PTEN、HPVl6/18-E6蛋白和雌激素受体在宫颈腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨宫颈腺癌组织中抑癌蛋白PTEN、人乳头瘤病毒(HPV)16/18-E6蛋白和雌激素受体(ER)的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学S-P法对65例宫颈腺癌组织进行PTEN、HPV16/18-E6蛋白和ER检测,对30例慢性宫颈炎组织中HPV16/18-E6蛋白和ER的表达进行检测.结果:宫颈腺癌组织细胞核中PTEN的表达显著低于癌旁宫颈腺上皮组织(P＜0.01),96%的宫颈腺癌细胞核呈低表达,而仅35%的癌旁宫颈腺上皮呈低表达(P＜0.01);HPV16/18-E6蛋白和ER在宫颈腺癌中的阳性表达率分别为32.1%与49.4%,均显著高于慢性宫颈炎组织(P＜0.01);HPVl6/18-E6蛋白和ER的表达与宫颈腺癌的病理学分级、临床分期无关,在宫颈腺癌中的表达呈正相关.结论:PTEN在宫颈腺癌的发生中起一定的作用,其抑癌作用环节可能在细胞核水平;部分宫颈腺癌的发病可能与HPV16/18-E6蛋白过度表达有关;部分宫颈腺癌可能属于激素依赖性,雌激素可能有协同人乳头瘤病毒致癌的作用.     

miR-9靶向调控PTEN在HPV16+及HPV18+宫颈癌细胞凋亡中的作用

研究微小RNA-9(microRNA-9,miR-9)靶向调控人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源蛋白（Recombinantphosphataseandtensinhomolog,PTEN）在人乳头瘤病毒（Humanpapillomavirus,HPV）16+及HPV18+宫颈癌细胞凋亡中的作用。收集宫颈癌组织及正常宫颈组织，培养HPV16+SiHa细胞、HPV18+HeLa细胞、HPV阴性C33A细胞及正常宫颈上皮H8细胞，检测miR-9、PTEN的表达水平。SiHa细胞和HeLa细胞进行分组转染后检测增殖抑制率、凋亡率、PTEN及miR-9表达水平。结果显示高危型HPV阳性及阴性的宫颈癌组织中miR-9的表达水平高于正常宫颈组织、PTEN的表达水平低于正常宫颈组织（P<0.05）且高危型HPV阳性宫颈癌组织中miR-9、PTEN表达的变化更显著；SiHa细胞、HeLa细胞中miR-9的表达水平高于C33A细胞和H8细胞、PTEN的表达水平低于C33A细胞和H8细胞（P<0.05）；敲低miR-9表达后，SiHa细胞、HeLa细胞的PTEN表达水平、增殖抑制率、凋...     

免疫印记法检测宫颈脱落细胞中HPV16/18 E6蛋白的意义

目的用免疫印记法检测宫颈脱落细胞中人乳头瘤病毒（HPV）16/18型E6蛋白的表达,从而为探求一种简捷、无创的诊断宫颈癌及其癌前病变的新方法提供理论依据。方法采用免疫印记法（Western blot）检测112例宫颈脱落细胞标本中HPV16/18 E6蛋白的表达,并以导流杂交检测标本中HPV DNA作为对照。结果在宫颈癌组和CINII/Ⅲ组,HPV16/18 E6蛋白的表达水平（75%、67.5%）明显高于正常对照组（5%）,P（0.05;而CINI组（31.5%）与正常对照组比较,HPV16/18 E6蛋白表达的差异无统计学意义,P=0.05。结论宫颈脱落细胞中HPV16/18 E6蛋白的过度表达与宫颈癌及CINII/Ⅲ的发生密切相关;利用免疫印记法检测脱落细胞中HPV16/18 E6蛋白对宫颈鳞癌及CINII/Ⅲ的诊断及无创性筛查具有重大意义。     

雌激素受体p在胃腺癌中表达的研究

目的：检测雌激素受体β（ERβ）在胃组织的存在状况并研究其在人胃腺癌中的作用。方法：使用免疫组化方法,在蛋白水平对配对的原发性胃腺癌患者的癌组织及其癌旁非癌组织的ERB亚型进行检测,采用20例正常胃粘膜作为对照。结果：ERβ蛋白在部分胃腺癌及其癌旁非癌组织表达,但ERβ阳性率及表达模式不同。与配对的非癌组织相比,部分癌组织发生了ERβ表达减少或丢失,而且ERβ表达减少与低分化程度相关（P=0．041）,丢失的ERβ仅见于低分化癌。结论：ERβ可作为识别某些进展期胃腺癌发生发展的标志物,ERβ表达改变在低分化癌中更常见,也提示ERβ阳性胃腺癌可能比ERp表达丢失者预后更好;另外,在非癌组织腺上皮存在E邢的表达提示在正常胃组织中ERB很可能具有一种保护性作用。     

HLA-I表达与维吾尔族妇女宫颈癌前病变及HPV16感染的关系研究

目的：观察人白细胞相关抗原I（human leukocyte antigen class I,HLA-I）表达与维吾尔族妇女宫颈癌前病变进程及高危型HPV16的关系。方法：收集维吾尔族妇女宫颈炎、宫颈内上皮瘤样病变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）和宫颈鳞癌患者的石蜡包埋组织标本共148例,提取组织DNA,应用PCR的方法检测HPV阳性及HPV16型别;同时采用免疫组织化学SP法检测HLA-I蛋白表达水平。结果：（1）在维吾尔族妇女中HLA-I抗原在宫颈炎、CINI-II、CINIII、SCC组中阳性表达逐渐减少,差异有统计学意义（P〈0.001）。（2）HLA-I的阳性表达下降趋势与宫颈癌临床分期、组织分化程度和淋巴结转移密切相关。（3）HPV在宫颈炎、CINI-II、CINIII、宫颈癌中的感染率分别为13%、46%、82%、95%,差异有统计学（P〈0.001）。（4）HPV16在宫颈炎、CINI-II、CINIII、宫颈癌中的感染率分别为4%、30%、68%、85%,差异有统计学（P〈0.001）。（5）在HPV16阳性标本中,存在HLA-I表达缺失的占71%（58/82）,HPV16感染与HLA-I表达呈负相关（r=-0.625,P〈0.001）。结论：（1）HLA-I表达缺陷可能是宫颈病变进展的重要标志,对宫颈癌的预测预警提供依据。（2）HPV16感染在宫颈病变的发展过程中起到了极大的促进作用,是一个很强的致癌因素。（3）HPV16感染与HLA-I表达之间的关系对揭示宫颈癌发病机制提供了客观依据。     

高危型HPV 感染对宫颈病变组织IFN-r、IL-10表达的影响

目的：探讨高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染对宫颈病变组织干扰素-r(IFN-r)、白细胞介素-10(IL-10)的影响。方法：收集我 院2013 年1 月到2015 年1 月妇科门诊行宫颈活检患者150 例,根据病理检查结果,将患者分为观察组（宫颈癌33 例、CINⅠ期 26 例、CINⅡ期28 例、CINⅢ期23 例）110 例,对照组（慢性宫颈炎患者）40 例。提取两组患者宫颈组织标本,检测观察组 HPV-DNA、HPV 分型,及两组IFN-r、IL-10 蛋白及mRNA 表达,分析高危型HPV感染与宫颈病变组织IFN-r、IL-10 表达的关系。 结果：观察组HPV-DNA阳性87 例（79.1%）,其中HPV16 型47 例（42.7%）、HPV18 型20 例（18.2%）感染率最高;且HPV16、18 感 染率在CINⅠ期、CINⅡ期、CINⅢ期以及宫颈癌组中的感染率差异均有统计学意义（P<0.05）,Spearman相关性分析显示,HPV16、 18 与宫颈病变程度均呈现正相关关系（r=0.896,0.786;均P<0.05）。IFN-r、IL-10 表达水平在CINⅠ期、CINⅡ期、CINⅢ期、宫颈 癌、对照组表达水平差异均具有统计学意义（P<0.05）,Spearman 相关性分析显示,IFN-r与宫颈病变程度呈现负相关关系（r=-0. 567,P<0.05）,IL-10 呈现正相关关系（r=0.678,P<0.05）。且HPV16、HPV18 感染率与IFN-r表达呈现负相关关系（rHPV16/18=-0. 678,-0.675,均P<0.05）,与IL-10 呈现正相关关系（rHPV16/18=0.582,0.778,均P<0.05）。结论：IFN-r表达随着宫颈病变加重或者 HPV16、HPV18 感染率升高逐渐降低,IL-10 则逐渐升高。     

宫颈腺癌发生相关蛋白的蛋白质组学初步研究

目的：为了研究宫颈腺癌和正常宫颈组织的差异表达蛋白,为宫颈腺癌的发生和早期诊断提供有意义的生物标志物。方法：以正常宫颈组织和宫颈腺癌组织为研究对象,提取组织总蛋白,依次进行二维凝胶电泳,凝胶图象分析,基质辅助激光解吸附／离子化飞行时间质谱及生物信息学分析。Western Blot方法验证部分蛋白表达情况。结果：建立了宫颈腺癌和正常宫颈组织的二维电泳图谱,进行质谱和生物信息学分析比较鉴定宫颈腺癌和正常宫颈组织差异表达蛋白7个,与正常宫颈组织比较,宫颈腺癌表达降低的蛋白有3个,包括抑制素（inhibin-beta）,PTEN,乳铁蛋白（lactoferrin）;宫颈腺癌表达升高的蛋白有4个,包括谷胱甘肽S-转移酶（GSTT1＊0）,Homeodomain—interacting protein kinase2（HIPK2）,CD44v5,galectin-7。Western Blot方法检测结果显示inhibin-beta和PTEN在宫颈腺癌中表达变化情况与蛋白质组学结果一致。结论：宫颈腺癌和正常宫颈组织存在差异表达蛋白,这些差异表达蛋白可能是宫颈腺癌发生相关蛋白,可能作为宫颈腺癌早期诊断的标志物。     

K14和CMV启动子驱动裸鼠体内HPV16 E6/E7基因表达的差异

人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）是一种无包膜的环状闭合双链DNA病毒,具有严格的嗜人组织的特性．为探讨不同启动子驱动HPV E6/E7癌蛋白在裸鼠体内不同组织的表达效率,构建了带有角蛋白(K14)启动子和带有巨细胞病毒（CMV）启动子的E6/E7腺病毒载体（pAd-K14-E6/E7和pAd-CMV-E6/E7）,pAd-K14-E6/E7和pAd-CMV-6/E7、以及作为对照的重组腺病毒空载体pAdtrack- K14和pAd-CMV同源重组后,分别在293细胞中包装,收集重组病毒Ad-K14-E6/E7 、Ad-CMV-E6/E7、Adtrack-K14和Ad-CMV,通过尾缘静脉注射到随机分组的裸鼠体内,并每d向裸鼠腹腔注射0.05 mg雌激素．采用RT-PCR和Western 免疫印迹检测不同实验组E6/E7 mRNA 和蛋白表达水平,免疫组化法检测P53和Bcl-2蛋白表达．结果显示,注射病毒Ad-K14-E6/E7（实验组1）裸鼠子宫体中E6/E7 mRNA、E6蛋白质、P53和Bcl-2蛋白高表达,而其它组织中低表达;注射病毒Ad-CMV-E6/E7（实验组2）裸鼠各组织E6/E7　mRNA、E6蛋白质、P53和Bcl-2蛋白均低表达．研究表明,在裸鼠体内角蛋白K14启动子可以调控E6/E7在子宫体中表达,CMV启动子未能诱导E6/E7在子宫体中表达．     

靶向HPV16-E6的siRNA对宫颈癌CaSki细胞的抑制作用

以RNA干扰技术为手段,HPV编码的癌蛋白E6为靶标．探讨靶向HPV16-E6的siRNA对宫颈癌细胞生物学行为的影响,并试图阐明该实验的临床意义．构建靶向HPV16-E6的siRNA表达载体,应用体外转染试剂转染HPV16-E6阳性的宫颈癌CaSki细胞．以RT—PCR检测CaSki细胞中E6蛋白的mRNA的表达．借助细胞色素c测定来分析细胞凋亡相关分子的表达和活性．从而研究靶向HPV16-E6的siRNA诱导细胞凋亡的分子机制．RT．PCR检测结果表明,将靶向HPV16-E6的siRNA的表达载体瞬时转染到HPV16-E6阳性的CaSki细胞后,其所舍E6蛋白质和mRNA的表达下调;Westernblotting栓出抑凋亡蛋白Bcl．2的表达亦告下调;细胞色素C释放实验结果显示,HPV16-E6siRNA能够诱导细胞色素c从线粒体释放到细胞浆中。从而诱导细胞凋亡．靶向HPV16-E6的siRNA能够有效抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡．靶向HPV16-E6的siRNA为研究重要致瘤蛋白HPV16-E的功能开辟了新途径,给HPV16-E6阳性肿瘤的靶向基因治疗提供新的实验依据．并探索了HPV感染及宫颈癌的新基因疗法．     

TSHR蛋白在宫颈癌的表达及其与HPV-16感染的关系

目的研究促甲状腺激素受体（TSHR）在子宫颈癌组织的表达及其与乳头瘤病毒（HPV－16）的关系。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素过氧化物酶（SP）法检测79例子宫颈癌和30例子宫颈炎组织HPV－16与TSHR蛋白表达。79例癌症患者中病理分级〈Ⅱ级33例,≥Ⅱ级46例;病理分期〈Ⅱ期56例,≥Ⅱ期23例;无淋巴结转移66例,有淋巴结转移13例;肿瘤大小〈3cm44例,肿瘤大小≥3cm35例。结果HPV－16在子宫颈癌表达率55．70％明显高于宫颈炎5％（P〈0．05）,TSHR在子宫颈癌表达率68．35％明显高于宫颈炎26．67％（P〈0．05）。HPV－16表达与肿瘤的大小、肿瘤分级、分期、淋巴结转移不相关。TSHR表达与肿瘤的大小呈正相关,P〈0．05,与肿瘤分级、分期及淋巴结转移不相关。HPV－16与TSHR在宫颈癌表达呈正相关。结论HPV感染对宫颈癌病变起到强烈的预警作用。TSHR不仅在甲状腺滤泡上皮细胞表达,在子宫颈癌细胞也表达,TSHR过表达能促进宫颈细胞的异常增殖,其异常功能可能是恶性肿瘤特定的临床表型。HPV与TSHR在子宫颈癌变过程中起协同作用。     

GRP94和CD8在宫颈病变组织中的表达及意义

目的：探讨葡萄糖调节蛋白94（glucose—regulated protein94,GRP94）和CD8在宫颈病变组织中的表达及与HPV感染的关系。方法：采用免疫组化S—P法检测32例原发宫颈癌、27例宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia, CIN）及40例慢性宫颈炎组织中GRP94和CD8的表达及定位;采用western blot技术检测6例宫颈癌及6例正常宫颈组织中GRP94和CD8的表达。结果：①在宫颈癌、CIN2／3、CIN1及慢性宫颈炎组织中,GRP94的阳性表达率分别为87．5％、82．4％、40％和22．5％;CD8的阳性表达率分别为28．1％、64．7％、90％和97．5％;GRP94在宫颈癌和CIN2／3中的表达均显著高于慢性宫颈炎和CIN1组织（P均〈0．05）;CD8在宫颈癌组的表达显著低于慢性宫颈炎组、CIN1组及CIN2／3组（P均〈0．05）。②Western blot结果示GRP94在宫颈癌组织中的表达显著高于正常宫颈组织（P〈0．01）;CD8在宫颈癌组织中的表达显著低于正常宫颈组织（P〈0．01）。③GRP94的表达与宫颈癌分化程度、有无脉管侵袭有关（P〈0．05）,而与年龄、病理类型、临床分期及有无淋巴结转移无关（P〉0．05）;CD8的表达与有无脉管侵袭有关（P〈0．05）,而与年龄、病理类型、临床分期、分化程度及有无淋巴结转移无关（P〉0．05）。④宫颈病变组织中,GRP94的表达与HPV感染呈正相关（rs=0．377,P=0．000）;cD8的表达与HPV感染呈负相关（rs=-0．395,P=0．000）;GRP94与CD8的表达呈负相关（rs=-0．608,P=0．000）。结论：GRP94表达可能是宫颈CIN进展及宫颈癌预后判断的重要预测指标。     

TLR4在宫颈癌与不同HPV亚型宫颈癌细胞株中表达及意义

目的 探讨TLR4在正常宫颈组织、宫颈上皮不典型增生、宫颈癌组织以及不同HPV亚型宫颈癌细胞株中表达与意义.方法 采用SP免疫组织化（IHC）检测TLR4在12例正常宫颈组织、30例宫颈轻度不典型增生（cervical intraepithelial neoplasia Ⅰ,CINⅠ）、30例宫颈中-重度不典型增生（cervical intraepithelial neoplasiaⅡ-Ⅲ,CIN Ⅱ-Ⅲ）以及49例宫颈癌（invasive cervical carcinoma,ICC）组织中的表达;应用细胞免疫荧光法、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测TLR4在不同HPV亚型宫颈癌细胞株HPV18（＋）HeLa、HPV16（＋）Siha以及HPV（-）C33a宫颈癌细胞株上的表达.结果 TLR4的表达随着宫颈病变程度的增高逐渐增强,在正常宫颈组织、CINⅠ、CIN Ⅱ～Ⅲ、ICC中阳性表达率分别为8.33 %（1/12）、20.00 %（6/30）、26.67 %（8/30）和55.10 %（27/49）,ICC与正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ～Ⅲ之间均有显著性差异（P＜0.01）.TLR4表达与HPV感染有关,在HPV阳性宫颈癌细胞株上表达强于HPV阴性细胞株.结论 TLR4可能参与宫颈癌起始、发展,TLR4的表达与功能与HPV感染有关.     

宫颈癌中端粒酶的表达和高危型人乳头瘤病毒感染

目的：研究不同程度子宫颈病变中高危型人乳头瘤病毒HR-HPV感染和端粒酶活性的表达,以探讨两者在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的作用及相关性。方法：采用第二代杂交捕获技术检测宫颈脱落细胞HPV．DNA含量,并用免疫组织化学EnVision二步法检测宫颈组织标本中端粒酶的表达。结果：（1）端粒酶阳性表达率在对照组、C1NI、CINII、CINⅢ和宫颈癌组分别为10．00％、16．67％、40．00％、70．00％、95．00％,宫颈癌组高于cINⅢ,CINⅢ高于C1NⅡ,C1NII高于CINI,差异均有统计学意5C（X^2=-4．329,P=0．037;xⅫ．327,P=0．038;X^2=4．022,P=0．045）。（2）随着宫颈病变级别的增加,高危型HPV的阳性率和病毒负荷量均增高。高危型HPV的阳性率在宫颈癌和CINⅢ组明显高于对照组、CINI及CINⅡ（X^2=29．501-7．414,P〈0．01）。高危型HPV的病毒负荷量在对照组与其他4组比较,差异均有统计学意K（P〈0．05）;C1NI组分别与CINⅡ、C1NⅢ及宫颈癌组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。（3）随着宫颈病变级别的增加,高危型HPV的阳性率和端粒酶阳性表达率依次递增,两者有明显的相关性（r=0．943,P〈0．01）。结论：高危型HPV感染和端粒酶活性均与宫颈癌前病变及宫颈癌的发生发展密切相关,有望作为子宫颈癌前病变和宫颈癌筛查的监测指标。     

PTEN和β-cat在尖锐湿疣、Bowen＇s病和皮肤鳞癌中的表达及意义

目的：探讨PTEN和β-cat在尖锐湿疣、Bowen＇s病和皮肤鳞癌中的表达及意义。方法：采用免疫组化法检测蛋白PTEN和β-cat在正常皮肤、尖锐湿疣、Bowen＇s病、皮肤鳞状细胞癌（Scc）中的表达。结果：在正常皮肤、尖锐湿疣、Bowen＇s病、皮肤鳞状细胞癌（Scc）中PTEN蛋白的高表达率分别为100%,80.95%,46.67%,36.67%;β-cat蛋白的异常表达率分别为16.67%,30.16%,53.33%,70.00%,与正常皮肤组织相比,Bowen＇s病及Scc中PTEN蛋白的高表达率表达下降（P〈0.05,P〈0.01）;β-cat蛋白的异常表达率明显升高（P〈0.05,P〈0.01）。在Scc中两者的表达呈负相关（r=-0.416,P〈0.05）。结论：蛋白PTEN、β-cat在Scc的发生、发展中有重要的意义。     

腮腺腺样囊性癌中PTEN、MDM2表达

目的:研究腮腺腺样囊性癌组织中抑癌基因PTEN、癌基因MDM2蛋白表达,探讨PTEN、MDM2在腮腺腺样囊性癌中两者之间的相关性,为将来临床应用提供参考。方法:选取腮腺腺样囊性癌手术存档石蜡标本30例,另取10例腮腺腺样囊性癌癌旁正常组织石蜡标本作为对照组,采用免疫组化SP法检验PTEN、MDM2表达情况。结果:腮腺腺样囊性癌和癌旁正常组织中PTEN蛋白的阳性率分别为20%(6/30)和70%(7/10),二者存在显著性差异(P0.05)。MDM2蛋白在两种组织中阳性率分别为66%(20/30)和20%(2/10)(P0.05),二者存在显著性差异(P0.05)(r=-0.657),在腮腺腺样囊性癌中PTEN、MDM2的表达负相关。结论:PTEN、MDM2蛋白异常表达在腮腺腺样囊性癌的发生发展中起重要作用。     

子宫内膜癌中PTEN与PI3K-Akt通路的表达及意义

目的：研究PTEN与P1K3-Akt通路在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化技术检测正常子宫内膜组织（24例）、子宫内膜样腺癌组织（55例）及子宫内膜浆液性癌组织（26例）中PTEN、P13Kp110α及P—AKTSer473的表达情况,分析其表达与组织病理参数的关系。结果：免疫组化结果显示：子宫内膜癌的PTEN表达缺失率,P13Kp110α及p-AKTser473表达阳性率均高于正常子宫内膜组织,且正常子宫内膜组织与子宫内膜样腺癌组织比较有统计学意义（P〈0．05）;随着肌层浸润深度增加,PTEN表达缺失率增加（P〈0．05）。结论：PTEN的表达缺失及P13Kp110α与P-AKTSer473的表达可能与子宫内膜癌的发生发展有关,尤其是在子宫内膜样腺癌的发生发展机制中占重要地位。     

兰州市门诊病人人乳头瘤病毒（HPV）感染与宫颈病变相关性分析

目的：了解兰州市门诊病人人乳头瘤病毒（HPV）感染情况、年龄分布及与宫颈病变相关性,免疫组化法测不同宫颈病变组中P16表达,了解P16在筛查宫颈癌及其癌前病变中的作用。方法：收集兰州市2009年10月至2011年3月782例门诊女病人,核酸分子快速导流杂交基因芯片技术（HyBrimax）对宫颈脱落细胞行HPV分型检测,分析门诊病人中HPV感染状况及年龄分布。部分细胞学异常或高危HPV阳性者阴道镜下宫颈活检,病理检查宫颈病变程度及与HPV感染相关性,免疫组化法检测宫颈组织中P16蛋白表达情况。结果：兰州市门诊782例病人中,HPV阳性率28.64%（224/782）,21种亚型检测出17种,排在前5位亚型分别为HPV16、HPV58、HPV68、HPV52、HPV33,各年龄组间HPV感染差异有统计学意义（P〈0.05）,21-30岁之间感染占37.42%。117例病检组织中,HPV在正常/炎症、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ、ICC组中阳性率分别为35.55%、65.60%、88.46%、100%,各组间HPV感染差异有统计学意义（P〈0.01）,同时P16表达依次增高,阳性率分别为22.22%、56.25%、84.61%、100%,组间差异有统计学意义（X2=36.124,P=0.001）。结论：兰州市门诊病人HPV感染阳性率为28.64%,各年龄组间感染差异有统计学意义,随宫颈病变加重,HPV检出率及P16蛋白表达均增高,二者联合检测有助于早期诊断及治疗。     

宫颈癌组织中MCM5和P16^INK4A mRNA的表达及其临床意义

目的：检测宫颈癌组织中微小染色体维持蛋白-5（minichromosome maintenance protein 5,MCM5）与P16^INK4AmRNA的表达,并探讨其在宫颈癌中的临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）检测40例宫颈鳞状细胞癌、15例低度宫颈上皮内瘤变（CINⅠ）、20例高度宫颈上皮内瘤变（CINⅡ-Ⅲ）中MCM5和P16^INK4AmRNA的相对表达量,并以20例正常宫颈组织作为对照,分析其与宫颈癌临床病理特征的关系。结果：（1）随着宫颈病变程度的加重,MCM5和P16^INK4AmRNA的表达量逐渐增高。宫颈癌组织中MCM5和P16^INK4AmRNA的表达量分别是正常宫颈组织的（3.026±1.210）倍和（2.540±0.718）倍,差异具有统计学意义（P〈0.05）。宫颈癌组织中MCM5 mRNA的表达量明显高于CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ（P〈0.05）,CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ中MCM5 mRNA的表达量均显著高于正常宫颈组织,差异具有统计学意义（P〈0.05）,而CINⅠ与CINⅡ-Ⅲ比较差异无统计学意义（P〉0.05）;宫颈癌组织中P16^INK4AmRNA的表达量为正常宫颈组织的（2.54±0.86）倍,差异有统计学意义（P〈0.05）,亦显著高于CINⅠ,差异具有统计学意义（P〈0.05）,但与CINⅡ-Ⅲ比较差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）在宫颈癌组织中,MCM5 mRNA的表达量与肿瘤的临床期别、分化程度显著相关（P〈0.01）,但与患者的年龄无关（P〉0.05）;P16^INK4AmRNA的表达量与肿瘤的临床期别、年龄均无关（P〉0.05）,但与肿瘤的分化程度相关（P〈0.01）。结论：MCM5、P16^INK4A的高表达可能在宫颈癌的发展中起重要作用。MCM5基因检测有助于区分癌前病变和宫颈癌,有望成为宫颈癌肿瘤增生的新标志物。P16^INK4A的检测在宫颈病变筛查中具有重要意义,有助于CIN的分级并预测转归,从而提高宫颈癌筛查率。     

无蹼壁虎心脏雌激素受体免疫组织化学研究

目的：观察雌激素受体（ERα和ERβ）在非繁殖期成年无蹼壁虎（Gekko swinhonis）心脏的表达并比较性别差异。方法：应用显示雌激素受体的免疫组织化学方法。结果：ERα和ERβ阳性反应均见于无蹼壁虎心肌细胞和成纤维细胞,且受体的表达无性别差异;ERα表达存在明显的心房（11．56±1．67）心室（6．68±1．88）差异（P〈0．01）。结论：雌激素可能是通过ERα主要作用于心房,通过ERβ调节整个心脏的机能;雌激素受体含量与性别无关,可能与生理条件下受体的活性及功能状态有关。