TNF受体家族介导的细胞凋亡信号转导

肿瘤坏死因子（TNF）家族是一类多功能的细胞因子,具有诱导细胞凋亡、抗病毒、免疫调节等多种生物学活性.其中一些成员可以通过和细胞膜上相应受体（即TNF受体家族成员）结合,启动细胞内的凋亡机制,而诱导细胞凋亡.一些蛋白质（如TRADD、FADD、RIP、RAIDD等）参与这些信号传递过程.越来越多的TNF家族成员、TNF受体以及与细胞凋亡相关的Caspase蛋白酶家族成员被人们发现.     

可溶性人TRAIL分子的制备及其抗肿瘤活性

TRAIL(TNF relatedapoptosis inducingligand)是1 995年发现的一个新的TNF超家族成员.使人感兴趣的是该分子既可广泛介导多种组织来源的肿瘤细胞发生凋亡而基本不影响正常细胞的功能,也可引起许多对于FasL和TNF α有抗性的细胞凋亡[1 ,2 ] .因此,有可能成为一种新的抗肿瘤药物.     

肿瘤坏死因子家族新成员——TRAIL

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)或称凋亡素2配体(Apo2 ligand, Apo-2L), 是TNF家族的新成员.它是从表达序列标签库(expressed sequenced tag, EST)中寻找TNF的同源分子时发现的.TRAIL是一种分子质量为32.5 ku的Ⅱ型跨膜糖蛋白, 活性形式呈同源三聚体.TRAIL和可溶性的TRAIL强烈诱导肿瘤细胞株凋亡.新近发现的TRAIL受体DR4和DR5及TRID说明了TRAIL与TNF和Fas/Apo-1配体的作用途径是不同的.随着对TRAIL的受体及作用机理研究的深入, TRAIL很可能成为新一代抗肿瘤制剂.     

受体相互作用蛋白3——细胞凋亡与坏死的调节阀

综述了受体相互作用蛋白(RIPs)蛋白结构和RIP3调控细胞凋亡与坏死机制的研究进展．受体相互作用蛋白3(receptor-interacting protein 3, RIP3)是丝/苏氨酸蛋白激酶家族成员之一,该蛋白质家族包含一类高度保守的丝/苏氨酸激酶结构域．RIP家族激酶作为细胞应激传感分子,在调控细胞凋亡、细胞坏死和存活通路中发挥重要作用．近年发现,RIP3参与肿瘤坏死因子TNFα诱导的细胞程序化坏死的生物学过程．认识RIP3调控TNFα诱导的细胞凋亡与坏死不同死亡途径转换的分子机制,有助于发现肿瘤治疗的新策略．     

粘中着斑激酶在TNF—α和环己亚胺协同诱导人肝癌细胞SMMC—7721凋亡中的作用

探讨了粘着斑激酶（focal adhesion kinase,FAK）在TNF－α和环己亚胺协同诱导SMMC－7721细胞凋亡中的作用,利用转染FAK反义质粒来特异性降低SMMC－7721细胞的FAK含量,用Western杂交的方法来检测蛋白激酶B（PKB）的蛋白含量,以及用流式细胞仪的方法来检测细胞的凋亡。研究发现TNF－α本身并不能诱导SMMC－7721细胞发生凋亡,而只有当用环己亚胺和TNF－α协同处理时才发生凋亡。在TNF－α和环己亚胺协同诱导的凋亡过程中,PKB蛋白含量的降低,提示PKB的蛋白水平与凋亡的发生密切相关。当用FAK反义质粒降低SMMC－7721细胞的FAK含量（约降低了60％）后,细胞对TNF－α和环己亚胺协同诱导的凋亡的敏感性在用低剂量TNF－α处理的情况下增加,而在高剂量TNF－α和处理的情况下降低,相应地,在低剂量TNF-α和环己亚胺处理的情况下,FAK反义质粒转染株细胞的PKB含量比对照的PKB含量低;而在高剂量TNF－α和环己亚胺处理的情况下,FAK反义质粒转染株细胞的PKB含量比对照的要高。结果提示,FAK对TNF－α和环己亚胺协同诱导SMMC－7721凋亡的过程有一双相作用,并且该过程可能与PKB有关。     

RIP1介导肿瘤坏死因子α诱导的L929细胞凋亡与程序性坏死

肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNFα)诱导的L929细胞死亡是研究细胞程序性坏死的重要模型,但也有报道称,TNFα处理后的L929细胞发生了凋亡。该研究以所在实验室保存的L929细胞(L929-A)和从商业化细胞库购买的L929细胞(L929-N)为模型,进一步鉴定了TNFα诱导的L929细胞死亡类型与调控机制。结果发现,TNFα处理后的L929-A细胞中出现了凋亡特征,且阻断胱冬肽酶(caspase)信号通路可显著抑制TNFα诱导的L929-A细胞死亡,但却促进TNFα诱导的L929-N细胞死亡。此外,受体相互作用蛋白1(receptor-interacting protein 1,RIP1)在TNFα诱导的两种L929细胞死亡过程中都具有关键性的调控作用,表明TNFα处理后的L929-A细胞发生了RIP1依赖的细胞凋亡,而L929-N细胞发生了程序性坏死(necroptosis)。同时,启动细胞程序性坏死的关键蛋白RIP3(receptor-interacting protein 3)在L929-N细胞中表达水平显著高于L929-A细胞,因此,RIP3的这种差异表达可能是决定两种L929细胞在TNFα处理后发生不同类型细胞程序性死亡的重要原因。     

肿瘤坏死因子家族及其相关药物的研究进展

细胞凋亡是进化保守的重要生物学过程,具有重要的生理和病理作用,如在免疫系统的发育与稳态以及多种疾病（包括肿瘤）的发 生、发展、预后及治疗等过程中起重要作用。因此,近年来参与细胞凋亡信号转导的肿瘤坏死因子（TNF）/TNF 受体（TNFR）家族的重要 成员TNFα/TNFR、Fas/FasL和TRAIL/TRAILR成为重要的药物靶点,并开发出多个相关靶向药物,尤其是生物药物,其中有些在临床疗 效和商业上获得巨大成功。简介参与细胞凋亡信号转导的TNF/TNFR家族重要成员,着重对其通过介导细胞凋亡而发挥的生物学作用及其 相关药物研发作一综述,希望对我国的药物研发有所裨益。     

TNF相关的凋亡诱导配体及其受体研究进展

TNF相关的凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis-induicing ligand,TRAIL),属于TNF超家族成员,与Apo-1L(FasL)有较高的同源性,又称为Apo-2L。TRAIL有两类受体,一类是死亡受体,如DR4和DR5,TRAIL与DR4或DR5结合可以诱导细胞凋亡;另一类是“诱骗”受体,如DcR1、DcR2,可以竞争性地与TRAIL结合,逃避或抑制TRAIL诱导的正常细胞损伤。TRAIL及其受体的发现为肿瘤的治疗提供了一个新的方向。     

Fas与FasL的分子生物学研究进展

Fas是细胞表面诱导凋亡的分子,是I型膜蛋白,属TNF受体家族成员。而Fas配体（FasL)是Ⅱ型膜蛋白,属TNF家族成员。Fas与FasL结合,可向细胞传递死亡信号,引发细胞凋亡。Fas在人体中表达及功能正常与否,对人体免疫调控起重要作用。     

肿瘤坏死因子信号传导的分子机理

肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)是一种具有多种生物学效应的细胞因子,其生物学效应包括促进细胞生长、分化、凋亡及炎症诱发等.TNF的生物学效应都是通过细胞表面的两种TNF受体引发的.TNF的信号传导通路主要包括细胞凋亡及转录因子NF-kB和JNK蛋白激酶的激活.这3条信号传导通路之间及各通路内部含有各种调节机制,使TNF的各种生物学功能协调发挥出来.从1994年到现在,对肿瘤坏死因子信号传导通路的分子机理研究取得了一系列突破性进展,在细胞信号传导研究领域中树立了成功的典范.     

多囊卵巢综合征模型鼠颗粒细胞凋亡及TRAIL蛋白的表达

目的通过观察卵巢颗粒细胞凋亡及TRAIL(肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)蛋白的表达情况,探讨颗粒细胞凋亡与PCOS发病的相关性及凋亡调控蛋白TRAIL在PCOS颗粒细胞凋亡中的作用。方法采用硫酸普拉睾酮钠诱导大鼠PCOS模型,3’-末端原位标记法(TUNEL)检测大鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况,免疫组化染色及RT-PCR分析检测TRAIL蛋白及TRAIL mRNA在颗粒细胞的表达。结果PCOS组大鼠卵巢窦状卵泡颗粒细胞凋亡发生率及TRAIL蛋白的表达较对照组明显增强(P<0.01,P<0.05),窦前卵泡颗粒细胞凋亡发生率及TRAIL蛋白的表达两组无显著性差异(P>0.05),两组卵巢始基卵泡颗粒细胞未发现凋亡征象及TRAIL蛋白表达。PCOS组大鼠卵巢颗粒细胞TRAIL mRNA的表达较对照组明显增强(P<0.01)。结论PCOS大鼠卵巢窦状卵泡颗粒细胞凋亡明显增强,TRAIL在PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控中发挥了作用。     

TRAIL与顺铂联用对人骨肉瘤细胞杀伤作用的实验研究

目的探讨TRAIL与顺铂联合应用对人骨肉瘤细胞的杀伤作用.方法将TRAIL与顺铂单独及联合应用于体外培养的骨肉瘤OS-732细胞,采用MTT法测定细胞抑制率,于倒置相差显微镜、荧光显微镜、扫描及透射电镜下观察细胞的形态学改变及超微结构变化.结果 50ng/ml的TRAIL与5μg/ml顺铂合用于OS-732细胞24小时后,细胞抑制率为84.37%,明显高于单用TRAIL(50μg/ml)时的9.68%及单用顺铂(5μg/ml)时的24.39%(P<0.01).细胞的形态与超微结构观察均显示,合用比单用促凋亡效应更显著.结论 TRAIL与顺铂合用,可高效杀伤人骨肉瘤细胞,此协同作用主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现的.     

死亡受体5介导细胞凋亡的研究及应用

死亡受体DR5(death receptor 5)属于肿瘤坏死因子受体(tumor necrosis factor receptor,TNFR)超家族的成员,其胞质区部分含有死亡结构域(death domain,DD),广泛分布于各种肿瘤细胞和正常组织细胞的膜上.配体TRAIL与肿瘤细胞表面的DR5结合,可诱导大多数肿瘤凋亡,而对正常的组织几乎没有作用.近年来死亡受体DR5与细胞凋亡的关系已成为研究热点之一,对DR5介导细胞凋亡的机制和应用进展作一综述.     

TRAIL及其受体在细胞凋亡中的作用

ＴＲＡＩＬ是最近发现的ＴＮＦ家族的新成员。它在结构和功能方面和ＴＮＦ家族的另一成员———Ｆａｓ／ＡＰＯ １Ｌ很相似。ＴＲＡＩＬ能够诱导多种转化细胞凋亡,但对正常细胞没有这种作用。目前共发现了ＴＲＡＩＬ的５个受体。本文就ＴＲＡＩＬ及其受体的结构和功能以及可能存在的调控机制等方面进行了综述。     

人TRAIL基因cDNA的克隆与序列测定

为研究人TRAIL的基因组结构,生物学性能和用于肿瘤生物治疗的可能性,利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)从人急性早幼粒白血病细胞系HL-60细胞总RNA中扩增出人TRAIL基因编码区cDNA序列,将其克隆至pGEM-T载体中,序列测定表明,克隆片段与文献报道的人TRAIL基因编码区cDNA序列完全一致.     

TRAIL的研究进展

TRAIL(TNF-related apoptosis-inducing ligand)是TNF家族新成员,它在细胞凋亡中介导一个非常复杂的信号调控与转导过程,在这一过程中,NF—κB和p53发挥了很重要的调节作用。TRAIL亦能诱导多种肿瘤细胞凋亡而对正常细胞没有显著细胞毒性,可能成为一新的抗肿瘤药物。本文介绍了其在结构、生理功能、表达调控及凋亡诱导机制上的研究进展。     

Is TRAIL the holy grail of cancer therapy?

Abstract  Inducing apoptosis has become an important approach in the development of new anti-cancer treatments. Tumour necrosis factor apoptosis inducing ligand (TRAIL) based therapies have emerged as one of the most promising examples of this as they selectively induce apoptosis in tumour cells. However, many primary tumours are inherently resistant to TRAIL-mediated apoptosis and require additional sensitisation. Here we review apoptotic and non-apoptotic TRAIL-signalling, and the therapeutic effects of TRAIL-based treatments both as monotherapy and in combination with sensitising agents. T. Newsom-Davis and S. Prieske contributed equally to this work.     

Post-translational modification of TRAIL receptor type 1 on various tumor cells and the susceptibility of tumors to TRAIL-induced apoptosis

Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) and its receptors (TRAIL-R1 and TRAIL-R2) are promising targets for tumor therapy. However, their clinical use is limited because some tumors show resistance to TRAIL-treatment. Here, we analyzed epitopes of nine TRAIL-R1-specific human monoclonal antibodies and demonstrated at least five tentative epitopes on human TRAIL-R1. We found that some of the five were post-translationally modified on some tumor cell lines. Interestingly, one of them, an epitope of TR1-272 antibody (TR1-272-epitope) disappeared on the tumor cells that are more susceptible to TRAIL-induced apoptosis compared to TR1-272-epitope positive cells. Treatment of TR1-272-epitope negative cells with TRAIL induced large cluster formation of TRAIL-R1, while treatment of TR1-272-epiope positive cells with TRAIL did not. These results suggest that TR1-272-antibody might distinguish the TRAIL-R1 conformation that could deliver stronger death signals. Further analysis of epitope-appearance and sensitivity to TRAIL should clarify the mechanisms of TRAIL-induced apoptosis of tumor cells and would provide useful information about tumor therapy using TRAIL and TRAIL-R signaling.     

人TRAIL 基因原核表达载体的构建及鉴定

目的:克隆肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因片段(114～281氨基酸残基)并构建原核表达载体。方法:取健康人外周血提取总RNA,设计合成引物并引入EcoR I和Xho I酶切位点,RT-PCR扩增TRAIL基因的胞外区片段,克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆。结果:从外周血cDNA中扩增出501 bp的目的片段,测序结果证实成功构建重组质粒pGEX-6P-1/TRAIL。结论:成功构建TRAIL基因的原核表达载体pGEX-6P-1/TRAIL,为肿瘤细胞的凋亡研究提供理论依据。     

The death receptor DR5 is involved in TRAIL-mediated human osteoclast apoptosis

The number and activity of osteoclasts (OCs) are critical for maintaining normal bone turnover. The number is determined by the rates of cell differentiation and death. TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL), a member of the TNF superfamily, induces apoptosis by interacting with its death receptors, (DR4, DR5). However, its activity can be modulated by two decoy receptors, (DcR1 and DcR2). In this paper we show that TRAIL treatment causes reduced OC viability as well as an increased apoptotic OC number. Loss of nuclei integrity and derangement of the actin microfilament were also induced by TRAIL in OCs. Moreover, we demonstrated the expression of all TRAIL receptors in both precursors and differentiated OCs, and the upregulation of DR5 during OC differentiation. Interestingly, DcR2 was upregulated in the early stage of osteoclastogenesis and downregulated at the end of the differentiation process. We showed that DR5, upregulated by TRAIL, could be the mediator of TRAIL-induced OC apoptosis, since the addition of anti-DR5 neutralizing antibodies restores the OC viability previously reduced by TRAIL. Furthermore, the intracellular pathway induced by TRAIL in OCs involves caspase-8 and Bid activation. In conclusion, our data highlight an important role for the TRAIL/TRAIL receptor system in the regulation of OC apoptosis.