人脑原发性肿瘤癌基因扩增和重排的研究

作者对52例人脑原发性肿瘤和5例正常人脑DNA中c-myc、L-myc、Nmyc、erbB、c-fos、sis及Ha-ras等七种癌基因的扩增和重排进行了研究,发现多数胶质瘤中有c-myc、L-myc、erbB及c-fos等癌基因的扩增,少数胶质瘤和脑膜瘤中发现myc家族癌基因的限制性酶切区带位置有多态性变化;同时还观察到原发性脑瘤中存在两种或两种以上癌基因的扩增和重排现象。作者对癌基因与人脑原发性肿瘤的关系进行了讨论。     

人脑原发性肺瘤癌基因的研究——Southern吸印杂交分析

用c-myc、Ha-ras、v-sis及v-erbB四种癌基因为分子探针,对8例人脑原发性肿瘤和两例正常人脑DNA进行Southern吸印杂交分析。结果显示:以c-myc基因为探针进行分子杂交时,所有被检测肿瘤和正常对照都可见一条相同的10.0kb(HindⅢ酶切)人c-myc基因区带。其中一例室管膜瘤和一例脑膜瘤还出现另一条异常的7.0kb(HindⅢ酶切)c-myc基因区带。斑点杂交结果表明,上述两例肿瘤中有c-myc基因的扩增(2—8倍),同时还具有erbB基因的扩增(8倍)。Ha-ras及v-sis基因杂交,未见异常区带。上述结果提示室管膜瘤和脑膜瘤的发生可能与c-myc基因的激活有关;c-myc基因的异常变化与erbB基因扩增同时出现,可能为癌基因之间的协同作用提供证据。     

慢粒白血病中c-abl 癌基因的重排

作者采用α-³²P-dCTP标记的v-abl癌基因探针与7例慢粒白血病细胞DNA的PvuⅡ、Hind Ⅲ和Bg 1 Ⅱ酶切片段杂交。结果发现其中3例慢粒病例的Pvu Ⅱ和Hind Ⅲ酶切杂交图谱与正常对照相比有明显变化,且Pvu Ⅱ酶切位点有多处改变。表明在慢粒白血病中,Ph染色体重排亦可累及 c-abl癌基因内部,并可能有多次多点重排发生。     

DMBA、垂体移植诱发性乳腺瘤内172^Arg—Leu突变型p53的特性及其与基因重排和扩增关系的研究

p53最早发现于SV40转化的细胞系,后来几乎在不同类型的细胞内均检测到这种蛋白质。野生型P58是一种有效的肿瘤抑制因子,但突变体p53可与ras－肿瘤原因协同转化体外的腺代细胞,而且在肿瘤发生时常伴随着p53基因的突变。乳腺瘤内,p53基因的突变率为40％,并可见到某些肿瘤基因参与癌症的形成过程,暗示p53基因结构和功能和改变可能与这些基因的重排和扩增有关。本实验选择4种不同年龄的172^Arg-Leu突变型p53转基因小鼠为受试动物,将同系动物的垂体腺植入小鼠的肾脏后,再以致癌剂DMBA处理,以使动物乳腺内的p53基因表达和诱导小鼠乳腺癌形成。从乳腺癌小鼠分别摘取乳腺组织,提取DNA和RNA,以H－ras、PCNA、CylinD1、p53基因的DNA片段作为特异性核酸探针,进行Southerm Blotting和Northern Blotting分析,以检测在突变体P53表达的情况下,PCNA、H-ras、CyinDl等基因在体内的变化规律,实验发现,在4组不同的受试动物中,其乳腺癌细胞的PCNA和H－ras两种基因发生了基因重排,特征是其DNA标本中分别出现了一条很强的额外杂交带,但对照动物乳腺该类基因以及被检测的肿瘤基因中均未发现结构上有任何改变。这表明,仅管内源性p53和突变体p53的高效表达抑制或延缓肿瘤的发生,但不能从根本上阻止PCNA和H－ras基因的重排。肿瘤基因的拷贝数及其表达的定量测定结果证明,虽然CyclinDl和H-ras基因在所有检测的小鼠癌组织和正常乳腺细胞均有扩增,但扩增的量极低,很难构为成肿瘤形成的主要因素。其他基因,如：MDM、PCNA等,也未见到明显改变。由于p53基因在转化细胞和肿瘤组织内的存在方式与基因扩增密切相关,乳腺癌小鼠体内的突变型p53的高效表达可能对基因扩增起到了抑制作用。最终,在一定程度上推迟了转基因小鼠的肿瘤形成过程。此外,致癌剂DMBA可诱发小鼠乳腺癌形成。其主要机制是使H－ras基因的第61位密码子发生突变。本实验证明,DMBA虽使垂体移植转基因小鼠发生了乳腺癌,但其作用点并非常见的第61位密码子,而是使H－ras基因发生重排,并使PCNA基因结构也发生同样变化。这种现象不仅是DMBA致癌方式上的新发现,而且表明该致癌剂的这种生物学效应可能与突变体p53的功能有关。     

人类乳腺癌中几种癌基因的状态与临床指征关系的初步探讨

本文报告了乳腺癌标本中N-ras、c-myc和neu癌基因异常改变,包括扩增和重排,并对这些结构改变与乳腺癌临床指征的关系作了初步的分析。本文的实验结果表明这些癌基因可能在人类乳腺癌的生物学行为和发病方面起着一定的作用。     

中心体扩增与肿瘤

中心体是动物细胞中非常重要的非膜结构细胞器,它除了作为微管组织中心在有丝分裂过程中具有指导两极纺锤体组装的功能外,还参与了细胞内的许多生命活动过程。中心体扩增通常导致异倍体的形成、以及染色体和细胞骨架的不稳定性。因而与肿瘤的发生、发展有着直接的关系。中心体扩增在肿瘤的诊、治中具有广阔的研究与应用前景。中心体扩增的参数可以作为肿瘤诊断以及预后的指标;中心体可望成为肿瘤治疗的靶位点。     

脊椎动物线粒体DNA的基因重排

将GenBank上已公布的321种脊椎动物mtDNA全序列,按纲整理归类,绘制基因排布图并进行比对。比对结果表明：81个物种的mtDNA中观察到基因重排现象,涉及脊椎动物各纲,其中9个物种同时存在基因顺序变化和基因倒置现象,所有的基因重排都涉及tRNA的变化。脊椎动物mtDNA基因顺序变化可分为3类：1)邻接的基因或片段的位置交换;2)接近于控制序列或轻链起始位点的基因或片段的位置变化,有时还伴随着控制序列的倍增;3)I-Q-M区域的变化。所有鸟类、蛇类、鳄类和有袋类的mtDNA具有各自独特的基因排列顺序。基因倒置现象常见于鱼类和哺乳类,且多表现为tRNA从轻链往重链上迁移。本文就这些基因重排现象、发生重排的机制和mtDNA基因重排在系统发生研究中的应用做一简要概述。     

人原发性肺癌癌基因表达研究

分子生物学的新近发展揭示某些癌基因与人类肿瘤的发生、发展、分化密切相关。目前认为,至少有两大类癌基因,即myc家族基因与ras家族基因在肺癌的病理发生中起重要作用。但是有关肺癌基因表达的研究,国内迄今尚未见报道。 本研究以myc家族基因(c-myc、L-myc及N-     

P53，Rb和c－myc基因在人脑原发性肿瘤中的转录表达

采用ＲＮＡ斑点杂交分析,对２１测人脑原发性胶质瘤和１１例人脑膜瘤中ｐ５３,Ｒｂ和ｃ－ｍｙｃ基因转录水平的表达进行研究,发现４８．４％的肿瘤中ｐ５３基因表达减弱,２１．９％的肿瘤中Ｒｂ基因表达减弱;７１．９％的肿瘤中ｃ－ｍｙｃ基因表达增强,在ｐ５３基因表达减弱的１５例病例中有１３例（８０％）ｃ－ｍｙｃ基因表达增强,结果表明,ｐ５３基因表达减弱和ｃ－ｍｙｃ基因表达增强与人脑原发性肿瘤的发生有关。     

一种测定多个目的基因扩增的简易方法——差异PCR扩增法

一种建立在PCR的基础上,不使用同位素能快速安全地检测基因组中某一目的基因扩增程度的简易方法。此法所需DNA样品量少、灵敏度高,对于为观察细胞株而制备的小量样品或者石蜡包埋及福尔马林处理后的组织切片中某种基因的扩增尤为适宜。可做为一种辅助诊断手段推广应用到临床实验室。     

癌基因及癌相关基因的甲基化研究进展

正常细胞基因具有相对稳定的甲基化类型。由于内外环境因素的影响,这种类型常常发生改变,继而影响基因的表达。在致癌物的作用下,细胞ＤＮＡ普遍呈低甲基化现象,癌基因特异位点的低甲基化将使其异常表达而参与细胞的癌变过程。此外,ＤＮＡ的低甲基化使染色质凝聚发生率碍,在细胞分裂过程中易致染色体易位和丢失。