草履虫的纤毛染色方法

(一)杀死固定 1.固定液配制酒精95％5毫升,苦味酸(饱和液)15毫升,冰醋酸20毫升,甲醛60毫升,蒸馏水100毫升。将上面四种药物混合后,再加等量的蒸馏水稀释,即成200毫升的固定液。如要少配或多配,可依次按1∶3∶4∶12∶20的比例进行。此固定液可长期保存,效果不变,也适应其他原生动物和动物组织的固定。 2.固定的方法用吸管吸取培养草履虫的烧杯边缘的培养液,可得到高浓度的草履虫,投入离心管中,然后以9∶1的比例加入固定液(即草履虫培养液9份,固定液1     

草履虫分离器的制作和使用

在制作草履虫的玻璃片标本或实验材料的时候,常因其中混有各种原生动物、藻类等而影响观察和使用。为了把草履虫和“它们”分离开,提高玻璃片标本的使用效果,我们根据草履虫具有趋向负电极的特性,利用3毫米厚的有机玻璃片和三氯甲烷,粘合制作一种“草履虫分离器”,使用效果比较好。“草履虫分离器”的制作尺寸详见附图。草履虫分离器的使用法:1.把分离器放在平稳的桌子上;2.用玻璃腻子把分离器的通道     

失重对草履虫生长和繁殖的影响

在地球引力场内,草履虫能够正常生长,当它遇到恶劣条件时(如低温、缺水等),就形成胞囊来保护自己。那么,在无引力的情况下,草履虫能否正常生长繁殖呢?本实验用离心、干燥法保存草履虫胞囊,密封瓶盛稻草水培养草履虫,利用小灯泡为革履虫供光、供热,用福尔马林固定实验结果,在航天飞机返回后进行镜检计数,以确定失重情况下草履虫的生长繁殖情况。     

一种快速观察四膜虫纤毛的方法

器材与药品离心机,三用水箱,天平,染色缸。席夫试剂(schiff reagent),漂白液,乙醇二甲苯,磷酸缓冲液(PH7.2)。亮绿(溶剂是95％的乙醇) 步骤 1.取四膜虫浮液3—5ml,离心5分钟(800—1000转/分),去上清液,留沉淀物0.3—0.5ml。 2.用PH7.2磷酸缓冲液洗涤,离心5分钟(800—1000转/分),去上清液,留沉淀物0.3—0.5ml。 3.涂片。用甲醇固定液固定。 4.水解处理。室温下先在1NHCl中处理1分钟,后移至1NHCl(60℃)中处理7—9分钟(水解     

大鼠睾丸组织固定法的优选研究

目的选择一种最优势、合理的固定方式以提高对睾丸组织制片效果,以配合不同种类的科学研究。方法选用10％甲醛溶液、NBF—Bouin’s、Bouin’s和改良Davidson’s四种不同的固定液对大鼠睾丸进行充分固定后,制作石蜡切片,进行HE染色,比较不同固定液中的睾丸组织学形态的差异;利用糖原特殊染色（PAS）,探讨不同固定液对睾丸糖原观察的影响;采用免疫组织化染色,测评睾丸组织内雄激素受体的固定效果。结果改良Davidson’8固定液较NBF—Bouin’s引起的曲细精管萎缩轻,形态更为清晰,用免疫组织化学方法检测雄激素更为敏感,并且改良Davidson＇s固定液在需要对精子发生进行分期时,其PAS染色的效果与Bouin＇s液固定后等同。结论与苴守圈常浦相№曲冉David0Rnn浦对女宙奥由的圈索特罩掂杯     

草履虫的几种培养方法

实验室培养草履虫除用稻草液培养外,还可选用下述方法进行培养。1、麦粒液培养: 在每100毫升煮沸后冷却的清水中,加入5粒麦粒。将麦粒液倒入大口瓶内暴露于空气中,24小时后接入草履虫。实验     

草履虫大量材料集中制备与制片

通过系列创新措施,滤筛操作、预固定及固定、虫体纯化、接合生殖及横分裂生殖筛选富集,大批量虫体集中染色、脱水、透明等处理步骤进行草履虫玻片标本制作。采用滤筛操作法,比传统离心法具有能够一次性获得大量虫体材料和操作简便快速等优点。     

培养草履虫的一点经验

取陈旧稻草垫子的稻草,剪成0.5—1寸长,放在150毫升的小烧瓶内,加5克葡萄糖,再放100毫升凉开水(经煮沸10—15分钟后晾凉的),用纱布盖好,放在恒温箱内培养,在23℃左右,经5—7天就可培养出草履虫。此时将表面白膜移开,用肉眼即可观察到草履虫的白色小点。培养液中加葡萄糖的作用是使培养液中增加营养,有利于细菌和其他微生物的繁殖,为草履虫提供了充足的饵料。同样道理,在培养液中加入维生素,草履虫会生长得更好、更大。     

离心、超滤技术在甲型肝炎减毒活疫苗生产工艺中的应用

采用离心和超滤技术进行甲型肝炎减毒活疫苗生产 ,达到提高病毒的收获率。将含有甲型肝炎病毒的细胞收获液离心 ,上清进行超滤浓缩 ,回收病毒 ,病毒回收效果好。实验证明 ,该方法适合规模化生产。     

草履虫保种的简便方法

中学生物学第一个实验就是观察草履虫,而且每年只用一次草履虫,用其它方法保留草履虫当然可以,但一般都比较费时费力,随用随采也比较麻烦。在工作中我摸索出了一种草履虫的简便保种方法,具体做法是: ①先在富含有机质比较丰富的水沟中采回草履虫,用微吸管分离,提纯培养。②将100克园土过筛装入三角瓶内,加水100ml,用棉塞封好瓶口,在锅内蒸30分钟杀死土壤中的原生动物和某些藻类,冷却后备用。③将纯养的草履虫接种于三角瓶内,室内培养一天后转入冰箱冷藏室内保种。一年     

盐生肉质草本植物海马齿叶片石蜡切片简易方法

海马齿是海边盐生肉质草本植物,由于叶片的肉质化,传统石蜡切片制作路线不能制作出结构完整,效果较好的切片.本实验以传统的石蜡切片方法为基础,在固定方法选择,脱水时间控制,包埋温度,染色等方面做了适合海马齿叶片特点的改良,固定方法采用戊二醛固定液固定24 h,并洗脱;脱水每级梯度时间为1 h,包埋温度在100℃,染色方法采用固绿染色法.结果表明:采用这种改良的方法可以制作出染色清晰,组织结构完整的海马齿叶片切片.这对其它肉质化植物的石蜡切片制作有着借鉴作用.     

草履虫实验中的两点经验

1.在实验观察时,常常难以从培养液中吸到大量的草履虫。以往的书籍介绍用离心的方法或自培养液上层表面吸取,但效果总是不佳,学生更难做到适度。若在无底试管或玻璃管的一端,包上一小块细密的丝绢或的确良布,用以过滤培养液,使草履虫滤集在管底的绢或布上,然后小心地取下翻转之,使     

草履虫保种的简便方法

1. 先在含有机质比较丰富的水沟中采回草履虫,在体视显微镜下用微细吸管将草履虫分离,培养于稻草营养液中。2. 将肥沃的园土过筛,称取100g 装入三角瓶中,加水100ml,用棉塞封好瓶口。在普通锅内蒸30min,杀死土壤中的原生物和其它藻类,冷却后备用。     

超滤过结合密度梯度离心纯化鲍曼不动杆菌噬菌体方法的建立

目的 探讨获得低浓度内毒素和高滴度鲍曼不动杆菌噬菌体的方法,为制备安全的噬菌体生物制剂提供参考.方法 用可截留100 kD以上分子量的超滤离心管浓缩噬菌体裂解液并滤出分子量约为10 kD的内毒素,然后用蔗糖密度梯度离心纯化噬菌体浓缩液;分别测定超滤前、超滤后和纯化后的噬菌体滴度,采用鲎试验测定超滤前后内毒素的浓度,通过SDS-PAGE分析超滤前后和纯化后噬菌体蛋白的纯度.结果 经超滤离心法噬菌体滴度从3.9×1010 PFU/mL提高至1.68×1012PFU/mL,并可去除99.2％的内毒素;超滤过结合密度梯度离心后的SDS-PAGE可清晰呈现7种蛋白,分子量为29～100 kD.结论 超滤过结合密度梯度离心是一种简便、快速浓缩和纯化噬菌体的方法,并可有效地去除裂解液中的内毒素.     

蝗虫性细胞减数分裂制片方法的改良

最近,我室采用分离、滴片方法观察蝗虫性细胞减数分裂,取得良好效果。现介绍如下。 1.取材在麦熟和稻熟季节采集蝗虫。取其精巢固定于卡诺液中0.5—1小时。去固定液,用95％酒精洗3次,移于70％酒精中,置于低温下可长期保存。 2.制片方法 (1)用眼科镊把精巢取出,装入瓶中,加入碎玻璃反复振荡,使组织捣碎。 (2)用吸管吸取捣碎液放入离心管内,以1000转/分的速度离心3—5分钟。去上清液,     

草履虫中的内共生现象

双小核草履虫细胞质和细胞核内含有9种颗粒状细菌共生体,尾草履虫细胞核内含有3种全孢螺菌共生体,绿草履虫细胞质中含有小球藻共生体.双小核草屐虫中的某些细菌共生体能感染无共生体草履虫,具有感染能力的全孢螺菌和小球藻也能成功地进入到尾草履虫或绿草履虫细胞内,成为相应草履虫的内共生体.并报告了这几种草履虫中发生的互惠共生现象,以及绿草履虫中宿主与共生体间的"生态调节"现象.     

用干玉米穗培养草履虫

经多次实验,我们发现用干玉米穗(干的玉米雄花穗)培养草履虫效果较好。方法是:将干玉米穗剪成寸长,取3克放入烧杯内,用自来水冲洗2遍。然后加200毫升水,再煮沸10分钟。放凉后,接种草履虫4—5个,盖上纱罩,置于20—30℃的室温下培养。2—3天后即有大量草履虫出现。此法比常用的稻草培养法有许多优点:(1)培养速     

草履虫活体观察实验的一点改进

草履虫是原生动物的典型代表 ,在水里游动非常迅速。要观察活体草履虫必须设法将其固定。一般的实验指导书上通常都是用棉纤维来固定 ,棉纤维直接取于棉絮。这样所取的棉纤维不易分开 ,在显微镜下看到的仅是黑的一片 ,根本看不到草履虫 ,如果作如下改进效果较好。实验室里擦镜纸是必备的 ,擦镜纸既薄又细腻 ,纤维与纤维之间容易分开。我们可以就地取材 ,在载玻片上用镊子刮下少许擦镜纸上的纤维 ,再在刮下的纤维上滴上草履虫培养液 ,然后在显微镜下观察。可以看到在显微镜下一根根纤维纵横交错 ,把草履虫的活动空间隔成一间间小室。草履虫活…     

一种裸藻的扫描电镜观察

关于裸藻（Euglenasp．）的形态、生态等特征已有报道［1］,但该种探藻的分类定种及其生理生化特征尚需作进一步的研究。作者采用扫描电镜对这种裸藻的外部形态、细胞器及繁殖等作了进一步观察。1材料与方法实验所用材料取自沁阳市鱼种场,由于在水华盛期取材,水华内的裸藻一般很纯,不必进一步分离、浓缩和清洁即可用于制样。用吸管吸取水华浮膜上层较红的部分置于固定器皿中,迅速加固定液【＼饱和升汞1份十2％俄酸6份）固定lh;然后蒸馏水洗4次,每次15ndn,以除去固定液．用15—100％的梯度酒精脱水,每次10—15Ann,醋酸异戊酯置换l…     

细胞蜡块制作方法改良及在浆膜腔积液临床病理分析中的应用

目的研究并分析浆膜腔积液经多次反复离心及加固定液离心制作成细胞蜡块的成功率,并结合相关免疫细胞化学染色以验证其诊断的价值。方法选取临床怀疑恶性胸腹水的患者30例,胸腹水标本接收后放置半小时,倒掉部分上清液,剩余液体分批多次转移至同一个10 ml离心管中离心5min,2000 r/min、弃上清(一般反复转移离心5次),再加入10%的中性甲醛,2000 r/min离心5min,弃上清,此时细胞沉渣已经成小块状,取出块状细胞用滤纸包裹,装入包埋盒,放入10%的中性甲醛固定1h,然后脱水、浸蜡、包埋,制作成细胞蜡块、切片、HE染色。镜下观察细胞形态学,并结合相关的免疫细胞化学染色标记,确定胸腹水的性质及细胞来源。结果通过对细胞蜡块制作过程的改良,30例胸腹水细胞蜡块制作成功率达到100%,结合免疫细胞化学检测,对胸腹水的诊断率达到100%,且简单、经济、实用性强。结论通过对细胞蜡块制作过程的改良,并结合相关的免疫细胞化学染色检查有助于诊断晚期难以取得病理活检组织的浆膜腔积液的性质及来源,尤其针对基层病理科而言,该方法既实用又经济,值得推广。