有序差异显示:一种基因表达谱系统比较法

系统研究具有同一基因组的各种细胞群之间基因的差异表达谱十分重要。目前,研究基因差异表达的技术大致有ｍＲＮＡ差异显示［１］、ＲＤＡ［３］、ＳＳＨ［４、５］和ｃＤＮＡ阵列［６］等。近几年,还发展了一些研究基因差异表达谱系统的技术,如ＲＬＣＳ（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｌａｎｄ－ｍａｒｋｃＤＮＡｓｃａｎｎｉｎｇ）［８］、ＧＥＦ（ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓ－ｓｉｏｎｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇ）［２］和ＲＮＡ指纹法［９］等。然而,这些技术或较为复杂,或灵敏度偏低。本文拟介绍一种有效的基因表达谱系统比较法——有序差…     

植物青枯病菌细菌素的产生,性质及其利用

细菌素（Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ）是细菌代谢过程中合成的、对同种或近缘种有特异性抑制作用的杀菌蛋白或多肽物质［１］。大多数植物病原细菌如放射农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒａｄｉｏｂａｃｔｅｒ）、密执安棒形杆菌（Ｃｌａｖｉｂａｃｔｅｒ ｍｉｃｈｉｇａｎｅｓｔｓ）、软腐欧文氏菌（Ｅｒｗｉｎｉａｃａｒｏｔｏｖｏｒａ、 Ｅ． ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ）、丁香假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅ）、甘蓝黑腐黄单胞菌（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）等都具有产生细菌素的能力［２］…     

三褶脉紫菀中的新二萜甙

三褶脉紫菀（ＡｓｔｅｒａｇｅｒａｔｏｉｄｅｓＴｕｒｃｚ．）系菊科多年生草本植物,遍布全国,是民间常用的中药,有清热解毒、祛痰镇咳的功效［１,２］。化学工作者们曾从其同属植物紫菀（ＡｓｔｅｒｔａｒａｒｉｃｕｓＬ．ｆ．）中分离到紫菀酮（ｓｈｉｏｎｏｎｅ）、槲皮素（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）、无羁萜（ｆｒｉｅｄｅｌｉｎ）、表无羁萜（ｅｐｉｆｒｉｅｄｅｌｉｎｅｌ）、毛叶醇（ｌａｃｈｎｏｐｈｙｌｌｏｌ）、乙酸毛叶酯（ｌａｃｈｎｏｐｈｙｌｌｏｌａｃｅｔａｔｅ）、茴香醚（ａｎｅｔｈｏｌｅ）以及紫菀三萜皂甙［２—４］…     

孢堆黑粉菌属三个新组合及中国黑粉菌补遗Ⅷ

本文报道了３个新组合种和３个中国新记录种。新组合是：广州孢堆黑粉菌［Ｓｐｏｒｉｓｏｒｉｕｍ ｃａｎｔｏｎｅｎｓｅ（Ｚｕｎｄｅｌ）Ｌ．Ｇｕｏ］香茅粒孢堆黑粉菌［Ｓｐｏｒｉｓｏｒｉｕｍ ｃｙｍｂｏｐｏｇｏｎｉｓ－ｄｉｓｔａｎｔｉｓ（Ｌｉｎｇ）Ｌ．Ｇｕｏ］和海南孢堆黑粉菌［Ｓｐｏｒｉｓｏｒｉｕｍ ｂａｉｎａｎａｅ（Ｚｕｎｄｅｌ）Ｌ．Ｇｕｏ］。中国新记录种为：中间黑粉菌（Ｕｓｔｉｌａｇｏ ｔａｎａｋａｅ     

[^3H]Cortisol及[^3H]Dexamethasone在大鼠肝细胞膜上的特异结合位点

本研究应用［３Ｈ］ｃｏｒｔｉｓｏｌ和［３Ｈ］ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ（ＤＥＸ）两种配基,观察到大鼠肝细胞膜上存在一类糖皮质激素（ＧＣ）特异结合位点。这些位点与ＧＣ的结合具有饱和性、高亲和力及低容量。其平衡解离常数（Ｋｄ）分别为１２．８４±６．５８ｎｍｏｌ／Ｌ和４０．２７±２３．４４ｎｍｏｌ／Ｌ;最大结合容量（Ｂｍａｘ）分别为２．５７±１．８４ｐｍｏｌ／ｍｇ蛋白质与０．６４±０．１８ｐｍｏｌ／ｍｇ蛋白质（ｃｏｒｔｉｓｏｌ,ｎ＝４;ＤＥＸ,ｎ＝３;±ＳＥ）。动力学实验数据所得的Ｋｄ值与Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析所得的Ｋｄ值结果基本一致。［３Ｈ］ｃｏｒｔｉｓｏｌ和［３Ｈ］ＤＥＸ饱和结合实验数据用Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图分析,均显示为直线。Ｈｉｌｌ系数则分别为０．９８８０和０．９９９０．竞争抑制实验结果表明,ｃｏｒｔｉｓｏｌ对［３Ｈ］ｃｏｒｔｉｓｏｌ的结合位点有高度特异性竞争,比其它几种类固醇（强的松、黄体酮、ＲＵ４８６、ＤＥＸ）的竞争力至少强４０倍以上．用放射自显影技术进行研究,也提供了［３Ｈ］ｃｏｒｔｉｓｏｌ特异结合银粒位于大鼠肝细胞膜上的依据。     

除草剂阿特拉津生物降解研究进展

阿特拉津（Ａｔｒａｚｉｎｅ）又称氯乙异丙嗪［２－氯－４（乙基）－６－（异丙氨基）－１,３,５－三嗪］,商品名莠去津,是一种广泛使用的三嗪类除草剂,用于阔叶杂草和禾草的防除,如玉米、高梁、甘蔗和库区杂草等。阿特拉津虽然是一种低毒除草剂,但由于它被微生物矿化的过程十分缓慢,在土壤中的半存留期长达４-５７周,所以在施用过这种除草剂的土壤中以及地下水和表面水中,其浓度远远超过３ｐｐｂ的最大允许值,造成对环境的污染［１］。阿特拉津在世界范围内已经使用了近４０年,其在环境中的扩散引起广泛重视,因此研究这种化合物的生物降解机理十分必要。虽然自１９８２年以来先后在诺卡氏菌属（Ｎｏｃａｒｄｉａ）［２,３］、红球菌属（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｕｓ）［４,５］、不动杆菌属（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）［６］、土壤杆菌属（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）［７］和假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）［１,８,９］等多个细菌属中分离到降解阿特拉津的菌株,但直到９０年代中期,对这一生物降解过程所涉及到的基因、酶和中间代谢物仍知之甚少。自１９９５年Ｗａｃｋｅｔ实验室从施用过阿特拉津的土壤中分离到假单胞菌ＡＤＰ菌株以后［１］,阿特拉津的生物降解机理研究获得了迅速发展。此后,又从根瘤菌属（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ）［１０］以及棍状杆菌属（Ｃｌａｖｉｂａｃｔｅｒ）、产碱杆菌属（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｓ）［１１］和Ｒａｌｓｔｏｎｉａ等多个细菌属中分离到降解阿特拉津的细菌。本文主要对假单胞菌ＡＤＰ菌株降解阿特拉津的酶学、遗传学和生物工程研究概况作简要介绍 。     

栗疫菌低毒力dsRNA与真菌病毒dsRNA的序列同源性

以我国栗疫菌［Ｃｒｙｐｈｏｎｅｃｔｒｉａ（＝Ｅｎｄｏｔｈｉａ）ｐａｒａｓｉｔｉｃａ］低毒力菌株ＥｐＣ１４０（广西）的［γ─￣３２Ｐ］ＡＴＰ末端标记ｄｓＲＮＡ作探针,与５种真菌病毒ｄｓＲＮＡ进行分子杂交。探针可与紫孢侧耳病毒（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｓｅｐｉｄｕｓｖｉｕｓ）和小麦全蚀菌病毒（Ｇａｅｕｍａｎ─ｎｏｍｙｃｅｓｇｒａｍｉｎｉｓ·ｖｉｒｕｓ）的ｄｓＲＮＡ杂交,但不能与黑曲霉病毒（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒｖｉｒｕｓ）、产黄青霉病毒（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍｖｉｒｕｓ）和稻瘟菌病毒（Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａｏｒｙｚａｅｖｉｒｕｓ）的ｄｓＲＮＡ杂交。当以低毒力菌株ＥｐＣ３２（云南）作探针时,结果相同。     

植物发育基因克隆技术的新进展

过去２０年,人们已经分离到了相当数量的与发育相关的基因。这主要借助于蛋白质产物的分离纯化,然后根据其氨基酸结构推算其相应的核苷酸序列,并据此合成寡核苷酸探针,最终从ｃＤＮＡ文库或基因组文库中筛选出目的基因。而未知其编码产物的发育基因的分离克隆则是非常困难的工作,以前广泛应用的主要方法有ＤＮＡ标签法（ＤＮＡｔａｇｇｉｎｇ）［１,２,３］,作图克隆法（ｍａｐ－ｂａｓｅｄｃｌｏｎｉｎｇ）［４］,差别筛选法（ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｓｃｒｅｅｎｉｎｇ）［５］和扣除杂交法（ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）［６,７,８］。这些方法虽然都取得了一定的成功,但由于各自的缺陷性,而限制了它们更加广泛的应用。近年来在ＰＣＲ技术的基础上,人们已经建立了若干种分离克隆植物发育基因的新方法。１９９２年,ＬｉａｎｇＰ和ＰａｒｄｅｅＡ［９］首次提出并运用了ｍＲＮＡ差别显示技术（ｍＲＮＡｄｉｆ－ｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ＰＣＲ,ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）来进行基因的分离。实践表明,ｍＲＮＡ差别显示技术在分离、鉴定差别表达的新基因方面与以前的各种技术相比有其独特的优越性,但同时它也存在着重复性较差等缺点。因此,最近研究工作者又在其基础上,发展了诸如代表性差式分析（ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌｄｉｆｅｒｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓ,ＲＤＡ）［１０,１１］和抑制性扣除（或减去）杂交（ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ,ＳＳＨ）［１２］等一些更新的方法。下面就此作一简要概述。     

中国灰蝶科一新记录属三新记录种

本文报道发现于我国云南的灰蝶科Ｌｙｃａｅｎｉｄａｅ１新记录属：塔灰蝶属Ｔｈａｄｕｋａ Ｍｏｏｒｅ,［１８７９］;３新记录种：塔灰蝶Ｔｈａｄｕｋａ ｍｕｌｔｉｃａｎｄａｔａ Ｍｏｏｒｅ,［１８７９］,佩娆灰蝶Ａｒｈｏｐａｌａ ｐｅｒｉｍｕｔａ （Ｍｏｏｒｅ,［１８５８］）和迪花灰蝶Ｆｌｏｓ ｄｉａｒｄｉ（Ｈｅｗｉｔｓｏｎ,１８６２）。     

森林植被动态研究述评

１引言专业名词演替（ｓｕｃｅｓｉｏｎ）是ＪｏｈｎＡｄｌｕｍ首先提出的,Ｄｕｒｅａｕ第一个真正地在生态学的意义上使用了演替［４２］,Ｔｈｏｒｅａｕ给演替赋予了明确的定义［３７］。Ｃｌｅｍｅｎｔｓ［７１,７２］和Ｇｌｅａｓｏｎ［８４］则是第一批对演替过...     

云木香化学成分研究Ⅱ

从丽江产云木香（ＳａｕｓｒｅａｌａｐｐａＣ．Ｂ．Ｃｌａｒｋｅ）根中分离得到的另外７个化合物,它们分别是＿孕甾烯醇酮（ｐｒｅｇｎｅｎｏｌｏｎｅ）（１）,β－谷甾醇（β－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ）（２）,葫萝卜甙（ｄａｕｃｏｓｔｅｒｏｌ）（３）,苯丙素甙（ｓｙｒｉｎｇｉｎ）（４）,木质素甙（１－ｈｙｄｒｏｘｙｐｉｎｏｒｅｓｉｎｏｌ－１－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）（５）,油酸［（ｚ,ｚ）－９,１２－ｏｃｔａｄｅｃａｄｉｅｎｏｉｃａｃｉｄ］（６）和油酸－１,３－甘油二酯［（ｚ,ｚ）－９,１２－ｏｃｔａｄｅｃａｄｉｅｎｏｉｃａｃｉｄ－２－ｈｙｄｒｏｘｙ－１,３－ｐｒｏｐａｎｅｄｉｎｙｌｅｓｔｅｒ］（７）．它们的结构通过波谱和化学的方法得到鉴定。其中化合物１作为天然产物首次从植物中分离得到,化合物３,４,５和７为首次从该植物中分离得到。     

中国链格孢属的研究Ⅰ

本文报道链格孢属的２个新种：寄生在苦木科（Ｓｉｍａｒｏｕｂａｃｅａｅ）臭椿［Ａｉｌａｎｔｈｕｓ ａｌｔｉｓｓｉｍａ （Ｍｉｌｌ）．Ｓｗｉｎｇｌｅ］上的臭椿链格孢（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｉｌａｎｔｈｉ ｓｐ．ｎｏｖ．）,寄生在桦木科（Ｂｅｔｕｌａｃｅａｅ）黑桦（Ｂｅｔｕｌａ ｄａｈｕｒｉｃａ Ｐａｌｌ．）上的桦木链格孢（Ａ．ｂｅｔｕｌａｅ ｓｐ．ｎｏｖ）,２个新组合：豆链格孢［Ａ．ａｚｕｋｉａｅ（     

幽门螺旋菌的分子生物学研究现状

幽门螺旋菌的分子生物学研究现状王正祥（扬州大学医学院微生物学教研室,江苏扬州２２５００１）自从Ｗａｒｒｅｎ和Ｍａｒｓｈａｌｌ［１］于１９８２年成功分离出幽门螺旋菌（ＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒＰｙｌｏｒｉ）以来,国内外大量的研究结果［２,４］已确定Ｈ．ｐ...     

槲皮素硫酸酯对猪血小板胞浆游离钙浓度和蛋白激酶C的影响

槲皮素（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ,Ｑｕｅ）,是一种天然的黄酮类化合物,具有多种生物活性［１］,但是Ｑｕｅ水溶性差,口服时胃肠难以吸收［２］．因此,为进一步开发和利用Ｑｕｅ,人工合成水溶性Ｑｕｅ——槲桷皮素硫酸酯（ｓｏｄｉｕｍｑｕｅｒｃｅｔｉｎｓｕｌｆａｔｅ...     

[B3—Lys]—胰岛素的研究：受体结合及生物活性

本文用＾１２５Ｉ－［Ｂ３－Ｌｙｓ］－胰岛素和＾１２５Ｉ－胰岛素研究了［Ｂ３－Ｌｙｓ］－胰岛素和胰岛素与人胎盘细胞膜胰岛素受体结合物性并进行了比较。实验结果表明［Ｂ３－Ｌｙｓ］－胰岛素与ＨＰＭ胰岛素受体结合能力比天然猪胰岛素高。由竞争取代曲线得到的［Ｂ３－Ｌｙｓ］－胰岛素和猪胰岛素的ＩＣ（５０）值分另为０．６５和１．１１ｎｍｏｌ／Ｌ。经Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分别得出［Ｂ３－Ｌｙｓ］－胰岛素与ＨＰＭ胰岛素     

我国新担子菌类补遗

在研究甘肃、四川、云南的担子菌类时发现如下４新种：云南地红菇（ＭａｃｏｗａｎｉｔｅｓｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓＺａｎｇ）,属红菇科（Ｒｕｓｕｌａｃｅａｅ）,地红菇属（ＭａｃｏｗａｎｉｔｅｓＫａｌｃｈｂｒ．）系我国新记录;松针锈耳（ＣｒｅｐｉｄｏｔｕｓｐｉｎｉｃｏｌａＺａｎｇ）绣耳科（Ｃｒｅｐｉｄｏｔａｃｅａｅ）;蛇盖条孢牛肝菌（ＢｏｌｅｔｅｌｕｓｓｅｒｐｅｎｔｉｐｉｌｅｕｓＺａｎｇｅｔＹｕａｎ）,属松塔牛肝菌［疣孢牛肝菌科］（Ｓｔｒｏｂｉｌｏｍｙｃｏｔａｃｅａｅ）;喜杉绒盖牛肝菌（ＸｅｒｏｃｏｍｕｓｐｉｃｅｉｃｏｌａＺａｎｇｅｔＹｕａｎ）,属牛肝菌科（Ｂｏｌｅｔａｃｅａｅ）;长柄灰包（ＬｙｃｏｐｅｒｄｏｎｌｏｎｇｉｓｔｉｐｕｍＺａｎｇｅｔＹｕａｎ）,属灰包科（Ｌｙｃｏｐｅｒｄａｃｅａｅ）。     

木姜子属生物碱的研究概况(综述)

樟科木姜子属（ＬｉｔｓｅａＬａｍ．）全球约２００种,主要分布于亚洲的热带和亚热带。我国有７２种,在北纬１８°至３４°间均有分布,但主产南方和西南温暖地区,为森林中习见的树木。本属植物的主要用途是提取芳香油（工业上的重要原料）和作为中草药［１］。在我国本属有１７种植物可入药［２］。如药典记载的毕澄茄－山鸡椒（Ｌ．ｃｕｂｅｂａ）的干燥成熟果实,有温中散寒、行气止痛的功效［３］;天目木姜子（Ｌ．ａｕｒｉｃｕｌａｔａ）、木姜子（Ｌ．ｐｕｎｇｅｎｓ）、清香木姜子（Ｌ．ｅｕｏｓｍａ）、潺槁木姜子（Ｌ．ｇｌｕ…     

武陵山地区鱼类寄生杆咽属线虫两新种

本文报道在武陵山地区的白甲鱼［（Ｖａｒｉｃｏｒｋｉｎｕｓ（Ｏｎｙｃｈｏｓｔｏｍａ）ｓｉｍｕｓ（ＳａｕｖａｇｅｅｔＤａｂｒｙ）］和沪溪直口峻（ＲｅｃｔｏｒｉｓｌｕｘｉｅｎｓｉｓＷｕｅｔＹａｏ）中发现的两种杆咽属（Ｒｈａｂｄｏｃｈｏｎａ）线虫新种,定名为白甲鱼杆咽线虫,新种（ＲｈａｂｄＯｃｈｏｎａｏｎｙｒｋｏｓｔｏｍｉｓｐ．ｎｏｖ．）和短咽杆咽线虫,新种（ＲｈａｂｄＯｃｈｏｎａｂｒｅｖｉｃｈｏｎａｓｐ．ｎｏｖ．）,并对两新种进行了测量和详细的描述。     

文摘

基因工程９８０１３４人工纤维状蛋白：一篇综述［英］／ＨｅｓｌｏｔＨ．／／Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ．－１９９８，８０（１）．－１９～３１［译自ＤＢＡ，１９９８，１７（１９），９８－０８２７８］从以下方面综述了人工纤维状蛋白（ＡＦＰｓ）：家蚕（Ｂｏｍｂｙｘｍｏ...     

显示基因表达差异的PAGE—银染技术

ｄｄＲＴ－ＰＣＲ（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙ　ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎ－ｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）技术是Ｌｉａｎｇ和Ｐａｎｄｅｅ~（［１］）于１９９２年首先建立的一种在ＲＮＡ水平上显示基因表达差异,进而分离目的基因的有效方法。与其它分离基因的方法相比,ｄｄＲＴ－ＰＣＲ方法具有许多优点~（［２］）,目前已经成为筛选未知差异表达基因的最为有效的方法之一。ｄｄＲＴ－ＰＣＲ是３种技术的有机结合：（１）通过错定引物Ｔ１２ＭＮ（Ｍ＝Ａ、Ｔ、Ｃ、Ｇ,Ｎ＝Ａ、Ｃ…