结核分枝杆菌耐酸机制的研究进展

结核分枝杆菌能在宿主体内长期存活,很大一部分原因是能抵抗吞噬体的酸性环境。细菌一方面能抑制吞噬体与溶酶体融合,干扰吞噬体成熟、酸化过程;另一方面也能通过自身功能抵抗吞噬溶酶体内的酸性杀伤作用。本文主要介绍吞噬体的酸化过程及结核分枝杆菌耐酸机制的最新研究进展。     

表面活性剂对鱼体内铅的蓄积、分布和清除的影响

研究了重金属铅在鲫鱼体内蓄积、分布和清除规律以及阴离子表面活性剂十二烷基苯磺酸钠对鱼体内铅的蓄积、分布和清除的影响。结果表明,铅进入鲫鱼体内后,在不同部位中的分布有差异,铅的含量从高到低依次为内脏,头部,腹肌,背肌。鱼体内铅的含量随着暴露时间的延长而增大;表面活性剂十二烷基苯磺酸钠能延缓铅在鱼体内的蓄积,加快鱼体内铅的清除。鱼体内铅的清除速度比蓄积慢。     

外源酚对凤眼莲体内酚含量和与酚代谢有关酶的影响

凤眼莲能够吸收和在体内聚集外源苯酚,体内的酸含量随着环境中酚浓度的上升而上升。从生长于合酚培养液中的凤眼莲体内能够检测到酚糖苷,说明凤眼莲体内有酚精苷转移酶的存在。浓度小于５０ｍｇ／Ｌ的外源酚能提高凤眼莲体内的多酚氧化酶和过氧化物酶的活性。多酚氯化酶与过氧化物酶在线粒体和微粒体中均有不同程度的分布,而酚糖苷转移酶则不存在于这些细胞器中。     

天花粉蛋白与膜脂相互作用的研究

天花粉蛋白（ＴＣＳ）在≥２．２２μｍｏｌ／Ｌ时能引起大豆磷脂脂质体内含物释放,Ｃａ＾２＋对这种释放有一定的促进作用,低ＰＨ值也能促进ＴＣＳ与脂质体的作用;将ＴＣＳ与细细胞一起保温;当ＴＣＳ终浓度达１４．７μｍｏｌ／Ｌ时能损伤红细胞膜,产生溶血作用;ＴＣＳ还能作用于红细胞血影膜,改变其脂双层的不对称性。     

SHIV病毒在猴体内的复制与传代

目的为建立SHIV艾滋病动物模型提供毒力较强的病毒株,将新合成的SHIV XJ02170病毒适应猴体,并增强其毒力。方法实验前采集猴血清并进行血清学检查和PCR检测。选出13只无SIV,STLV1,SRV D和B病毒感染的猴。第一批实验,将SHIV前病毒DNA质粒经肌肉注射到猴体内,每只500μg;SHIV病毒液,经静脉注射到猴体内,每只2ml。病毒质粒和病毒液各接种2只猴。当第一批猴体检出病毒后,10ml感染猴的全血,抗凝后静脉注射到第二批猴体内,当第二批猴检出病毒后再将10ml感染猴的全血静脉注射到第三批猴体内,连续传代4次。每批实验均定期采集血液标本,分别用肝素和EDTA抗凝,进行病毒分离;病毒基因PCR检测;CD4,CD8测定;病毒抗体检测。结果SHIV XJ02170病毒和SHIV XJ02170前病毒DNA质粒在猴体内的传代中均能分离出病毒;从传代猴的血浆和外周血单核细胞(PBMC)中检出了病毒DNA和RNA基因;CD4,CD8测定结果显示有暂时性倒置现象,后变为正常倒置与正常交替出现;在传代的猴血清中检测出特异性HIV病毒抗体。结论SHIV XJ02170病毒与SHIV XJ02170前病毒DNA质粒,均能在恒河猴体内复制。     

聚乙二醇对PEG化重组人促红细胞生成素热稳定性和生物学活性的影响

为了研究聚乙二醇对PEG化rhEPO热稳定性和生物学活性的影响,用酶学方法切除rhEPO和PEGrhEPO分子中的N连接糖基,研究酶切产物在37℃时287nm和350nm吸光度随时间的变化;用MTT比色法,网织红细胞法和HCT法比较体内和体外生物学活性的改变。结果显示聚乙二醇修饰能显著减少无N连接糖基的rhEPO分子间的聚集,降低rhEPO体外生物学活性,但增高体内生物学活性;无N连接糖基的PEG化rhEPO具有与rhEPO相当的体内生物学活性。因此聚乙二醇能提高rhEPO热稳定性;聚乙二醇可替代糖基,维持rhEPO的体内生物学活性。用PEG修饰原核细胞表达的rhEPO是开发rhEPO制品的新思路。     

能指引体内“交通”的肽

能指引体内“交通”的肽ＥｒｋｋｉＲｕｏｓｌａｈｔｉ与ＲｅｎａｔａＰａｓｑｕａｌｉｎｉ在今年３月２８日出版的Ｎａｔｕｒｅ上报道,用编码不同肽的ＤＮＡ顺序与编码噬菌体表面蛋白的基因连接,创建了一个噬菌体库;将此噬菌体库注射到小鼠体内,１～４分钟后割取各种...     

狂犬病人源二硫键稳定单链抗体融合蛋白的构建及活性检测

【目的】构建、表达人源二硫键稳定单链抗体(scdsFv),检测其生物活性,以获得对狂犬病病毒有特异结合能力及中和活性的scdsFv蛋白。【方法】从GenBank上获得RV单抗SO57重链可变区VH和轻链可变区VL序列,在VH44和VL100位各突变一个氨基酸为半胱氨酸,用linker连接形成scdsFv,人工合成此序列,克隆入表达载体pET22b(+),在大肠杆菌中表达目的蛋白,镍柱亲和层析法纯化,并进行SDS-PAGE、Westernblot鉴定。ELISA法和鼠脑组织抹片方法检测scdsFv对RV的特异结合活性;硫氰酸盐洗脱法测定scdsFv蛋白对RV的相对亲和力指数;分别用荧光抗体病毒中和试验(FAVN)和小鼠体内中和试验测定scdsFv的体外和体内中和活性。【结果】成功获得RV人源二硫键稳定单链抗体序列,大肠杆菌中表达得到scdsFv蛋白;分子量约为30.0kDa,Western blot表明此蛋白能与抗His单克隆抗体发生特异性反应。scdsFv能与RVVero疫苗特异结合,且结合力随抗原浓度降低而降低;scdsFv能与鼠脑组织中的RV结合。FAVN法测得scdsFv的中和效价为41IU/mL;小鼠体内中和试验表明scdsFv能保护55.6%鼠耐过强毒攻击。【结论】获得的scdsFv,具有良好的RV结合活性和体内外中和活性,有可能被用于暴露后狂犬病的预防。     

中国林蛙皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂RCSPI2的基因克隆和原核表达

<正>丝氨酸蛋白酶抑制剂广泛存在于动物、植物及微生物体内[1],是一类丝氨酸蛋白酶活性调节剂,能调节生物体内许多重要的生命过程,如蛋白质折叠、血凝、补体激活、炎症反应、细胞迁移、细胞基质重建、以及肿瘤抑制等[2,3],很多已被开发为新药,在临床上有广泛应用。基于     

海蛇乙醇浸出物对小鼠免疫系统的影响

目的 探讨海蛇乙醇浸出物（AEBFSS）在小鼠体内、体外对免疫系统的影响。方法 体外试验：采用AEBFSS与小鼠脾细胞共孵育72h,测定T、B淋巴细胞转化功能;体内试验：采用每天灌胃给予小鼠1次AEBFSS,共6天。测定脾脏中T淋巴细胞转化功能和溶血素抗体生成水平。结果 在体外条件下低浓度AEBFSS促进T、B淋巴细胞增殖,高浓度时则作用相反;在体内条件下低浓度AEBFSS能增加B细胞生成溶血素抗体,对T细胞增殖无明显影响,高浓度则抑制T、B细胞功能。结论 AEBFSS对小鼠免疫系统有一定的双向调节作用。     

大豆低聚糖对肠道菌群结构调节的研究

目的 :对山松牌大豆低聚糖对肠道菌群调节的效果进行研究。方法 :通过动物实验和人体试验。结果 :山松牌大豆低聚糖能增殖体内乳杆菌和双歧杆菌数量 ;在较高剂量时 ,能使体内的肠球菌和肠杆菌增殖。采用B/E值 (即双歧杆菌和肠杆菌的比值 )作为指标进行分析发现 ,该制品在低剂量时能更好地优化肠道菌群结构。结论 :大豆低聚糖对肠道菌有较好的调节效果     

趋磁细菌纳米磁小体的培养与分离及其在医学上的应用进展和前景

趋磁细菌是一种对磁场有趋向性反应的细菌,其原因是它们体内能合成一种特殊的细胞器-磁小体;由于磁小体有着大小合适,磁性强,表面易修饰等诸多优点,在诸多领域,尤其是医学领域有广泛的应用和广阔的前景.本文主要就从环境中区分和分离趋磁细菌;对其不同培养条件的优化与选择;从细菌体内提取磁小体并加以纯化;将不同药物偶联于磁小体之上的方法及其在医学上如,制造磁性细胞,磁分离技术,生物传感与检测技术,并将其作为靶向药物的载体,肿瘤治疗,基因治疗等方面的应用现状和前景作简要论述.     

舒缓激肽体系的生理生化特性及其临床意义

舒缓激肽是属于多肽类的组织激素,在各种动物体内起着很重要的生理作用。它能使毛细血管舒张和通透性增加,从而导致血压降低;又能使离体平滑肌收缩;还能致痛。因而在烧伤、炎症、水肿和休克等病理过程中起着重要的作用。在生物体内除舒缓激肽外,尚有各种与其性质类似的物质,统称为激肽(kinin)。它们系由激肽原(kininogen)经激肽释放酶(kallikrein)降解后产生。     

紫杉醇抑制前列腺癌增殖的体内实验研究

目的探讨紫杉醇对人前列腺癌细胞PC-3增殖的体内抑制作用。方法建立体内绿色荧光蛋白（GFP）标记的人雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3裸鼠原位移植瘤模型,观察紫杉醇对裸鼠前列腺癌原位移植瘤的体积、重量的影响。结果裸鼠模型体内实验显示,与对照组（100μL生理盐水）相比,紫杉醇处理组（0.5 mg/kg）在给药第18天后能显著抑制前列腺肿瘤的体积（P〈0.05）;紫杉醇处理组在抑制前列腺肿瘤重量方面与对照组相比亦有明显抑制作用（P〈0.05）。与对照组相比G31P处理组VEGF（P〈0.05）的表达差异具有统计学意义（免疫组化法）。结论紫杉醇在体内实验中能明显抑制人雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3的增殖。     

诱抗菌激发子诱导黄瓜产生对炭疽病的抗性

用细胞壁提取法从诱抗菌中提取出激发子,经点滴法测定发现该激发子与活菌一样能诱导黄瓜产生对炭疽病的抗性反应。黄瓜经激发子处理后,体内与抗病反应有关的过氧化物酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶活性显著增强;过氧化物酶同功酶酶带增多,着色加深;酚类物质和木质素含量也明显提高。     

诱抗菌激发子诱导黄瓜产生对炭疽病的抗性

用细胞壁提取法从诱抗菌中提取出激发子,经点滴法测定发现该激发子与活菌一样能诱导黄瓜产生对炭疽病的抗性反应。黄瓜经激发子处理后,体内与抗病反应有关的过氧化物酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶活性显著增强;过氧化物酶同功酶酶带增多,着色加深;酚类物质和木质素含量也明显提高。     

β-蜕皮激素对蚕豆离体叶片光合和呼吸强度影响的初步研究

昆虫体内分泌脱皮激素能引起细胞的染色体膨大,致使昆虫蜕皮;可是在植物体内也含有这种激素。目前已从约40种植物中分泌出蜕皮激素。云南露水草的蜕皮激素含量也很高。为什么在植物体内产生蜕皮激素呢?一般认为它有防治昆虫的作用。但除此之外,对植物本身的生理活动起什么作用呢?有人认为它对植物的作用类似生长素。也有人     

新型蛋白转导域PTD4的细胞内转导及其组织分布

目的:合成新型蛋白转导域PTD4,研究其细胞内穿膜效应及在体组织分布。方法:设计并采用固相合成法合成新型蛋白转导域PTD4,用FAM(羧基荧光素)进行标记,采用高效液相色谱仪(HPLC)和质谱仪测定其纯度与相对分子质量;采用荧光倒置显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察其在细胞内的穿膜情况;采用裸鼠活体成像观察穿膜肽在体内的组织分布及代谢特性,并切片观察各组织器官的分布情况。结果:合成了新型蛋白转导域PTD4,纯度为95.76%,相对分子质量为1776.5;PTD4在体外的穿膜效应有时间与浓度依赖性,约24 h代谢完毕,且共聚焦显微镜细胞层扫证实穿膜肽进入胞内;尾静脉注射的PTD4在裸鼠体内可迅速分布于各组织器官,但组织分布不均一,且有时间与浓度依赖性,6 h后荧光强度下降了大半,且腹腔注射方法不如尾静脉注射的穿膜效率高。结论:采用Fmoc固相肽合成法可成功合成蛋白转导域PTD4;PTD4能高效穿透细胞膜,穿膜效应呈时间与浓度依赖性;PTD4在体内能迅速分布于各组织细胞。     

表皮生长因子对细胞生长和增殖的调节作用

小鼠表皮生长因子(mEGF)是一个低分子量、对热稳定的多肽,是一条由53个氨基酸残基组成的单链。EGF 是一个强有力的细胞分裂促进因子,能刺激体内多种类型的组织细胞分裂和增殖;它有较广泛的生物学效应,与肿瘤的发生和生长密切相关。     

再生水灌溉对苜蓿生长发育和品质的影响

通过盆栽试验,研究了再生水不同灌溉方式对苜蓿生长发育和品质的影响.结果表明：与清水灌溉相比,再生水能显著增加苜蓿的株高、侧枝数及产草量,但对苜蓿叶面积有一定的抑制作用;再生水灌溉、再生水与清水混灌和轮灌使苜蓿体内可溶性蛋白含量分别增加78.43%、83.68%、72.53%,但再生水灌溉不利于苜蓿可溶性糖的累积.再生水灌溉下,苜蓿植株体内的Ca、Mg含量较清水灌溉分别增加了27.78%、26.61%;再生水灌溉及混灌下,苜蓿体内的Fe含量较清水灌溉分别降低28.71%、10.09%;再生水灌溉、轮灌和混灌下苜蓿地上部Cd含量较清水灌溉分别增加98.6%、89.5%和59.0%,但苜蓿体内重金属Pb、Cd含量仍低于国家卫生标准（GB 13078—2001）规定限量值.说明再生水是苜蓿可利用的灌溉
资源,但其长期效应仍需进一步研究.