小鼠中性粒细胞在抗体及补体参与下对日本血吸虫童虫杀伤作用的体外实验

用光镜及电镜观察小鼠中性粒细胞及中性粒细胞依赖抗体及补体对体外培养的日本血吸虫童虫 的作用。结果表明：单纯中性粒细胞很少粘附到童虫表面,仅个别十分疏松地粘附在童虫表面,被粘附 的童虫结构正常。提示：单纯中性粒细胞对童虫无明显作用,在抗体及补体协同下,中性粒细胞成群且 紧密地粘附在童虫体表,在细胞集聚的周围,虫体体被出现隧道样及火山口样变化,紧贴童虫的中性 粒细胞伸出伪足,虫体体棘紊乱,皮层变平,体被剥脱,虫体变形,说明中性粒细胞在抗体及补体协同 下,对童虫有杀伤作用、文中对杀伤机制进行了扼要的讨论。     

免疫血清及补体对体外培养日本血吸虫童虫的杀伤作用

本文报道抗体、补体、补体加抗体对机械转变日本血吸虫童虫的杀伤作用,并比较其杀伤效率。用光学显微镜及扫描电镜观察形态变化。结果显示杀伤率为补体加抗体>单纯补体>单纯抗体。除去补体血清中的B因子,杀伤率明显下降,说明补体C_3旁路途径参与杀伤童虫的作用。童虫孵育于含有补体及抗体的培养基中72h后,虫体头背部体棘零乱或消失,有些体被破损及脱皮。     

日本血吸虫肝门型童虫扫描电镜观察

1.本文报道用扫描电镜观察正常情况下日本血吸虫10日龄和15日龄肝门型童虫体被超微结构,可供血吸虫免疫学、药理学和生理学研究参考。 2.根据肝门型童虫的大小、形状、皮式等错综复杂的表现,认为童虫皮式,不仅在同龄而且在同一个体不同部位,其演变是不同步的。 3.对本型童虫与日本血吸虫成虫有关资料如皮褶、体棘和感觉乳突等方面作了比较。     

磷脂酶A2激活对中性粒细胞趋化和粘附的作用

外源性磷脂酶A2(Ⅰ型PLA2)和钙离子载体(A23187)可明显促进中性粒细胞对TNF,FMLP的趋化及同玻璃球的粘附.PLA2抑制剂二溴苯乙酮(PBPB)和PLA2抗体对PLA2诱发的趋化和粘附具有浓度相关的抑制作用,而对A23187的相同作用并无影响.提示PBPB和PLA2抗体可能通过直接同PLA2作用而抑制PMN趋化和粘附,A23187诱导的促趋化及粘附作用可能不同于PLA2.     

细胞粘附分子在中性粒细胞介导的缺氧／复氧心肌细胞损伤中的作用

目的观察缺氧/复氧对心肌细胞与中性粒细胞粘附效应的影响及细胞间粘附分子-1(intercellularadhensionmolecule-1,ICAM-1)和淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocytefunctionassociatedantigen-1,LFA-1)在中性粒细胞介导的心肌细胞损伤的作用。方法计数不同实验条件下与心肌细胞粘附的中性粒细胞;以及抗ICAM-1单抗和抗LFA-1单抗阻断后中性粒细胞粘附数的改变,检测心肌细胞乳酸脱氢酶释放量。结果中性粒细胞与缺氧/复氧心肌细胞粘附数较缺氧组和正常对照组显著增加(P＜0.01);心肌细胞释放LDH明显增高(P＜0．01),单纯缺氧组与正常对照组相比无显著差异(P＞0．05)。加入抗ICAM-1单抗和抗LFA-1单抗后,缺氧/复氧组与心肌细胞粘附的中性粒细胞数较正常对照组显著降低(P<0．01),心肌细胞释放LDH也明显下降(P＜0．01)。缺氧组与正常对照组相比则无显著差异(P＞0.05)。结论缺氧/复氧使心肌细胞与中性粒细胞粘附效应增加,心肌细胞损伤加重,ICAM-1和LFA-1参与这一过程。抗ICAM-1和抗LFA-1单抗可减轻中性粒细胞对缺氧/复氧心肌细胞的损伤。     

人中性粒细胞C_3受体YC玫瑰花结形成及其形态学观察

异物被吞噬细胞吞噬时通常需要经过细胞膜上受体的认别和粘附。大量实验证明,无论是中性粒细胞还是巨噬细胞,其细胞表面均存在有Fe受体和C_3补体受体,它们在吞噬细胞识别、结合、吞噬抗原颗粒及传递抗原信息中起着协同作用。体内外各种因子或微环境均能影响表面补体受体的活性。     

原位杂交检测斯氏肺吸虫童虫半胱氨酸蛋白酶的基因表达部位

目的 从基因水平研究半胱氨酸蛋白酶基因在斯氏肺吸虫童虫的表达,并进行虫体定位。方法 利用地高辛标记原位杂交技术检测半胱氨酸蛋白酶基因在斯氏肺吸虫童虫的表达并定位。结果 在斯氏肺吸虫童虫的肠管上皮细胞中呈强阳性着色,在虫体皮层细胞中有弱阳性着色。结论 半胱氨酸蛋白酶主要在斯氏肺吸虫童虫的肠管上皮细胞中表达,在虫体皮层细胞中也有弱表达。     

缺氧—再给氧刺激培养的脑微血管内皮细胞表达细胞间粘附分子—1

在缺氧－再给氧条件下,观察了体外分离培养的大鼠脑微血管内皮细胞表面粘附分子ＩＣＡＭ－１的表达及中性粒细胞与内皮细胞粘附作用的改变。结果表明,单纯缺氧１０ｈ不引起内皮细胞ＩＣＡＭ－１的上调,再给氧６ｈＩ－ＣＡＭ－１的表达升高（Ｐ＜０．０１）,再给氧１２ｈ表达量增加了１００％（Ｐ＜０．０１）,此时中性粒细胞与内皮细胞的粘附作用也明显增强（Ｐ＜０．０１）。缺氧前用盐酸川芎嗪（２ｍｇ／ｍｌ）预处理内皮细胞可阻断ＩＣＡＭ－１的表达（Ｐ＜０．０１）,同时也可降低ＰＭＮ与内皮细胞的粘附（Ｐ＜０．０５）。结果提示,脑微血管内皮细胞在缺氧－再给氧刺激下可自身调节Ｉ－ＣＡＭ－１的表达,为中性粒细胞与内皮细胞的粘附提供特异的结合位点。     

强壮粗体虫寄生引起的鳜肠道病理

强壮粗体虫是鳜肠道最常见寄生蠕虫。通过光镜及电镜对自然感染强壮粗体虫的鳜肠道进行了组织病理观察。强壮粗体虫的寄生引起鳜肠上皮细胞脱落、肠固有膜层结缔组织增生及白细胞向病灶处浸润,并可观察到嗜酸性粒细胞附着在与肠上皮及固有膜接触的虫体的体壁及吻部。在虫体吻部与肠固有膜层接触处依次观察到纤维细胞、成纤维细胞、嗜酸性粒细胞等,其中嗜酸性粒细胞又可分为未成熟嗜酸性粒细胞、成熟的嗜酸性粒细胞及正在脱颗粒的嗜酸性粒细胞。另外在肠壁的固有膜层观察到包裹虫体的结缔组织纤维囊,囊壁由三层结构构成,同时在鳜肠壁相同的位置观察到被宿主细胞浸润了的组织空腔,推测其为结缔组织纤维囊退化所形成       

三平正并殖吸虫发育过程中的同工酶谱

采用同工酶电泳技术对三平正并殖吸虫童虫、早期成虫和后期成虫的葡萄糖磷酸变位酶、葡萄糖磷酸异构酶和葡萄糖－６－磷酸脱氢酶的同工酶进行了研究,结果显示三平正并殖吸虫由童虫向成熟期发育过程中,葡萄糖磷酸变位酶和葡萄糖磷酸异构酶的同工酶谱趋于复杂,酶带数目后期成虫〉早期成虫〉童虫;而葡萄糖－６－磷酸脱氢酶同工酶谱则趋于简单,童虫或未成熟虫体酶带数目较成熟虫体为多。三种酶系统的同工酶排列型式显示,吸虫由童虫     

持续灌注和静态保存对中性粒细胞凋亡的影响

为研究体外循环机持续灌注、间断压力灌注、单纯低温保存犬离体肺对支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞凋亡变化以及对肺泡巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞的影响,探索最佳的离体肺保存方式,将30只Mongrel犬随机分成3组,为体外循环组、压力灌注组和低温保存组,每组10只。在保持机械通气的条件下,完整摘取双肺,3种不同方式保存离体肺,并按时间点留取支气管肺泡灌洗液标本。流式细胞仪检测犬离体肺支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞凋亡,免疫组织化学法检测犬离体肺肺泡巨噬细胞对凋亡中性粒细胞吞噬。随着犬肺离体时间的推移,各实验组离体肺支气管肺泡灌洗液中凋亡的中性粒细胞明显减少,在每个时间点上,体外循环组中性粒细胞的凋亡最多,压力灌注组中次之,低温保存组中最少。各实验组吞噬凋亡中性粒细胞的巨噬细胞随着离体时间的延长呈逐渐减少的趋势,在肺离体各时间点上,体外循环组中巨噬细胞对凋亡中性粒细胞的吞噬清除优于间断压力灌注组和单纯低温保存组。采用体外循环机持续灌注犬离体肺,能增加中性粒细胞凋亡,促使吞噬细胞吞噬凋亡的中性粒细胞,避免发生凋亡延迟,从而减轻离体肺组织的缺血再灌注损伤,具有较好的肺保护作用。     

日本血吸虫尾蚴人工方法转变的童虫超微结构的观察

本文报道日本血吸虫尾蚴经注射器推压和血清孵育两种人工方法转变的童虫与载体皮肤型童虫的透射及扫描电镜的观察结果。描述了三种童虫在转变后3小时至12小时其糖膜、外质膜、体被内包含体及腺体的超微结构的变化。     

环孢霉素A通过ROS-Cyclophilin A-ERK1/2信号途径抑制人脐静脉内皮细胞与中性粒细胞粘附

为研究环孢霉素A(cyclosporin A,CsA)对缺氧／复氧诱导人脐静脉内皮细胞(ECV-304)与中性粒细胞粘附的影响,本工作以缺氧／复氧诱导粘附为模型,采用D-N-乙酰氨基己糖苷酶比色法检测粘附率,流式细胞术检测ECV-304细胞表面粘附分子E-选择素(E-selectin)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达,Fenton反应测定活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量,Westera-blot法检测ECV-304细胞亲环素A(cyclophilin A,CyPA)、磷酸化及总细胞外信号调节激酶(ERK1／2)蛋白的表达。结果发现,ECV-304细胞经缺氧／复氧处理后,ROS释放增多,E-selectin、ICAM-1的表达上调,其表面中性粒细胞的粘附增加,CsA能显著抑制缺氧／复氧的上述作用。缺氧／复氧后,CyPA蛋白表达明显上调,ERK1/2显著活化,细胞总ERK1/2蛋白表达无明显改变。CyPA抑制剂CsA以及CyPA反义寡核苷酸均明显减轻缺氧／复氧诱导的ERK1/2激活,显著减少ECV-304细胞与中性粒细胞柑附。ERK112信号通路特异性阻断剂PD98059亦显著抑制ECV-304细胞与中性粒细胞的粘附。上述结果提示,CsA抑制缺氧气／复氧诱导的ECV-304细胞与中性粒细胞粘附,并可能通过抑制ROS-Cyclophilin A-ERK112的信号转导途径实现。     

日本血吸虫发育的组织化学研究

本文报告了日本血吸虫在小鼠体内发育过程中虫体内组织化学的定位及其所发生的改变。组织化学的研完结果表明日本血吸虫在小鼠体内生长和发育过程中童虫体内物质呈现动态的改变,主要表现为: 1.在皮肤中的早期童虫仅在体后端实质组织内含有丰富的硷性磷酸酶活力,随着虫体的移行和生长,实质组织的阳性反应减弱或消失,而在体壁出现了极强的酶活力 2.刚侵入皮肤的童虫体内贮有大量糖原,随着虫体的移行和发育,糖原显著减少,至将成熟时又再贮存糖原,且于成熟后一直保持着丰富的含量。 3.未在发育阶段的童虫体内查见脂类物质,仅在性将成熟及充分成熟的雄虫实质组织和雌虫卵黄细胞中才沉积相当量的脂类。 4.在发育过程中,两性生殖腺无明显的多糖物质,但一直含有丰富的核酸和蛋白质,至雌虫将成熟时又在卵黄细胞中出现了制造卵壳的前身物,蛋白质、酚及酚酶。 最后,对血吸虫的发育生理学进行了讨论。     

日本血吸虫童虫体表超微结构动态观察

本文报告日本血吸虫皮肤型、肺型、肝门型童虫的体被用扫描电镜观察其超微结构的变化,其目的在于寻求日本血吸虫童虫的体被在实验动物体内变化的规律,提供血吸虫病在免疫学上和预防化学药物上的研究参考。其图版Ⅰ—Ⅲ的1—4为日本血吸虫尾蚴,5—7为0.5小时龄皮肤型童虫,8—13为10日龄肺型童虫,14—22为15日龄肝门型雄性童虫。     

炎性刺激下中性粒细胞血管内皮细胞粘附的单细胞定量研究

炎性刺激下中性粒细胞血管内皮细胞粘附的单细胞定量研究周向东龙勉１（第三军医大学大坪医院,重庆６３００３８;重庆大学生物工程研究院１）中性粒细胞（ＰＭＮ）粘附于血管内皮细胞（ＶＥＣ）是炎性过程的第一步,故此两种细胞在致炎因素作用下其粘附特性的改变情况...     

日本血吸虫童虫体表超微结构动态观察

本文报告日本血吸虫皮肤型、肺型、肝门型童虫的体被用扫描电镜观察其超微结构的变化,其目的在于寻求日本血吸虫童虫的体被在实验动物体内变化的规律,提供血吸虫病在免疫学上和预防化学药物上的研究参考。其图版Ⅰ—Ⅲ的1—4为日本血吸虫尾蚴,5—7为0．5小时龄皮肤型童虫,8—13为10日龄肺型童虫,14—22为15日龄肝门型雄性童虫。     

日本血吸虫尾蚴及童虫的生理学比较

本文介绍了经0.05％中性红-氢氧化钾染色确定为活的血吸虫尾蚴和童虫的生理学比较结果。与尾蚴相比,童虫体表对PAS及Alcian蓝阳性反应消失,与抗血清接触不再产生套膜反应;对水不能耐受,在淡水中6小时内已全部死亡,而在生理盐水中仍有92.7％存活;钻腺内含物排空,童虫不能再经皮肤感染,但越过皮肤屏障若被注入皮下或腹腔则分别有45.4—46.5％及56.9—64.9％发育为成虫。     

中华下弯吸虫雷蚴至成虫阶段的发育形态观察

本文介绍了在中间宿主赤豆螺体内发育的中华下弯吸虫雷蚴和尾蚴形态，并用其尾蚴形成的囊蚴感染鸭和鸡，从试验动物体内检得不同虫龄的童虫和成虫，５日龄童虫出现龙骨样突出的中间列腹腺，９日龄虫体成熟，大小为２．５０─３．３０×０．６７５─０．９５０ｍｍ，出现发育完全的生殖腺，子宫内已含有成熟的虫卵。虫体两侧列腹腺数为９─１３个，多为１２个，中列腹腺起自内贮精囊的后部，止于卵巢后缘。     

卫氏并殖吸虫童虫回收和体外保存的实验研究

将实验感染卫氏并殖吸虫囊蚴的21只小鼠和25只大鼠的组织碎片,分别浸于37℃林格氏液中,不同时间内共检获游离的童虫3026条,其中93.6％及98.5％以上的童虫是于浸泡2及4小时检获的,提示此法浸泡2—4小时即可回收绝大多数的虫体。对检获的活虫保存在4—8℃的灭菌生理盐水,林格氏液或囊蚴保存液中,至少可活5天,个别童虫在囊蚴保存液中可活39天以上,而同液保存在20—25℃或37℃中,1—2天即有童虫死亡,5—10天全部死尽。