棉花凝集素的纯化及性质研究

抗枯萎、抗黄萎病的棉种的浸取液,经硫酸铵分级,纤维素柱、亲和层析后,再经分子筛过滤,获得在ＰＡＧＥ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ或ＨＰＬＣ柱上均呈现单一蛋白带的棉花凝集素。该凝集素只凝集兔红细胞,对人Ａ、Ｂ或Ｏ型血细胞均不凝集,其凝集活性可被半乳糖或猪甲状腺球蛋白等所抑制。棉花凝集素在６５℃加热５ ｍ ｉｎ,即丧失全部凝集活性;它的凝集活性强烈地依赖于Ｃａ２＋ ;Ｍｎ２＋ 对活性也有促进作用,Ｍｇ２＋ 则无作用。经凝胶过滤或ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定,凝集素的分子量为６３０００,Ｎ－末端氨基酸为Ｖａｌ。凝集素含有１．５％ 的中性糖,是一种促有丝分裂原,细胞转化率为５０．３％ 。     

外源褪黑素调控棉花枯萎病抗性研究

为探究外源褪黑素对棉花抗枯萎病的影响及作用机理,以海岛棉新海14号为材料,于叶面喷施不同浓度褪黑素（0、10、25、50、75、100 μmol/L）后接种棉花枯萎病菌,对枯萎病菌侵染后棉花幼苗进行抗病性鉴定、抗病相关酶活性及基因表达分析。结果表明,外源褪黑素对棉花枯萎病菌的生长无抑制作用,10-100 μmol/L褪黑素均能在一定程度上提高棉花对枯萎病的抗性,其中50 μmol/L褪黑素处理效果最好。与对照相比,50 μmol/L褪黑素预处理能有效减少接菌后棉花叶片中的过氧化氢（H₂O₂）含量和超氧阴离子（O₂^·-）的产生速率,增强过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）、几丁质酶（CHT）、β-1,3葡聚糖酶（GLU）、多酚氧化酶（PPO）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性,并显著提高木质素代谢途径相关基因（GbPAL、Gb4CL和GbCAD）和类黄酮代谢途径关键基因（GbCHI、GbDFR和GbTT7）的表达量。表明50 μmol/L 的褪黑素处理能提高接菌后棉花抗氧化能力,增强防御酶活性,调控木质素、类黄酮代谢途径相关基因的表达,从而提高棉花对枯萎病的抗性。     

He—Ne激光与云芝多糖配合使用对小鼠免疫功能的影响

Ｈｅ－Ｎｅ激光与云芝多糖单独使用或配合使用均可显著提高小鼠植物血球凝集素（ＰＨＡ）刺激的淋巴细胞转化率、血素抗绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）血凝抗体效价、脾细胞产生溶血抗体能力、自然杀伤（ＮＫ）细胞及巨噬细胞（ＭＰ,Ｍｅｇａ,Ｐｈｇｏｃｙｔｅ）抗瘤活性,且配合使用好于单独使用,说明Ｈｅ－Ｎｅ激光与云芝多糖具有协同作用。     

建国以来我国黄淮棉区棉花品种的遗传改良：Ⅲ.农艺性状,抗病性？…

以不同历史时期的１０个代表性棉花品种的２年５点实验和１９７３－１９９６年棉花品种区域实验的历史资料,研究我国黄淮棉区自５０年代以来棉花品种农艺性状、抗病性和稳定性的遗传改良效果。结果表明：建国４０多年来,该棉区棉花早熟性和抗病性育种取得显著进展。在品种的产量和品质提高的同时,品种的生育期缩短了３－５天,霜前花率提高了近７个百分点。棉花品种的抗病性也显著提高。抗枯萎病问题已基本解决,抗黄萎病问题存在     

苦参凝集素蛋白基因的分离克隆

自苦参（Sophora flavescens Ait.)块根中分离得到一种32kD的凝集素蛋白（SFL）,其对兔血及人的4种血型都具有很强的凝集活性,对棉花枯萎病菌（Fusarium vasinfectum Atk.),小麦赤霉病菌（Gibberella saubinetii(Mont)Sacc.)和水稻稻瘟病菌（Pricularia oryzae Cav.)的生长有明显抑制作用,依此凝集素蛋白N端部分氨基酸序列合成引物,通过5',3'-RACE技术,从苦参块根总RNA中克隆到了编码这一凝集素蛋白的全长cDNA序列（已注册GenBank,AF285121) ,根据全长cDAN序列这一cDNA序列编码一个284个氨基酸的前体蛋白,而分离得到的凝集素蛋白为一个254个氨基酸残基的成熟蛋白,在其第182位点含一个N糖基化位点N－L－S。     

红花菜豆凝集素糖—结合肽段的分离

红花菜豆凝集素糖－结合肽段的分离施炜星宋金芳孙册（中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）关键词红花菜豆凝集素;糖－结合肽段;分离收稿日期：１９９６－０６－０８;接收日期：１９９６－０９－０３。凝集素的生物学作用和功能与其糖－结合专一性密切相...     

乳腺癌ConA、LCA、PSA免疫组化研究

运用ＡＢＣ法研究５０例乳腺癌三种凝集素受体（Ｌｅｃｔｉｎ－Ｒ）的表达,并以乳腺纤维瘤和乳腺小叶增生症各１０例作为对照。结果表明：该三种凝集素受体在乳腺良、恶性病变中的表达率无显著性差异。ＣＯｎＡ－Ｒ在乳腺癌以胞浆型定位为主,在纤维腺瘤则以胞膜型多见（Ｐ＜０．０５）。ＬＣＡ－Ｒ和ＰＳＡ－Ｒ在乳腺三种病变中均以胞浆型为主。ＣｏｎＡ－Ｒ与乳腺癌分化程度具良好的相关性;ＬＣＡ－Ｒ与乳腺癌瘤体大小有关。该三种凝集素受体与ＥＲ、ＰＲ及ＣＥＡ的表达未显示密切的关联。     

棉铃虫为害诱导棉花内物质含量变化

由于昆虫为害的影响,植物往往能产生有利于自身而不利于害虫的变化,从而避免或减轻虫害。如在甘薯组织中,正常情况下几乎不存在多酚化合物,在受到虫害后12h就开始合成[1],大白菜被盲蝽Lygusclisponsi取食后,在取食点周围组织内酚类化合物含量增加,并且过氧化物酶活性也增强[2]。我们在室内对棉花受二代棉铃虫Helicoverpaarmigera（Huhuer）的为害进行模拟实验,研究了棉花受害后叶内次生物质和营养物质的含量变化。1材料与方法棉花品种（系）：表现为高抗的有590s;中抗的有HG－BR－8、291、中12;感虫的有Pay－784、中无383－12…     

人女性生殖器官和胎盘组织的凝集素标记研究

应用ＡＢＣ法和ＰＡＰ法系统研究了９种凝集素对子宫、卵巢、输卵管、乳腺和胎盘绒毛等５种组织的标记状况,发现大豆素（ＳＢＡ）只与子宫内膜被覆上皮而不与子宫内膜腺体上皮结合;蓖麻素－１（ＲＣＡ－１）则恰相反。胎盘绒毛合体细胞滋养层游离缘呈线状麦胚素（ＷＧＡ）结合阳性,而细胞滋养层麦胚素（ＷＧＡ）标记可为环细胞膜阳性。当子宫内膜由增生期向分泌期、妊娠期和乳腺由静止期向泌乳期进展时,麦胚素（ＷＧＡ）、双花扁豆素（ＤＢＡ）、花生素（ＰＮＡ）等凝集素在腺细胞游离缘的结合明显增强。此外,麦胚素（ＷＧＡ）、花生素（ＰＮＡ）、蓖麻素－１（ＲＣＡ－１）等在子宫内膜、乳腺、输卵管、卵巢等组织的被覆上皮和腺上皮细胞都有较高的结合。间质中纤维组织、血管内皮细胞和巨噬细胞等也与麦胚素（ＷＧＡ）、花生素（ＰＮＡ）、荆豆素－１（ＵＥＡ－１）及刀豆素（ＣｏｎＡ）等呈阳性结合。作者探讨了上述女性生殖器官和胎盘组织的凝集素标记特点、相互关系、共同规律及可能具有的生理生化意义。     

坛紫菜凝集素的糖结合专一性和细胞凝集作用

坛紫菜的磷酸盐缓冲液浸取液,经硫酸铵沉淀和DEAE－Sepharose,SephadexG-100二步层析纯化,获得纯化的坛紫菜凝集素（PHL）。该凝集素能与3种单糖（阿拉伯糖,半乳糖,木糖）及麦芽糖专一性结合,其中与麦芽糖结合最强。细胞凝集实验结果显示,PHL能凝集兔,绵羊及鸡红细胞而不能凝集鸭,鸽子及人血红细胞,PHL还能凝集海洋微藻－绿色巴夫藻和淡水微藻－蛋白核小球藻,它们的凝集活性与藻细胞密度有关。不同状态的细菌和酵母细胞对PHL反应不同,表明随着细胞状态的改变,细胞表面的凝集素受体也随之发生变化。     

四个烙铁头蛇毒凝集素样蛋白基因的克隆与序列分析

从烙铁头蛇（Trimeresurus mucrosquamatus)的毒腺中提取mRNA,利用RT－PCR进行体外扩增,获得凝集素样蛋白基因,克隆至PMD18－T载体中,筛选出4种凝集素样蛋白基因（命名为TML-1、MTL－2、TML－3和TML－4）。由基因序列推导出的氨基酸序列表明：TML－1,2,3,4序列中均有CRD结构。序列同源性比较和Cys位点分析推测：TML－1和TML－2可能分别是类似于flavocetin-A的蛇毒凝集素样蛋白的α亚基和β亚基;TML－3可能类似于GPIb-bp的蛇毒凝集素样蛋白的α亚基,TML－4则可能是类似于Ⅸ/Ⅹ-bp的蛇毒凝集素样蛋白的β亚基。     

棉花维管组织内生细菌分析之一——不同抗性品种含菌动态与土质和生育期的关系

于１９９３年棉花生长季节,对种植在偏砂性和偏粘性土壤中的不同抗枯萎病品种中棉－１２、８６－１、川７３－２７和感病品种邯郸－１４进行了内生细菌分析。试验分别在五叶期、现蕾期和开花结铃后期取样,在ＴＳＡ培养基上分离维管组织内生细菌,共获得细菌分离物５３００余株。细菌数量经ＳＡＳ软件进行统计分析,结果表明,不同品种、不同土质及不同生育期的含菌量变化,在ａ＝０．０５水平上差异显著。四个品种在偏砂性土中的内生细菌含量均高于偏粘性土壤中的棉株,三个抗枯萎病品种的含菌量也均高于感病品种邯郸－１４,其中以８６－１含菌量最高,其次为中棉－１２,再次为川７３－２７。不同生育期的菌量变化是五叶期最低,现蕾期最高,开花结铃后期又下降,但仍高于五叶     

小葱凝集素的纯化和部分性质研究

小葱凝集素的纯化和部分性质研究林玉满（福建师范大学实验中心生化室,福州３５０００７）凝集素具有众多的生物学性质~［１－４］。自从发现凝集素至今已一百多年,人们已从植物种子或根、茎、叶、韧皮纯化的凝集素有百数十种~［３,５］,但对蔬菜凝集素的研究不多,有...     

苦楝内生真菌抗植物病原真菌活性菌株的筛选

实验对苦楝植株中内生真菌的抗植物病原真菌活性进行了研究。从苦楝（Melia azedarach）的根、茎、叶、花、果实中分离得到290株内生真菌,分别测定各菌株的抗菌活性效果,并对筛选出的9株菌株发酵液进行抗菌活性测定。发现L071027Z3、SX071116Z1-2和XY070430J3菌株发酵液对玉米小斑病,小麦赤霉病,棉花枯萎病,苹果炭疽病的抑制率较高。再对这3株供试菌在发酵液粗提物质量浓度为50 mg/mL时,进行进一步抑菌实验,3个菌株的发酵液粗提物对玉米小斑病,小麦赤霉病,棉花枯萎病,苹果炭疽病具有不同程度的抑制菌丝生长活性作用且有机相提取物的抑制作用较高,其中L071027Z3的抑菌圈与其它菌株差异极显著。     

海岛棉GbGSTU7的克隆及其对枯萎病菌侵染的应答

该研究基于前期转录组测序数据分析,采用RT-PCR方法从海岛棉06-146中克隆得到参与海岛棉抗枯萎病调控的候选基因谷胱甘肽转移酶基因(GbGSTU7),对其序列进行生物信息学分析,并对GbGSTU7基因在病菌侵染下不同组织的表达特性进行分析,以探讨GbGSTU7基因与棉花抗枯萎病的关系。结果显示:(1)GbGSTU7基因CDS全长711 bp,编码236个氨基酸,属于GST家族tau类,二级结构由5个β折叠和9个α螺旋构成,三级结构呈球状。(2)枯萎病菌侵染后,GbGSTU7基因表达量在抗枯萎病品种06-146的根中呈下降趋势,48 h达到最低,茎和叶中呈先升高再降低的趋势,在茎中12 h达到最高,在叶中24 h达到最高;在感枯萎病品种‘新海14’的根中呈先下降再上升趋势,且在8 h达到最低,在茎和叶中的趋势无明显规律,但在茎中8 h达到最高,在叶中4 h达到最高;且两个材料中均表现为GbGSTU7基因在根中的表达量最低时,茎的表达量升到最高。研究表明,GbGSTU7基因在海岛棉抗、感病材料的各组织中均可响应枯萎病菌的诱导表达,且均具有明显的组织特异性;推测GbGSTU7基因可能与棉花抗枯萎病有着密切的关系,可能在棉花抵御病菌侵染的过程中发挥重要的调控作用。     

连作对棉花抗枯萎病生理生化特性的影响

连作障碍引起棉花的产量和品质下降,严重制约着我国棉花产业的可持续发展。枯萎病作为典型的土传真菌病害,一直是困扰我国棉花生产的两大病害之一。研究采用室内盆栽试验,通过接种棉花枯萎病菌,研究不同连作年限(0、5、15a)土壤对棉花生长状况及体内超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、过氧化物酶(POD)活性、可溶性蛋白和丙二醛(MDA)含量的影响,进而探讨其对棉花抗枯萎病性能的影响。研究结果表明:与非连作土壤相比,连作土壤显著影响棉花的生长,导致棉花幼苗鲜重、主根长、株高降低,SOD和CAT活性降低,可溶性蛋白和丙二醛(MDA)含量升高,抗病品种中棉38的POD活性无显著变化,但耐病品种南农10号的POD活性明显提高。说明连作降低了棉花对枯萎病菌的抗氧化酶反应,加重了棉花的膜质过氧化程度,进而降低了棉花对枯萎病的抗性。     

抗倒胺（Inabenfide）对棉花幼苗生长的影响

抗倒胺（Ｉｎａｂｅｎｆｉｄｅ）对棉花幼苗生长的影响沈成国金留福（山东农业大学农学系,泰安２７１０１８）ＥＦＦＥＣＴＳＯＦＩＮＡＢＥＮＦＩＤＥＯＮＧＲＯＷＴＨＯＦＣＯＴＴＯＮＳＥＥＤＬＩＮＧＳＳｈｅｎＣｈｅｎｇ－ｇｕｏＪｉｎＬｉｕ－ｆｕ（Ｄｅｐａｒｔ...     

甘薯凝集素的提取及性质研究

抗蔓割病甘薯的叶片组织浸取液,经硫酸铵分级沉淀,甲壳素柱层析及葡聚糖凝胶过滤得到一种在PAGE或SDS－PAGE上均呈现单一蛋白带的甘薯凝集素。该凝集素没有血型专一性及被测动物红细胞专一性,其凝集活性可被N－乙酰葡萄糖胺或岩藻糖所抑制。甘薯凝集素在75℃加热10min,即丧失全部凝集活性,其凝集活性依赖于Ca^2 和Mg^2 ,Mn^2 则无作用。经Sephadex G-100和SDS－PAGE测定,凝集素相对分子质量为63000,中性糖含量为6.21%,该凝集素对蔓割病菌有抑制作用,是一种酸性糖蛋白。     

转铁蛋白糖链结构对受体亲和性的影响

用伴刀豆凝集素（ＣｏｎＡ）,小扁豆凝集素（ＬＣＡ）,和欧曼陀罗凝集素（ＤＳＡ）亲和层析法,分别从正常人血清转铁蛋白（Ｔｆ）和孕妇血清Ｔｆ中获得二天线糖链的Ｔｆ和多天线糖链的Ｔｆ．用于研究其对从胎盘中纯化得到的转铁蛋白受体（ＴｆＲ）的亲和性。经Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图结果发现,解离常数分别为：４．９７×１０－８ｍｏｌ／Ｌ和９．８０×１０－８ｍｏｌ／Ｌ．最大结合分别是１８０ｆｍｏｌ／Ｌ和１８２ｆｍｏｌ／Ｌ,表明含多天线糖链的Ｔｆ对受体的亲和性比二天线糖链的Ｔｆ降低１倍,而ＴｆＲ的结合位点数不变。     

青山羊小肠凝集素的分离,纯化及性质研究

报道了青山羊小肠凝集素的分离,纯化及性质研究。青山羊小肠先经过含有疏基乙醇的磷酸缓冲液抽提,然后上Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ６Ｂ柱及ＤＥＡＥ－ＣＥＬＬＵＬＯＳＥ－２３柱,得到纯化的青山羊小肠凝集素,采用ＳＤＳ电泳法测得其分子量在６６ １００左右,而且该凝集素不含糖,对人Ｂ型血球有专一性凝集作用。半抗原抑制实验表明它对半乳糖（乳糖）有亲和性,其中酸性氨基酸含量较高,组氨酸,蛋氨酸含量较低,该凝集素在胚胎期