高效液相色谱法测定1,25- 二羟基维生素D2纳米乳注射液的含量

目的:建立高效液相色谱法测定1,25-二羟基维生素D_2纳米乳注射液含量。方法:采用C18-STⅡ色谱柱(4.6×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水=85:15(V/V);流速:1.5 m L/min;检测波长:274 nm;温度:室温;进样量:200μL。结果:该方法专属性好,平均回收率99.96%(RSD为0.63%,n=9);溶液在冷藏(2~6℃)保存24 h稳定(RSD=0.98%,n=7);在0.06μg/m L~4.0μg/m L范围内线性关系良好,其回归方程为:Y=201098 X-8412.5(R2=0.9998,n=9)。结论:该方法简便、快捷、灵敏度高、专属性强,可用于该注射液的含量测定。     

橡胶树MSAP反应体系优化及其不同开割高度单株DNA甲基化分析

以‘热研7-33-97’橡胶树无性系幼嫩叶片为材料,通过利用单因素和正交试验相结合的方法,对酶切、预扩增和选择性扩增3个影响甲基化敏感扩增多态性(MSAP)分析的关键步骤的反应体系中关键影响因素进行了优化,建立橡胶树MSAP反应最佳体系,并用于高低割线橡胶树基因组DNA甲基化差异分析。结果表明:在50μL反应体系中,750 ng基因组DNA用EcoRⅠ20 U,HpaⅡ20 U或MspⅠ10 U于37℃恒温同步酶切10 h,酶切完全。最佳预扩增体系(20μL)为:连接产物4μL,Mg Cl_2(25 mmol·L~(-1))0.15μL,d NTPs(2.5 mmol·L~(-1))0.1μL,上下游引物E-00/HM-00(10μmol·L~(-1))各0.3μL,Taq酶(5 U·μL~(-1))0.1μL,10×PCR Buffer 2μL。最佳选择性扩增反应体系(20μL)为:稀释20倍的预扩增产物2μL,Mg Cl_2(25 mmol·L~(-1))0.1μL,d NTPs(2.5 mmol·L~(-1))0.125μL,上下游引物E+3/HM+3(10μmol·L~(-1))各0.4μL,Taq酶(5 U·μL~(-1))0.1μL,10×PCR Buffer 2μL。高低割线树DNA的甲基化比例分别为37.22%和36.43%,2种开割胶树基因组CCGG位点胞嘧啶全甲基化率明显高于半甲基化率,推测橡胶树基因组甲基化主要模式可能是Cp G型。综上表明,建立的MSAP反应体系稳定可靠且重复性好,为后续橡胶树不同胁迫(割胶)程度DNA甲基化的研究奠定了基础。     

RP-HPLC法测定加替沙星眼用凝胶剂含量

目的建立测定加替沙星眼用凝胶剂含量的方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.3%磷酸溶液(pH 3)(23∶77),流速1.0ml/min,检测波长290nm。结果标准曲线线性范围4.0~40.0μg/ml,r=0.9998;回收率为99.5%,RSD=1.23%;精密度RSD=2.54%。结论该法简便、快速、可靠,完全适合加替沙星眼用凝胶剂质量控制。     

RP-HPLC法测定盐酸托莫西汀的含量和有关物质

目的:建立RP-HPLC法测定盐酸托莫西汀的含量和有关物质.方法:采用Kromasil C18(4.6mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-水-三乙胺溶液(40:60:0.5,冰醋酸调pH至6.0),流速:1.0 mL·min-1,检测波长:270 nm,柱温:室温.结果:有关物质与盐酸托莫西汀分离良好,盐酸托莫西汀在2.0～50.0mg·L-1 范围内线性关系良好(r=:0.9998),平均回收率为99.8%(RSD=1.7%),检测限为80 μg·L-1(S/N=3).盐酸托莫西汀与有关物质分离良好.结论:该方法操作简便、重复性好、专属性强,可用于测定盐酸托莫西汀的含量和有关物质.     

模拟大气氮沉降对温带森林土壤微生物群落结构的影响

本研究以温带森林土壤为研究对象,设置野外模拟氮沉降实验,分析不同施氮形态和施氮水平对微生物群落结构的影响。试验设置对照(Control,0 kg N·hm~(-2)·a~(-1))、混合态低氮(NH_4NO_3,50 kg N·hm~(-2)·a~(-1))、混合态高氮(NH_4NO_3,150 kg N·hm~(-2)·a~(-1))、铵态氮低氮((NH_4)_2SO_4,50 kg N·hm~(-2)·a~(-1))、铵态氮高氮((NH_4)_2SO_4,150 kg N·hm~(-2)·a~(-1))、硝态氮低氮(NaNO_3,50 kg N·hm~(-2)·a~(-1))、硝态氮高氮(NaNO_3,150 kg N·hm~(-2)·a~(-1))7种氮处理,持续施氮3年后,运用磷脂脂肪酸(PLFA)法对土壤微生物群落结构进行测定。结果表明:在不同水平的氮添加下,土壤微生物总量、细菌、土壤革兰阳性细菌(G+细菌)、土壤革兰阴性细菌(G-细菌)和真菌的PLFA含量均随施氮水平的增加而升高;在不同形态的氮添加下,混合态氮添加提高了微生物总量、细菌、真菌和放线菌的PLFA含量。主成分分析(PCA)表明,除铵态氮低氮添加样地外,其他氮添加处理样地中的土壤微生物结构都发生了改变。这些结果表明,模拟大气氮沉降初期,氮添加会增加温带森林土壤微生物生物量,达到一定水平后会改变土壤微生物群落结构。     

黑磷纳米片光催化甲基橙降解机理

偶氮废水大量排放到环境中会对生态系统和人类健康造成严重威胁,发展偶氮染料废水的高效处理技术具有实际意义。光催化法由于工艺简单、处理彻底等优点具有应用前景。本研究利用液相剥离法制备黑磷纳米片(LBP),以甲基橙(MO)为例,考察LBP对偶氮染料的光催化能力;利用淬灭及荧光探针试验判断体系中参与反应的主要瞬态物种;结合液相色谱-质谱的产物鉴定结果,阐明光催化降解机理。结果表明: MO在酸性(pH=3.0)和碱性(pH=11.0)条件下的降解速率(k_obs)高于中性条件下(pH=7.0)。LBP光照下产生羟基自由基(·OH)进攻偶氮键使双键断裂生成中间产物,后者被·OH继续氧化,生成主要降解产物N,N-二甲基-4-(2-对苯甲基肼)苯胺、2-二甲胺基-5-((4-(二甲胺基)苯基)二氮基)苯酚和N,N-二甲基-4-硝基苯胺。     

哮喘患儿呼出气一氧化氮、1,25-二羟维生素D3及儿童哮喘控制测试评分与肺功能的相关性

目的:探讨哮喘患儿呼出气一氧化氮(FeNO)、1,25-二羟维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]及儿童哮喘控制测试(C-ACT)评分与肺功能的相关性。方法:选取2017年6月～2018年6月在我院就诊的86例哮喘患儿作为观察组,另选取同期于我院进行健康检查的86例健康儿童作为对照组。比较两组受试儿童1,25(OH)_2D_3浓度、FeNO、一秒用力呼气容积(FEV1)、呼气流量峰值(PEF)水平,比较不同病情哮喘患儿1,25(OH)_2D_3浓度、FeNO、C-ACT、FEV1、PEF水平,并分析哮喘患儿1,25(OH)_2D_3、FeNO、C-ACT与肺功能的相关性。结果:观察组1,25(OH)_2D_3浓度、FEV1、PEF水平低于对照组(P0.05),FeNO水平高于对照组(P0.05);随着病情加重,1,25(OH)_2D_3浓度、PEF、FEV1水平、C-ACT评分均逐渐下降,FeNO水平逐渐升高,不同病情患儿间比较差异均有统计学意义(P0.05)。哮喘患儿1,25(OH)_2D_3与FEV1、PEF呈正相关(r=0.912、0.873,P=0.006、0.008);C-ACT与FEV1、PEF呈正相关(r=0.472、0.366,P=0.036、0.032);FeNO与FEV1、PEF无相关(r=-0.035、-0.124,P=0.075、0.064)。结论:哮喘患儿1,25(OH)_2D_3浓度、C-ACT评分明显降低,FeNO水平明显升高,1,25(OH)_2D_3、C-ACT评分与肺功能呈正相关,但FeNO与肺功能无相关,C-ACT可用于哮喘患儿病情的预测,同时,通过提高患儿体内1,25(OH)_2D_3浓度可以改善其肺功能。     

RP-HPLC测定红丝线中香豆素的含量

采用反相高效液相色谱法,测定红丝线中香豆素的含量。色谱柱为ZORBAXXDB-C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:V(甲醇)∶V(0.01mol/L磷酸二氢钠溶液(pH5.4))=45∶55;流速:1mL/min;检测波长278nm。香豆素的线性范围为2.5~30mg/L(r=0.9998),回收率97.5%~101%。该法简便、准确,重复性好,适用于测定红丝线中香豆素的含量。     

种群模型参数辨识的一种方法

1、M(。,m)模型的建立定理.对于微分方程 dnx,(t)dtn+口zd卜lx,(t) dtn一1+…+a。_:dx:(t) dt否,x,(‘)+box:(‘)+b3x;(‘)x:(‘)+…+”。·,x:(‘)‘二(‘)给定样本数据{x;(k)1,k二1,2,…,N,i=I,2,…,m,则该方程的参数向量a=〔a:aZ…a。一,ib:bZ…b二+:〕丁可通过〔(AIB)T(A{B)〕一’(A{B)TC辨识,其中,C=〔△,x;(2),△nx:(了),…,△。x,(N)〕T陈华豪等万卷s2/△,一‘x工(2)△“一‘x:(3)…△x:(2)△x:(3)A二一……△一’x,(N),△x,(、){,111\x,(z),x贯(1),x,(1)x:(1),…,x;(了).x二(I)B二‘1‘“’,‘飞‘”,‘1.:员.,‘2‘2’,”…     

HPLC-MS/MS法快速测定人血浆中美利曲辛及生物等效性研究

目的:建立测定人血浆中关利曲辛浓度的高效液相串联质谱法(HPLC-MS/MS),用于氟哌噻吨美利曲辛片的生物等效性研究.方法:以Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(4.6mm× 150mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈(含1%甲酸):0.02mo·L-1甲酸铵水溶液(80∶20,V∶),流速:0.8mL·min-1;柱温:40℃,以醋酸乙酯:二氯甲烷(4∶1,V∶V)为提取剂.样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对美利曲辛(m/z 292.2→232.2)和阿米替林(m/z 278.1-91.0)进行测定.结果:美利曲辛的高(50μg·L-1)、中(20μg·L-1)、低(0.5μg·L-1)3个浓度的平均回收率分别为97.53%、104.03%和106.87%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为0.2μg·L-1.线性范围为:0.2～60μg·L-1,回归方程为:F=1.8691ρ+0.0555,r=0.9986(n=9),权重为1/ρ2.结论:该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究.     

验证细菌分布广泛性的实验

在《植物学》细菌一节中讲到,细菌的分布极广。但是,由于细菌的个体很小(一般只有1微米左右),学生不易看到,为了使学生能明确理解到细菌分布的广泛性,并养成爱清洁的习惯,设计了这个实验。现将实验过程及结果介绍如下: 实验用品培养皿、滤纸条、天平、量简、烧杯、电炉、pH试纸、蛋白胨、牛肉膏、琼脂、0.1N NaOH、0.1N HCl实验方法 1.做培养基称取蛋白陈2克、牛肉膏1克、琼脂4克,放入盛有200毫升水的烧杯中煮溶,用0.1N NaOH或0.1N HCl将pH值调至7.2,分装于五套培养皿中,高     

单猪屎豆碱（Monocrotaline）的晶体结构

从猪屎豆种子中提取分离,得到单猪屎豆碱(Monocrotaline)。经X射线衍射分析测定了晶体结构。该化合物属正交品系,空间群为P2_12_12_1,晶体学参数:a=10.072(7),b=11.431(1),c=13.560(2)A,V=1561.3(7)A,Z=4,D=1.384g·cm~(-1) ,μ(MoKa)=0.699mm~(-1),F(000)=696,M=325.36,分子式为C_(16)H_(23)NO_6。在1≤3a(1)收集1627个衍射点,最终偏差因子R和R_0分别为0.058和0.05232。     

大豆的综合利用[Ⅰ]从大豆油渣提取蛋白质的研究

提取豆油后的大豆残渣(简称大豆油渣),用1—12％的碱溶液提取数次,油渣和碱溶液的比例(W/W)为1/10,混合物在50℃的温度下搅拌30分钟,减压过滤,合并几次滤液(滤渣保留待分析),用0.5N的HCl溶液中和,用饱和(NH_4)_2SO_4溶液沉淀,减压过滤,用无离子水洗沉淀几次,真空干燥,粉碎过筛,得到有香味的褐黄色的粉末状产物.得率23.54％;产物的蛋白质的平均含量为71.46％. 分别用IR,UV,HLC和电泳等现代技术对上述产物进行了分析鉴定. 本文还讨论了pH,温度,时间和“配比”等因素对提取效率的影响.     

双指示剂催化动力学光度法测定中药中痕量铜

在pH 5.5的邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲介质中,以邻菲啰啉为活化剂,研究了痕量铜(Ⅱ)催化过氧化氢氧化甲基橙和次甲基蓝的指示反应。通过测定430 nm和670 nm两个波长处催化体系和非催化体系吸光度的变化,并优化反应条件,建立了一种测定痕量铜(Ⅱ)的新方法。结果表明,铜(Ⅱ)的质量浓度在0.004～0.160μg/mL范围内与△A有良好的线性关系,其中△A=△A_(430) △A_(670),线性回归方程为△A=0.1120c 0.0003,线性相关系数r=0.9957。该方法可用于中草药中所含痕量铜的测定,其结果与原子吸收光谱法相吻合。     

顶青霉D15木聚糖酶提纯及性质研究

经硫酸铵分级沉淀,BiO-gelP60凝胶过滤,和DEAE离子交换层析,从顶青霉D_15的麦麸培养物中提纯,得到4个具有凝胶电泳纯的木聚糖酶组分D_(x1)、D_(x2)、2_(x3)、D_(x4)、SDS—凝胶电泳法测得各个组分的分子量是:D_(x1),76000;D_(x2),4300;D_(x3),32500;D_(x4),29500。圆盘等电聚焦电泳法测得4个组分的等电点分别为4.50、5.70、5.30和5.20。热处理60分钟,D_(x1)、D_(x2),D_(x3)、D_(x4)的半失活温度分别为51.7℃、50.8℃、54.6℃和55.6℃。D_(x1)、D_(x4)在pH3.6—6.6稳定,D_(x2)和D_(x3)则在pH2.4—6.0稳定。各组分的A_(280)(1cm(?)mg/m1)分别是:D_(x1),0.97;D_(x2),1.46;D_(x3),0.98和D_(x4),1.07。     

4种外生菌根真菌对难溶性磷酸盐的溶解能力

以红绒盖牛肝菌(Xerocomus chrysenteron)、美味牛肝菌(Boletus edulis)、黄须腹(Rhizopogen luteous)和劣味乳菇(Lactarius insulsus)4种外生菌根真菌为对象,在纯培养条件下比较它们对4种难溶性磷酸盐[Ca_3(PO_4)_2、Ca_(10)(PO_4)_6(OH)_2、FePO_4·4H_2O和AlPO_4]的溶解能力,以探讨外生菌根真菌对难溶性磷酸盐的溶解作用及其影响因素.结果表明:(1)4种外生菌根真菌均能在Ca_3(PO_4)_2为唯一磷源的NBRIP平板上生长,但生长速率明显不同,且红绒盖牛肝菌生长速率最快.(2) 4种菌根真菌对4种磷酸盐的溶解能力存在显著差异,红绒盖牛肝菌发酵液可溶性磷含量大多显著高于对照和其他菌根真菌,对磷酸盐的溶解能力最强.(3)4种菌根真菌发酵液可滴定酸度(2.30～46.00 mmol·L~(-1))和pH(4.57～6.99)与其溶磷量分别呈极显著正相关(r=0.991**)和极显著负相关(r=-0.939**).(4)4种外生菌根真菌均能分泌乙酸、柠檬酸和反丁烯二酸,且它们分泌有机酸总量(14.14～1 537.46 mg·L~(-1))与其溶磷量呈显著正相关(r=0.998*).研究发现, 4种外生菌根真菌发酵液可滴定酸度、pH和有机酸的种类与含量是影响其溶解Ca_3(PO_4)_2能力的主要因素;红绒盖牛肝菌的溶磷能力较强,具有应用于中国土壤缺磷地区造林的潜力.     

核酸降解物在水稻生产上的应用及其作用机理的研究——Ⅰ.核酸降解产物的增产效果及其有效组分的初步研究

在苗期应用核酸降解物可以促进水稻在插秧后早发增蘖,获得增穗增产的效果。核酸降解物作用于水稻对形态影响不大,但能促进根系发育,提高根系对同位素标记磷(~(32)P)酸盐的吸收能力,对齐穗期稻株地上部分光合作用和呼吸影响不甚明显。由于核酸的种类和降解方法不同,核酸降解物的组成有差异,对有效组分的初步研究,说明核酸降解物的主要有效成分为核苷酸和碱基,细胞分裂素也有一定的效果,但不起主导作用。因此我国以综合利用所生产的白地霉为原料制造核酸降解物,应用于水稻增产一般可以达到5～8%,是一个多快好省的途径。     

热带雨林和亚热带季雨林灌木光合作用对水分胁迫的反应

生长在热带植物温室的热带雨林植物Piper hispidum和亚热带季风常绿阔叶林植物九节(Psychotria rubra),在灌水、环境的CO_2浓度和26℃下,饱和光强的最大光合速率(PN)分别为6.3和9.8μmol·m~(-2)·s~(-1)。在低的叶片/空气水蒸汽压陡度(△w=10毫巴·巴~(-1))情况下,每降低叶片水势(ψ)1巴,P.hispidum的PN降低0.38μmol·m~(-2)·s~(-1);当ψ为-8巴时,PN随△w增高而降低,其关系PN=7.02-0.06△w(r~2=0.7);ψ为—13巴时,PN与△w关系的直线斜率变小(0.02)。对于九节,PN对△w变化的反应更为敏感。在ψ为-8.75巴时,PN=11.16—0.1△w(r~2=0.65)。在高ψ(-8和-8.75巴)情况下,两种灌木的气孔传导率(g)随△w的变化而相近;但ψ降低时,九节的g对△w的变化反应较P.hispidum敏感。ψ降低导致两种灌木的水分利用效率(WUE,μmol·m~(-2)·s~(-1)CO_2同化/mmol·m~(-2)·s~(-1)水散失)增高;而△w增高,WUE降低。九节的PN对△w增高的反应较P.hispidum敏感。     

抗生素保存褐马鸡粪便分泌型免疫球蛋白A的时效性研究

粪便免疫球蛋白是衡量野生动物健康状况及生存状态的有效手段之一,其中粪便的保存问题是关键。为探索抗生素对粪便分泌型免疫球蛋白A(SIg A)的保存时效性,采用酶联免疫吸附法对4种常用抗生素(利福平、四环素、卡那霉素和庆大霉素)的3种不同浓度(1μg·m L~(-1)、25μg·m L~(-1)、50μg·m L~(-1))保存的褐马鸡Crossoptilon mantchuricum粪便SIg A的含量进行了测定。结果表明,25μg·m L~(-1)的利福平保存的褐马鸡粪便SIg A效果最佳,其次是50μg·m L~(-1)的四环素和50μg·m L~(-1)的卡那霉素,庆大霉素保存效果最差。     

氮肥配施生化抑制剂组合对黄泥田土壤氮素淋溶特征的影响

揭示尿素类肥料添加生化抑制剂组合后,在黄泥田土壤中硝态氮(NO~-_3-N)和铵态氮(NH~+_4-N)的淋溶损失规律。采用室内土柱淋溶培养试验,研究脲酶抑制剂N-丁基硫代磷酰三胺(NBPT)和硝化抑制剂2-氯-6-(三氯甲基)吡啶(CP)单独添加及配合施用对尿素和尿素硝铵(300 kg N/hm~2)中氮(N)素在土体中淋溶损失的影响。结果表明:尿素和尿素硝铵处理淋溶液中NH~+_4-N和NO~-_3-N浓度均呈先升后降的变化趋势,而出峰时间不一。NH~+_4-N和NO~-_3-N淋失量随着时间的延长,处理间差异逐渐变大。NBPT处理可以减缓尿素水解,有效抑制NH~+_4-N生成,延缓其出峰时间,减少NH~+_4-N流失;CP处理可以有效抑制NH~+_4-N向NO~-_3-N转化,减少NO~-_3-N流失。与单独添加NBPT和CP处理相比,两者配施对N素淋溶损失有明显的协同抑制效果在黄泥田土壤中,既能减缓尿素水解,保持土壤中较高NH~+_4-N含量,又能降低淋溶液中NO~-_3-N浓度。培养结束时(第72天),UAN处理中NO~-_3-N、NH~+_4-N、矿质态N淋失总量及硝化率较U处理高34.39%、5.32%、31.72%和15.71%。U+NBPT、U+CP和U+NBPT+CP处理较U处理分别显著降低NO~-_3-N淋失总量达15.58%、114.77%和73.45%;UAN+NBPT、UAN+CP和UAN+NBPT+CP处理较UAN处理分别显著降低达15.88%、54.87%和37.46%。不同处理NO~-_3-N淋失总量大小表现为:UAN UAN+NBPT U UAN+NBPT+CP U+NBPT UAN+CP U+NBPT+CP U+CP CK。在一定施肥量条件下,NBPT和CP单独施用或配施均可降低黄泥田土壤中NO~-_3-N累积淋失量。对各处理淋溶液中NO~-_3-N淋失量(y)随时间(x)的变化进行拟合,其中以线性方程(y=ax+b)的拟合度较高,且各抑制剂处理a、b值均存在明显差异。总体认为,在黄泥田土壤中施用CP及其与NBPT配施可以显著降低土壤NO~-_3-N淋溶损失,减少N素淋失风险,提高肥料利用率。