酵母菌麦芽糖发酵等效异位基因系的遗传分析

用球形酵母或薛氏酵母为隐性菌株,对酵母属3个种的麦芽糖发酵基因进行了遗传分析。实验结果证明:(1)啤酒酵母2.982含有2个互不连锁的麦芽糖快发酵基因MALⅠ和MALⅡ。(2)卡尔斯伯酵母2.500仅含MAL6基因。(3)在葡萄汁酵母2.346与薛氏酵母杂种的一个后代中,发现葡萄汁酵母至少含有一个MALI基因。(4)球形酵母2.1161含有malI,malⅡ和mal6基因。本文对单倍体细胞间、单倍体细胞与孢子及孢子间三种杂交方法有所改进,提高了杂交频率。     

酵母菌杂交育种——Ⅲ.酵母菌麦芽糖发酵等效异位基因系的遗传分析

用啤酒酵母及卡尔斯伯酵母研究麦芽糖发酵等效异位基因,对啤酒酵母与薛氏酵母的杂种后代进行一系列杂交,结果证明啤酒酵母含有3个等效异位基因MALA、MALB及MALC基因(暂定名,因未与标准MAL基因鉴定),而薛氏酵母不含任一MAL基因,故为隐性菌株。 在卡尔斯伯酵母与球形酵母杂交试验中,发现卡尔斯伯酵母只含有1个MAL6基因,证实了Winge等人的工作。 所有这4个麦芽糖发酵基因都是互相独立的不连锁的基因。     

酵母菌杂交育种——Ⅰ.酵母菌麦芽糖基因对麦芽糖发酵力的效应

为了研究酵母菌麦芽糖基因对麦芽糖发酵力的效应,我们从酵母菌分离出4个不连锁的麦芽糖基因。MALA、MALB和MALC是从啤酒酵母分离出的,MAL6是从卡尔斯伯酵母分离出的。用显微操作技术共组成20种不同基因组合和65个杂种。用不同基因型的二倍体杂种测定麦芽糖基因对麦芽糖发酵力的效应,结果表明: (1)根据单因子杂种产生CO_2的量可分为两类杂种,含MALA和MALB单因子杂种比含MALC和MAL6单因子杂种产生的CO_2量多。 (2)含MALA与MALB基因的纯合子与杂合子麦芽糖发酵力一样,而含其余两个基因的纯合子比杂合子产生CO_2量多。 (3)双因子杂种产生CO_2的量变化很大(2.8—4.9克),值得注意的是双因子杂种(MALB×MALA)产生的CO_2量最高,同时发现凡由MALB与另一MAL基因组成的双因子杂种表现出麦芽糖发酵力的相加效应(杂种优势),而由其他三个MAL基因组成的双因子杂种发酵力和亲株一样。 (4)多因子杂种(三因子、四因子杂种)麦芽糖发酵力和其双因子杂种相同。 这些实验结果提示在MAL基因和麦芽糖发酵力间有明显的相关性。     

麦芽糖假丝酵母菌混合糖代谢的发酵特性

葡萄糖和木糖的混合糖共代谢是木质纤维素资源高效转化利用的关键环节。利用本实验室保藏的天然木糖利用酵母菌,麦芽糖假丝酵母(Candida maltosa)Xu316,本研究对该菌代谢利用不同比例的葡萄糖、木糖发酵特性进行了系统测试,总结了麦芽糖假丝酵母混合糖代谢的一般规律。研究结果表明麦芽糖假丝酵母菌具有较高的葡萄糖利用率和木糖醇积累能力。在糖浓度低于20%时,该菌可以共同利用葡萄糖和木糖,最大乙醇产量和木糖醇产量分别为0.43g·g-1和0.58g·g-1,具有工业应用生产生物基产品的潜力。     

渤海海水中酵母菌的种类

本文报道了渤海海水中酵母菌种类的调查结果,从31个站位中,共分离鉴定了228株酵母菌,这些酵母菌分别属于8属40种:红酵母属(Rhodotorula)5个种,隐球酵母属(Cryptococcus)8个种,德巴利酵母属(Debaryomyces)2个种,毕赤酵母属(Pichia)8个种,酵母属(Saccharomyces)2个种,短梗霉属(Aureobasidium)1个种,球孢酵母属(Torulaspora)1个种,假丝酵母属(candida)13个种。40个种中,有13种是中国新记录,即:黑隐球酵母(Cryptococcus ater),大型隐球酵母(Cr.magnus),多型德巴利酵母(Debaryomyces polymorphus),克鲁维酵母(Saccharomyces kluyveri),伯顿毕赤酵母(Pichia burtonii),卡森毕赤酵母(P.carsonii),埃切毕赤酵母(P.etchellsii),季也蒙毕赤酵母(P.guilliermondii),海梅尔毕赤酵母(P.heimii),嗜土毕赤酵母(P.philogaea),奥默毕赤酵母(P.ohmeri),棘胫小蠹毕赤酵母(P.scolyti),和戴尔有孢圆酵母(Torulaspora delbrueckii),在这13种中,除埃切毕赤酵母和奥默毕赤酵母外,其余11种在海水里也是首次报道。     

海南热带雨林腐木上酵母菌物种多样性研究

用含木糖为唯一碳源(培养基X)和含葡萄糖及7.6%乙醇(培养基E)的两种富集培养基分别从采自海南热带雨林的56和57份腐木样品中分离到酵母菌67和75株.依据26S rDNA D1/D2区域序列分析并结合形态学特征对这些菌株进行了分类学研究,探讨了该地区腐木上的酵母菌物种多样性及其分布.从分离的142株酵母菌中鉴定出14个属63个种,其中疑似新种25个,占总种数的近40%,说明在热带雨林腐木中尚存在大量酵母菌新分类群有待被发现.从用培养基X和E分离的酵母菌中分别鉴定出7属37种和11属33种,优势属均为假丝酵母属Candida Berkhout和毕赤酵母属Pichia Hansen,但种类组成基本不同.用培养基x富集分离的菌株以Candida quercitrusa S.A.Meyer＆Phaff的地理分布最广,用培养基E富集分离的菌株以异常毕赤酵母Pichia anomala(Hansen)Kurtzman、酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae Meyen ex Hansen和亚膜毕赤酵母Pichiasubpelliculosa Kurtzman分布最广泛.同一样品用两种不同富集培养基分离的菌株大多数属于不同的种,在对比的23份样品中,只从2份样品中分离到了同一个种的菌株.用培养基X和E分离的菌株分别属于可利用木糖和可耐受乙醇的酵母菌,用两种培养基同时分离到的菌株属于具备利用木糖和耐受高浓度乙醇两种能力的菌株.这些酵母菌在木质纤维素物质的生物乙醇转化技术中的应用价值值得进一步研究.     

乳酸菌与酵母菌共生机理的研究进展

早期研究者从营养角度分析乳酸菌与酵母菌的共生机制,发现混合培养过程中乳酸菌与酵母菌不仅存在互补机制,代谢产物相互之间能够产生促进或抑制作用。随着Lux S/AI-2介导的群体感应现象(QS)的发现与发展,目前研究者多从群体感应角度来探讨乳酸菌与酵母菌种间的信息交流模式。本文着重从营养及信号分子这两个角度阐述目前乳酸菌与酵母菌共生机理的研究进展。     

产甘油假丝酵母TRP1基因的克隆与功能分析

产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes) WL2002-5 是我国发酵甘油生产菌种, 具有高产甘油和耐高渗透压的优良性能。本文采用遗传互补的方法从产甘油假丝酵母基因文库中克隆了TRP1基因(CgTRP1)。序列分析显示, 该基因编码区全长735 bp, 编码的磷酸核糖氨基苯甲酸同分异构酶(CgPRAI)氨基酸序列与其他酵母来源的PRAI蛋白同源性在32.9%~49.2%之间。功能互补实验显示, CgTRP1基因在高拷贝情况下可以互补酿酒酵母trp1基因功能但在低拷贝情况下只能部分互补酿酒酵母trp1基因功能, 是一条功能明确、结构完整的酵母新基因。在CgTRP1 基因下游发现另一蛋白编码基因, 编码的氨基酸序列与酵母无机焦磷酸酶有很高的相似性。     

酵母菌基因工程载体——pCN系杂种质粒的构建及其特性的研究

pCN系质粒是利用DNA重组技术,以YRp7和pAT153为原始质粒所构建的酵母菌基因工程载体。pCN系质粒由酵母菌TRPL基因的1．4 kb DNA片段和完整的pAT 153分子组成。根据pAT153质粒中所插入的TRPl DNA片段的方向性,pCN质粒有两种不同的构型。在性质上,pCN系质粒保留了 YRp7高转化能力和pAT153高拷贝水平,同时它在酵母受体中的稳定性比’YPp7明显提高。pCN质粒中尤以pCN60可作为酵母基因工程的载体。     

云南抚仙湖产类胡萝卜素酵母菌的资源调查

【目的】对分离自云南抚仙湖湖水的379株酵母菌进行产类胡萝卜素的筛选,以期获得具有开发应用价值的产类胡萝卜素酵母菌。【方法】采用酸热法提取类胡萝卜素,紫外分光光度计测定类胡萝卜素含量,SPSS软件分析产类胡萝卜素酵母的分布特征。【结果】318株酵母菌(占供试菌株的83.91%)具有产类胡萝卜素的能力,大多数菌株类胡萝卜素产量在10-300μg/g之间,最高达590.83μg/g。产类胡萝卜素酵母集中分布于红冬孢酵母属(Rhodosporidium)和红酵母属(Rhodotorula);担子菌酵母产类胡萝卜素的能力高于子囊菌酵母;筛选到9株产类胡萝卜素活性较强的菌株:双倒卵形红冬孢酵母(Rhodosporidium diobovatum)3株、沼泽生红冬孢酵母(Rhodosporidium paludigenum)2株、粘红酵母(Rhodotorula glutinis)、禾本红酵母(Rhodotorula graminis)、瑞纳锁掷孢酵母(Sporidiobolus ruineniae)及Cystofilobasidium macerans各1株。【结论】高原湖泊抚仙湖生存着大量产类胡萝卜素的酵母菌,"红色酵母"(Red yeasts)具有较强的产类胡萝卜素的能力,红冬孢酵母属(Rhodosporidium)和红酵母属(Rhodotorula)是抚仙湖产类胡萝卜素酵母菌的主要类群。     

工业酵母菌的遗传修饰研究进展及其应用前景

简要概述工业酵母菌的遗传修饰研究进展,主要介绍适用于工业酵母菌遗传修饰的转化系统;敲除工业酵母基因工程菌细胞内不需要的基因的反选择技术;外源基因在工业酵母菌中克隆和表达的非自身克隆技术;工业酵母菌自身已有基因的克隆和表达的自身克隆技术等。此外,对遗传修饰的工业酵母菌的工业化应用前景作了简要展望 。     

芝麻香型白酒大曲中酵母菌的分离与鉴定

为了开发利用白酒大曲中的酵母菌资源,采用稀释涂布平板法,从芝麻香型白酒大曲中分离得到15株酵母菌株。利用26S rRNA基因序列分析技术对其进行分类鉴定。结果表明,其中6株酵母菌为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）,6株为库德里阿兹威氏毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）,3株为热带假丝酵母（Candida tropicalis）;并对代表菌株Y1、Y2及Y4进行了形态观察;最后通过随机扩增多态性DNA标记（random amplified polymorphic DNA, RAPD）对分离得到的酵母菌进行分型,表明6株酿酒酵母分属于5个株型,6株库德里阿兹威氏毕赤酵母分属于5个株型,3株热带假丝酵母分属于3个株型。     

基于可培养法分析新疆葡萄与葡萄酒相关酵母菌菌群结构

从葡萄、葡萄发酵物、土壤及酒厂设备分离到3 991株新疆本土葡萄酒酵母菌,并通过Wallerstein Laboratory(WL)营养琼脂培养形态分类、代表菌株26S rDNA Dl/D2和5.8S-ITS区域序列鉴定,对新疆葡萄酒酵母菌株进行系统分类和多样性分析,得到22个WL培养类型,7个属13个种。伊犁和于田地区酵母菌种类最多,达10个种;叶城地区和中信国安、乡都酒业、野果林(伊犁)酒厂酵母菌种类最少,仅有1种。新疆优势种为葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。陆生毕赤酵母(Pichia terricola)、Metschnikowia aff、核果梅奇酵母(Metschnikwoia fructicola)、韩国梅奇酵母(Metschnikwoia koreensis)在新疆地区首次分离鉴定到。对新疆葡萄酒相关的酵母菌群落结构进行全面分析,结果显示新疆与葡萄酒相关的酵母菌丰富多样。为新疆葡萄酒酵母资源的开发利用和葡萄酒的质量控制等奠定了菌种基础。     

在四个酵母菌株中发现自由浮动的线形质粒

在四个酵母菌株中发现了自由浮动的线形质粒,这类质粒可能使更多的酵母具有工业用途。美国农业部的北部地区研究中心(皮奥里亚,伊利诺州)已经发现了三株复膜孢酵母和携带线形质粒的酵母。这一发现具有重大意义,因为多数微生物中的质粒,包括供基因转移用的载体的环状质粒,都被膜包着(象线粒体或细胞核的膜结构)。然而,酵母中的线形质粒自由地漂浮在细胞质中,这使它容易将 DNA 移动或插入到细胞中。其它研究者还使线形     

云南高原湖泊杞麓湖冬季可培养酵母菌多样性分析

【目的】探究云南杞麓湖酵母菌群落结构及其与环境因子的相互关系。【方法】采用原位培养方法对杞麓湖14个水样进行酵母菌分离,应用26S r DNA D1/D2区域序列分析,并结合形态及生理生化指标将对分离获得的酵母菌进行鉴定,运用软件bio-dap和Canoco分析酵母菌类群的丰富度及其与环境因子间的相互关系。【结果】从杞麓湖中分离得到321株酵母菌,鉴定为14个属27个种和1个潜在的新类群。Rhodosporidium kratochvilovae和出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)是优势种,分别为总菌株数的29.6%和16.8%。水体总磷含量是影响产色素红冬孢酵母属(Rhodosporidium)分布的重要环境因子,而p H为隐球酵母属(Cryptococcus)分布的一个重要选择条件。【结论】杞麓湖酵母菌具有较为丰富的群落多样性。     

云南5个地区戟叶酸模花中酵母菌和类酵母的多样性

[目的]研究云南5个地区(晋宁、祥云、程海、泸沽湖、洱海)的戟叶酸模(Rumex hastatus)花中的酵母菌和类酵母.[方法]采用涂布平板法对5个地区的戟叶酸模花中酵母菌和类酵母进行分离,通过26S rDNA Dl/D2区域序列分析并结合形态观察对分离获得的酵母菌和类酵母进行鉴定;采用胞外酶定性筛选培养基进行产酶筛选;用苏丹黑B染色法筛选产油脂菌株.[结果]从戟叶酸模花中分离得到82株酵母菌和99株类酵母;82株酵母菌鉴定为6个属16个种和1个潜在新种,99株类酵母鉴定为短梗霉属(Aureobasidium)的普鲁兰类酵母(A.pullulans)及3个变种;戟叶酸模花中的优势属是类酵母短梗霉属,其次为红酵母属(Rhodotorula)和隐球酵母属(Cryptococcus);筛选到134株具有产胞外酶活性和83株产油脂的酵母菌和类酵母.[结论]研究结果显示5个地区的戟叶酸模花中酵母菌和类酵母种类多样性较为丰富,并具有产淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、脂肪酶和油脂的特点,有潜在的应用前景.     

重组酵母菌的高密度发酵表达

酵母作为一类外源基因的表达系统具有很多优点 ,有许多外源基因在工程酵母菌表达生产重要的外源蛋白[1] 。从生理学角度看 ,作为外源基因的受体细胞 ,酵母的生理和遗传特性影响着外源基因的表达。同时 ,外源基因的表达 ,特别是高表达的外源蛋白对宿主细胞有抑制作用甚至会导致细胞中毒或死亡。再加上工程菌的培养过程中的不稳定性问题的存在 ,因此 ,菌体细胞的高浓度和目的基因的高表达是一对矛盾 ,它们互相制约 ,构成生物工程研究的重要工作之一。1 .工程酵母菌的高密度发酵酵母的高密度发酵是一个相对概念 ,一般指发酵液中酵母浓度在 30 …     

原生质体融合构建耐温酵母菌株#

耐温的克鲁维酵母(Y₀₃₄)与产酒率高的酿酒酵母(A₀₀₁。)进行属间原生质体融合构建耐温酵母菌株,经DTT分段预处理获得大量具再生活性原生质体对融合株AY₀₂₃等进行了乙醇脱氢酶同工酶,麦芽糖同化,遗传稳定性及高温发酵分析,融合株AY₀₂₃表达了双亲遗传特性。在45℃高温发酵条件,乙醇产率高达7.4％,是目前已见文献报道的产酒率最高的耐温(45℃)酵母菌株。     

海南热带雨林腐木上两个无性型子囊菌酵母新种

用含木糖为唯一碳源和含葡萄糖及7.6%乙醇的两种富集培养基对采自海南热带雨林腐木样品中的酵母菌进行了分离培养。对分离出的酵母菌株进行的分子分类学研究表明,其中两株酵母菌X2WZ07-4和G2WZ06-1代表两个无性型子囊菌酵母新种。大亚基(26S)rRNA基因D1/D2域序列分析显示,与X2WZ07-4和G2WZ06-1亲缘关系最近的已知种分别为Candida cylindracea和C.llanquihuensis。在D1/D2域,X2WZ07-4与C.cylindracea模式菌株的碱基序列差异为2.5%;G2WZ06-1与C.llanquihuensis模式菌株的序列差异为3.9%,均远大于酵母菌种间在此区域的序列差异(～1%)。这两个新种分别被命名为拟柱形假丝酵母Candida pseudocylindracea sp.nov.(模式菌株:X2WZ07-4T=AS2.3788T=CBS10854T)和五指山假丝酵母Candida wuzhishanensis sp.nov.(模式菌株:G2WZ06-1T=AS2.3784T=CBS10850T)。     

云南程海湖冬季酵母菌多样性及胞外酶活性研究

采用过滤涂皿的方法对云南程海湖冬季湖水样品中的酵母菌进行分离,通过26S r DNA D1/D2区域序列分析并结合形态观察和生理生化测试对分离获得的菌株进行鉴定,同时采用胞外酶定性筛选培养基进行产酶活性筛选,分析冬季程海湖酵母菌的多样性及胞外酶活性。结果从程海湖中分离获得171株酵母菌,鉴定为14个属22个种和2个潜在的新分类单元;优势属是红冬孢酵母属Rhodosporidium、红酵母属Rhodotorula和隐球酵母属Cryptococcus;优势种是红冬孢酵母Rhodosporidium kratochvilovae和斯鲁菲亚红酵母Rhodotorula slooffiae;湖北半部的样点CH2的多样性指数(H′=1.5945)和丰富度指数(R=2.7576)均最高,均匀度指数较高的是湖北部的样点CH1(J=0.8531);样点之间种群差异大,相似性低。大多数酵母菌株具有产1种以上的胞外酶。