胆红素自由基对人红细胞的损伤作用

为了进一步证明胆红素自由基对细胞造成的直接损伤,探讨胆红素对细胞表现毒性的机理以及在色素类结石形成中所起的作用,我们以胆红素自由基作用于人红细胞,用TBA法研究了完整人红细胞的脂质过氧化,用SDS-PAGE法研究了红细胞膜的损伤以及用荧光法研究了膜损伤后某些性质的改变。结果表明:胆红素自由基能引起人红细胞膜脂质过氧化,使膜蛋白发生降解,从而直接可测氨基减少,而溶液中游离氨基的含量却相应增加。根据以上事实,重点讨论了胆红素对细胞表现毒性的可能原因以及与色素类结石形成的关系。     

胆红素自由基对大鼠肝细胞损伤作用的研究

用不同自由基源处理的胆红素与鼠肝细胞相互作用,结果表明：胆红素自由基可引起鼠肝细胞脂过氧化,使总谷胱甘肽及ＧＳＳＧ水平明显下降,细胞损伤后,乳酸脱氢酶外漏,上述结果与自由基浓度正相关,而与其种类无关。牛血清蛋白有明显的抑制作用,差示光谱表明：胆红素可能与细胞色素Ｐ－４５０快速形成络合物,根据以上结果,重点讨论了胆红自由基对肝细胞损的化学本质及其与胆结石形成的关系。     

胆红素自由基对大鼠肝细胞损伤作用的研究

用不同自由基源处理的胆红素与鼠肝细胞相互作用,结果表明：胆红素自由基可引起鼠肝细胞脂质过氧化,使总谷胱甘肽及ＧＳＳＧ水平明显下降,细胞损伤后,乳酸脱氢酶外漏,上述结果与自由基浓度正相关,而与其种类无关,牛血清白蛋白有明显的抑制作用。差示光谱表明：胆红素可能与细胞色素Ｐ－４５０快速形成络合物。根据以上结果,重点讨论了胆红素自由基对肝细胞损伤的化学本质及其与胆结石形成的关系。     

石英粉尘对人红细胞膜的损伤及柠檬酸铝的抗损伤作用研究——V、对膜蛋白构象的影响

本研究用圆二色技术测定石英粉尘对人红细胞膜蛋白构象的影响以及柠檬酸铝拮抗石英影响的效应.结果显示,石英引起膜蛋白构象改变较为迅速;对膜蛋白构象的影响(α-螺旋量减少)存在着剂量效应关系.柠檬酸铝可以有效地减轻石英对红细胞膜蛋白构象的影响.     

金属硫蛋白对大鼠红细胞膜受羟自由基损伤保护作用的自旋标记—ESR研究

用自旋标记物5NS,16NS及MSL分别插入红细胞膜脂及标记膜蛋白,发现金属硫蛋白(10~(-5)mol/L)对羟自由基引起的膜运动性减弱和膜蛋白构象改变有明显抑制作用,说明金属硫蛋白对大鼠红细胞膜的羟自由基损伤有保护作用,并且,对于低剂量的羟自由基损伤,保护作用更为明显。     

稀土离子对磷脂酰胆碱脂质体及人红细胞膜自由基氧化的影响

通过荧光和电泳方法研究了稀土离子对磷脂酰胆碱脂质体及人红细胞膜脂持过氧化的影响。结果表明稀土离子都能够强烈的抑制膜的脂质过氧化,春作用强度随不同的稀土离子要有较大的判别稀土离子对分离的人红细胞膜的脂质过氧化的抑制作用比对ＰＣ脂质体更强。     

金属硫蛋白对大鼠红细胞膜受羟自由基损伤保护作用的自旋标记—ESR研究

用自旋标记物5NS,16NS及MSL分别插入红细胞膜脂及标记膜蛋白,发现金属硫蛋白(10~(-5)mol/L)对羟自由基引起的膜运动性减弱和膜蛋白构象改变有明显抑制作用,说明金属硫蛋白对大鼠红细胞膜的羟自由基损伤有保护作用,并且,对于低剂量的羟自由基损伤,保护作用更为明显。     

锌7—与镉7—金属硫蛋白对羟自由基损伤大鼠红细胞膜保护作用的比较

用电子自旋共振自旋标记物氮氧自由基硬脂酸和马来酰亚胺标记大鼠红细胞膜脂和膜蛋白,测定膜脂流动性和膜蛋白构象改变,以硫代巴比妥酸法测定脂质过氧化产物丙二醛含量。结果表明,锌７－与镉７－金属硫蛋白对羟自由基引起的膜脂流劝性减低,脂质过氧化反应增强及膜蛋白构象及改变有明显的抑制作用,而且,前的作用明显强于后。     

活性氧自由基诱发的胆红素聚合、聚集及稳定自由基的形成

 为了深入了解胆红色素类结石形成的触发机制,我们研究了活性氧自由基与胆红素的作用。结果表明:·O_2和·OH均可诱发胆红素聚合和聚集,井使胆红素转变成稳定的自由基,从而引起脂质过氧化和透明质酸分子降解。经自由基处理的胆红素溶解度减小,粒度分布趋向颗粒变大.根据以上事实,重点讨论了自由基触发的胆色素类结石的致病过程。     

超氧歧化酶(SOD)对人红细胞膜的保护作用

前文曾报道,红细胞膜经外源O₂^-_·自由基(碱性条件下,邻苯三酚自氧化产生)处理后有明显损伤作用。在此基础上,本文研究猪红细胞SOD对人红细胞膜氧化损伤的保护作用。结果表明,外源SOD对人红细胞膜有明显保护作用,表现为膜流动性和膜重封闭能力保持正常水平,膜蛋白交联作用有显著减小。     

羟自由基对培养细胞损伤作用的实验观察

将不同浓度的H₂O₂与V79细胞共同孵育24、48h后,结果显示SOD活性下降,LPO含量增加,细胞内GPT、GOT、LDH和CPK酶活性升高,其变化程度与培养时间和H₂O₂浓度成正比.     

厨房油烟引起AL细胞遗传损伤和胞内自由基形成

为了解厨房油烟(cooking oil fumes,COF)对细胞的危害及其遗传毒性机制,以A细胞为实验模型,对细胞活力水平、细胞基因突变率、细胞非巯基蛋白化合物水平(NPSH)以及细胞内活性氧(ROS)产生的变化规律进行了研究。实验发现：用厨房油烟(COF)处理后,A细胞的活力下降,细胞CD59基因的突变率随着处理浓度的增加而增加,NPSH水平随着处理浓度的增加而降低,且存在一定的剂量一效应关系。检测胞内产生的ROS,发现400μg／ml COF处理30min后,细胞内ROS含量高于对照3倍多。实验结果表明：COF可引起细胞氧化胁迫,诱导哺乳动物细胞基因突变。     

超氧阴离子自由基对大鼠脑皮层神经细胞的损伤作用

为了探讨超氧阴离子自由基对神经细胞的影响,以产生超氧阴离子自由基系统（XO/X）作用于原代培养的新生大鼠大脑皮层神经元,分析神经细胞的生长状态、蛋白质被氧化修饰的程度、脂质过氧化程度、核DNA损伤程度、亚细胞结构变化以及Cu/ZnSOD基因表达等变化。结果显示：超氧阴离子自由基可使神经细胞的生长状态不佳,ATP酶活性降低为4.223μmol/(mg.min^-1)(Pr)。细胞总羰基含量增加为295.40μmol/g湿重,LPO含量增加为4.87mol/g(Pr),膜脂流动性下降（P值为0.398),核DNA单链断裂增加（DNA在SCG中的迁移率为7.35mm),亚细胞结构变化（线粒体肿胀和变性等）以及SOD基因表达增强（SOD含量、SOD活性和SODmRNA丰度均增加）。结果说明超氧阴离子自由基可损伤神经细胞的蛋白质、核酸、脂质和亚细胞结构。     

硒对自由基损伤的红细胞引起微循环紊乱的保护作用--动物实验及临床研究

为研究硒保护实验动物大脑表面微循环免受自由基损伤红细胞的干扰作用,以及术前服硒对心脏手术病人在体外循环过程中皮肤和肌肉微循环的保护效果,在动物实验中利用荧光标记的图象分析法观察大鼠脑微小动静脉直径,流速和通透性的改变,并在临床观察中用激光多普乐法对服硒组心脏手术病人皮肤和肌肉微循环的变化与对照组进行比较研究。     

巴氏碳球C60对红细胞膜的光敏作用研究

用人红细胞膜作实验材料,研究了巴氏碳球Ｃ６０对红细胞膜的光敏作用。结果发现,Ｃ６０光激发后对膜蛋白质几种重要氨基酸有明显破坏作用,并氧化膜蛋白巯基和膜不饱和脂肪酸。采用ＮａＮ３和ＳＯＤ作抑制剂探明了Ｃ６０的光敏作用存在氧自由基的影响,并在Ｃ６０光激发后的电子顺磁共振（ＥＳＲ）研究中得到进一步证实。     

钆和镱对人红细胞膜脂及膜蛋白的作用

利用荧光偏振,自旋标标顺磁共振波谱和激光拉曼技术研究了钆和镱对人红细胞膜结构和功能的影响。结果表明,低浓度的Ｇｄ３＋（０．５μｍｏｌ／Ｌ）对（Ｎａ＋＋Ｋ＋）－ＡＴＰ酶和Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶有轻微的激活作用,而随着其浓度的增大,则明显抑制酶的活性,Ｇｄ３＋与Ｙｂ３＋和人红细胞膜作用后,降低膜脂流动性,并使膜蛋白酰胺Ｉ＇－α螺旋振动强度减弱．     

羟自由基对人红细胞磷脂酰乙醇胺脂质体相变性质的影响

研究了过氧化氢与亚铁离子体系产生的羟自由基对人红细胞膜磷脂酸乙醇胺(PE)脂质体相变性质的影响.结果表明,羟自由基导致脂质体不饱和脂肪酸链的含量明显降低和丙二醛(MDA)含量显著升高,同时其膜流动性随之下降.在室温下,羟自由基诱使PF脂质体冰冻断裂面出现脂质颗粒,说明羟自由基通过脂质过氧化作用可促进PE脂质体从脂双层转变为非双层结构.