生殖细胞及性腺移植

生殖细胞和性腺移植研究近年来已取得了突破性进展。这两项技术对于农业、医学及动物繁殖学的研究具有深远的意义和很大的应用价值。本文从同源移植、异源移植、移植技术及其它移植相关问题等方面对生殖细胞和性腺移植进行了简要介绍，并阐述了近年来在这方面所取得的进展。     

卵巢冷冻保存和移植的研究进展

卵巢冷冻保存和移植是建立卵子库的一项有效技术,近年来取得了很大进展。本文介绍了卵巢组织冷冻保存和移植的方法及近年来的研究情况。     

鱼类生殖细胞移植的研究进展

生殖细胞移植在生物学、畜牧学及兴起的鱼类生物工程上都有很多用途。目前,采用基于基因组的育种方法已选育出多种带有所需遗传性状的鱼类新品系;但由于缺乏鱼卵与胚胎的低温保存技术,尚未找到长期保存其种质资源的方法。就鱼类生殖细胞移植的最新研究进展进行综述,同时针对鱼类生殖细胞移植及其低温保存技术研究中存在的问题进行讨论,并提出了鱼类生殖细胞移植的应用前景,以期能积极推动鱼类生物工程的研究,加速鱼类生殖细胞移植在产业中的应用。     

动物体细胞核移植技术的研究现状

动物体细胞核移植的成功表明动物体细胞的分化是可逆的,这是近年来人类在细胞生物学及发育生物学领域取得的最伟大的成就之一。１９９７年首例体细胞核移植绵羊在世界上诞生,之后不久出现了体细胞核移植小鼠及牛,并通过体细胞核移植技术制作了转基因动物。成就是不言而喻的,但其中也暴露出一些需克服和解决的问题。本文围绕世界上首例体细胞克隆羊诞生的背景、体细胞核移植技术目前的研究状况、体细胞核移植过程中的核质互作、体细胞核移植技术目前存在的问题、体细胞核移植技术在制作转基因动物上的应用等方面,扼要介绍了体细胞核移植技术在最近两年内取得的进展。     

美洲鲥雄性生殖细胞冷冻保存及移植

采用分离细胞冻存和组织块直接冻存2种方法, 进行美洲鲥(American shad, Alosa sapidissima)精巢细胞的长时间冷冻保存(>250d), 并比较分析2种不同冻存方法对美洲鲥雄性生殖细胞的冻存效果。解冻复苏后用Hochest33342和PI共染细胞核, 分析统计各期雄性生殖细胞的存活率, 结果显示组织块冻存方法所得精原干细胞和精母细胞的存活率明显高于分离细胞冻存的; 而精细胞及其他细胞存活率在2种方法间无显著差异; 特别是, 镜检发现组织块冻存方法所得精子存活率高达93.83%, 说明此冻存方法能同时高效地冻存美洲鲥各期生殖细胞, 包括成熟的精子。同时, 将组织块冻存的美洲鲥生殖细胞用PKH26染色标记后移植到出苗第1天的斑马鱼仔鱼中, 在细胞植入后5d仍能在受体中检测到供体细胞, 且有部分供体细胞能与内源生殖细胞共定位, 表明经过长时间冷冻保存的美洲鲥生殖细胞仍具有生殖细胞特性, 且能整合到斑马鱼受体性腺原基。研究结果为进一步开展美洲鲥, 或其他洄游性鱼类的生殖细胞发育、培养及种质资源保存等研究工作奠定了技术理论基础。     

微囊化基因工程细胞移植的研究进展

微囊化基因工程细胞移植是将目的基因通过基因转染技术导入到靶细胞内,再将该细胞微囊化后植入受体体内,具有组织相容性好,避免了机体的排斥反应(免疫隔离),且微囊内的功能细胞可以长期存活,发挥其生物学效应。该技术使得异种组织细胞或基因工程细胞移植成为可能,在神经内分泌及代谢疾病等方面的研究取得了可喜的进展,具有广阔的应用前景。     

哺乳动物体细胞核移植研究进展

体细胞核移植技术已经在基础研究领域与产业化应用领域体现出了重要的价值,因而体细胞核移植技术及其相关研究已经成为了生物领域的持续性研究热点,但是围绕体细胞核移植技术仍然存在许多质疑,其中最主要的就是体细胞核移植的效率较低。尽管如此,体细胞核移植研究仍然在近年来取得了令人瞩目的成就,包括小鼠与恒河猴核移植胚胎干细胞系的建立。该文就体细胞核移植的研究历史与进展进行简要的论述,同时针对体细胞核移植研究中的细胞重编程与治疗性克隆研究中的发展与问题进行剖析,希望能够积极推动治疗性克隆的研究进展,加速核移植与干细胞技术在产业化领域中的应用。     

生殖细胞形成的调控机制及体外培养体系的研究进展

生殖细胞是多细胞生物体遗传物质传递的载体,在发育生物学、临床医学及畜牧业生产等领域中具有广阔的应用前景。原始生殖细胞作为胚胎体内最早出现的生殖细胞,在发育过程中受多种信号因子的诱导,发生特化、迁移、分化及减数分裂,最终形成单倍体的配子,此过程在遗传学和表观遗传学方面受到严格的调控。另外,多能性干细胞向生殖细胞的分化以及生殖细胞的体外培养方面在最近均取得了较大的进展。该文将主要围绕原始生殖细胞,综述最近几年来关于生殖细胞形成中的转录调控及体外培养体系的进展。     

骨髓刺激后骨髓干细胞移植治疗下肢缺血的研究进展

自体骨髓干细胞移植治疗下肢缺血的研究是近年来令人关注的领域,取得一定的进展,但疗效有待进一步提高。骨髓刺激后自体骨髓干细胞移植治疗肢体缺血取得了较好的疗效;同时它具有抽取骨髓血少、获得细胞量多且安全性高的优点。但其具体作用机理尚不十分明确。内皮祖细胞数量的增加与质量的提高、局部微环境的改变可能是骨髓刺激后自体骨髓干细胞移植促进肢体缺血改善的机制。     

调控鱼类性腺分化基因的研究进展

鱼类种类繁多, 其性别决定机制也几乎涵盖了所有的动物类型。近几年来, 随着分子生物学技术的不断更新, 关于鱼类性别决定机制的研究, 尤其是对调控性腺分化基因的克隆、表达及功能验证取得了突破性进展。文章从性腺分化、核受体家族、类固醇合成酶类和卵母细胞结构基因4个方面综述了调控鱼类性腺分化基因的研究进展。       

肝移植围手术期肠道微生态变化研究进展

随着医疗技术的不断创新与发展,我国肝移植的数量逐年增加,但术后并发症仍难以控制,导致不良预后,因此肝移植术后并发症逐渐成为关注的焦点。随着“肠－肝轴”的提出,研究发现肝移植围手术期肠道菌群发生了明显变化,干预肠道菌群及其信号通路可能是控制术后并发症的新途径。本文从肠道微生物的定义与生理作用、“肠－肝轴”的病理生理联系在肝移植围手术期的作用及粪菌移植在肝病中的应用３个方面进行综述,列举肝病和肝移植与肠道微生态变化特点的相关研究,以及粪菌移植改善微生态从而达到治疗的相关研究,旨在阐述肝移植患者肠道紊乱的可能机制与菌群的具体变化,并展望应用粪菌移植技术加快肝移植术后恢复的可行性。

     

ApoE derived from adipose tissue does not suppress atherosclerosis or correct hyperlipidemia in apoE knockout mice

The synthesis of apoE by adipocytes has profound effects on adipose tissue lipid flux and gene expression. Using adipose tissue transplantation from wild-type (WT) to apoE knockout (EKO) mice, we show that adipose tissue also contributes to circulating apoE. Different from circulating apoE produced by bone marrow transplantation (BMT), however, adipose tissue-derived apoE does not correct hyperlipidemia or suppress atherosclerosis. ApoE secreted by macrophages has a more acidic isoform distribution, and it increases binding of reconstituted VLDL particles to hepatocytes and fibroblasts more effectively than apoE secreted by adipocytes. The incremental binding can be entirely accounted for by binding to the LDL receptor. After BMT into EKO hosts, plasma cholesterol and macrophage-derived apoE are largely within IDL/LDL- and HDL-sized particles. After adipose tissue transplantation, most cholesterol and adipocyte apoE remain in VLDL. After BMT, circulating apoE no longer demonstrates predominance of acidic isoforms compared with that circulating after fat transplantation. In conclusion, fat transplantation provides circulating apoE levels similar to those provided by bone marrow transplantation, but it does not suppress hyperlipidemia or atherosclerosis. A potential mechanism contributing to this difference is differential binding to cell surface lipoprotein receptors.     

Current status of the organ replacement approach for malignancies and an overture for organ bioengineering and regenerative medicine

Significant achievements in the organ replacement approach for malignancies over the last 2 decades opened new horizons, and the age of “Transplant Oncology” has dawned. The indications of liver transplantation for malignancies have been carefully expanded by a strict patient selection to assure comparable outcomes with non-malignant diseases. Currently, the Milan criteria, gold standard for hepatocellular carcinoma, are being challenged by high-volume centers worldwide. Neoadjuvant chemoradiation therapy and liver transplantation for unresectable hilar cholangiocarcinoma has been successful in specialized institutions. For other primary and metastatic liver tumors, clinical evidence to establish standardized criteria is lacking. Intestinal and multivisceral transplantation is an option for low-grade neoplasms deemed unresectable by conventional surgery. However, the procedure itself is in the adolescent stage. Solid organ transplantation for malignancies inevitably suffers from “triple distress,” i.e., oncological, immunological, and technical. Organ bioengineering and regenerative medicine should serve as the “triple threat” therapy and revolutionize “Transplant Oncology.”     

两种异位心脏移植小鼠模型的建立和比较

目的比较腹部和颈部小鼠心脏移植模型的优缺点,探讨二次器官移植或双心脏移植研究的可行性和实用性动物模型。方法参照Ono法和Chen法并加以改进,建立了同系或者同种小鼠腹部和颈部异位心脏移植模型,同时对两种手术方式的成功率、手术时间、移植心脏存活时间和病理组织学进行了比较。结果腹部和颈部异位心脏移植手术成功率分别为86.7%和83.3%,两种手术方式在总手术时间、移植心脏存活时间和病理组织形态学检查上均无明显差异(P0.05)。结论在熟练掌握显微外科技术的基础上,两种异位心脏移植模型都能顺利建立,两者既可分开选用,又可结合运用,以适应不同实验需求。     

伊班膦酸盐预防肝移植术后骨质疏松症的临床效果观察

目的:观察每月口服伊班膦酸盐、维生素D3及钙剂预防肝移植术后骨质减少及骨质疏松症的临床疗效。方法:选择我院2011年1月至2013年8月收治的50例终末期肝病行尸体原位肝移植的患者,患者肝移植术后每月口服伊班膦酸钠(150mg)、维生素D3(800IE)及钙剂(1g/日),采用双能X线吸收测定法评估移植术后3个月、6个月、1年、2年腰椎及股骨颈的骨密度,同时评估骨的代谢物碱性磷酸酶(BAP)、尿吡啶诺林(PYD)、尿脱氧吡啶诺林(DPYD)的变化。结果:肝移植术后3个月患者的腰椎骨和股骨颈骨密度T值及测量值较移植前均有所下降,在持续治疗后12个月及后上升较为明显,骨密度较基线值的百分比从移植后的3个月到24个月呈稳定的上升趋势,差异有统计学意义(P0.05)。移植术后3个月的骨碱性磷酸酶较移植前明显的下降,在6、12个月时较前增加,但在24个月时再次下降。而移植术后的3、6个月的尿吡啶诺林、尿脱氧吡啶诺林上升,在12、24个月时与移植前比较无明显变化。移植后2年骨折发生率为4%。结论:每月口服1次伊班膦酸盐能显著提高肝移植术后患者第1年及第2年的骨密度,降低骨折的发生率。     

Current status of the organ replacement approach for malignancies and an overture for organ bioengineering and regenerative medicine

Significant achievements in the organ replacement approach for malignancies over the last 2 decades opened new horizons, and the age of “Transplant Oncology” has dawned. The indications of liver transplantation for malignancies have been carefully expanded by a strict patient selection to assure comparable outcomes with non-malignant diseases. Currently, the Milan criteria, gold standard for hepatocellular carcinoma, are being challenged by high-volume centers worldwide. Neoadjuvant chemoradiation therapy and liver transplantation for unresectable hilar cholangiocarcinoma has been successful in specialized institutions. For other primary and metastatic liver tumors, clinical evidence to establish standardized criteria is lacking. Intestinal and multivisceral transplantation is an option for low-grade neoplasms deemed unresectable by conventional surgery. However, the procedure itself is in the adolescent stage. Solid organ transplantation for malignancies inevitably suffers from “triple distress,” i.e., oncological, immunological, and technical. Organ bioengineering and regenerative medicine should serve as the “triple threat” therapy and revolutionize “Transplant Oncology.”     

去势大鼠新鲜、冷冻卵巢移植后激素代谢变化

目的观察去势大鼠经新鲜、冷冻卵巢移植后体内激素代谢变化情况。方法24只去势大鼠经右下腹皮下移植新鲜卵巢（3 d之内乳鼠卵巢）和经过冻存培养后的卵巢（3 d之内乳鼠卵巢）后,检测移植前、移植后1个月2、个月的三碘甲腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）、促甲状腺激素（TSH）、睾酮（T）、雌二醇（E2）、孕酮（P）、黄体生成素（LH）及卵泡生成素（FSH）。结果冻存卵巢移植前与新鲜卵巢移植前比较：T值升高,有显著性差异（P〈0.01）;冻存卵巢移植后1个月与新鲜卵巢移植后1个月比较差异无显著性（P〉0.05）;冻存卵巢移植后2个月与新鲜卵巢移植后2个月比较：E2升高明显,差异具有显著性（P〈0.01;新鲜卵巢移植后2个月与移植前比较：T4,T,E2,P,LH均有明显升高（P〈0.01;P〈0.05）;冻存卵巢移植后2个月与移植前比较：E2,P增高明显（P〈0.01;P〈0.05）。结论冷冻卵巢移植较新鲜卵巢移植功能恢复明显。     

小鼠腹部心脏移植模型的制作与改进

目的建立并改进小鼠腹部异位心脏移植模型,为器官移植研究提供技术支持。方法SPF级近交系小鼠112只进行心脏移植手术,在传统方法的基础上进行改进,观察改进后手术效果并分析其优势。结果手术成功率为89.28％。总手术时间（103.9±16.5）min,受体手术时间（73.0±7.9）min。改进的方法简化了操作步骤,降低了手术难度。结论改进的小鼠腹部异位心脏移植技术是一种简便、有效、成功率高的模型制作方法。     

Stable hepatocyte transplantation using fibrin matrix

Fibrin matrix, a naturally derived biodegradable polymer matrix, was evaluated as a scaffold for hepatocyte transplantation in an athymic mouse model. One week after transplantation, opaque conglomerates of the transplanted hepatocytes and fibrin matrix were found on the intestinal mesentery, whereas no transplanted hepatocytes were observed in control groups (transplantation of hepatocytes suspended in culture medium). The hepatocytes in the conglomerates retained hepatocyte-specific functions, as examined with histochemical and immunohistochemical stainings. Stable hepatocyte engraftment may thus be achieved by hepatocyte transplantation using fibrin matrix.