不同方法生产的短棒状杆菌生物学活性比较

提高短棒状杆菌疫苗临床疗效,解决接种后局部硬结,发烧等不良副反应。在菌体菌苗的基础上,采用超声、破碎、离心、胰酶消化脱脂的方法提取细胞壁做脾激活抑瘤试验生物学检定。结果显示,纯化的短棒状杆菌细胞壁可使小鼠脾激活指数达到4.06。能抑制艾氏腹水瘤的生长,而菌体脾指数3.18。实验证实,纯化的短棒杆菌细胞壁菌苗的活性好于菌体菌苗。     

伤寒Vi多糖菌苗预防接种后三年抗体效价的持久性观察

<正> 在尼泊尔和南非德兰士瓦东部,采用随机抽样、双盲法并设对照区的试验,最近报告了纯化Vi多糖菌苗预防伤寒的效果。推测由接种菌苗而诱导的血清Vi抗体,其保护力至少可持续1～1 1/2年。 本文报告的是在马里兰、图尔斯大学和智利空军新兵的志愿者中,接种Vi菌苗刺激Vi抗体有效增长情况的研究,并对马里兰大学已接种学生随访36     

四联气雾免疫研究——Ⅳ炭疽、布氏、鼠疫、土拉活菌苗气雾免疫人群接种反应和血清学效果观察

炭疽、布氏、鼠疫、土拉活菌苗联合一次气雾吸入免疫,在报告Ⅰ、Ⅲ中经动物试验证明安全有效,在报告Ⅱ中经对公社社员进行接种反应和血清学效果观察,证明安全有效。为适应战备要求,进一步对学生、工人、战士等不同职业人群进行了接种反应和血清学效果观察,结果报告如下。     

改良炭疽菌苗开发中克隆的保护性效力和进展

<正>以往的研究致力于开发更安全、有效的人用炭疽菌苗,已经证明无论化学菌苗或活菌苗必须含有一种或几种毒素成份方可保护活芽胞攻击。我们近期的研究致力于∶畜苗炭疽杆菌Sterne株Aro_突变株,产保护性抗原(PA)的重组活菌苗,和含PA,PA片段和新佐剂配方的非活菌苗。 炭疽杆菌Aro—1和Aro—2 用四环素抗性转座子Tn916致突变,使炭疽杆菌链霉素抗体、产毒素、无荚膜株UM23—1产生两个独立的Aro~-突变株,此二株Aro~-突变株的生长需要几种芳香族复合物,命名为Aro—1、Aro~-—2,它们对小鼠和豚鼠比UM23—1株毒力弱,但用其免疫小鼠和豚鼠,对强毒炭疽杆菌芽胞致死量非肠道攻击提供明显保护。当体外无四环素培养时,两种Aro~-突变株回变到亲本表型。     

脑膜炎球菌和淋球菌的现状

<正>1881年,Pasteur使用二种有效的菌苗防止鸡霍乱和炭疽。随后的一个世纪,已经发展了大量的用于人类细菌性疾病的菌苗;而且有一些如白喉和破伤风类毒素以及百日咳菌苗特别成功。这并不否认一种更为安全的百日咳菌苗是极其需要的。总之,当我们考虑解决细菌性菌苗发展中的重大问题时,还必须承认有大量的遗留问题需解决。     

炭疽杆菌的致病因子与炭疽的防治

炭疽为一种人、兽共患急性传染病,部分国家将炭疽杆菌作为生物威胁因子进行研究和生产。该菌毒性与质粒PXOl、PXO2有关,PXOl产物包括水肿因子、保护性抗原和致死因子。PXO2是另一编码致病因子,产物荚膜抑制细胞的吞噬,有助病菌繁殖、扩散和建立感染。抗生素与抗炭疽血清联合应用,突变保护性抗原、水肿因子、致死因子联合注射,Al(OH)3佐剂PA疫苗,减毒口服菌苗,PA基因重组活菌苗均可抵抗炭疽杆菌致死性攻击。     

联合菌苗规程(吸附)—总论

<正>为了满足联合菌苗的需要,一些国家质控当局已将白喉和破伤风(DT)及白喉、破伤风和百日咳(DTP)联合菌苗的单价成份的适宜检定进行了合并,但各国之间尚未取得统一。 联合菌苗的规程应考虑到用于联合制剂的各种成份的检定和混合后的进一步检定。由于抗原之间的相互作田,以及佐剂和防腐剂对成品效力和稳定性的影响,因此在生产的每个阶段进行各项检定是很重要的。     

全细胞百日咳菌苗与含凝集原的无细胞菌苗的第二期现场试验

<正>由英国“应用微生物学及研究中心”研制的无细胞百日咳菌苗,含有凝集原2及3,百日咳毒素和丝状血凝素。188名婴儿进入一项随机的双盲试验,以联合白喉及破伤风类毒素的无细胞或全细胞菌苗按3、5及8～10个月的间隔进行接种。两组的局部反应相以,但在接种无细胞菌苗后,具有全身反应的婴儿显著地少于全细胞菌苗。对无细胞菌苗凝集原和毒素组分的抗体平均对致滴度高于全细胞菌苗。接种第三剂菌苗后一年,无细胞组抗体的持久性亦较好。     

菌苗进展

<正> 关于细菌感染,有种种的免疫机制和免疫反应。近年来,伴随现代生物化学和分子生物学的进展,对于细菌感染的研究更加深入,并且制造出新的和更有效的菌苗。 实际工作的医生面临着一种新菌苗的数量比任何时候都增长的形势,迫使他们对那些新菌苗做严格的选择,选出其中有限数量的符合流行病学需要的有效和安全的菌苗。 菌苗就它们的抗原性、免疫反应、接种反应和安全性来说,可分为性质不同的四大类:1.类毒素。2.菌体抗原(Whole—cellAntigens)。3.减毒活菌苗。4.化学组分菌苗(fractionated Vaccines)。     

纯化乙型脑炎疫苗的研制

将乙脑P3毒株接种地鼠肾细胞,制备病毒原液,经灭活、浓缩、层析纯化后收集抗原,再经除菌、配制,制备乙脑纯化疫苗。结果表明：病毒浓缩液经纯化后,杂蛋白去除率大于99％,牛血清蛋白残留量也明显降低;纯化疫苗主要指标检定均达到预期效果;效力试验结果显示当纯化原液蛋白含量稀释至15μg/ml时,疫苗效力符合要求。     

卡介苗标准化(续完)

<正> 7.菌苗不得含有其他微生物:菌苗生产整个过程要做无菌试验,通常取苏通培养物,批量菌苗和生产完毕后随机抽样的液体部份进行。最好使用硫乙醇酸盐培养基作所有的无菌试验,因它适合于需氧菌、厌氧菌及一些霉的生长。有些实验室也用琼脂、肉汤、沙氏或一些培养霉菌的培养基,一般pH为8.3。孵育温度30-32℃,至少观察7天。对浓度大的菌苗及观察有困难时,可于第5天后移种,重复培养。第二次接种也应在7天后观察判定结果。所有接种菌苗的管都不得污染。成品安瓶应进行菌苗的毒性试验,用一支安瓶内全部菌苗腹腔注射10只小鼠,10天后小鼠全部活存。其他试验:在短期内测定BCG活菌数,     

四联活菌苗气雾免疫研究——Ⅲ.炭疽、布氏、鼠疫、土拉活菌苗联合气雾免疫家兔血清抗体测定及炭疽菌苗的保护力试验

一、炭疽活菌苗单价气雾或与布氏、鼠疫、土拉联合气雾一次吸入免疫均能产生较好的免疫力,每只动物剂量3亿,攻击80个绝对致死量可保护70-100%。二、应用炭疽乳胶抗原测定免疫血清抗体水平,可见动物保护在70-100%时,其血清几何平均滴度为1：12-1：18之间。在四联气雾免疫中,不论是血清抗体的产生还是对强毒菌的攻击,都与单价结果相近,看不出有干扰现象。三、应用炭疽、鼠疫乳胶抗原,布氏、土拉菌体染色抗原测定血清抗体,结果表明上述四种菌苗免疫后六天半数以上动物产生抗体,十二天内可达100%阳转。四、用炭疽、鼠疫乳胶抗原在免疫前测定动物自然抗体,全部为阴性,免疫后血清滴度达到1：5者,玻片全血凝集即为阳性。玻政策全血凝集具有特民、敏感、简易、快速等特点,可作为炭疽、鼠疫活菌苗免疫后效果观察的辅助方法。     

关于制备第一个抗炭疽菌苗的荣誉应属于William Smith Greenfield的问题

<正>本文的目的是让人们注意这一事实,W.S.Greenfield(1878～81年工作于伦敦Brown动物治疗研究所)制备了一种有效的抗炭疽菌苗,比工作于Pouilly-fe-fort的Pasteur的实验工作早许多个月。由于当时资金短缺和反对采用活动物进行实验的压力,Greenfield被迫将自己的实验工作限制于小量动物试验,但他的实验结果却是结论性的。他指出,炭疽杆菌在液体培养基中连续传代能逐渐失去毒力,甚至对最敏感的动物小白鼠无害。给牛注射适     

炭疽杆菌保护性抗原在大肠杆菌中的表达及其纯化

利用基因重组技术获取炭疽杆菌保护性抗原(PA)。将炭疽杆菌保护性抗原编码基因pag与pET载体连接构建重组质粒,转化大肠杆菌DE3株,诱导表达炭疽杆菌保护性抗原,并经亲和层析及凝胶过滤纯化此抗原。实验成功构建了表达炭疽杆菌保护性抗原的重组菌株,纯化后PA纯度达90%,且经检测纯化产物具有天然PA的生物学活性。同时表明从大肠杆菌中纯化PA较以往从炭疽杆菌中获取PA简便易行。     

伤寒Vi多糖菌苗接种反应观察

本文报告了对我国首次成功的伤寒Ｖｉ多糖菌苗进行人体接种反应观察结果,接种对象为２０至５４岁无伤寒病史,近年无伤寒菌苗接种史的健康人,共６０名,以完全随机的方法分为两组,实验组注射３０μｇＶｉ多糖菌苗,对照组注射Ｖｉ多糖菌苗的稀释液。其结果３０名Ｖｉ多糖菌苗接种者注射后体温无中重反应发生,局部红肿仅有１例中反应。注射后对血压、心律没有影响。红细胞计数,白细胞计数均在正常范围,与接种前相比,无显著差异     

新无细胞百日咳菌苗的展望

<正>发展一种与目前使用的全菌体百日咳菌苗有根本区别的改进的新百日咳菌苗,临床试验要证明待选的菌苗必须是安全和有效的。由于我们对百日咳感染或百日咳菌苗接种后产生的保护性免疫基础尚不知道,所以,不可能用特异的抗体应答作为直接检测免疫力的指标。但是,我们不能不证明待选菌苗必须保护易感人群免得疾病。肯定的     

O139霍乱灭活全菌体菌苗免疫后人群抗体水平测定

Ｏ１３９霍乱弧菌经甲醛灭活制备而成的全菌体菌苗在广西田阳县进行临床考核。每组５０名中学生经肌肉途径接种４５亿菌和９０亿菌两种剂量,一个月后８０％接种者血清中杀弧菌抗体升高,最高可达１∶１６０,免疫后３个月开始缓慢下降,但仍有６８－７２％接种者抗体效价在１∶２０以上。高剂量组半数接种者的杀弧菌抗体可维持存在６个月。血清中凝集抗体升高明显,但３个月后下降也明显。与对照组Ｏ１菌苗相比,两种抗体水平升高与下降趋势一致。采用ＥＬＩＳＡ法测定抗毒抗体,Ｏ１３９菌苗组与Ｏ１菌苗组结果相似,均有一定上升。上述结果提示Ｏ１３９霍乱灭活菌苗可作为短效应急菌苗使用     

制造化学菌苗的方法学

<正>化学菌苗是用病原微生物的保护性抗原制备的免疫制品。保护性抗原是诱导对抗病原菌某种致病作用的特异性抗体的抗原物质。保护性抗原通常具有聚合物性质,在机能上是病原菌的致病性因子,宿主在进化中产生对此类因子的特异性免疫应答力。应强调指出并非所有的致病性因子都能视为保护性抗原,虽然后者必定是一种致病性因子。用保护性抗原制造菌苗是在特异性预防传染病方面最合理和有前途的趋向之一。与颗粒化学菌苗不同,化学菌苗不含杂质,并且容易检定和控制。     

日本百日咳免疫接种进展

<正>日本是成功地采用无细胞百日咳菌苗进行基础和加强免疫的唯一国家。那里的百日咳发病数已经明显下降。本文报道采用无细胞百日咳菌苗前后的百日咳流行病学,接种全细胞或无细胞百日咳菌苗后的临床病徵及今后日本百日咳免疫接种的方针。     

炭疽菌保护性抗原受体结合区的表达及其多克隆抗体的制备

原核表达炭疽杆菌保护性抗原受体结合区并制备该蛋白的多克隆抗体.从炭疽芽胞杆菌A16R中经PCR扩增得到了炭疽菌保护性抗原(PA)受体结合区基因,即PA的第四结构域(PA-D4),将其克隆至含有6×His编码序列的原核表达载体pET-2b(+)中,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行蛋白表达;用HiTrapTM Chelating HP柱纯化重组蛋白,Western blot进一步鉴定;以纯化后的蛋白为抗原,免疫新西兰大耳白兔制备该蛋白的多克隆抗体;用ELISA和Western blot检测抗血清.结果表明,目的蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了可溶性表达,纯化后纯度可达90%以上;制备了针对PA-D4融合蛋白的高效价抗血清,ELISA抗体滴度为1∶ 102 400;其抗体能特异性识别内源性的PA.PA-D4重组蛋白及其多克隆抗体的获得,为后续研究其功能和炭疽疫苗免疫保护机制奠定了基础.