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采用DEAE-FractogelTSK650S阴离子交换树脂柱层析法从菠菜(SpinaciaOleracea)中分离纯化了PSII核心天线复合物CP43和CP47,计算出每分子CP43含19-20个Chla和4-5个β-Car;每分子CP47含20-21个Chla和3-4个β-Car。普通及三维(3D)低温(77K)荧光发射光谱的测定证明,纯化的CP43和CP47都具有较好的完整性。常温(298K)吸收光谱的测定,证明纯化的CP43和CP47的红光区最大吸收峰分别位于671nm和674nm,但是它们在该区的四阶导数光谱均给出670nm和682nm两个峰,这表明,它们均至少含有两种不同结合状态的Chla分子。对CP43和CP47中可能的能量传递机制进行了讨论 相似文献
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光系统Ⅱ核心天线CP43的纯化及性质 总被引:7,自引:0,他引:7
菠菜放氧的PSII核心复合物经0.8mol/LTris-HCl(pH8.0)洗涤后,用温和的非离子去垢剂DM和高浓度的LiClO4增溶,再经DEAE-Toyopearl-650S离子交换柱层析分离,可得到PSII核心天线43kD叶绿素a结合蛋白(CP43)。SDS-PAGE显示一条43kD蛋白质带。根据Arnon法和Markewll法的结果表明,每个蛋白质分子结合20~21个分子的叶绿素a。室温条 相似文献
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光系统II核心天线CP43的纯化及性质 总被引:3,自引:0,他引:3
菠菜放氧的PSI核心复合物经0.8mol/LTris-HCl(pH8.0)洗涤后,用温和的非离子去垢剂DM和高浓度的LiClO4增溶,再经DEAE-Toyopearl-650S离子交换柱层析分离,可得到PSII核心天线43kD叶绿素a结合蛋白(CP43)。SDS-PAGE显示一条43kD蛋白质带。根据Arnon法和Markwel法的结果表明,每个蛋白质分子结合有20~21个分子的叶绿素a。室温条件下,CP43在红光区具有671nm的最大吸收峰和683nm的荧光发射峰,以及W型的圆二色信号,表明其处于较为天然的状态。文中还制备并鉴定了对CP43特异的抗血清。 相似文献
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菠菜放氧的光系统Ⅱ(PSⅡ)核心复合物经0.8mol/L Tris(pH8.0)洗涤后,用温和的非离子去垢剂DM和高浓度的LiClO4增溶,再经DEAE-Toyopearl-650S离子交换柱层析分离,可得到PSⅡ天线组分中的叶绿素α/b结合蛋白(CP29)。SDS-PAGE显示一条30kD蛋白质带。根据Arnon法和Markwell法的结果表明,每个蛋白质分子结合有7~8个分子的叶绿素α和2~3 相似文献
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将OG处理的PSⅡ经高速离心和透析制得的OECC,用DM增溶后,上DEAE-6505柱,LiCIO4梯度洗脱可得PSⅡ核心天线蛋白CP47。根据Amon法和Markwell法的结果表明,每个蛋白质分子结合13~14个分子的Chla。室温条件下,CP47在红光区具有674nm的最大吸收峰和693nm的荧光发射峰,以及W型的圆二色信号,表明其处于较为天然的状态。将制得的CP47免疫家兔可制得相应的抗血 相似文献
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番茄系统感染TMV(tobaccomosaicvirus)诱导叶β-N-乙酰氨基已糖苷酶活性升高。番茄叶胞外提取液经冰冻干燥浓缩,-20℃丙酮沉淀、CM-SephadecC-25离子交的层析,PBE94(PolybufferExchanger94,Sigma)聚焦层析和SEPHADEXg-150凝胶层析纯化,获得纯化的β-N-乙酰氨基乙糖苷酶。凝胶层析测得该酶的分子量为145kD,SDS-PAGE 相似文献
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尖吻蝮蛇毒内一种新抗凝血因子ACFⅡ的纯化及特性 总被引:8,自引:0,他引:8
利用阴离子交换层析、凝胶过滤及阳离子交换层析三步方法,从皖南尖吻蝮蛇毒中分离纯化到一个新的抗凝血因子ACFⅡ(anticoagulation factorⅡ)。纯化的ACFⅡ在PAGE、SDS-PAGE和IEF-PAGE图谱上均呈单一区带。ACFⅡ由两条分子量为14.6kD的肽链通过二硫键连接在一起,其等电点为7.0。ACFⅡ具有显著的抗凝血活性,在体外延长PPT时间的最终浓度为0.4mg/L。A 相似文献
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本文报道用抗PAI-1单克隆抗体(McAb)亲和层析建立了纯化PAI-1的简便方法。经免疫亲和层析,SephacrylS200凝胶过滤,从HepG2细胞培液中分离到糖基化和非糖基化两种形式的PAI-1,回收率为84%,PAI-1比活性6.1×104IU/mg。糖基化PAI-1分子量为50kD,比活性5.8×104IU/mg。非糖基化PAI-1分子量43kD,占总PAI-130%,仍具有PAI-1活性。用ConA-Sepharose亲和层析进一步纯化得到SDS-PAGE纯的糖基化PAI-1。 相似文献
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地衣芽孢杆菌1Baciuus Licheniformis)BL-306产生的胞外β-甘露聚糖酶经硫酸铵分级盐析,DEAE-纤维素柱层析。Sephadex-G100柱凝胶过滤和DEAE-纤维素柱再层析分离纯化,得到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)均一样品。用SDS-PAGE测得纯化后β-甘露聚糖酶分子量为26000道尔顿。用凝胶等电聚焦电泳(PAGEIEF)测得等电点PI为5.0。该酶 相似文献
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甲基单胞菌Methylomonas sp.GYJ3中甲烷单加氧酶羟基化酶组分… 总被引:1,自引:0,他引:1
从Meth ylomonas sp.GYJ3菌株中经DNEAE-SepharoseCl-6B阴离子交换层析和SephacrylS300凝胶层析分离出纯化出甲烷加氧酶羟基酶组分,经HPLC分析,纯度大于90%,分子量为240kD,纯化们数为3.9,比活为225nmol环氧丙烷每分钟毫克蛋白,SDS-PAGE表明,羟基化酶由三个亚基组成,亚基分子量为56、43、27kD.ICPAES测定羟基化酶的Fe 相似文献
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番茄系统感染TMV(tobacco m osaicvirus)诱导叶β-N-乙酰氨基己糖苷酶活性升高。番茄叶胞外提取液经冰冻干燥浓缩、- 20℃丙酮沉淀、CM-Sephadex C-25 离子交换层析,PBE 94(Polybuffer Exchanger 94, Sigm a)聚焦层析和Sephadex G-150 凝胶层析纯化,获得纯化的β-N-乙酰氨基己糖苷酶。凝胶层析测得该酶的分子量为145 kD,SDS-PAGE测得该酶的分子量为75 kD,证明该酶由两个亚基构成。该酶能水解p-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-β-D-GlcNAc)和P-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷(pNP-β-D-GalNAc)两种底物,能被过碘酸氧化,Schiff试剂染色。在感染TMV 的番茄叶片中,β-N-乙酰氨基己糖苷酶活性大部分位于胞外 相似文献
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沈炳福 《植物生理与分子生物学学报》1994,(2)
苜蓿根瘤菌(Rhizobiummeliloti)nodC蛋白是结瘤基因nodC编码的43kD多肽(NodC)。应用噬菌体T7RNA聚合酶/启动子表达系统.pT7-5作为载体质粒.构建了带有nodC基因的PBF6克隆.经诱导在大肠杆菌JAKE中获得表达,过量生成NodC,占细胞总蛋白量的5%。经细胞膜蛋白组份的分离,Bio-gel柱层析,SDS-PAGE电泳等获得了比较纯化的NodC。 相似文献
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经DEAE-Sephacel、UltrogelAcA 34、Heptylam ine-Sepharose 和Bio Scale Q2等四步层析从牛脑皮层膜中同时纯化出抑制型G 蛋白(inhibitory G protein, Gi)和O型G蛋白(other G pro-tein, Go).对Go 的选择性激活使Gi 和Go 的分离大为简化,并使二者的大量制备成为可能.纯化的G 蛋白的SDS-PAGE银染显示单一蛋白带,其结合[35S]GTPγS的活性分别提高68倍和124倍.用圆二色光谱法(CD)测量了纯化的G蛋白的二级结构. 相似文献
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大豆C4途径与光系统Ⅱ光化学功能的相互关系 总被引:6,自引:0,他引:6
测定了不同发育时期大豆(Glycine max(L)Merr.)“黑农41”叶片的4种C4酶(PEPCase(磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶)、NADP-MDH(NADP苹果酸脱氢酶)、NADP-ME(NADP苹果酸酶)和PPDK(丙酮酸磷酸二激酶))活性、荧光动力学数值(Fv/Fo(PSⅡ活性)、qP(光化学淬灭)、qN(非光化学淬灭、ΦPSⅡ(有效PSⅡ光化学效率))和光合速率。结果表明在“黑农41” 相似文献
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败血症大鼠心肌肌浆网phospholamban蛋白磷酸酶活性的变化 总被引:3,自引:1,他引:2
用DEAE-Sephacel层析法部分纯化了大鼠心肌肌浆网phospholamban(PLB)蛋白磷酸酶(PPase),并证明其是PPase-1。在SDS-PAGE电泳放射自显影上证明,ES大鼠心肌SR部分纯化的PLBPPase对底物^32P-磷酸化酶a和^32P-SR)的去磷酸化作用明显减弱;LS大鼠该部分纯化的PPase对底物的去磷酸化作用和健康大鼠相比未见明显变化。测定败血症大鼠心肌SR及其 相似文献
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利用COS7细胞暂时表达系统,研究转译起始序列对EPO-cDNA表达的影响。通过DNA重组技术,构建了原EPO-cDNA表达载体pCSV-EPO(1),其转译起始序列为5'AATTCATGG3'。同时通过定点突变技术,将起始序列改变成5'CCACCATGG3',而构建了另一表达载体PCSV-EPO(2)。后经序列分析证明无误后和前均通过DEAE-dextran法转染COS7细胞上清,测定结果为 相似文献
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以牛血球为材料,经溶血等处理和丙酮沉淀,获得牛血球超氧化物歧化酶粗品。此粗酶可以通过DEAE-Sepharose和CM-Sepharose快速柱层析,获得超氧化物歧化酶纯品。纯化的酶比活可达13500u/mg,经PAGE、SDS-PAGE和快速蛋白液相色谱(FPLC)检测,结果表明,纯化酶是均一的Sephadex G-100凝胶过滤测得该酶分子量为31,800,SDS-PAGE测得亚基分子量为15 相似文献
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重组人尿激酶原的分离纯化及性质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道从人尿激酶原(pro-urokinase,pro-UK)基因重组工程菌E.coliJA221表达产物的复性液中纯化尿激酶原的方法。复性产物经Zn^2+选择性沉淀,尿激酶抗体亲和柱层析,benzamidine-Sepharose CL 4B亲和吸附,即得比活达110000IU/mg的纯化产品。样品经SDS-PAGE鉴定,在还原及非还原条件下,均表现为分子量为43kd的单一条带。动力学研究测得 相似文献