抗体生产纯化技术（Review）

自1997年FDA批准第一个治疗淋巴癌的嵌合单抗药物Rituxan, Anti-CD-20抗体上市,并进入56个国家,至2007年,FDA已批准了20多种治疗性单抗药物,约一半用于治疗癌症,七个已成为年销售额超十亿美元的"炸弹药物"。而随着高细胞密度培养及表达技术：大规模培养的表达水平从1g/L到5g/L;细胞的培养规模越来越大：12000L到15000L和在建的20000L细胞培养规模,同时多个细胞培养罐并行运行;这些都极大的推动了大规模蛋白质纯化技术的发展：从批产几公斤－年产几十公斤抗体,发展到批生产几十公斤－年产上十吨抗体的规模。同时,新型凝胶技术、更大规模的纯化生产系统技术和膜过滤技术的发展,使经典的三步层析技术能够缩短到两步层析技术生产抗体,进一步节约了投资,提高了产能和产率。本文将详细介绍最新发展的两步层析主导的一条完整抗体生产纯化解决方案。     

中空纤维膜过滤技术在单抗生产中的应用

作为生物药物的”重磅炸弹”,大规模动物细胞培养生产治疗用单克隆抗体（以下简称单抗）已成为生物制药发展的主导。Mabselect SuRe亲和层析结合Capto Adhere复合离子交换两步层析工艺已经成为抗体生产工艺的亮点,而中空纤维膜过滤技术是一种快速高效的膜分离技术,具有容尘量高、温和低剪切力、操作灵活、成本低、易于放大等优点．因此广泛应用于重组蛋白、疫苗等生物制药领域。通过将中空纤维膜过滤技术和下游两步层析工艺相结合,可以成功的迎接几十甚至上百公斤单抗生产所面临的挑战。     

利用BIOSTAT~ STR一次性生物反应器实现大规模灌注培养与高密度分批补料培养

<正>灌注培养是一种众所周知的药物生产方法,多年来已被广泛的应用于许多生物技术药物的生产工艺中。最近,灌注培养还被用于高细胞密度的种子培养,以缩减放大到生产规模的种子培养步骤。随着细胞培养技术的不断改进,高密度补料分批培养与灌注培养的结合能够实现更高的细胞密度与产品表达浓度,因此,只需更小体积的生物反应器,便可生产治疗性蛋白质或抗体。细胞培养工艺开发能力越来越强,使用一次性反应器也将变得更具有优势,BIOSTATSRT一次性生物反应器能够提供最大可达2000L的生产规模,可以达到过去十至二十倍甚至更大的生物反应器才能实现的商业化生产规模。     

动物细胞大规模培养生产蛋白的工艺选择

目前全世界蛋白治疗药物的迅速增长和市场需求已远远超过了现有生产能力。动物细胞规模化生产重组蛋白和抗体的工艺选择可考虑使用当前较成熟的工业化支持技术平台,以缩短产品工艺研发的时间,加快工业化进程。当前被FDA批准的生物技术产品以及公开发表的生产工艺占有主流优势的是搅拌式生物反应器悬浮培养,工艺设计是流加或灌流培养。其大规模细胞培养生产所面临的挑战是获得最大生产力的同时注重维持产品的质量;去除所有培养环境中外源因子的污染,更为精确有效的工艺控制手段,规模化培养中氧气的限定与溶解CO2浓度累积的控制等。     

生物制药中的灌注层析技术

灌注层析技术替代传统层析技术为世界著名制药工业及科研机构制造厂更多成功的机会。我国生物活性物质与天然药物的研究开发需要借助强有力的快速分离纯化手段才能取是成功。本文介绍灌注层析技术的特点;灌流方式下的免疫检测技术;灌注层析纯化方法开发与优化,族大;在线生产监测;产品分析与定量;诊断试剂的自动制备;抗体片段的纯化;ＢｉｏＣＡＤ系列生物工作站的技术特点。     

生物制药中的灌注层析技术

灌注层析技术替代传统层析技术为世界著名制药工业及科研机构创造了更多成功点。机会。我国生物活性物质与天然药物的研究开发需要借助强有力的快速分离纯化手段才能取得成功。本文介绍灌注层析技术的特点;灌流方式下的免疫检测技术;灌注层析纯化方法开发与优化,放大;在线生产监测;产品分析与定量;诊断试剂的自动化制备;抗体片段的纯化;ＢｉｏＣＡＤ系列生物工作站的技术特点。     

用于重组抗体生产的细胞大规模培养技术

近年来,用于单抗药物生产的动物细胞大规模培养技术发展迅速.此领域的技术进展集中在个性化培养基开发,工艺条件优化等方面.本文总结了用于提高重组抗体表达水平的常用方法,以及细胞培养工艺对抗体药物“关键质量属性”(聚体、降解、糖基化修饰、电荷变异等)的诸多影响.此外,细胞培养工艺在产业化过程面临着工艺放大与技术转移,定性研究与工艺验证等实际问题.未来大规模细胞培养工艺的开发,将进一步借助动物细胞的组学研究成果和新兴的“过程分析技术”.     

国产生物反应器大规模高密度培养Vero细胞

本文考察了在2．5LcelliGen细胞培养器和国产20LcellCul-20细胞培养生物反应器中采用微载体技术培养细胞的情况。分析了用cellcul-20细胞培养生物反应器进行大规模培养时细胞的生长、代谢规律,研究了从2．5L扩大到20L规模的细胞转移条件。采用微载体球间直接转移技术。提高了接种效率,减少了接种步骤和污染机会。当国产GT一25微载体用量为5g／L,采用连续灌注工艺培养vero细胞,在国产20L cellCul—20细胞培养生物反应器中,连续培养5天,细胞数增加7倍,细胞密度超过1．0×10⁷ cells／m】。本文开发的细胞培养工艺,对于中试及工业规模的动物细胞大量培养具有一定的指导意义。     

抗体药物开启生物医药发展新时代

<正>治疗性抗体药物在生物医药中的研究发展是最快的。自1986年美国FDA批准第一个治疗性抗体上市以来,抗体药物的研发得到快速发展。迄今已有35个抗体药物批准上市,目前处在临床研究的抗体药物350多个,处在Ⅲ期临床研究的抗体药物约有30个,用于癌症、炎症或免疫疾病、高胆固醇、骨质     

治疗性单抗与抗体产业关键技术

抗体技术历经动物血清多克隆抗体、杂交瘤单克隆抗体,以及重组基因工程抗体等不同发展时期,尤其是后者使得治疗性抗体的生产进入产业化阶段.在已上市的抗体药物中,人源化抗体、全人源抗体由于免疫原性小,临床药效好,目前已经成为抗体药物的主流.随着抗体药物在癌症、免疫调节等治疗领域的广泛应用.抗体产业已经成为国际制药行业的主要组成部分.我国的抗体产业由于品种不足、技术落后,尚处于起步阶段,其行业发展受限于诸多技术瓶颈,如:工程细胞系构建与筛选、大规模培养工艺开发,单抗的纯化与质控等,上述产业化关键技术的突破可加快我国抗体产业的发展进程.