葡萄花药三倍体植株的倍性鉴定

用卡宝品红染色法检查格列那什二倍体葡萄(Vitis vinifera var. Cre nache)花药再生植株的染色体, 并用UNICHRO软件对其数目及长度进行了测量。结果表明,这些花药植株根尖中染色体组型为2n=3x=57的细胞平均占观察细胞总数的86.5%,来自不同花药的再生殖株均为三倍体。讨论了这些植株的可能来源。 Abstrart:The chromosome number in the root tip of triploid plants regenerated from anther culture of diploid Vitis vinifera var.Grenache were examined with Carbolfuchsin staining method and the length of chromosomes were measured with UNICHRO package.The results show that average pecentage of cells which have a karyotype for 2n=3x=57 in root tip of pollen plants were 86.5% in the total number of cells observed,the plants regenerated from different anthers are triploid.Their possible origin is discussed.     

应用胚挽救技术获得三倍体柑橘植株

以3个柑橘异源四倍体体细胞杂种(即四倍体粗柠檬与哈姆林甜橙体细胞杂种,简称"HR";酸柚与粗柠檬体细胞杂种,简称"SR";墨西哥来檬与伏令夏甜橙体细胞杂种,简称"KV")为父本,分别与二倍体单胚性沙田柚进行有性杂交,在有性胚还没有完全败育以前,通过胚抢救技术进行三倍体植株培养(以四季柚花粉亲本为对照)。结果表明,处理的杂交组合直接成苗率极显著低于对照(P0.01),其中又以沙田柚×HR组合成苗率相对较高,达10.1%;较适合瘪籽沙田柚幼胚离体培养的培养基是MT+GA31.0mg/L+蜂皇浆200mg/L+水解乳蛋白250mg/L+蔗糖30g/L+琼脂0.7%;流式细胞分析仪检测结果显示,本试验成功获得了柑橘三倍体植株。     

以异源四倍体体细胞杂种为父本杂交培育三倍体柑桔植株的研究

以 3个柑桔原生质体融合而来的四倍体体细胞杂种为父本 ,与二倍体单胚性种柚子 (Citrusgrandis)以及单多胚混合型品种“华农本地早”桔 (C.reticulata)有性杂交 ,授粉后 90 d,发现种子干瘪 ,大部分种子的胚败育。将干瘪种子在 MT附加 1mg/L GA3 或 50 0 mg/L麦芽浸出物的培养基中 ,经培养抢救 ,有 2 5.6%的种子萌发成苗或继续进行胚的生长 ,后者进一步诱导能形成丛芽 ,经试管嫁接或诱导生根形成完整植株。共获得 6个组合 73棵完整植株 ,染色体数检查表明 ,2 0株为三倍体 (2 n=3x=2 7) ,32株为二倍体 (2 n=2 x=18) ,8株为非整倍体 ,其它 13株还有待于进一步检查。     

转多基因水稻植株的获得

将2-3个外源目的基因与筛选标记基因hpt连在同一个载体上,用基因枪法对1个梗稻品种和4个和稻品种进行了转化。梗稻中花8号转化频率最高为56.4%,和稻七丝软占、特青、奇妙香、九六零转化频率分别为6.4%,2.5%,2.8%和1.7%。分子杂交实验证明,通过两次潮霉素抗性筛选的To代再生植株100%含有hps基因,其中70%以上含有外源目的基因的完整表达结构。遗传分析表明,大部分TI代植株中 潮霉素抗敏比符合孟德尔31的分离规律。     

百合未授粉子房离体培养胚胎形成及植株再生

未受精子房离体培养是诱导雌核产生单倍体的技术之一。以1个野生种和3个杂种系共7个百合(Lilium)基因型为实验材料, 探讨了基础培养基、花蕾取样时期和外源激素等因素对百合未授粉子房离体培养胚胎形成的影响。结果表明, CBM、MS和BDS三种基础培养基均可诱导百合未授粉子房胚胎形成, 但以BDS培养基诱导效果最佳; 开花前1天的花蕾较适于百合未授粉子房离体培养; 2 mg·L^-1 2,4-D + 2 mg·L^-1 6-BA和2 mg·L^-1 2,4-D + 2 mg·L^-1 KT两种外源激素配方均适用于百合未授粉子房离体培养诱导胚胎形成。在培养过程中, 大多数胚性胚珠中只含有1个胚胎, 位于珠孔端、合子端或极核处, 少数胚性胚珠中含有双胚胎。通过百合未授粉子房离体培养, 从5个基因型材料中共获得146株再生植株。采用根尖染色体计数法对其中的62株进行了倍性测定, 其中43株与母体植株染色体倍性不同。     

不结球白菜小孢子胚植株再生及倍性研究

以不结球白菜子叶型小孢子胚为外植体,研究冷处理、活性炭及AgNO3对小孢子植株再生的影响,并对再生植株染色体倍性进行鉴定.结果表明:对小孢子胚进行5 d的4℃冷处理培养能提高其胚芽诱导率和胚芽数;培养基中添加1.0 g/L的活性炭对提高小孢子胚芽诱导率没有明显效果,但能有效减轻胚芽的玻璃化;添加5.0或7.0 mg/L的AgNO3对小孢子胚芽诱导有显著效果.染色体倍性鉴定结果表明:不结球白菜小孢子植株的染色体自然加倍率较高,在50%～100%之间;不同基因型不结球白菜小孢子植株的倍性变异具有多样性;在部分基因型中嵌合体占较高比例,最高达到42.86%.     

甜瓜属种间杂交中3种不同倍性资源的微繁

以3种不同倍性的甜瓜属种间杂交资源(双二倍体Cucumis hytivus、异源三倍体黄瓜和种间杂种F1)无菌苗的顶芽或腋芽为试材,比较它们再生能力的差异,寻求各自增殖的最适培养基,从而建立其离体繁殖体系.结果表明:倍性越高,增殖能力越小,增殖速度也最小(双二倍体种转接的间隔时间比其它两种材料长1～2周).双二倍体、异源三倍体黄瓜和种间杂种F1的最大繁殖系数分别为4.6、7.1和8.4;相对应的培养基分别为MS 0.05 mg·L-1TDZ、MS 2.2 mg·L-1 6-BA和MS 0.5 mg·L-1 6-BA).3种材料的生根结果基本一致,在1/2MS 0.2 mg·L-1IBA上的生根率均能达84.5%,驯化成活率达90%以上.同一材料的田间性状表现整齐一致,没有发现变异.     

水稻同源三倍体与二倍体杂交的细胞胚胎学观察(简报)

水稻同源三倍体与二倍体之间的杂交曾有过报道,渡边等发现三倍体自交表现为完全不结实,若授以正常的二倍体花粉,结实率为 13．5％。Sen在籼型品种T1242自然产生的三倍体与二倍体的杂交后代中,得到了三体、双三体和四体等。另外,Watanabe、Hu、Ramanujam、胡兆华和Qu等也进行过研究,但都是对其中出现的非整倍体进行研究,对于出现的二倍体, 未有详细的报道。     

从棉花胚性细胞原生质体培养获得植株再生

原生质体培养植株再生是进行体细胞杂交与基因工程操作的重要基础工作。近年来,国内外已有一些关于棉花原生质体分离与培养的研究报告,1986年 Firoozabady 报道从陆地棉(Ghirsutum)叶肉原生质体培养获得2—3个细胞的微克隆,1987年 Ka~-     

三倍体皱纹盘鲍活体倍性鉴定——用上足触手、外套膜活体组织制备染色体标本

以上足触手,外套膜活体组织为材料,采用PHA体外浸泡法,运用正交实验设计,探讨了暂养温度,PHA（植物血球凝集素）浓度及取材时间对细胞分裂频度的影响。根据直观分析,得出用上足触手,外套膜活体组织直接制备染色体标本进行三倍体皱纹盘鲍活体倍性鉴定的最优组合是：暂养温度20℃;PHA浓度为1．00％,取材时间17：00－18：00,3因素的主次顺序：暂养温度→PHA浓度→取材时间。并可获得大量图像清晰,长度适中,分散的中期分裂相。     

人工诱导异源四倍体和倍间三倍体白鲫的红细胞观察及其相对DNA含量测定

染色体核型分析表明,异源四倍体白鲫含有两套白鲫染色体和两套红鲫染色体,新四倍体白鲫含有三套白鲫染色体和一套红鲫染色体,倍间三倍体白鲫含有二套白鲫染色体和一套红鲫染色体。为进一步阐明人工诱导多倍体的染色体倍性与细胞和细胞核及其相对DNA含量之间的相关关系,作者测量了异源四倍体、新四倍体和借间三倍体鱼红细胞及其核的大小,同时测定了它们的红细胞相对DNA含量,并与它们亲本红细胞及其精子细胞相对DNA含量进行了比较。       

大白菜与结球甘蓝异源三倍体小孢子植株的获得与鉴定

以6个不同基因型的大白菜四倍体(AAAA,2n=4x=40)品系9401、9402、9403、9404、9405、9406为母本,结球甘蓝二倍体(CC,2n=2x=18)自交系9501为父本配制杂交组合得到的6个杂种一代为试材,进行了游离小孢子培养研究,成功诱导出胚状体,获得了再生植株,并对部分再生株进行了染色体数鉴定和性状调查。结果表明:不同组合小孢子胚胎发生能力不同,各组合产胚率均较低;小孢子再生植株中,染色体数为18的个体所占比例最大,达46.7%;小孢子植株减数分裂行为复杂,终变期除二价体和单价体外,还有三价体等联会形式;小孢子植株性状表现各异。     

葫芦科植物幼嫩子房壁制片技术的优化及其染色体倍性鉴定

该研究利用黄瓜、甜瓜、西瓜和西印度黄瓜这几种葫芦科植物的幼嫩子房壁作为材料进行染色体制片,探索子房材料的样品大小、预处理时间和酶解时间对染色体制片的影响及其优化,并用该制片方法对黄瓜候选单倍体植株的子房壁进行倍性鉴定和荧光原位杂交实验。结果发现:(1)黄瓜、甜瓜、西瓜和西印度黄瓜的幼嫩子房壁最佳预处理时间分别为1 h 30 min、1 h、55 min和45 min,子房长度为0.2～1 cm,子房壁材料切成边长为1～1.5 mm小块,酶解时间为1 h 10 min～1 h 20 min时,用该优化制片方法均可观察到较多的分裂相。(2)利用该方法鉴定结果显示,葫芦科植物黄瓜、甜瓜、西瓜和西印度黄瓜的染色体分别为14、24、22和24条,黄瓜候选单倍体植株的体细胞染色体数为7条。(3)将该制片方法获得的染色体装片用于荧光原位杂交结果显示,在二倍体黄瓜染色体中有3对明亮的45S rDNA杂交信号和1对5S rDNA杂交信号,而单倍体黄瓜中相应信号数量均减半;在甜瓜、西瓜和西印度黄瓜中均有2对45S rDNA杂交信号和1对5S rDNA杂交信号。研究认为,利用葫芦科植物子房壁作为制片材料,不仅可以获得良好的分裂相,还具有易于取材、制片效率高等优点,因此子房壁制片法是研究植物染色体数目和鉴定倍性的有效方法,且该制片方法也适用于进一步的荧光原位杂交分析。     

柑橘与黄皮属间体细胞杂种植株的异常倍性变异

黄皮属（Ｃｌａｕｓｅｎａ）是芸香科柑橘亚科黄皮族植物,有３０余个种,其中１１个种原产于中国。黄皮在我国广东、广西、福建等省区有大面积商业栽培,其中鸡心黄皮是最著名的品种［１］。本研究以柑橘属优良脐橙品种“朋娜”为胚性愈伤组织亲本,以黄皮属品种鸡心黄皮...     

通过测定DNA来确定啤酒酵母的染色体倍性

已经找到一种确定工业用酵母菌株的染色体倍性的方法。这种方法包括测定酵母单个细胞的 DNA 含量,可以通过血球记数器细心地记下细胞数目,然后通过比色法测定 DNA 的数量来实现。应用这一技术,有两株正在研究的陈贮啤酒酵母被确认为四倍体。     

玉米未成熟胚乳愈伤组织和器官的发生及其倍性变化的初步研究

本试验在附加和不附加外源激素的MS培养基上,均得到了玉米未成熟胚乳愈伤组织。愈伤组织在附加外源激素的MS培养基上达到器官分化,获得了发育正常的和许多畸形的胚乳植株。所得到的愈伤组织细胞和植株根尖细胞染色体数目和倍性是不稳定的,二者有相同的趋向,其中有整倍体的细胞(2n=10,20,30,40,50),也有各种非整倍体的细胞(2n=5—49)。     

三倍体观赏百合与二倍体食用龙牙百合的杂交分析

为探讨异源三倍体百合与龙牙百合(BB)的杂交亲和性,实现观赏百合与食用百合的种质融合与创新,该研究以三倍体百合Triumphator(LLO)作母本,龙牙百合为父本,采用常规授粉与切柱头授粉,利用基因组荧光原位杂交(GISH)技术分析母本及子代的基因组成.结果 显示:(1)通过常规授粉和切柱头授粉共获得17个发育良好的...     

从水稻根部悬浮培养细胞分离原生质体及植株再生

以长香稻(Oryza sativa L．)(糯稻)的幼嫩种子根为材料,在Ms和N6培养基上诱导产生结构松软而分散的愈伤组织,经过AA液体培养基振荡悬浮培养,悬浮培养细胞经酶解后得到了活性较高的原生质体,试验结果表明这是分离原生质体较理想的材料。在附加2,4-D lmg／L(以下单位同)、KT(激动素)0．2、各氨酰胺876、天门冬酰胺266的Ms琼脂糖培养基中,诱导出了大量愈伤组织,在含KT2、NAA(α-萘乙酸)0．2、zT(玉米素)0．2、cH(水解酪蛋白)1000和4％椰子汁的N6培养基中成功地诱导出了由原生质体再生的植株。当代原生质体再生植株能正常开花、结实、产生种子;染色体数均为二倍性(2n＝24),最显著的特点是结实率低,穗粒数减步、生育期延迟。