克隆植物构型及其对资源异质性的响应

密集型和游击型是两个极端的克隆植物构型,在它们之间还应存在中间过渡类型的连续统。作者给出了描述该连续统的一个指数ｖ＝ｌｎ ［Ｅ（ Ｒ２）］１２Ｅ（ｌ） ／ｌｎｎ （ １２ ≤ｖ≤１） 。并讨论了克隆植物的间隔物长度对生境斑块质量的响应     

汉滩病毒A9株强毒和弱毒克隆M基因片段G1糖蛋白编码区核苷酸序列…

采用逆转录－ＰＣＲ方法,用３对引物分３个片段扩增强毒克隆（Ａ９ｖ）及弱毒克隆（Ａ３９ｓ）的Ｍ基因片段ｃＤＮＡ并克隆入ｐＧＥＭ－Ｔ载体中,采用Ｓａｎｇｅｒ双脱氧法测定了Ａ３９ｓ,Ａ９ｖ病毒Ｇ１糖蛋白编码区的全序列,发现二者均由１９７８个核苷酸组成,比７６／１１８株少６个核苷酸,并发现Ａ３９ｓ在Ｇ１编码区有３３个碱基及８个氨基酸与Ａ９ｖ不同,进一步与７６／１１８,ＨＶ１１４的相关序列比较,发现Ｇ１编码     

汉滩病毒A9株强毒和弱毒克隆M基因片段G1糖蛋白编码区核苷酸序列的分析比较

采用逆转录－ＰＣＲ方法,用３对引物分３个片段扩增强毒克隆（Ａ９ｖ）及弱毒克隆（Ａ３％）的Ｍ基因片段ｃＤＮＡ,并克隆入ｐＧＥＭ－Ｔ载体中。采用Ｓａｎｇｅｒ双脱氧法测定了Ａ３９ｓ、Ａ９ｖ病毒Ｇ１糖蛋白编码区的全序列,发现二者均由１９７８个核苷酸组成,比７６／１１８株少６个核苷酸,并发现Ａ３９ｓ在Ｇ１编码区有３３个碱基及８个氨基酸与Ａ９ｖ不同。进一步与７６／１１８、ＨＶ１１４的相关序列比较,发现Ｇ１编码区的第６０６、６１４位氨基酸的变异同Ａ３９ｓ病毒的减毒有一定相关。从Ａ３９ｓ、Ａ９ｖ、７６／１１８及ＨＶ１１４４株病毒Ｇ１糖蛋白编码区推导的氨基酸序列亲疏水性资料显示,在位于Ｇ１糖蛋白Ｃ末端的最大亲水区域的６００～６２０位氨基酸区域,弱毒株Ａ３９ｓ同强毒株Ａ９ｖ、７６／１１８、ＨＶ１１４的亲水性有明显不同,而这一差异又主要由第６１４位氨基酸的变异所引起。因此推测,Ｇ１糖蛋白Ｃ端亲水区域同汉滩病毒毒力相关,而第６１４位的精氨酸被谷氨酰胺取代,同Ａ３９ｓ病毒毒力的减弱可能有关。     

温州蜜柑叶片气体交换和叶绿素荧光对低温的响应

研究了低温对温州蜜柑叶片气体交换和叶绿素荧光的影响,结果表明：（１）８℃低温处理１１８ｈ对气体交换和叶绿纱荧光影响不大。（２）２℃低温处理１５ｈ后,净光合速率（Ｐｎ）、气孔导度（Ｇｓ）,羧化效应（ＣＥ）下降,胞间ＣＯ２浓度（Ｃｉ）升高,表观量子效率（ＡＱＹ）和叶绿素荧光参数ＦＱ及Ｖｖ／Ｆｍ没有显著变化。（３）室外自然低温处理作７ｄ,Ｐｎ、Ｇｓ、ＣＥ饱和ＣＯ２光合速率、ＡＱＹ及Ｆｖ／Ｆｍ显著下降,Ｃ     

兔血管平滑肌延迟整流钾通道研究及其与克隆Kv1.5通道的电生理特性比较

本文用膜片箝全细胞技术比较了研究了单个兔肺动脉血管平滑肌细胞上延迟整流钾通道与克隆Ｋｖ１．５通道的电生理及药理学特性。将平滑肌细胞箝制在－４０ｍＶ,以１０ｍＶ的步跨阶跃去极化（０￣６０ｍＶ）可产生一系列快速上升的外向电流,几无衰减,其激活曲线的Ｖ１／２为２７．２ｍＶ。灌流液中加入１００ｍｍｏｌ／Ｌ和ＴＥＡ １ｍｍｏｌ／Ｌ ４ＡＰ,电流幅度均明显减小,细胞外Ｃａ＾２＋水平由１．５ｍｍｏｌ／Ｌ降至０．     

沿中国东北样带（NECT）分布的若干克隆植物与非克隆植物光合速率与水 …

比较了沿１６７０ｋｍ长的中国东北样带（ＮＥＣＴ）分布的在繁殖习性上不同的植物功能型,克隆植物（ｃｌｏｎａｌ ｐｌａｎｔ）与非克隆植物（ｎｏｎ－ｃｌｏｎａｌ ｐｌａｎｔ）的光合作用、蒸腾作用、气孔导度、水分利用效率。所测定的２１８种植物中有１１５种属于克隆植物。对于灌木和草本植物功能型而言,净光合速率（Ｐｎ）和水分利用效率（ＷＵＥ）在样带东西两端较低,在样带中间较高;蒸腾速率在温带荒漠植物分布的西端     

D1／D2／Cyt—559复合物的共振拉曼光谱

光系统Ⅱ（ＰＳⅡ）反应中心Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ－５５９复合物在４８８ｎｍ处激发的共振拉曼谱显示４个主要谱带,其峰位分别在１５３２（ｖｌ）１１６５（ｖ２）１０１０（ｖ３）和９７０（ｖ４）ｃｍ＾－１处,表明ＰＳⅡ反应中心结合的β－胡萝卜素分子是全反式构型。Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ－５５９复合物在色素抽提液的拉曼光谱也显示４个主要的拉曼峰,其中ｖ４谱带的强度急剧下降,说明ＰＳⅡ反应中心内部结合的β－胡萝卜素     

模拟微重力条件对植物幼苗生长的影响

与正常重力下生长的植物幼苗对照相比,在竖直平面内径回转器连续做１２０ｈ圆周回转的草莓和香石竹幼苗的生长状况发生如下变化：（１）株高和叶片数有所增加;（２）草莓的叶绿素含量降低４７．５％,香石竹叶绿素含量增加４．３％;（３）回转后两种幼苗的叶绿素的主要吸收峰位不变,而每个峰位吸收强度有所增加;（４）两思苗的叶片快速荧光动力学参数,回转后除ＣＡ／Ｆ０外,Ｆｖ／Ｆｏ、Ｆｖ／Ｆｍ和Ｔ１／２均有提高;（５）     

用T-A载体克隆技术构建丙肝病毒C+E1区真核表达质粒pSVL-HCV/C+E1

用ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄＩＩ将丙肝病毒Ｃ＋Ｅ１ＤＮＡ片段从其克隆载体ｐＧＥＭ３ｚｆ－ＨＣＶ／Ｃ＋Ｅ１上切下,经Ｔａｑ酶补齐３’末端后插入到载体ｐＳＶＬ－Ｔ中,构建成丙肝病毒Ｃ＋Ｅ１真核表达载体ｐＳＶＬ－ＨＣＶ／Ｃ＋Ｅ１。本实验中重组效率达６４．７％（１１／１７）,正向插入为５０％（２／４）。     

玉香梨的组织培养与快速繁殖

１植物名称沙梨品种玉香梨（Ｐｙｒｕｓｐｙｒｉｆｏｌｉａ　ｃｖ．　ｙｕｘｉａｎｇ）。２材料类别侧芽。３培养条件（１）丛芽诱导培养基：１／２ＭＳ大量元素＋ＭＳ微量元素＋铁盐＋有机成分＋６－ＢＡ２ｍｇ·Ｌ－１（单位下同）＋ＮＡＡ０．２＋ＧＡ３２＋３％蔗糖＋０．８％琼脂,固体培养;（２）增殖培养基：１／２ＭＳ＋ＢＡ１．５＋ＮＡＡ０．２＋ＧＡ３１＋３％蔗糖＋０．８％琼脂,固体培养;（３）生根培养基：１／２ＭＳ＋ＩＢＡ１０＋１．５％蔗糖＋０．６％琼脂,固体培养８ｄ后转入不含任何激素的同类培养基中的二步生根法…     

丙型肝炎病毒（HCV）广东株包膜蛋白区cDNA的序列测定

采用微粒吸附法从广东省一慢性丙型肝炎病人血清中提取现型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ,经随机引物逆转录为ｃＤＮＡ,再经聚合酶链反应（ＰＣＲ）,获得包膜蛋白区（Ｅ１,Ｅ２／ＮＳ１）两个部分重叠的产物片段,分别为４８９ｂｐ和８０６ｂｐ。其中,４８９ｂｐ片段主要位于Ｅ１区,小部分位于Ｃ区;８０６ｂｐ片段位于Ｅ２／ＮＳ１区。将４８９ｂｐ片段插入ｐＵＣ１９载体,再亚克隆进ｐＵＣ１８质粒载体。８０６ｂｐ片段则插入到     

高温对生长在加富CO2条件下水稻离体叶片叶绿素荧光的影响

４个水稻品种ＩＲ７２、植朝２号、特三矮２号和Ⅱ优４４８０栽种于两种ＣＯ２浓度（３５０μＩＬ＾－１、６００μＩＬ＾－１）下,将其离体叶片不同温度（３０、３５、４０、４５、５０℃）处理３０ｍｉｎ后,其细胞膜渗漏率随处理温度的升高而上升,ＩＲ７２和桂朝２号在４０～４５℃之间有一个急剧上升的折点,而特三魏２号和Ⅱ优４４８０的折点则在４０～５０℃之间,Ｅｖ／Ｆｍ,Ｆｖ／Ｆｏ．ΦＰＳⅡ和ａＰ随处理温度的升高而     

用PCR扩增和克隆鸡传染性贫血病毒全基因组DNA

根据已发表的序列,分别在鸡贫血病毒（ＣＡＶ）环形基因组ＤＮＡ（全长２．３ｋｂ）的ＥｃｏＲＩ位点和ＢａｍＨＩ位点的两侧选择适当序列合成两对引物,用ＰＣＲ技术,从斑点杂交检测到病毒核酸的ＣＡＶ感染的ＭＤＣＣＲＰ１细胞基因组ＤＮＡ中,分别扩增出包含ＥｃｏＲＩ和ＢａｍＨＩ分割开的病毒基因组两部分（１．５ｋｂ和０．８ｋｂ）约１．５ｋｂ和约１．２５ｋｂ的两个片段。再将其中相应序列拼接克隆进ｐＵＣ１８载体,获得包含ＣＡＶ全基因组序列ＤＮＡ片段的克隆质粒ｐＣＡＶ２．４。酶切分析表明,该质粒具有预期的ＢａｍＨＩ位点、ＰｓｔＩ位点、ＨｉｎｄⅢ位点,而预期的ＥｃｏＲＩ位点消失。重组质粒插入ＤＮＡ片段的两端序列分析表明,质粒ｐＣＡＶ２．４是包含ＣＡＶ全基因组序列的重组质粒,插入ＤＮＡ片段序列中的ＥｃｏＲＩ位点序列发生了一个碱基突变。     

胰岛素受体的配体结合结构域的克隆与表达

用ＰＣＲ方法从人胎盘ｃＤＮＡ 中获得编码胰岛素受体α亚基中结合胰岛素的相对独立的结构域Ｌ１、Ｌ２以及人工设计的Ｌ１－（Ａｌａ）１０－Ｌ２的基因,克隆入含Ｔ７噬菌体ＲＮＡ聚合酶启动子的表达质粒ｐＥＴ－３ａ中,转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）,用ＩＰＴＧ诱导表达成功。ＤＮＡ测序、氨基酸组成分析以及蛋白质Ｎ端测序证明所表达的蛋白质正确。经过包涵体的分离、洗涤、溶解和纯化,得到了纯的变性状态受体的胰岛素高亲     

强光及活性氧对大豆光合作用的影响

利用叶绿素荧光技术研究了强光及活性氧对大豆（ Ｇｌｙｃｉｎｅ ｍａｘ Ｌ．） 光合作用的影响。结果表明,大豆叶片在强光（２０００ μｍｏｌ·ｍ － ２·ｓ－ １） 下照射２ ｈ 后,净光合放氧速率下降。随着处理光强的增加,叶绿素荧光参数Ｆｍ／Ｆｏ、Ｆｖ／ Ｆｍ 、ΦＰＳⅡ、ｑＰ 和ｑＮ 均呈下降趋势。在强光处理大豆叶片时,加入外源活性氧Ｈ２Ｏ２ 、Ｏ－·２ 、·ＯＨ 和１Ｏ２ 后,大豆叶片受到伤害。其中１Ｏ２ 和·ＯＨ 的破坏作用十分明显,表现为Ｆｖ／ Ｆｍ 和ΦＰＳⅡ的明显降低。抗氧化剂ＤＡＢＣＯ、甘露醇、抗坏血酸和组氨酸对强光下的大豆叶片有保护作用,但这种保护作用不强。在暗处理叶片时,超氧物歧化酶（ＳＯＤ）的抑制剂ＤＤＣ对Ｆｍ／ Ｆｏ 和Ｆｖ／Ｆｍ 的影响不大;抗坏血酸过氧化物酶（ＡＰＸ） 的抑制剂ＮａＮ３ 使Ｆｖ／Ｆｏ、Ｆｖ／ Ｆｍ和ΦＰＳⅡ下降明显。强光处理大豆叶片时,ＤＤＣ明显降低Ｆｍ／ Ｆｏ、Ｆｖ／ Ｆｍ 和ΦＰＳⅡ,ＮａＮ３ 降低Ｆｍ／ Ｆｏ、Ｆｖ／ Ｆｍ 和ΦＰＳⅡ的作用则更大。据此推测,在强光下大豆发生了光抑制,光抑制的发生与活性氧的存在有一定的关系     

缺氧对培养的肺动脉内皮细胞血管紧张素Ⅱ分泌的影响

缺氧是否通过影响血管内皮细胞的分泌功能而参与缺氧性肺动脉高压的发生尚不清楚。本实验动态观察了缺氧对培养的新生小牛内皮细胞（ＰＡＥＣ）的血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）分泌的影响。结果发现：２．５％Ｏ２缺氧早期（１．５ｈ）,ＰＡＥＣ的ＡＴⅡ分泌增加（Ｐ＜０．０１ｖｓ常氧组）,缺氧后期与常氧组无明显差别;０％Ｏ２缺氧早期（１．５－６ｈ）,ＡＴⅡ分泌明显降低（Ｐ＜０．０１ｖｓ常氧组及２．５％Ｏ２组）,后期ＡＴⅡ分泌明显增高（Ｐ＜０．０１ｖｓ常氧组及２．５％Ｏ２组）;无论缺氧还是常氧条件下,ＮＯ供体ＳＩＮ１显著抑制ＡＴⅡ的分泌（Ｐ＜０．０１）,而内源性ＮＯ抑制剂硝基精氨酸则明显促进ＡＴⅡ分泌（Ｐ＜０．０１）;０％Ｏ２缺氧２４ｈ后,ＰＡＥＣ细胞内ｃＧＭＰ含量明显降低（Ｐ＜０．０５）。上述结果表明缺氧可通过抑制ＰＡＥＣ的内源性ＮＯ产生而促进ＡＴⅡ的分泌,ＰＡＥＣ自分泌的改变可能参与缺氧性肺动脉高压的发生过程。     

内皮素A型受体胞内区在大肠杆菌中的表达及其纯化

利用ＰＣＲ技术和ＤＮＡ体外重组方法,将内皮素Ａ型受体（ＥｎｄｏｔｈｅｌｉｎｔｙｐｅＡｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＥＴＡＲ）胞内区ｃＤＮＡ克隆到ｐＵＣ１８载体中进行序列分析。结果表明,ＤＮＡ序列与预期结果完全相符。然后用低熔点琼脂糖回收插入到ｐＵＣ１８载体中的ＥＴＡＲ胞内区ＤＮＡ片段,连接到ｐＧＥＸ２Ｔ融合蛋白表达载体的凝血酶位点下游,转化大肠杆菌ＪＭ１０３,得到的重组质粒命名为２Ｔ／ＥＴＡＲ。ＪＭ１０３（２Ｔ／ＥＴＡＲ）经３０℃培养、ＩＰＴＧ诱导明显表达出ＥＴＡＲ胞内区融合蛋白,表达产物主要以包涵体形式存在。包涵体经变性和复性后,用亲和层析一步纯化法获得了较纯的ＥＴＡＲ胞内区融合蛋白,为进一步研究ＥＴＡＲ胞内区的功能打下了良好的基础     

戊型肝炎病毒（HEV）开读框架2中1.3kb cDNA的克隆与序列分析

以戊型肝炎（Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ）病人高热期血清为原材料,设计特定引物,经ＲＴ－ＰＣＲ扩增获得开放阅读框２（ＯＲＦ２）１．３ｋｂ基因片段,用ＥｃｏＲＩ和ＢａｍＨＩ插入克隆载体ｐＵＣ１８,测定了该克隆基因片段的核苷酸序列并进行了比较分析。其片段长度为１３０９ｂｐ,其Ａ＝２４９（１９．２％）,Ｇ＝３１８（２４．２９％）,Ｔ＝３３９（２５．９％）,Ｃ＝４０３（３０．７９％）;与印度株和缅甸株的同源性在９０     

抗癌胚抗原单链抗体基因在家蚕细胞和幼虫中的表达

将抗癌胚抗原（ＣＥＡ）单链抗体基因插入家蚕杆状病毒转移载体ｐＢａｃＰＡＫＨｉｓ, 与修饰的家蚕核型多角体病毒ＢｍＢａｃＰＡＫＤＮＡ共转染家蚕细胞, 经同源重组得到含有在多角体蛋白基因启动子控制下的抗ＣＥＡＳｃＦｖ 基因的重组病毒ＢｍＢａｃＳｃＦｖ。用重组病毒分别感染家蚕细胞和幼虫, 在两者中均得到了高效表达, 产物分子量为２８ｋＤ, 前者占细胞总蛋白的６ ％ , 后者为０ ．３ ｍｇ／ 蚕。目的基因在家蚕细胞和幼虫中表达产物经Ｎｉ２＋ＩＤＡＳｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ亲和柱纯化, 前者纯度可达９０％ 以上, 后者纯度较低; 纯化后的融合蛋白具有ＣＥＡ 结合活力, 其亲和常数分别为５ ．４×１０８／ｍｏｌ·Ｌ－ １ 和２．３ ×１０８／ｍｏｌ·Ｌ－１ , 略低于其亲本单抗Ｅ７Ｂ１０ ２．７ ×１０９／ｍｏｌ·Ｌ－ １ 。     

乙烯消减盐渍胁迫对苜蓿种子萌发的抑制作用

在无盐条件下,外源乙烯对苜蓿种子萌发有促进作用,但对最终发芽率无影响。盐渍严重抑制苜蓿种子萌发,加入１～５０μｌ／Ｌ（ｖ／ｖ）外源乙烯或０．１～５．０ｍｍｏｌ／Ｌ１－氨基环丙烷－１－羧酸（ＡＣＣ）或５～１００ｍｇ／Ｌ（ｗ／ｖ）乙烯利（ＥＴＨ）均能极显著地减轻ＮａＣｌ对苜蓿种子萌发的抑制作用。激动素（ＫＴ）也有类似作用,并能促进萌发种子的乙烯产生,它与ＡＣＣ一起使用,则对种子萌发和乙烯产生均显示加成作用。在ＮａＣｌ胁迫下,应用乙烯和乙烯利虽有利萌发,但幼芽鲜重和下胚轴长度明显低于无盐对照。