乙型肝炎病毒X基因转基因小鼠模型的建立及其应用研究进展

主要介绍了乙型肝炎病毒X基因转基因小鼠模型的建立,及其在HBx的反式激活作用和肝细胞癌等方面的研究进展。     

乙型肝炎病毒X基因及HBx蛋白的研究进展

我国是乙型肝炎高发区,乙型肝炎病毒(HBV)X基因及其编码的多功能蛋白HBx是乙型肝炎病毒基因转录所必需的作用因子,在乙肝的致病过程中起到重要作用。HBx可直接或间接改变肝脏结构细胞的结构和功能,引发肝脏细胞的凋亡;具有广泛的非特异性反式激活作用,反式激活细胞内的某些癌基因或病毒基因,与乙型肝炎和肝细胞癌的发生关系十分密切。本文从多方面综述了X基因及HBx蛋白目前的研究进展,展现了X基因功能的多样性。     

乙肝病毒HBx基因克隆及其转基因鼠表达载体构建

乙型肝炎病毒X蛋白HBx与肝细胞癌的发生有很高的相关性。PCR扩增并克隆了HBx基因及其失活突变体HBx-M13。构建了HBx基因及HBx-M13在小鼠肝脏的特异性表达载体。为建立转HBx基因及HBx-M13的小鼠动物模型、进一步研究HBx在肝癌发病过程中的分子生物学机理奠定了基础。     

综述:乙型肝炎病毒所致非可控性炎症恶性转化的可能机制

肝细胞癌(HCC)占我国大陆地区恶性肿瘤死亡原因的第二位,主要由乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染所致.人类白细胞Ⅱ类抗原遗传多态性与HBV感染的慢性化有关.HBV与免疫系统相互作用导致的非可控性炎症是HBV进化和HCC发生的必要因素.持续的、非充分的抗病毒免疫对HBV变异有选择作用.在炎症促癌过程中病毒和肝细胞基因组均经历了"变异-选择-适应"的进化过程.HBV变异不但能预测HCC的发生,而且具有促癌功能.HBV在肝细胞基因组中整合,尤其是羧基端截短型X基因的整合不但促进HCC的发生和转移,而且抵抗抗病毒治疗.明确HBV致癌机制可为降低和推迟HCC的发生和转移奠定基础.     

乙型肝炎病毒所致非可控性炎症恶性转化的可能机制

肝细胞癌(HCC)占我国大陆地区恶性肿瘤死亡原因的第二位,主要由乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染所致.人类白细胞Ⅱ类抗原遗传多态性与HBV感染的慢性化有关.HBV与免疫系统相互作用导致的非可控性炎症是HBV进化和HCC发生的必要因素.持续的、非充分的抗病毒免疫对HBV变异有选择作用.在炎症促癌过程中病毒和肝细胞基因组均经历了"变异-选择-适应"的进化过程.HBV变异不但能预测HCC的发生,而且具有促癌功能.HBV在肝细胞基因组中整合,尤其是羧基端截短型X基因的整合不但促进HCC的发生和转移,而且抵抗抗病毒治疗.明确HBV致癌机制可为降低和推迟HCC的发生和转移奠定基础.     

乙型肝炎病毒X蛋白(HBx):一种多功能的病毒调节因子

乙型肝炎病毒(HBV)的慢性感染是导致肝细胞癌(HCC)的主要危险因子。X蛋白(HBx)被认为在肝细胞癌的发生发展中起重要作用。X基因是HBV基因组最小的开放读码框,它编码的X蛋白含154个氨基酸,分子量约为16．5kD。HBx是一种多功能的病毒调节因子,通过调节细胞和病毒的转录活性、信号传导途径、基因毒性压力反应、蛋白质降解等,直接或间接地影响HBV的复制和增殖。HBx亦可影响细胞周期调控、细胞凋亡,从而可能在慢性活动性肝炎和肝硬化的病程中起到起始肿瘤形成的作用。     

肝细胞在HBx刺激和低氧压力时表达IL-2（英文）

肝细胞肝癌有极端坏的预后,主要归因于它的高转移性复发.我们曾经报道过对于乙型肝炎相关性肝癌患者,癌周组织的白介素2(IL-2)水平越高就倾向于有更低的肝内转移复发率,而且IL-2的免疫组化显示主要着色于癌周的肝细胞.然而,是否肝细胞能在体外表达IL-2以及其内在机制仍未被揭示.本研究里,比较了有和没有肝炎病史的肝癌患者的癌周组织IL-2表达水平,然后在永生化的成人肝细胞THLE-2里过表达了乙型肝炎病毒x蛋白(HBx),并用过氧化氢处理模拟氧压力微环境.实验证实肝细胞在HBx刺激和低氧压力同时存在下能通过MAP3K7/NF-κB通路表达IL-2.研究结果提示靶向调节微环境氧化压力为预防和治疗乙肝相关性肝癌的转移复发提供了新的方向.     

非甲非乙型肝炎和肝细胞癌

<正> 目前,非甲非乙型肝炎病毒虽未确定,但其携带者的存在已无疑。有关非甲非乙型肝炎病毒与慢性肝炎、肝硬变和肝细胞癌的研究甚多。作者对乙型肝细胞癌和非甲非乙型肝细胞癌的临床病理现象进行探讨、比较。1974～1978年收治肝细胞癌患者共163例,将其中无输血史、HBsAg~+、抗-HB_c~+的病例作为乙型肝细胞癌(B组),将有输血史、HBsAg~-、抗-HBC~-的病例作为非甲非乙型肝细胞癌(非B组)。结果分析如下。     

HBx参与肝细胞癌发生发展调控的分子机制

肝细胞癌 (hepatocellular carcinoma, HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一,而HBV慢性感染是肝癌发生的主要原因.乙型肝炎病毒(HBV)中X基因编码的一种多功能蛋白(HBx),参与众多重要生物学过程的调控,并促进肝细胞癌的发生. 早期研究表明,HBx在HCC发生过程中发挥重要的调控功能,但其确切分子机制尚未完全明确. 近几年,HBx参与生物学过程的分子机制研究有了较快的进展. 有趣的是,研究发现,HBx在不同的细胞系以及HBV感染的不同阶段发挥促抑凋亡的双重作用,HBx还参与细胞自噬的调控. 此外,在HBx参与细胞增殖及肿瘤侵袭和转移等方面,也产生了一些新的认识. 本文将从HBx对肝细胞凋亡、自噬和增殖的调控及其对肝癌细胞转移和侵袭的调控等方面,对HBx参与肝细胞癌发生发展调控机制做一综述.     

乙型肝炎病毒C蛋白和X蛋白的修饰及其意义

乙型肝炎病毒(HBV)作为一个外来入侵的病毒可以激发人体的免疫反应,导致人体一系列与HBV感染有关的病理变化与临床表现.HBC和HBX是由HBV基因编码的两种重要蛋白.HBC对病毒基因组的复制和成熟是必不可少的,其蛋白修饰后的产物对病毒在宿主细胞内的组装、成熟和对外分泌中发挥着作用.HBX能与多种蛋白发生相互作用,在HBV的复制中起着不可或缺的作用,也影响着肝细胞癌的形成.现有的对HBC和HBX的磷酸化和泛素化过程的研究,为进一步揭示HBV的致病机制提供了依据,希望最终为乙型肝炎的临床治疗寻找一条新的途径.     

HBVX蛋白与基因调控和肿瘤形成的关系

乙型肝炎病毒Ｘ蛋白是乙型肝炎病毒基因组的四个开读框架之一,Ｘ－ＯＲＦ编码一分子量约为１７ｋＤ,约含有１５４个氨基酸的蛋白质。实验证实ＰＸ是一种反式作用因子,能与细胞内多种与转录、基因调节有关的因子结合,广泛激活病毒和细胞的启动子,参与基因调控,与ＨＢＶ慢性感染后所形成的肝细胞肿瘤密切相关。ＰＸ本身不具有直接结合双链ＤＮＡ的能力,它主要是通过蛋白与蛋白间的相互作用来行使功能,其中包括直接与一般转录因     

酵母重组DNA制备乙肝疫苗的标准化和检定规程的建议

<正> 引言 疾病: 乙型肝炎至少是引起带有肝脏病变的全身性感染的三种肝炎(甲型肝炎、乙型肝炎、非甲非乙型肝炎)的病毒之一。乙型肝炎是所有病毒性肝炎中最严重的一种,由于它占一些国家中,全部具有临床症状肝炎的一半,死亡率较高,急性病死率约占1％,甚至更严重的是有5％-10％的乙肝病人变成慢性携带者。加之无法与急性临床疾病相联系的慢性肝病、肝硬变和肝细胞癌,目前都     

肝细胞在HBx刺激和低氧压力时表达IL-2

肝细胞肝癌有极端坏的预后,主要归因于它的高转移性复发．我们曾经报道过对于乙型肝炎相关性肝癌患者,癌周组织的白介素2 (IL-2)水平越高就倾向于有更低的肝内转移复发率,而且IL-2的免疫组化显示主要着色于癌周的肝细胞．然而,是否肝细胞能在体外表达IL-2以及其内在机制仍未被揭示．本研究里,比较了有和没有肝炎病史的肝癌患者的癌周组织IL-2表达水平,然后在永生化的成人肝细胞THLE-2里过表达了乙型肝炎病毒x蛋白(HBx),并用过氧化氢处理模拟氧压力微环境．实验证实肝细胞在HBx刺激和低氧压力同时存在下能通过MAP3K7/NF-κB通路表达IL-2．研究结果提示靶向调节微环境氧化压力为预防和治疗乙肝相关性肝癌的转移复发提供了新的方向．     

乙型肝炎病毒动物模型研究进展

乙型肝炎病毒感染是全球范围影响人类健康的重要问题,慢性感染人群存在肝硬化和肝细胞癌的高患病风险。尽管乙型肝炎病毒疫苗有效,但是在世界范围内慢性感染人数超过了3.5亿,占全球人数的5%。乙型肝炎病毒的生物学研究及新治疗发展进展缓慢是由于缺乏合适的动物模型,每一种动物模型都有其优势和特殊弊端。简要综述了各种动物模型在乙型肝炎病毒研究中的应用进展。     

肝细胞癌中FHIT基因启动子甲基化状态分析及其与临床病理特征之间的关系研究

目的:分析肝细胞癌组织中FHIT基因启动子甲基化状态及其与FHIT基因表达和肝细胞癌临床病理特征的关系。方法:运用甲基化特异性PCR(MSP)方法分析肝细胞癌组织和癌旁正常肝脏组织中FHIT基因启动子甲基化状况;应用RT-PCT和Western免疫印迹方法检测FHIT基因mRNA和蛋白的表达情况;统计学分析FHIT基因启动子甲基化与肝细胞癌临床病理特征的关系。结果:MSP分析结果表明肝细胞癌组织中FHIT基因甲基化率(60.8%)显著高于癌旁正常组织中FHIT基因甲基化(16.2%;x2=31.071,P=0.000)。同时我们还发现:发生完全或者部分甲基化的肝细胞癌组织或者癌旁正常肝组织中FHIT基因mRNA和蛋白表达水平显著降低。FHIT基因启动子甲基化和肝细胞癌患者的临床分期和肝外转移情况密切相关(P=0.006和0.049),而与其他临床病理特征无相关性(P>0.05)。结论:FHIT基因甲基化是导致FHIT基因在肝细胞癌中失活的一个重要因素,与肝细胞癌的发生密切相关,有望成为肝细胞癌早期诊断的分子检测标志物和分子治疗新靶点。     

乙型肝-T炎病毒和黄曲霉素协同在裸鼠体内诱发人胎肝细胞癌变的研究

为了研究乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）和黄曲霉素（AFB1）在肝癌发生过程中的作用,用HBV感染人胚胎肝细胞移植至裸鼠背部皮下,以后每周注射AFB1,能诱发裸鼠成瘤,实验分为4组：A组为HV＋AFB1组,即用HBV感染的人胚胎肝细胞移植于裸鼠,同时注射AFB1;B组为HBV^ 组,用HBV感染的人胚胎肝细胞移植于裸鼠,不注射AFB1;C组为AFB1^ 组,用不感染HBV的人胚胎肝细胞移植于裸鼠,注射AFB1;D组为对照组,用不感染HBV的人胚胎肝细胞移植于裸鼠,也不注射AFB1。结果：A组成瘤率为27．3％（6／22）,B组0％,C组13．3％（2／15）,D组0％,所有肿瘤病理诊断均为肝细胞癌。用EMA单抗检测,证实为人来源细胞。PCR和DNA狭缝印迹显示：HBV X和HBV S基因阳性,证明HBV基因已在瘤细胞中。细胞首次用人乙肝病毒协同AFB1在裸鼠体内诱发成功人肝细胞癌,证明了ABV协同AFB1,在人肝细胞癌发生过程中的病因作用。同时,为进一步研究肝癌的发生及防治了良好的动物模型。     

乙型肝炎病毒X蛋白与内质网应激关系的研究进展

乙型肝炎病毒X蛋白是由乙型肝炎病毒X区转录翻译而成的多功能调节因子,与多种肝脏疾病的发生发展关系密切。近有研究表明,内质网应激受到乙型肝炎病毒X蛋白的调控,促进细胞存活。本文就研究现况对乙型肝炎病毒X蛋白和内质网应激的相关性进行总结,以期为进一步研究提供参考。     

环氧化物水解酶2在肝细胞癌中的表达水平与功能作用

本研究通过公共数据和实验数据,全面分析环氧化物水解酶2(epoxide hydrolase 2, EPHX2)在肝细胞癌中的表达情况、功能作用以及预后意义。利用GEO和MitoCarta数据集,筛选肝细胞癌中呈差异表达的线粒体相关基因;利用TCGA数据库分析EPHX2及其相关基因在肝细胞癌中的表达水平;运行R包绘制Kaplan-Meier生存曲线和功能富集分析;基于STRING和GSEA构建蛋白质互作网络和基因集富集分析;荧光定量PCR和GEO数据集验证EPHX2在肝细胞癌中的表达水平。本研究共筛选得到15个在肝细胞癌中呈差异表达的线粒体相关基因。EPHX2在肝细胞癌组织中的表达水平显著降低(P<0.01)。EPHX2表达水平与肝癌患者性别、分期和级别有关,而与年龄、T分期等因素无关。与EPHX2低表达组肝癌患者相比,EPHX2高表达组肝癌患者预后较好。功能富集结果显示,EPHX2与补体途径、脂肪酸降解等信号通路有关。蛋白质互作网络结果显示,EPHX2与HAO1、AGXT、ACOX1、GSTκ1、SCP-2、CAT、CYP2C8,CYP2C9,CYP2B6,和CYP2J2等密切相关。GSEA结果显示,EPHX2低表达组与肝癌细胞增殖、肝癌复发等基因集正相关。荧光定量PCR和GEO数据集验证结果显示,EPHX2在肝细胞癌组织和肝癌细胞株中呈显著低表达。EPHX2在肝细胞癌中呈显著低表达,提示其可能在肝细胞癌发生发展过程中发挥抑癌基因作用,但具体作用机制还需进一步验证。     

基于生物信息学分析的肝癌核心基因的筛选及验证

本研究基于GEO数据库,选取由慢性乙型肝炎诱导的肝细胞癌芯片数据GSE121248为研究对象,利用GEO2R软件分析数据,筛选出差异表达基因,利用DAVID数据库进行GO分析和KEGG pathway富集分析.利用STRING数据库构建PPI网络,分析筛选核心基因.利用GEPIA对核心基因的表达进行验证,Kaplan ...