中国丙型肝炎病毒基因型研究新进展

为了进一步了解中国丙型肝炎病毒基因型感染状态 ,我们建立了 5′ ＮＣＲＡＢＣ程序酶切分型法 :首先采用ＲＴＰＣＲ技术 5′ ＮＣＲ扩增ＨＣＶＲＮＡ阳性样品中的ｃＤＮＡ ,然后按照ＡＢＣ程序进行分型 ,Ａ应用ＢＨＨ(ＢｓｒＢⅠ ,ＨａｅⅡ ,ＨｉｎｆⅠ )复合内切酶消化 5′ ＮＣＲｃＤＮＡ ,Ｂ应用ＢｓｔＵⅠ消化 ,Ｃ应用ＨａｅⅢ消化 ,电泳检测片段大小。应用该方法对临床采集的ＨＣＶＲＮＡ阳性血清进行分型 ,在国内首次发...     

豌豆5SrRNA的cDNA克隆、全序列及结构特征分析

以赤霉素（ＧＡ）处理后的Ｇ２豌豆为材料,构建了一个２．０×１０６的ｃＤＮＡ文库,用随机筛选法从该ｃＤＮＡ文库中得到一个完整的ｃＤＮＡ．其中１１１５ｂｐ全序列分析表明,它编码了豌豆５Ｓ核糖体ＲＮＡ（５ＳｒｉｂｏｓｏｍａｌＲＮＡ,５ＳｒＲＮＡ）,基因内部存在着与核糖体蛋白Ｌ５及５ＳｒＲＮＡ结合蛋白（５ＳｒＲＮＡＢｉｎｄｉｎｇＰｒｏｔｅｉｎ）同源的区段,这些同源区段是蛋白与ＲＮＡ结合的位点．基因内部还存在着大量的重复序列．     

HCV5＇端非编码区cDNA的体外转录

采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）从广东省一例慢性丙型肝炎病人血清中获得丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５＇端非编码区（５＇ＮＣＲ）３０２ｂｐ的ｃＤＮＡ片段,经补齐和提纯后插入ｐＵＣ１９质粒,获得的重组体ｐＵＮ进行序列测定。将ｐＵＮ的目的基因亚克隆进体外转录载体ｐＳＰＯＲＴＩ多克隆位点的ＥｏｏＲＩ和ＰｓｔＩ切点之间,所得重组体ｐＳＮ线性化后由Ｔ＿７ＲＮＡ多聚酶及ＳＰ６ＲＮＡ多聚酶引导体外转录反应,产物经凝胶电泳及特异引物ＲＴ－ＰＣＲ,证实ＳＰ６引导的是正义ＲＮＡ,Ｔ７合成的是反义ＲＮＡ,其大小分别力４２９ｂｐ和３６２ｂｐ。并证实所得ＲＮＡ力ＨＣＶ５＇ＮＣＲｃＤＮＡ转录而来。获得的ＨＣＶ５＇ＮＣＲｃＤＮＡ和ＲＮＡ在常规逆转录和ＰＣＲ步骤中用于设立有效的模板对照,对消除假用性及评估试剂有重要意义。同时,ＨＣＶ５＇ＮＣＲ体外转录载体的构建可用于制各ＲＮＡ探针和反义ＲＮＡ,改进后还可作为定量ＰＣＲ的竞争性模板。     

HCV5′端非编码区cDNA的体外转录

采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）从广东省一例慢性丙型肝炎病人血清中获得丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５′端非编码区（５′ＮＣＲ）３０２ｂｐ的ｃＤＮＡ片段,经补齐和提纯后插入ｐＵＣ１９质粒,获得的重组体ｐＵＮ进行序列测定,将ｐＵＮ的目的基因亚克隆进体外转录载体ｐＳＰＯＲＴＩ多克隆位点的ＥｃｏＲｆｆＩ和ＰｓｔＩ切点之间,所得重组体ｐＳＮ线性化后由Ｔ７ＲＮＡ多聚酶及ＳＰ６ＲＮＡ多聚酶引导体外转录反应,产物     

蓖麻蚕rDNA基因核骨架结合区在酵母中的自主复制功能

蓖麻蚕核糖体ＲＮＡ基因（ｒＤＮＡ）５′－非转录间隔区有长约１ｋｂ的核骨架结合区ＳＡＲ（ｓｃａｆｏｌｄ－ａｓｓｏｃｉａｔ－ｅｄｒｅｇｉｏｎ）［１］。本文对该ＳＡＲ元件的酵母自主复制功能进一步研究,证明该ＳＡＲ５′端６８８ｂｐ含有１２个ＡＣＳ（ＡＲＳ的核心序列）同源序列,但无ＡＲＳ活性,而其３′端仅３个ＡＣＳ同源序列,但对酵母的转化率比全片段还高４０～５０倍。体外结合实验证明,蓖麻蚕ｒＲＮＡ基因的ＳＡＲ能专一地同酵母核骨架结合,提示ＡＲＳ的功能体现与核骨架结合紧密相关。ｒＲＮＡ基因ＳＡＲ与ＡＲＳ的功能在进化上可能是很保守的。在此基础上可进一步分析ＳＡＲ中与ＤＮＡ复制相关的正调及负调元件。     

大鼠4.5S RNAs的cDNA克隆与序列分析

利用ＲＴ－ＰＣＲ方法,首次从大鼠肝脏细胞总ＲＮＡ中扩增出４．５Ｓ ＲＮＡｓ的ｃＤＮＡ。该ｃＤＮＡ被克隆到ｐＧＥＭ３Ｚｆ（＋）质粒上,经酶切电泳鉴定,然后测序。与报道的小鼠和仓鼠４．５Ｓ ＲＮＡｓ序列进行了比较研究,并对该分子的结构特点进行了初步分析。     

鸡贫血病毒SJ1株DNA的分子克隆

通过ＰＣＲ方法扩增,用ｐＵＣ１１９和ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ质粒载体分段克隆了山东省分离的ＳＪ１株的全病毒ＤＮＡ。限制性内切酶酶切分析结果显示其与国际标准株的酶谱相似     

人端粒酶RNA基因的克隆与鉴定

以人血基因组ＤＮＡ为模板,合成两段２０个寡聚核苷酸为引物,经过ＰＣＲ扩增,得到４８０ｂｐ的片段,克隆到ｐＭＤ１８－Ｔ载体中,经电泳、酶切、ＰＣＲ鉴定后测定序列。序列分析表明氙克隆的人端粒酶ＲＮＡ（ｈｕｍａｎ ｔｅｌｏｍｅａｓｅ ＲＮＡ,ｈＴＲ）基因含有４８０ｂｐ,包括约４５０ｂｐ的编码模板区主序列和约３０ｂｐ的上游调控区序列,其中模板区的１１个核苷酸（５’－ＣＵＡＡＣＣＣＵＡＡＣ－３’）合成端粒亚     

曼氏血吸虫发育过程中的基因组DNA变异

曼氏血吸虫（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａｍａｎｓｏｎｉ）和日本血吸虫（Ｓ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ）成虫和曼氏血吸虫尾蚴基因组ＤＡＮ经限制性内切酶ＢａｍＨＩ消化后,分别与＾３２ｐ－ｄＣＴＰ标记的来源于核糖体ＤＮＡ的ＰＳＭＨＣＲ５、ＰＳＭＨＣＲ４ＰＳＭ８８９探针杂交,曼我血吸虫尾蚴和成虫在ＰＳＭＨＣＲ４杂交带型的１．６－２．８ｋｂ之间,存在有明显不同的次杂带;而ＰＳＭＨＣＲ５和ＰＳＭ８８９的杂交带型,无明显差异     

GENUS ANTROPHYUM KAULF.FROM CHINA AND NEIGHBORING REGIONS

ＧＥＮＵＳＡＮＴＲＯＰＨＹＵＭＫＡＵＬＦ．ＦＲＯＭＣＨＩＮＡＡＮＤＮＥＩＧＨＢＯＲＩＮＧＲＥＧＩＯＮＳＸ．Ｃ．ＺＨＡＮＧ（Ｔｈｅｈｅｒｂａｒｉｕｍ（ＰＥ）,ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ,ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ,Ｂｅｉ...     

褐家鼠线粒体DNA遗传多态性的研究

通过碱变性法提取线粒体ＤＮＡ,用地高辛标记的探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交限制性酶切多态性（ＲＦＬＰ）分析,研究中国家鼠Ｒａｔｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ遗传多态性。采用ＡｐａⅠ、ＡｖａⅠ、ＢａｎＨＩ、ＢｃｌⅠ、ＢｇｌⅠ、ＣｌａⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＥｃｏＲⅤ、ｈｉｎｄⅢ、ＰｖａⅡ、ＳｃａⅠ和ＸｂａⅠ等１２种限制性内切酶分析来自我国８个地区２６只褐家鼠的线粒体ＤＮＡ,共检出２０种限制性态型和１１种ｍｔＤＮＡ单倍     

中国对虾cDNA文库的构建

中国对虾ｃＤＮＡ文库的构建ＣＯＮＳＴＲＵＣＴＩＯＮＯＦｃＤＮＡＬＩＢＲＡＲＹＯＦＳＨＲＩＭＰＰＥＮＡＥＵＳＣＨＩＮＥＮＳＩＳ（ＣＲＵＳＴＡＣＥＡ,ＤＥＣＡＰＯＤＡ）关键词中国对虾ｃＤＮＡ文库构建ＫｅｙｗｏｒｄｓＰｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ,ｃＤＮ...     

点状产气单胞菌脯氨酰内肽酶基因克隆与序列测定

点状产气单胞菌点状亚种（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｐｕｎｃａｔａ ｓｕｂｓｐ．ｐｕｎｃｔａｔａ）具有脯氨酰内肽酶（ｐｒｏｌｙｌ ｅｎｄｏｐｅｐｔｉｄａｓｅ ＰＥＰ）活性。将其染色体ＤＮＡ有Ｅｃｏ ＲⅠ部分酶切后回收８－１６ｋｂ的ＤＮＡ片段,与ＥｃｏＲⅠ消化载体ｐＵＣ１８连接后转化Ｅ．ｃｏｉｌ ＤＨ５α,用该酶的专一性底物Ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ－Ｇｌｙ－β－ｎａｐｈｔｈｙｌａｍｉｄｅ从质粒库中     

应用生态学报第5卷（1994）关键词索引

应用生态学报第５卷（１９９４）关键词索引ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＰＰＬＩＥＤＥＣＯＬＯＧＹＶｏｌ．５（１９９４）ＫＥＹＷＯＲＤＩＮＤＥＸＡＡｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｌｉｃｏｓｕｓｉｇｌｏｏ５（３）：２３７Ａｇｒｏｅｃｏｓｙｓｔｅｍ￥ｋ４...     

黄脊蛇肺微血管的扫描电镜观察

黄脊蛇肺微血管的扫描电镜观察ＥＭＯＢＳＥＲＶＡＴＩＯＮＯＮＴＨＥＬＵＮＧＭＩＣＲＯＶＡＳＣＵＬＡＴＵＲＥＯＦＴＨＥＳＮＡＫＥＣＯＬＵＢＥＲＳＰＩＮＡＬＩＳ关键词黄脊蛇肺微血管构筑扫描电镜ＫｅｙｗｏｒｄｓＣｏｌｕｂｅｒｓｐｉｎａｌｉｓ,Ｌｕｎｇ,Ｍｉｃ...     

TWO NEW SPECIES FROM TRICHOSANTHES（CUCURBITACEAE）

ＴＷＯＮＥＷＳＰＥＣＩＥＳＦＲＯＭＴＲＩＣＨＯＳＡＮＴＨＥＳ（ＣＵＣＵＲＢＩＴＡＣＥＡＥ）ＹｕｅｈＣｈｕｎ－ｈｓｉＨｕａｎｇＬｕ－ｑｉＣｈｅｎｇＣｈｉｎｇ－ｙｕｎｇ〔ＡＢＴＲＡＣＴ〕ＴｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｅｓｒｅｆｅｒａｃｔａＹｕｅｈｅｔＬ．Ｑ．Ｈ...     

小鼠4.5S RNA逆转座子对Luc基因表达的影响

利用ＲＴ－ＰＣＲ方法,从小鼠肝脏组织总ＲＮＡ中扩增出４．５ＳＲＮＡ的ｃＤＮＡ。该ｃＤＮＡ被克隆到ｐＧＥＭ３Ｚｆ（＋）质粒上,酶切鉴定并测序。然后将该序列插入以Ｌｕｃ基因作为报道基因的表达载体ｐＳＶｌｕｃ２０的ＰｖｕⅡ位点,构建了含４．２ＳＲＮＡ逆转座子的表达载体ｐＳＶｌｕｃ２０－４．５Ｓ。脂质转染法将表达载体导入小鼠骨髓瘤细胞ＮＳ－１、ＳＰ２／０和人乳腺癌细胞Ｂｃａ６１。结果表明,小鼠４．５ＳＲＮ     

黄瓜花叶病毒山东株（CMV—SD）RNA2全和cDNA克隆的构建及全序列分析

分别利用５’ＲＡＣＥ和３’ＲＡＣＥ确定了ＣＭＶ－ＳＤＲＮＡ２的５’和３’未端序列,在此基础上,利用ＲＴ－ＰＣＲ得到了ＲＮＡ２的５’端一半的ｃＤＮＡＤＱ ＢＴＧ Ｐｃ２５和３’端一半的ｃＤＮＡ克隆ＰＣ２３,并通过拼接构建了ＲＮＡ２全长ｃＤＮＡ克隆ＰＣ２Ｆ。     

磁场对质粒pBR322DNA的影响

讨论了经５００ｍＴ、９００ｍＴ、１２００ｍＴ、１５００ｍＴ恒磁场作用后的质粒ｐＢＲ３２２ＤＮＡ与Ⅱ型限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠＳａｌⅠ、ＰｓｔⅠ、ＰｕｖⅡ、ＴａｑⅠ、ＢｇｌⅠ、ＲｓａⅠ、ＨｉｎｆⅠ、ＡＰａⅠ、ＫｐｎⅠ等的单酶解、双酶解及多酶解反应。从琼脂糖电泳分离酶解片段的结果,发现经磁场作用过的ｐＢＲ３２２ＤＮＡ在３３６１—６３１ｂｐ的区段内产生了一个被ＨｉｎｆⅠ识别的新序列ＧＡＮＴＣ,证明了磁场作用能引起ＤＮＡ点突变。     

INSTRUCTIONS TO CONTRIBUTORS OF ZOOLOGICAL RESEARCH

ＩＮＳＴＲＵＣＴＩＯＮＳＴＯＣＯＮＴＲＩＢＵＴＯＲＳＯＦＺＯＯＬＯＧＩＣＡＬＲＥＳＥＡＲＣＨ￥／／１．ＺｏｏｌｏｇｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ，ｉｓｅｄｉｔｅｄｂｙｔｈｅＫｕｎｍｉｎｇｉｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＺｏｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍ...