天麻栽培用蜜环菌的遗传多样性、生长和水解酶

蜜环菌Armillaria是一种广泛分布的担子菌,是栽培中药天麻所必须的共生菌。为揭示我国天麻栽培用和鄂西地区部分野生蜜环菌资源的遗传多样性和生物学特性,本文收集了9个省市EF-1-α的19个蜜环菌商品菌株和鄂西地区20株野生蜜环菌菌株,以IGS、ITS和elongation factor-1-alpha（EF-1-α）为分子标记对这些菌株进行系统发育与遗传多样性分析,并对影响与天麻共生的生物学特性（菌索发育和胞外水解酶活性）进行对比研究。结果表明,这19株蜜环菌商品菌株分别归属于2个clade。其中,有18个菌株聚在cladeⅢ,说明不同来源的蜜环菌商品菌株之间系统发育关系很近;通过对蜜环菌的系统发育、菌索生长以及胞外水解酶活性的研究,总体上商品种优于鄂西的野生蜜环菌生物种。从鄂西野生蜜环菌中筛选出4个具有潜在栽培价值的菌株。本研究为天麻栽培生产中蜜环菌菌种的选择提供参考。     

猪苓与天麻共生蜜环菌类群的比较

猪苓和天麻都是传统中草药,具有很高的药用价值。它们的生长都离不开蜜环菌,蜜环菌可以为其生长提供营养。对于猪苓和天麻共生的蜜环菌种类是否有一定的异同,目前尚未有相应的报道。本研究在前期完成的从全国11个省份收集野生猪苓菌核,分离得到47株蜜环菌以及ITS、β-tubulin和elongation factor-1 alpha 3种序列的基础上,与文献报道的天麻共生蜜环菌的序列进行比较,并构建系统发育树,结果显示猪苓和天麻共生的蜜环菌共分为10个clade,其中和猪苓共生的蜜环菌有6个clade,和天麻共生的蜜环菌有7个clade,有3个clade的蜜环菌既可以和天麻共生,也可和猪苓共生。在这3个共同类群中,菌株来自于陕西、山西、吉林、黑龙江、贵州、甘肃、四川几个省份。西藏、云南等地的蜜环菌则具有较高的专一性。本研究从系统发育角度明确了猪苓和天麻共生蜜环菌的异同,该结果可为猪苓和天麻栽培过程中蜜环菌种类的选择提供一定的理论依据。     

不同蜜环菌菌株对红天麻农艺性状、产量及质量的影响

为研究不同蜜环菌菌株对菌材的侵染情况以及对红天麻主要农艺性状、产量及有效成分含量的影响,筛选适宜黔西北地区天麻生长的野生蜜环菌菌株。采用不同蜜环菌菌株培养菌材,并与红天麻伴栽,观察记录不同蜜环菌栽培种对青冈菌材的侵染情况以及不同处理红天麻的农艺性状,检测天麻的有效成分含量。不同蜜环菌栽培种对青冈菌材的侵染情况不同,对红天麻农艺性状、产量及质量的影响也不同。其中菌株MHJ-1满袋时间最短、上菌速度最快,对菌材的侵染效果最好,且能显著提高红天麻产量,每平方米鲜天麻平均产量为（8.78±0.38）kg,比对照菌株提高5%;其伴栽的天麻醇溶性浸出物含量、天麻素含量、天麻素与对羟基苯甲醇总含量均最高,分别为（29.24±0.43）%、（0.946±0.012）%、（1.140±0.009）%,且极显著高于对照菌株,仿野生栽培试验表现出良好的伴栽效果。结果表明菌株 MHJ-1与红天麻的伴栽效果最好,适宜用于黔西北地区红天麻种植。     

人工种植天麻的影响因子优化研究

天麻是一种名贵的中草药,可用于治疗多种疾病。自然条件下,天麻通过与真菌蜜环菌的共生从腐木获取营养进行生长。为了对人工大规模种植天麻的影响因子进行优化研究,利用正交设计方法,在昭通小草坝地区开展了一个样本量较大的种植实验。在测试的4种因子中,接种蜜环菌对种植天麻影响最大：其次,在露天灌木丛地种植的天麻产量明显高于在林地下的种植。此外,开展了12个树种对蜜环菌生长以及天麻种植的影响研究。结果发现十齿花（Dipentodonsinicus）对蜜环菌的生长最好,同时,也在天麻种植实验中有最高的产量;然而,添加磷、钾元素并不提高天麻的产量。     

蜜环菌固体发酵的研究

天麻(Gastrodia data Blume)是一种常用中药,过去临床应用主要靠采挖的野生天麻。近数年来虽然报道人工栽培天麻已获得成功,但药源仍缺,供不应求。为改进天麻现有生产方法,解决广大群众的需要,我所根据在自然环境中天麻生长与蜜环菌的密切关系(没有蜜环菌,天麻则不能繁殖)的特点,于1971年以来,开展了用蜜环菌发酵物代替天麻的研究。试验证明,蜜环菌发酵物与天麻具有相似的生物学活性;临床试用结果证明,蜜环菌发酵物与天麻的疗效相似。     

蜜环菌菌种分离新法——天麻组织分离法

报道了一蜜环菌菌种分离方法——天麻组织分离法,并对此法与常用分离法——菌索分离法进行比较试验。结果发现,天麻组织分离法分离成功率高（78％）,远高于常用的菌索分离法（16％）,且前者操作简便、难度低,所得菌种生活活力、生长形态均优于后法。     

蜜环菌的化学成分及应用研究

蜜环菌的化学成分及应用研究郭顺星,徐锦堂,肖培根,杨峻山（中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京１０００９４）由于中药天麻（Ｇａｓｔｒｏｄｉａｅｌａｔａ）及猪苓（Ｇｒｉｆｏｌａｕｍｂｅｌｌａｔａ）必须依靠蜜环菌（Ａｒｍｉｌｌａｒｉａｍｅｌ...     

蜜环菌和天麻共生营养关系的放射性自显影研究

本文利用3H-葡萄糖以打孔浇灌法标记天麻。用标记的天麻伴栽蜜环菌,追踪标记化合物是否存在蜜环菌中。显微放射自显影的结果表明：天麻自身能吸收标记物,同化的标记物其长距离运输靠天麻的纵向维管组织进行。天麻表皮外的蜜环菌菌索的光镜、电镜自显影显示,蜜环菌能从天麻中获取营养,蜜环菌和天麻之间存在营养物质的相互交流,菌麻之间存在着特殊的共生关系。     

蜜环菌和天麻共生营养关系的放射性自显影研究

本文利用＾３Ｈ－葡萄糖以打孔浇灌法标记天麻。用标记的天麻伴栽蜜环菌,追踪标记化合物是否存在蜜环菌中。显微放射自显影的结果表明：天麻自身能吸收标记物,同化的标记物其生距离运输靠天麻的纵向维管组织进行。天麻表皮外的蜜环菌菌索的光镜、电镜自显影显示,蜜环菌能从天麻中获取营养,蜜环菌和天麻之间存在营养物质的相互交流,菌麻之间存在着特殊的共生关系。     

四株昭通乌天麻共生蜜环菌的生理生化特征及其分子鉴定

目的对4株昭通乌天麻(Gastrodia elata)共生蜜环菌(Armillaria mella)的生理生化活性进行研究,并鉴定其分类地位。方法通过测定不同碳源和氮源对蜜环菌生长以及胞外酶活性的影响,掌握该蜜环菌生理生化特性,再结合rDNA-IGS序列分析方法进行鉴定。结果不同蜜环菌需要不同的碳源、氮源。3种胞外酶中木聚糖酶活性最大,其次是羧甲基纤维素酶,漆酶活性最小。供试蜜环菌与云南、贵州地区天麻共生蜜环菌以及猪苓共生蜜环菌的亲缘关系比较远。结论蜜环菌能否作为天麻共生菌与其分类地位无关。     

蜜环菌的化学成分

蜜环菌Armillariella mellea(Vahl.exFr.)Karst是一种与传统中药天麻（Gastrodia elata Blume)共生的药用真菌,从蜜环菌子实体中分离并鉴定了3个化合物,利用波谱（MS,NMR和IR）和化学方法分别鉴定为1个新C－18植物鞘氨醇型神经酰胺（2S,3S,4R）－2－（十六碳酰氨基）－十八碳烷－1,3,4－三醇（1）,2个已知甾醇麦角甾醇过氧化物（ergosterol peroxide)及Ergosta-5,7-dien-3β-ol,这2个甾醇系从该属真菌中首次发现。     

我国主要蜜环菌生物种胞外酶活性对温度的种特异性响应

蜜环菌生物种与天麻的共生关系受到温度的调节。为了揭示我国蜜环菌生物种的温度适应性,本研究以我国8个蜜环菌生物种为实验材料,采用2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（ABTS）法和3,5-二硝基水杨酸（DNS）法研究了胞外漆酶、果胶酶和纤维素酶的活性对温度的响应特征。结果表明,各生物种的胞外酶活性存在显著性差异,各胞外酶活性具有随时间先升后降的变化趋势;各胞外酶的分泌时间和活性大小对温度的响应存在着很大的差异;且在培养过程中,首先分泌的是果胶酶和纤维素酶,然后才是漆酶。温度对蜜环菌胞外漆酶和果胶酶活性大小有影响,对产酶时间没有影响;对纤维素酶活性达到峰值的时间和活性大小都有很大影响。除此之外,蜜环菌胞外酶活性对温度的响应和我国蜜环菌的地域分布特点具有相关性,分布于秦岭-淮河线以南和以北的蜜环菌生物种胞外酶活性对温度的响应具有差异。本研究对开展蜜环菌生物学和我国天麻的野外种植区划的研究具有指导意义。     

天麻矿物质吸收及其营养机理探讨

探讨了天麻吸收矿物质过程和天麻的营养机理。研究蜜环菌在天麻的金属元素、非金属元素吸收中起的作用, 阐明天麻的有机营养吸收过程。提出了天麻吸收非金属元素的两个途径,分析了天麻吸收金属元素的“泵”的作用机理。指出了天麻蜜环菌之间的游离氨基酸特别是天冬氨酸和谷氨酸的交流是天麻和蜜环菌生长发育的关键。     

天麻的第二营养来源研究

用同位素32P、15N、86Rb标记技术,证实天麻除必需由蜜环菌获得营养外,还能从土壤养分中得到补充营养,可称为第二营养来源。土壤养分(肥料)可通过蜜环菌或天麻表皮进入天麻体内(参与天麻代谢生理活动),可能影响天麻和蜜环菌的关系和天麻生长,因此研究天麻施肥技术和对产量、质量的影响是很有意义的。     

鄂西地区蜜环菌生物种的遗传多样性研究

蜜环菌属Armillaria真菌是世界范围内广泛分布的担子菌,既是引起森林病害的重要病原菌,也是天麻和猪苓生长的必须共生真菌,具有重要的经济价值。本文对我国鄂西天麻主产区即神农架林区、大老岭自然保护区、宜昌市所属的夷陵区和五峰县、恩施自治州等地进行了系统的调查采样,共获得45份蜜环菌子实体样本及其二倍体菌株,其中通过孢子印分离获得约320个单孢菌株。在此基础上,采用IGS、ITS和elongation factor-1 alpha（EF1-α）分子标记对45份二倍体菌株进行测序和系统发育分析,对有单孢株的样本采用遗传互交不育性实验进行生物种鉴定。结果表明,鄂西地区的蜜环菌分为4个clade,共有6个不同的蜜环菌生物种,分别为CBS J,CBS L,CBS N,CBS O,CBS F和Armillaria mellea,具有丰富的遗传多样性。其中,24个样本鉴定为CBS L,是鄂西地区的优势种;9个样本鉴定为CBS J;9个样本鉴定为CBS N;另有3个样本分别鉴定为CBS O,CBS F和Armillaria mellea。其中CBS L、CBS N、CBS O首次在湖北地区报道,扩大了这3个生物种的分布范围。本研究为了解鄂西地区蜜环菌的资源情况提供基础数据,对天麻生产蜜环菌菌种选育具有重要的参考价值。     

不同蜜环菌菌株对乌天麻产量的影响

用不同的蜜环菌(Amillaria mellea)菌株与长白山乌天麻(Gastrodia elata)进行伴栽试验,以探索不同蜜环菌菌株对乌天麻产量的影响。结果表明:不同蜜环菌菌株对乌天麻产量的影响不同,其中菌株Ar-4能显著提高天麻产量,仿野生栽培和室外箱栽试验均表现出良好的伴栽效果。     

珍稀食药用菌——蜜环菌的开发与应用

蜜环菌是一种与传统中药天麻共生的药用真菌,其子实体、菌丝和菌索都可以入药,具有很高的研究开发价值,目前蜜环菌因具有极高的营养保健功能而倍受关注,国内外市场均有销售由蜜环菌及其多糖等提取物制成的药品和保健品。通过综述了蜜环菌的生物学特性、营养化学成分和药理作用的研究情况,并介绍了几种蜜环菌产品的制作方法和保健功能,旨在为蜜环菌的深入研究提供依据,并促进蜜环菌新型保健品或药品的开发,以满足国内外市场的需求。     

蜜环菌分纯及深层液体培养条件初探

（Ａｒｍｉｌｌｅｒｉｅｌｌａ ｍｅｌｌｅａ）是一种有名的药用覃菌,对人类大有裨益。笔者对从云南采集的蜜环菌Ｓｈ－１４进行分离纯化,并对蜜环菌固体培养的营养、温度、水份等进行了研究。同时对蜜环菌深层液培养的一级种子及发酵培养基对蜜环菌菌丝体生长影响作了探讨。通过实验获得最佳一级种子培养基及发酵培养基。     

浅论天麻和蜜环菌及其共生关系

天麻块茎是一种名贵的中药材。它有息风镇痛作用,对神经性头痛、高血压性头痛等都有显著疗效。天麻除开花结果期外,常年以块茎生活在土中,无根无绿叶。在山林生态系统中,组成了一条特殊的食物链:阔叶树—蜜环菌—天麻。其中的天麻和蜜环菌于同—土壤环境中建立了共生关系。这种共生关系,影响着天麻的生长和繁殖,决定了人工栽培天麻的成败。     

天麻室内有性繁殖技术

天麻室内有性繁殖技术蔡义荣（安徽省金寨县双河职业高中２３７３８１）天麻（Ｇａｓｔ。ｄｉ４ｅｌａｔａＢｌｕｍｅ）属寄生性兰科植物,无根无绿叶,依靠分解吸收蜜环菌卜。。ｌｉａｎａｍｅｌｌｅａ（ＶａｈｌｅｘＦｒ）ＱｕｅｌＪ而生存。应用箭麻（即成熟的天麻块茎...