哺乳动物早期胚胎细胞的极性与分化

哺乳动物早期胚胎细胞具有极性,在桑椹胚以前细胞极性由不稳定变为稳定。细胞极性包括表面极性和细胞质极性。细胞极性与滋养层和内细胞团两种细胞系的建立密切相关。细胞的极化使细胞形成顶-基轴,细胞分裂后,顶半球产生的极性子细胞分化为滋养层,基半球产生的非极性子细胞建立了内细胞团。内细胞团偏向胚泡一侧,使胚胎形成了胚-对胚轴(EA轴)。细胞分化是许多因素的综合效应,不能简单地归结为决定子的单独作用。     

早期哺乳动物胚胎的遗传操作

该书分四部分:一、发育遗传学(6篇);二,内源病毒及病毒载体(5篇):三、将克隆基因导入哺乳动物的种系中(11篇);四、非哺乳动物的基因转移系统(3篇)。 此书是1984年秋在英国Banbury举行的“哺乳动物卵及早期胚胎遗传操作会议”上发表的论文集。     

一种简单的无尾两栖类早期胚胎细胞染色体的制备法

众所周知,两栖动物是实验胚胎学研究自 古以来使用得最有价值的材料之一。近年来, 发育问题的研究已经深入到细胞、亚细胞以至 分子水平。两栖类材料被广泛地应用于研究动 物发育过程中基因表达的调控［’］。为了深人研 究两栖动物的发育过程,尤其是发育过程中核 质关系和细胞分化等发育生物学的核心间题, 迫切需要有一种简便可靠的分析其胚胎早期发 育阶段的染色体的技术。用压片法研究无尾两 栖类早期胚胎细胞的染色体,已有报道3,但这 种方法难以避免压片时人为因素的影响。我们 参考前人在这方面的工作〔2,5,61,并进行了改进, 以空气干燥法制作无尾两栖类胚胎细胞的染色 体标本,已获得初步的结果。现把我们的工作 总结如下。     

一种简单的无尾两栖类早期胚胎细胞染色体的制备法

众所周知,两栖动物是实验胚胎学研究自古以来使用得最有价值的材料之一。近年来,发育问题的研究已经深入到细胞、亚细胞以至分子水平。两栖类材料被广泛地应用于研究动物发育过程中基因表达的调控。为了深入研究两栖动物的发育过程,尤其是发育过程中核     

哺乳动物早期胚胎体外培养的研究

体外培养哺乳动物卵细胞技术是实验胚胎 学和发育遗传学研究的重要手段。实验哺乳动 物如小鼠,仓鼠、大鼠和兔等卵细胞的体外培养 已有许多报道^[1,3,4,6-11],尤其是小鼠卵细胞的培 养工作更多,可以说已是常规化了。但是我国 这方面的研究还较少,就连体外培养的早期受 精卵,也往往不能发育。     

哺乳动物早期胚胎的基因表达及其调控

哺乳动物的早期发育包括合子的形成、胚胎基因组的活化和细胞开始分化等。在这段时期,精蛋白被组蛋白取代;二倍体形成后甲基化的单倍体亲本基因组经历了脱甲基作用;母本控制的发育被合子控制所取代。此外,在染色体调节的转录抑制状态形成之后,胚胎基因组活化,但基因的有效表达需要有增强子。这种转录抑制状态的产生很可能发生在染色质结构水平,因为诱导组蛋白过乙酰化可免除对增强子的需求。早期胚胎的mRNA表达模式与在体内或体外成功发育的关系,对确定最佳培养条件和核移植程序是必不可少的。     

哺乳动物卵母细胞及早期胚胎蛋白质组学研究进展

雌性生殖细胞发育是动物繁殖的基石,哺乳动物卵母细胞和早期胚胎在其生长发育过程中有许多独特的现象和规律,涉及一系列蛋白质合成/降解和磷酸化等状态的动态改变。对卵母细胞分裂、成熟调控机理以及植入前胚胎发育规律的研究是发育生物学领域的一项重要课题。蛋白质组学是以细胞或组织内全部的蛋白质为研究对象,系统鉴定、定量蛋白质并研究这些蛋白质功能的科学。随着蛋白质分离、鉴定技术的快速发展,蛋白质组学为卵母细胞发生、分化、成熟以及质量控制等相关研究提供了新的方法和内容,如在蛋白质定量、修饰、定位和相互作用等方面提供其他组学技术不可获得的重要信息。这些信息将有助于揭示哺乳动物卵母细胞成熟和早期胚胎发育的分子机制,对于进一步完善卵母细胞的体外成熟培养体系,提高胚胎体外生产、体细胞克隆和转基因动物生产效率具有重要意义。     

哺乳动物早期胚胎体外发育阻滞的研究进展

哺乳动物胚胎在体外培养中普遍存在早期发育阻滞的现象。对此,人们用形态学、生物化学、分子生物学、显微操作等手段开展了磷酸、葡萄糖、次黄嘌呤和细胞质因素对早期胚胎发育阻滞的影响的研究。本综合分析了共培养系统的优缺点。说明了采用完全成分已知的培养液对进行有关研究的必要性。列出了有效运用于克服小鼠、大鼠、仓鼠、兔、猪、羊、牛、猴等动物早期胚胎阻滞的成分知的培养液的名称。     

哺乳动物早期胚胎体外发育阻滞的研究进展

哺乳动物胚胎在体外培养中普遍存在早期发育阻滞的现象.对此,人们用形态学、生物化学、分子生物学、显微操作等手段开展了磷酸、葡萄糖、次黄嘌呤和细胞质因素对早期胚胎发育阻滞的影响的研究.本文综合分析了共培养系统的优缺点.说明了采用完全成分已知的培养液对进行有关研究的必要性.列出了有效运用于克服小鼠、大鼠、仓鼠、兔、猪、羊、牛、猴等动物早期胚胎阻滞的成分已知的培养液的名称。 Abstract:The early embryo developmental block is a common phenomenon in mammal when embryos are cultured in vitro.Many studies of phosphorus,glucose,hypoxanthine and cytoplasmic factors on early embryo developmental block carried out by different methods such as morphology,biochemistry,molecular biology and micromanipulation have been reviewed.The merit and shortcoming were analyzed and the necessity of using simple or components limited media overcoming early embryo developmental block were also reviewed.Media that have been shown effective in overcoming early embryo developmental block in mouse,rat,hamster,rabbit,pig,sheep,cattle and monkey were listed.     

哺乳动物早期胚胎体外培养的研究 Ⅰ.2-细胞期小鼠胚胎的发育

体外培养哺乳动物卵细胞技术是实验胚胎学和发育遗传学研究的重要手段。实验哺乳动物如小鼠,仓鼠、大鼠和兔等卵细胞的体外培养已有许多报道,尤其是小鼠卵细胞的培养工作更多,可以说已是常规化了。但是我国     

哺乳动物早期胚胎端粒和端粒酶重编程

端粒位于真核染色体末端,是稳定染色体末端的重要元件。端粒酶(TER)是一种特殊的细胞核糖核蛋白(RNP)反转录酶(RT),其核心酶包括蛋白亚基和RNA元件。在DNA复制过程中的端粒丢失可以被有活性的端粒酶修复回来。哺乳动物端粒酶在发育中受调控,端粒的重编程可能是由于早期胚胎不同时期的端粒酶活性而造成的。因此,研究端粒和端粒酶重编程在早期胚胎发育中是非常重要的。该文综述了端粒和端粒酶的结构和功能,及其与哺乳动物早期胚胎发育的关系,并在此基础上展望了端粒和端粒酶在克隆动物胚胎发育的基础研究。     

蜘蛛胚胎细胞染色体制片技术

蜘蛛的染色体制片方法和核型分析,对蜘蛛遗传变异、种群演化、分类和染色体结构、功能与形态之间关系等问题的研究是十分重要的基本技术手段。目前,制作大型个体蜘蛛的染色体方法,常采用生殖腺的压片或蜘蛛血液细胞的常规制片法来制备染色体标本,然而,对于个体微小的真正蜘蛛类染色体的制片,如用上述二种方法就难以进行,国内也一直未见有关真正蜘蛛染色体制片方法的报道,至使小型个体蜘蛛的染色体组型分析工作进展缓慢。1977年美国的Seiji Malsimoto等采用蜘蛛胚胎细胞制作染色体标本,取得了较好的结果。胚胎细胞染色体制片法操作简便、快速,特别适用于小型个体蜘蛛染色体标本的制作。近年     

哺乳动物体细胞异种核移植胚胎早期发育的研究进展

体细胞异种核移植是指将一个物种的体细胞移植到另一物种的去核卵母细胞中,移入的体细胞核在受体胞质中重编程并发育成新个体的实验方法.该方法为拯救濒危物种和获取灵长类胚胎干细胞提供了可能的途径.但这方面的研究目前还只获得初步的进展,核重编程不完全以及异种胚胎的囊胚率低仍是其面临的主要难点.本文从基因表达、表观重编程、线粒体异质性、核重塑和核移植体系优化等方面入手,介绍近年来哺乳动物体细胞异种核移植的研究进展,并探讨异种重构胚重编程所面临的关键问题和可能获得成功的方法.     

哺乳动物滋养层细胞在胚胎植入中的作用

胚胎植入是哺乳动物生殖的关键环节,是一个非常复杂的过程.在胚胎植入过程中,多种着床相关因子、激素在母体-胚胎之间进行多重作用,引发复杂的生理作用,从而完成胚胎着床.在母体-胚胎界面上,胎源性滋养层细胞与母体子宫内膜细胞在信号联系（妊娠识别）和组织紧密连接（胚胎植入）过程中起着决定性作用,尤其是胚源性滋养层细胞,在胚胎植入过程中起主导作用.本文通过对滋养层细胞在胚胎植入中的作用的阐述,为进一步阐明胚胎植入的分子机制提供思路.     

哺乳动物胚胎的冷冻保存

哺乳动物精子冷冻保存试验于1950年获得成功,它标志着近代低温生物学的开端。冷冻精液结合人工授精,使得种公牛的配种潜力得到最大限度的发挥,良种公牛的精子可以普及到各处,甚至是偏僻的地方。良种后代的增加,不仅决定于公畜,也有赖于母畜。优良母畜繁殖潜力的提高,也是改良畜群的一方面。胚胎移植不仅可以充分利用优良母畜的繁殖潜力,同时把优良公畜和母畜都加以考虑。有些国家把胚胎移植作为完成育种计划的一种辅助方法,在牛的繁育上起了作用。精子能够低温     

使用激光微束研究哺乳动物早期胚胎分化

近年来，一些研究者用显微操作方法证实， 哺乳动物早期胚胎至少直至8一细胞期，每个卵 裂球仍然是全能的，即还没有开始分化。1965 年Daniel用激光微束照射破坏2一细胞期兔胚中 一个卵裂球后，另一卵裂球在培养条件下发育 至桑堪胚期。此外，还有Tarkowski和Wroblewska (1967）的卵裂球分离实验，Mintz (1965) 卵裂球重聚合实验以及最近Willadsen (1979) 羊胚卵裂球分离实验等。     

EST技术及其在哺乳动物早期胚胎研究中的应用

EST(expressed sequence tags ,EST) 是一段长约150～500 bp的基因表达的外源序列片段,是由大规模随机挑取的cDNA克隆测序得到的组织或细胞基因组的表达序列标签。一个EST代表生物某一时期的某种组织或细胞的一个表达基因。本文主要综述了EST技术的原理方法,哺乳动物早期胚胎研究的理论基础以及EST技术在早期胚胎研究方面的应用,并讨论了利用EST进行研究分析的发展趋势。     

制备绒毛细胞染色体的研究

在以往工作的基础上,建立了制备绒毛细胞染色体的24小时培养并结合酶解的方法。主要特点是将解离细胞、低渗处理与秋水仙素处理合并为一个步骤。用这种方法能使绒毛细胞染色体的制作成功率明显提高,并对研究内容进行了讨论。 Abstract:A study of enzymolysis for chromosome preparation from chorionic villus was established upon previous work .Essential feature of this technique was to merge cell separation from the cytotrophoblastic layer,treatment with hypotonic solution and colchicines treatment into one step.This technique significantly improved the success rate of chromosome analysis from CVS.The results of the study were discussed.     

一种改进的两栖类胚胎染色体制备方法

本文提供了一种改进的两栖类胚胎染色体制备方法。和原来的方法比较有三方面改进：分散细胞采用了Versene液,第二次固定采用了甲醇：冰乙酸(1:3）的固定液以及Ba(OH)₂的后处理。结果表明,染色体形态比原方法好,而且在多疵狭口蛙第7号染色体上观察到胚胎时期才存在的次猛痕。     

妊娠早期产前诊断的研究 Ⅰ.绒毛细胞直接制备染色体

通过绒毛活体取样,进行孕早期产前诊断已成为遗传疾病预防的一个新的方向。 绒毛滋养层细胞是受精卵有丝分裂的衍生物,它准确地反映了胎儿的遗传特性。妊娠早期的绒毛有较高的有丝分裂活性,这些特点为用直接法制备胎儿染色体、在孕早期检出染色体异常胎儿提供了有利条件,