩茎、叶片及各花部组织中均有表达,且在幼嫩组织中表达量较高;LoAB1I基因在冷藏期间的表达量呈先升高后降低的趋势,并于冷藏期第5周达到峰值,但在定植期间持续下降且保持较低水平。(5)经4℃低温处理60 d的百合鳞茎在定植后14～28 d能...     

宜昌百合胚性愈伤组织诱导及植株再生体系的研究

采用L₉（3⁴）正交试验等方法,以野生宜昌百合（Lilium leucanthum）鳞片为外植体,分别在光照和黑暗培养条件下,研究了TDZ、NAA、2,4-D不同浓度配比对宜昌百合的胚性愈伤组织诱导效果的影响,并采用石蜡切片技术对愈伤组织进行了的组织学观察。在此基础上,探讨了NAA对体胚苗壮苗生根的影响。结果表明：在光照条件下诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS+TDZ 0.5 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.05 mg·L^-1,诱导率为62.690%;黑暗条件下诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS+TDZ 0.5 mg·L^-1+NAA 1.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,诱导率为59.423%。胚性愈伤组织黄绿色或深绿色,颗粒状明显;非胚性愈伤组织松散易碎、呈水渍状,经石蜡切片观察可观察到胚性愈伤组织细胞核大、胞质浓,且细胞内含丰富淀粉粒,细胞直径为50~80 μm。非胚性愈伤组织细胞较大,未见明显细胞核,直径约为100~180 μm。体胚苗壮苗生根的最适宜培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg·L^-1+AC 1 g·L^-1,培养60 d后,幼苗移至草炭：蛭石：珍珠岩=1：1：1基质中,成活率为90%。本试验成功建立了宜昌百合鳞片胚性愈伤组织的再生体系,为宜昌百合利用胚状体进行无性育种以及种质资源的创新奠定了基础。     

岷江流域王百合和通江百合多酚氧化酶同功酶的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术,对岷江流域王百合3个采样点的14个样品和通江百合4个采样点的4个样品的多酚氧化酶(PPO)同功酶进行了研究。结果表明,两种百合的多酚氧化酶在种间和种内均有一定差异。酶谱的聚类分析在遗传相似系数约0.5处,将两种百合18个样品分成5个类群,其中王百合的13个样品聚成了4类,样品12则与通江百合的4个样品聚成了1类;5个类群在外部形态上也呈现出相似性。     

云南泸定百合8个野生居群的染色体核型分析

用常规压片法,对云南省境内泸定百合(Lilium sargentiae Wilson)8个野生居群的染色体进行了核型分析,结果显示:(1)野生泸定百合8个居群均为二倍体(2n=2x=24),染色体基数为12,共24条染色体,无B染色体;(2)核型类型均为3A,第1、2对染色体均为具中部(m)或近中部(sm)着丝点的大形染色体,且第1对染色体上均具有随体;(3)染色体长度比为1.64～2.26,平均臂比为6.43～8.22,核型不对称系数为79.82% ～ 81.77%。研究表明,泸定百合染色体数相对稳定,染色体变异主要表现在结构变异,各个居群的染色体组成、随体数、随体位置、臂比、染色体长度比及核型不对称系数均有差异,泸定百合各居群间存在明显的核型多态性。     

胡萝卜(Daucus carota L.)胚性细胞蛋白的分离研究

应用IEF/SDS-PAGE双向电泳技术,比较了胡萝卜胚性细胞、非胚性细胞和不同发育时期的胚状体中可溶性蛋白的双向电泳图谱,结果发现在胚性细胞中特异存在的胚性细胞蛋白在不同发育时期的胚状体中也存在,但在非胚性细胞中不存在。因此,推测体细胞胚胎发生所需的一些基因在胚性细胞中就早已表达了。我们还成功地分离和测定了ECP 45-2 N-末端和中央部分氨基酸序列。与已知氨基酸序列相比,ECP 45-2部分氨基酸序列与ECP 45-1 部分氨基酸序列具有较高比例的同源性。因此, ECP 45-1和45-2可能属于同一因基家族。