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采用单因素试验和正交试验研究发酵培养基组成,优化Streptomyces sp. FIM-16-06产他克莫司的发酵条件,探讨摇瓶发酵的主要影响因子初始p H、装液量、转速等发酵参数的影响。确定了适宜的发酵培养基和发酵参数:6. 0%玉米淀粉、2. 0%黄豆粉、2. 0%葡萄糖和0. 5%玉米浆,初始pH 7. 5,装液量50 m L/500 m L三角瓶,种子菌龄48 h,接种量10%,摇床转速250 r/min,发酵温度27℃,发酵周期7 d。优化后的发酵水平较原生产工艺提高60%以上。他克莫司的优化发酵工艺为其工业化生产奠定了基础。 相似文献
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目的:探讨他克莫司对HaCaT细胞中NF-kB分子表达的影响.方法:培养人HaCaT细胞,分别与10 μ mol.l-1和50 μ mol.l-1他克莫司溶液共孵育后,通过RT-PCR和Western-blot方法,分别从基因和蛋白水平,观察NF-kB分子表达的变化.结果:经10 μ mol.l-1和50 μ mol.l-1的他克莫司(FK506)溶液孵育后,HaCaT细胞中NF-kB分子表达明显低于对照组,同时体现一定的剂量效应,50 μ mol.l-1组的表达水平更低.结论:他克莫司可以剂量依赖性地抑制HaCaT细胞中NF-kB的分子表达. 相似文献
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目的:通过比较自体表皮移植术联合他克莫司和传统自体表皮移植术治疗白癜风的疗效,明确他克莫司乳膏对白癜风复色率的影响。方法:回顾性分析自体表皮移植术联合他克莫司和传统自体表皮移植术治疗的稳定期白癜风患者共90例,比较其均匀复色时间和疗效。结果:表皮移植术联合他克莫司组起效时间显著性短于单一表皮移植术组(P<0.05),1月、3月的显效率和痊愈率均明显高于单一表皮移植术组(P<0.05)。单一表皮移植术组颈部的疗效相比于头面部、躯干部、四肢更佳(P<0.05),表皮移植术联合0.1%他克莫司软膏外用治疗(相对于单一表皮移植术)可显著性提高位于四肢的皮损的疗效(P<0.05)。相较于单一表皮移植术而言,表皮移植术联合他克莫司对提高节段型和局限型白癜风疗效显著(P<0.05)。然而,他克莫司联合治疗可提高散发型和肢端型白癜风的疗效,但无统计学意义(P>0.05)。表皮移植术联合他克莫司组和单一表皮移植术组中,男性疗效均高于女性,但无显著性差异(P>0.05)。结论:自体表皮移植术联合0.1%他克莫司软膏治疗白癜风的疗效优于单一自体表皮移植术,他克莫司可有效提高白癜风复色。 相似文献
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目的:探讨他克莫司对HaCaT细胞中NF-κB分子表达的影响。方法:培养人HaCaT细胞,分别与10μmol·1^-1和50μmol·1^-1他克莫司溶液共孵育后,通过RT-PCR和Western-blot方法,分别从基因和蛋白水平,观察NF-κB分子表达的变化。结果:经10μmol·1^-1和50μmol·1^-1的他克莫司(FK506)溶液孵育后,HaCaT细胞中NF-κB分子表达明显低于对照组,同时体现一定的剂量效应,50μmol·1^-1组的表达水平更低。结论:他克莫司可以剂量依赖性地抑制HaCaT细胞中NF-κB的分子表达。 相似文献
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目的:探讨移植术后监测他克莫司血药浓度意义和临床药物剂量个体化调节方法。方法:70例肝移植患者术后采用口服他克莫司,每天两次的用药方案,分别在移植后1周和3周监测血液中他克莫司浓度以及外周血单核细胞中钙调磷酸酶活性。结果:移植3周比1周时他克莫司的清除率显著提高。每个采样时间的药物浓度都与0-12 h的浓时间曲线(AUC0-12)下方的面积呈显著的正相关。钙调磷酸酶最低活性与0-12 h的钙调磷酸酶活性-时间曲线显著相关(r20.92)。结论:谷浓度监测是对成年生物配体原位肝移植患者常规他克莫司用药剂量调整的最佳方法,同时监测患者钙调磷酸酶最低活性有助于估计患者在他克莫司用药间隔期的免疫状况。 相似文献
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目的:探讨肝移植术后胆道感染的情况下他克莫司导致肾毒性的处理措施及临床疗效.方法:回顾性分析我科收治的1例肝移植术后服用他克莫司导致肾毒性的患者,换周西罗莫司后肾功能恢复的临床资料.患者因移植术后胆道狭窄,行经皮肝胆管穿刺引流术(PTCD)治疗后出现发热,明确诊断为胆道感染,予以控制感染.继之出现恶心、呕吐等消化道症状,明确为他克莫司导致肾毒性所致,治疗上停用他克莫司胶囊,服用西罗莫司.结果:肝移植术后胆道感染促进他克莫司导致肾毒性的发生,在胆道感染控制的基础上,予以换用他克莫司为西罗莫司,同时扩容、补液等改善肾脏灌注治疗后,患者的肾功能逐渐恢复,现于我院门诊跟踪并规律复查.结论:西罗莫司是一种低肾毒性的免疫抑制剂,对于肝移植术后他克莫司导致肾毒性的处理,换用西罗莫司治疗能有效保护肾功能. 相似文献
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目的 观察不同浓度的他克莫司对大鼠血糖的影响.方法 选取雄性SD大鼠30只,体重70~85g,随机等分为三组.A组大鼠为他克莫司加五脂胶囊组,每日给予他克莫司(普乐可复Astellas Ireland Co.,Ltd生产)2 mg/kg和五酯软胶囊(四川光大制药有限公司生产)0.2粒/kg;B组为他克莫司组,每日给予他克莫司2 mg/kg;C组为对照组,每日给予同等量生理盐水,三组大鼠均在空腹时灌胃给药,用药1h后喂食.用药时间为5个月.每月监测大鼠他克莫司血药浓度和空腹血糖.结果 在用药的1~5个月期间,A组大鼠他克莫司血药浓度均明显高于B组.在用药的第1个月和第2个月,三组大鼠空腹血糖无明显差异(P>0.05),用药第3个月后,A、B两组大鼠血糖均明显高于对照组(P<0.01),A组大鼠血糖略高于B组,二者之间差异并无统计学意义(P>0.05);用药第4、5个月后A、B两组大鼠的血糖持续升高,并且A组大鼠血糖明显高于B组(P<0.01);A组的胰岛素分泌指数和敏感指数均明显低于C组(P<0.01).结论 他克莫司通过减少胰岛素的分泌、增加胰岛素抵抗导致大鼠血糖升高,这种升血糖作用呈时间依赖性和浓度依赖性. 相似文献
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L-丝氨酸高产菌株的选育和摇瓶发酵条件优化 总被引:3,自引:0,他引:3
采用B revibacterium flavmC-11A为出发菌株,经紫外线照射和亚硝基胍诱变处理,选育出一株L-丝氨酸高产菌株C32为目的突变株,使摇瓶产酸率由12.1 g.L-1增加到16.4 g.L-1,然后对其进行摇瓶发酵条件优化,使菌株C32的L-丝氨酸产率提高到30.1 g.L-1。 相似文献
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采用微波结合链霉素抗性筛选法选育放线菌素D的高产菌株。通过考察链霉素对Streptomyces rubiginosohelvolus FIM-N31菌株孢子生长情况的影响确定链霉素致死浓度,出发菌株FIM-N31的孢子经微波辐照处理后,涂布在含链霉素致死浓度(50 μg/mL)的培养基平板上培养,获得了大量的链霉素抗性基因突变株。摇瓶发酵筛选突变株,结果获得一株遗传性状稳定的放线菌素D高产菌Str186,其产放线菌素D的能力比出发菌株提高了8倍以上。 相似文献
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戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)是能利用木质纤维素水解液发酵产乳酸的潜力菌株,发酵条件优化与高产菌株的选育是提高乳酸产量的重要手段。通过单因素试验、Plackett-Burman设计与响应面试验,对戊糖乳杆菌ATCC 8041产乳酸的发酵培养基及发酵条件进行了优化。结果表明,该菌株发酵培养基的最佳组合为葡萄糖93.11 g/L、酵母浸粉5.19 g/L、碳酸钙29.43 g/L、蛋白胨10.00 g/L、Na2HPO4·12H2O 5.00 g/L、Mg SO4 0.20 g/L、Mn SO4 50 mg/L;最佳发酵条件为37℃、p H6.5、接种量6%、装液量80%。在此优化条件下,该菌株发酵产乳酸为54.12 g/L。进一步以戊糖乳杆菌ATCC 8041为出发菌株,通过原生质体进行紫外诱变,经多重筛选,最终获得一株遗传稳定性好的高产乳酸突变株,命名为戊糖乳杆菌Lactic UVC-02,由中国典型培养物保藏中心保存,注册号为CCTCC M 2013209。该突变株Lactic UVC-02经葡萄糖发酵,乳酸产量达64.17 g/L,比出发菌株ATCC 8041(54.12g/L)提高18.6%。 相似文献
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聚酮化合物是通过聚酮合成途径产生的一大类结构和生物活性多样的次级代谢产物,是链霉菌产生的主要次级代谢产物,具有重要的经济价值。为了在链霉菌中提高聚酮化合物产量,以满足工业生产需求,近年来,代谢工程的方法被广泛应用,例如,过表达合成途径中限速酶或途径特异性激活蛋白、强化前体供应、去除产物反馈抑制、合成基因簇异源表达等。本文将从代谢工程改造实例入手,全面综述链霉菌中聚酮化合物高效生物合成的研究方法及进展,并对利用合成生物学策略智能动态适配各个相关途径,进而提高该类化合物产量的研究思路进行展望。 相似文献
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【背景】禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)是一种危害小麦生产的重要病原真菌。【目的】筛选对禾谷镰刀菌具有拮抗活性的链霉菌菌株,为该病原的生物防治提供理论基础。【方法】采用稀释涂布法分离链霉菌,利用平板对峙法筛选高活性拮抗菌株;通过形态学、生理生化特征和16S rRNA基因序列分析确定其分类地位;采用生长速率法分析其发酵条件及无菌发酵液的稳定性;并测定该菌株的防病效果和抑菌谱。【结果】筛选到一株对禾谷镰刀菌具有较强抑制作用的链霉菌菌株21-6,抑菌率为75.2%±2.1%。根据形态学、生理生化特征及16S rRNA基因序列分析,将其鉴定为Streptomyces stelliscabiei。菌株21-6在pH为中性条件下的PDB培养基中培养5 d能够产生更好的抑菌效果。无菌发酵液能够抑制禾谷镰刀菌的菌丝生长和孢子萌发过程。无菌发酵液不受高温、胃蛋白酶、胰蛋白酶及蛋白酶K的影响,耐酸但对碱性条件敏感。发酵液对禾谷镰刀菌侵染小麦胚芽鞘具有抑制效果。菌株21-6具有聚酮合酶pks-Ⅰ和pks-Ⅱ基因。此外,该菌株对5种植物病原真菌均具有抑制效果。【结论】链霉菌菌株21-6对禾谷镰刀菌具有较好的生防潜力。 相似文献
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《氨基酸和生物资源》2016,(2):46-49
以产L-缬氨酸的谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)为原始菌株,利用注入低能氮离子束进行一系列诱变,获得一株稳定的高产L-缬氨酸突变菌株。摇瓶培养96h后发酵能力可达38.0g·L-1,较出发菌株提高18.01%。通过对摇瓶中葡萄糖、玉米浆浓度及培养条件进行优化,发酵能力达到40.6g·L-1,50L发酵罐的发酵能力可达70g·L-1左右。 相似文献
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产生物表面活性剂菌株的选育 总被引:1,自引:0,他引:1
以原油为碳源进行微好氧培养筛选到1株产生物表面活性剂的兼性厌氧菌I,其可将界面张力由16.36mN/m降到6.49mN/m。以其为出发菌株,经过紫外和甲基磺酸乙酯复合诱变,得到1株性能优良的变异新菌株,其降低界面张力的能力显著提高,界面张力降低了32.8%。性能评价表明,该菌株能在72℃高温和30%矿化度下生长。有望用于微生物采油研究。 相似文献