共查询到20条相似文献,搜索用时 0 毫秒
1.
大鼠脑谷氨酸脱羧酶基因的cDNA克隆及序列分析 总被引:4,自引:0,他引:4
胰岛β-细胞自身抗原蛋白之一是脑中谷氨酸脱羧酶(Glutamicaciddecarboxylase,GAD,EC4.1.1.15)同源物,以双链cDNA为模权,用PCR方法快速克隆了Wistar大鼠脑GAD基因的cDNA将此包括编码593个氨基酸的全长DNA片段重组入pUC质粒并用双脱的氧末端终止法测定了全部序列,证明其全长为1779bp,经比较发现Wistar大鼠脑与Russell报导的大鼠脑G 相似文献
2.
3.
以野生型拟南芥(Arabidopsis Columbia)基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到拟南芥生长素受体基因TIRI启动子2008片段,将该片断克隆到PGM-T载体上。序列分析表明,该启动子大小为2008bp,RNA聚合酶识别序列TATA-box,TIR1特异表达和增强序列CAAT-box皆完整,与已报道的序列比较仅有3个核苷酸发生改变,同源性为99.85%。将该启动子与GUS基因融合,构建成表达载体后,在拟南芥和烟草叶片中做瞬时表达,结果分析显示:拟南芥和烟草叶片中均有GUS酶活性存在。 相似文献
4.
大鼠脑α1型甲状腺激素受体基因cDNA克隆及序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
使用RT-PCR方法克隆了Wistar大鼠脑α1型甲状腺激素受体的cDNA,得到包含起始及终止密码子共1233bp、编码409个氨基酸的受体全长编码离列,酶切分析后,将此特异DNA片段重组入质粒pUC系统,得重组质料pTRA。双脱氧末端终止法测定了全部核苷酸顺序。 相似文献
5.
6.
为了获得HIV辅助受体CXCR4基因,进一步探索艾滋病(AIDS)的诊断、防治方法,采用逆转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)从中国人外周血淋巴细胞中克隆了CXCR4 cDNA基因,得到了预期的1 100bp左右的片段。将PCR产物与T载体连接,并进行了酶切反应鉴定,获得与T载体正向连接的克隆。测序结果表明:克隆的片段含有一个开放性阅读框架,编码352个氨基酸残基。搜索GenBank,目标片段与M99293、XM051223、XM051224、 XM051225有很高的同源性,比较结果显示:克隆的片段包括完整的编码序列,含两个碱基的差异。 相似文献
7.
华南农业大学广东省果蔬保鲜重点实验室陆旺金博士对香蕉果实expansin cDNA做了研究,他提取成熟香蕉果肉的RNA并分离mRNA,以mRNA反转录合成cDNA,以该cDNA为模板,设计expansin的简并引物,进行RT-PCR圹增,利用退火温度为50℃得到扩增产物纯化后与pGEM-T-Ea-Sy载体连接转化大肠杆菌,任意桃选2个阳性克隆,进行序列分析,结果得到2个序列相同的expansin的cDNA基因片段,命名为MA-EXP3,以示与登录的香蕉MA—EXP1和MA—EXP2相区别。MA—EXP3中存在expansin基因的保守区域即8个半胱氨酸残基和3个色氨酸残基,它编码为177个氨基酸与MA—EXP1的核苷酸同源性为74.2%,与氨基酸的同源性为86.4%。 相似文献
8.
9.
中国人HIV辅助受体CXCR4基因的克隆及序列测定 总被引:1,自引:0,他引:1
为了获得HIV辅助受体CXCR4基因,进一步探索艾滋病(AIDS)的诊断、防治方法,采用逆转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)从中国人外周血淋巴细胞中克隆了CXCR4 cDNA基因,得到了预期的1 100bp左右的片段.将PCR产物与T载体连接,并进行了酶切反应鉴定,获得与T载体正向连接的克隆.测序结果表明克隆的片段含有一个开放性阅读框架,编码352个氨基酸残基.搜索GenBank,目标片段与M99293、XM051223、XM051224、XM051225有很高的同源性,比较结果显示克隆的片段包括完整的编码序列,含两个碱基的差异. 相似文献
10.
草莓果实膜联蛋白基因(annfaf)全长cDNA克隆及序列分析 总被引:3,自引:0,他引:3
采用RACE技术从草莓(Franaria ananassa Duch)成熟果实中分离克隆了膜联蛋白(annexin)基因的cDNA5'-端未知序列,并通过测序确定了翻译的起始密码位点,终止密码位点及完整的读码框,从而首次获得了草莓果实膜联蛋白基因的cDNA全序列,命名为annfaf9annexin of Fragaria anananssa fruit)基因。 相似文献
11.
草鱼出血病病毒基因组的cDNA合成、克隆及部分序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
采用差速离心的方法纯化感染草鱼出血病病毒的细胞悬液.提纯的病毒粒子经蛋白酶K处理和酚-氯仿抽提,在1%琼脂糖凝胶电泳条件下分离得到11条dsRNA,利用柱离心式胶回收试剂盒纯化各基因片段.纯化的dsRNA溶于90%的DMSO中,70℃变性15min,然后采用随机引物法反转录合成各基因片段的cDNA,并平头连接于pZErO 2.0载体的EcoRV位点,电转化TOP10感受态细胞.重组质粒经酶切、PCR扩增得到大小不等的插入片段,cDNA-RNA斑点杂交的结果进一步证实其插入为目的基因片段.采用循环PCR测序的方法,对其插入片段进行了序列测定,对其中第11片段的部分序列作了报道. 相似文献
12.
采用差速离心的方法纯化感染草鱼出血病病毒的细胞悬液。提纯的病毒粒子经蛋白酶K处理和酚氯仿抽提,在1%琼脂糖凝胶电泳条件下分离得到11条dsRNA,利用柱离心式胶回收试剂盒纯化各基因片段。纯化的dsRNA溶于90%的DMSO中,70℃变性15min,然后采用随机引物法反转录合成各基因片段的cDNA,并平头连接于pZErO2.0载体的EcoRV位点,电转化TOP10感受态细胞。重组质粒经酶切、PCR扩增得到大小不等的插入片段,cDNARNA斑点杂交的结果进一步证实其插入为目的基因片段。采用循环PCR测序的方法,对其插入片段进行了序列测定,对其中第11片段的部分序列作了报道。 相似文献
13.
拟南芥生长素受体基因TIR1启动子的克隆及序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
以野生型拟南芥 (Arabidopsis Columbia)基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到拟南芥生长素受体基因TIR1启动子2008片段,将该片断克隆到PGM-T载体上.序列分析表明,该启动子大小为2008bp,RNA聚合酶识别序列TATA-box,TIR1特异表达和增强序列CAAT-box皆完整,与已报道的序列比较仅有3个核苷酸发生改变,同源性为99.85%.将该启动子与GUS基因融合,构建成表达载体后,在拟南芥和烟草叶片中做瞬时表达,结果分析显示:拟南芥和烟草叶片中均有GUS 酶活性存在. 相似文献
14.
水稻中编码甘油—3—磷酸转酰酶部分cDNA的克隆及序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
参照国外报道的几种双子叶植物的甘油-3-磷酸转酰酶的相对保守的氨基酸序列,设计并合成了一对简并引物,提取抗冷性强的水稻品种“丽梗2号”的RNA,采用RT-PCR技术,扩增出315bp的一般cDNA片段。扩增产物经纯化后直接克隆到pGEM-T载体系统中,经PCR法鉴定,所得的重组质粒中含有315bp的片段。 相似文献
15.
天蚕卵黄原蛋白cDNA的全碱基序列由5 720个碱基构成,一个开读框有5 334个碱基序列,编码了包括由15个氨基酸组成的信号肽在内的共1 778个氨基酸的蛋白质前体。天蚕和柞蚕卵黄原蛋白的同源性非常高,氨基酸序列达到92.6%,碱基序列达到94%。天蚕、柞蚕和家蚕的卵黄原蛋白的糖链附加位点(N-linkedg-lycosylationsite):柞蚕有4个,家蚕有5个,天蚕和家蚕相同保存着5个。在N-末端区域,天蚕和家蚕有多聚丝氨酸区域和可被胰蛋白酶识别的RSRR部位;柞蚕虽然也具有多聚丝氨酸区域,但没有可被胰蛋白酶识别的RSRR部位。在C-末端区域里,大多数昆虫从G ICG功能部位至C-末端结尾具有7个~10个半胱氨酸(Cys)。鳞翅目的4种昆虫柞蚕、天蚕、家蚕和舞毒蛾(A.pernyi,A.yam am ai,B.m ori,L.dispar)都是7个半胱氨酸。 相似文献
16.
17.
中国对虾蜕皮抑制激素全长cDNA的克隆及序列分析 总被引:17,自引:1,他引:17
对虾的蜕皮活动由蜕皮抑制激素和蜕皮激素调控,蜕皮抑制激素是甲壳动物CHH家族神经肽的成员之一,通过抑制Y器官蜕皮激素的合成而调节蜕皮,以中国对虾(Fennropenaeus chinensis)眼柄总RNA为材料,采用cDNA末端快速扩增(RACE)方法。首次得到蜕皮抑制激素的全长cDNA(GenBank登录号:AF469187)。该全长cDNA大小为697bp,是由320bp的3′RACE产物和468bp的5′RACE产物拼接而成,Blast搜索结果显示,该全长cDNA与甲壳动物的MIH基因序列具有较高的相似性,用Clustal X进行多序列比较结果表明,由该全长cDNA推导的氨基酸序列与对虾类的MIH的氨基酸序列同源性最高,其中与日本对虾,斑节对虾,刀额新对虾MIH的同源性分别为95.1%,83.1%,79.1%,根据以上数据,推断该697bp的全长cDNA为编码中国对虾MIH前体的cDNA。进一步序列分析表明,编码中国对虾MIH前体cDNA包括312bp的开放阅读框,81bp的3′UTR和302bp的5′UTR;编码103个氨基酸的MIH前体分子包括信号肽和成熟肽,信号肽由28个氨基酸组成,成熟肽由75个氨基酸组成,成熟肽中6个半胱氨酸非常保守。 相似文献
18.
河套蜜瓜ACC合成cDNA酶片段的克隆和序列分析 总被引:3,自引:0,他引:3
1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)合成酶是高等植物中乙烯生物合成的关键酶。以成熟河套蜜瓜果实的RNA为模板,经反转录和PCR扩增得到预期大小的DNA片段,插入到PUC19的SmaI位眯后转化E.coliJM109,筛选出重组子PHMAS1。离列分析表明获得了627bp的ACC合成酶cDNA片段。与已报道的ACC合成酶基因相应离理比较有很高的同源性。 相似文献
19.
20.
通过一步法提取黑曲霉AS3.796的总RNA,利用依据其他黑曲霉β-葡萄糖苷酶(bgl)基因序列设计的一对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增得到了该菌bgl基因cDNA片段。将目的片段与pGEM-T载体连接并转入大肠杆菌。序列测定结果表明该cDNA片段大小为2583bp,其基因序列与已公布的其它黑曲霉bgl基因的同源性最高可达99%。蛋白质分析结果表明该β-葡萄糖苷酶属于糖苷水解酶家族3成员。 相似文献