新生期缺氧缺血脑白质损伤大鼠神经元树突和突触损伤

目的探讨新生大鼠缺氧缺血脑白质损伤后脑内神经元的变化。方法新生3日龄SD大鼠24只,随机分为对照组和缺氧缺血脑白质损伤(WMI)组。于缺氧缺血后4周,应用免疫荧光染色检测大鼠脑内髓鞘碱性蛋白(MBP)、皮层和海马神经核抗原(Neu N)、微管相关蛋白-2(MAP-2)和突触素(Syn)的表达,应用高尔基染色法观察神经元树突变化,并应用Western blot法进一步测定Syn表达量的变化。结果免疫荧光染色结果显示:与对照组相比,WMI组MBP表达减少,皮层和海马Neu N阳性细胞数未见明显改变,MAP-2阳性细胞突起弯曲、断续;高尔基染色结果显示:WMI组树突棘数量减少;免疫荧光染色和Western blot结果显示:WMI组Syn表达量降低。结论新生大鼠发生缺氧缺血脑白质损伤后树突损伤、树突棘数量减少、突触减少导致神经元之间联系减少,可能引起学习记忆能力减退。     

血糖水平对缺氧缺血新生大鼠体重和脑重的影响观察

目的　观察不同血糖水平及缺氧缺血 (hypoxicischemia ,HI)前后血糖对缺氧缺血新生大鼠体重和脑重的影响。方法　通过制备缺氧缺血新生大鼠合并高低血糖模型 ,分别在脑HI后 2、2 4、48、72h和 7d共 5个时段 ,分别在断头前测体重和断头后取脑称脑重 ,并辅以免疫组化分析HI后 2 4h时段各组脑内葡萄糖转运蛋白 1(GLUT1)及葡萄糖转运蛋白 3 (GLUT3 )合成量的变化。结果　 2 4h时段HI组、HI前低血糖组、HI后低血糖组体重呈显著意义 ,低于正常组 ;2 4h时段缺氧缺血前后低血糖脑重均呈显著意义 ,低于其他各组 ,7d时段I前重高血糖组脑重高于HI组及HI前低血糖组。HI前重高血糖组HI后 2 4h在皮质部位GLUT1的合成量显著高于其他各组。HI前低血糖组HI后 2 4h在皮质部位GLUT3的合成量显著低于其他各组。结论　HI前低血糖对新生大鼠体重、脑重增长不利 ,HI前重高血糖有可能缓解HI引起的体重、脑重的减轻而显示一定的保护作用     

新生大鼠缺血缺氧后脑内一氧化氮合酶的动态表达

实验采用生后14天Wistar大鼠缺血缺氧（HI）动物模型。用免疫组织化学方法观察HI复苏（HI/R0后前脑一氧化氮合酶动态表达。结果显示;神经元一氧化氮合酶（nNOS)阳性神经元主要分布于新生大鼠大脑皮层的Ⅲ-Ⅳ层。尾状核,隔核及嗅结节,HI/R早期其表达水平无明显变化;复苏48小时及5天后,可分别在右侧大脑顶皮层或右侧大脑顶皮层和尾状核区出现梗塞灶,该区nNOS阳性神经元明显减少,而诱导型一氧化氮合酶（iNOS)阳性细胞在HI/R后12小时始现于损伤侧的侧脑室;随时间的推移在损伤侧缰核,皮层,尾状核以及丘脑背外侧核,丘脑腹侧核可见iNOS阳性细胞逐渐增多并染色加深,用识别单核巨噬细胞的克隆ED1单克隆抗体检测可见ED1阳性细胞出现的时间和在脑区的分布与iNOS阳性细胞相似,本实验提示,在局灶性脑缺血缺氧早期,脑内NO的释放不依赖于nNOS阳性神经元或iNOS阳性细胞,而在局灶性脑缺血缺氧晚期,iNOS阳性细胞产生的NO可能参与了脑损伤的过程。     

褪黑素抑制新生大鼠脑缺血缺氧损伤后海马内Bcl-2/Bax的下调和caspase-3的活化

目的探讨褪黑素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)后脑内Bcl-2、Bax和caspase-3表达的影响。方法用电凝结扎第7天的新生SD大鼠右颈总动脉制备新生大鼠脑缺血缺氧损伤模型,用称重法测定脑水肿程度;hematoxylin-eosin(HE)和triphenyltetrazolium chloride(TTC)染色观察脑组织的梗死范围;Fluoro-Jade B(FJB)染色观察细胞的死亡情况;免疫荧光染色、Westernblot检测caspase-3、Bcl-2和Bax在各组的表达。结果 HIBD大鼠右侧大脑半球出现明显的梗死灶,且含水量较假手术组明显增加;褪黑素可使之减轻。HE和FJB染色显示,褪黑素可减轻大鼠缺血缺氧损伤引起的海马神经元的形态改变,降低FJB阳性细胞的数量。免疫荧光染色和Western Blot检测显示,HIBD大鼠右侧海马caspase-3、Bcl-2和Bax水平升高,Bcl-2/Bax降低;褪黑素干预后caspase-3和Bax水平达降低,Bcl-2水平升高,Bcl-2/Bax升高。结论褪黑素可通过抑制新生大鼠脑缺血缺氧损伤后海马内Bcl-2/Bax的下调和caspase-3的活化,抑制细胞凋亡,对新生鼠脑缺血缺氧损伤产生保护作用。     

孕酮对缺氧缺血新生鼠脑皮质HIF-1α表达的影响

目的:探讨孕酮(PROG)对缺氧缺血性新生鼠脑组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法:7日龄SD大鼠80只随机分成4组(n=10):正常对照组,假手术组,缺氧缺血组和孕酮组,动物造模成功24 h后处死动物,应用RT-PCR和免疫组织化学方法观察各组新生鼠大脑皮质中HIF-1α表达的变化。结果:孕酮组HIF-1αmRNA及HIF-1α蛋白表达均明显高于其他三组(P<0.01)。结论:孕酮对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用可能与其上调HIF-1α的表达有关。     

缺氧缺血诱导对原代新生大鼠前脑混合细胞髓鞘形成和细胞骨架的影响

目的:该研究探讨了缺氧缺血诱导对新生大鼠前脑混合细胞髓鞘形成和细胞骨架的影响。方法:在原代培养的新生大鼠前脑混合细胞中,应用免疫组化染色髓鞘碱性蛋白(MBP)和劳克坚牢蓝(LFB)染色检测髓鞘和轴突的发育情况;Western印迹分析NF155蛋白的表达情况;免疫荧光分析参与细胞骨架调节的ERM-Rho GTP酶家族相关蛋白表达。结果:缺氧缺血对混合细胞的进一步分化和成熟起到抑制作用,MBP染色阳性率降低57%,髓鞘和轴突染色阳性率降低74%;NF155蛋白表达降低51%;Rho GTP酶家族成员Rac1、Cdc42分别降低81%和75%。结论:缺氧缺血使细胞突起的形成和骨架重组受到阻碍,继而影响髓鞘的发育和成熟,这一过程与ERM-Rho GTP酶细胞骨架通路有关。     

新生大鼠脑低氧缺血早期对纹状体胆碱能系统的影响

采用7日龄大鼠右侧颈总动脉结扎合并高温、低氧环境制作新生动物脑低氧缺血模型,观察了脑低氧缺血对新生动物纹状体胆碱能系统的影响。乙酰胆碱(ACh)放射免疫测定结果表明,低氧缺血损伤后24h,两侧纹状体ACh含量均比正常对照组明显下降。乙酰胆碱酯酶(AChE)组织化学图象定量提示,脑低氧缺血后24h,纹状体内拟胆碱能神经元数量未见减少,而胞体内AChE染色强度略有下降。胆碱能递质和该标志酶在新生鼠脑低氧缺血早期的一致改变,证明发育中纹状体胆碱能系统对低氧缺血敏感。鉴于动物不结扎动脉仅作低氧处理者双侧纹状体ACh含量出现与低氧缺血组相同的改变,故提示缺氧可能是造成胆碱能系统早期损伤的直接原因。     

DGMI对缺血再灌注大鼠脑内神经递质的影响

为了探讨银杏二萜内酯葡胺注射液(DGMI)对缺血再灌注大鼠脑内神经递质的影响。本研究将SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为6组,造模与给药结束后,使用高效液相-电化学的方法检测实验大鼠的氨基酸类与单胺类神经递质含量。大鼠脑组织的ImageJ图像分析发现,高剂量组大鼠的梗死体积与水肿面积显著低于模型组,并与空白组水平接近。高剂量组大鼠的Asp、Glu、GABA水平最接近空白组,认为高剂量组调节氨基酸类神经递质平衡的效果最佳。高剂量组大鼠的DA、E、NE与空白组比较无差异,认为高剂量组的治疗效果显著优于阳性对照药物。本研究表明,银杏二萜内酯葡胺注射液可以有效抑制兴奋性神经递质与单胺类神经递质的释放,增加脑内抑制性神经递质的含量,推测DGMI可以通过调节氨基酸类神经递质的平衡,从而对脑组织神经元进行保护。     

竹节参总皂苷抑制急性低压缺氧大鼠脑和心肌损伤的形态学观察

在模拟海拔8000米高空的急性低压缺氧条件下,研究了竹节参总皂苷对Wistar大鼠的脑、心肌组织和细胞损伤的预防效果.实验结果表明未给药的阴性对照组Wistar大鼠的脑和心肌组织以及细胞均遭到了严重损伤.而竹节参总皂苷和红景天提取物给药组的Wistar大鼠,其脑和心肌组织以及细胞的损伤程度明显减轻.其中竹节参总皂苷给药组的效果最明显.     

雌激素受体在脑内的表达与缺血再灌注损伤

雌激素作为一种内源性激素参与多器官生理过程的调节,通过与雌激素受体结合或介导不同雌激素受体间的协作而发挥效应,其中在中枢神经系统疾病的发展中具有保护作用已受到人们的广泛关注。脑卒中作为一种高发疾病,具有明显的性别差异性,因此对脑内雌激素的研究为脑卒中的预防及治疗提供了新的方向。我们针对雌激素受体不同亚型在脑内的分布及其在缺血再灌注损伤中的作用研究进展做简要综述。     

中药活性成分改善缺血缺氧所致脑微血管内皮 屏障功能损伤的研究进展

缺血性脑卒中发生时,基质金属蛋白酶等效应分子以及炎症反应、氧化应激等会破坏血脑屏障,增加缺血区有害产物进入脑组织, 产生脑水肿,引起继发性脑损伤。所以,保护与维持脑微血管内皮屏障功能的完整性,是脑卒中防治的重要策略之一。从调节效应分子 和相关信号通路的角度出发,综述中药活性成分对模拟缺血性脑卒中的体内外脑微血管内皮屏障功能损伤模型的改善作用研究进展,以 期为进一步阐释中药活性成分防治缺血性脑卒中的作用机制以及新药创制提供参考和依据。     

低氧预处理对新生大鼠脑低氧缺血时海马区Bcl-2和Bax表达的影响

目的：观察低氧预处理对新生大鼠脑低氧缺血时海马区Bcl-2和Bax表达的影响,探讨低氧预处理对新生大鼠脑低氧缺血损伤的保护机制。方法：7日龄新生SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、低氧缺血组（HIBD组）和低氧预处理组（HPC＋HIBD组）。采用免疫组织化学方法,检测各组脑组织海马区Bcl-2和Bax表达的变化。结果：与正常对照组、假手术组相比．HIBD组和HPC＋HIBD组海马区Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达明显增多;与HIBD组相比,HPC＋HIBD组海马区Bcl-2蛋白表达明显增多,Bax蛋白表达明显减少。结论：低氧预处理后Bcl-2表达上调,Bax表达下调,可能是其保护随后脑低氧缺血损伤的机制之一。     

出生后炎症大鼠脑性瘫痪模型神经生长发育测试及脑组织 CNP、MBP 的表达

目的:通过制备出生后脑性瘫痪鼠模型并对鼠脑损伤进行评估,观察与人类孕期损伤导致婴儿脑组织前少突胶质细胞之间的关联。方法:新生乳鼠在出生后第3、4、5、6、7天,每天腹腔注射脂多糖(LPS)(n=12,30,30,60,60,120μg/kg)或生理盐水(n=11)。新生乳鼠从生后第1天至第21天每天接受机能和认知发育测试。出生后第22天对乳鼠脑组织进行免疫组织化学检测,通过对前少突胶质细胞标志物(CNP)及髓鞘标志物(MBP)的检测评估鼠脑白质损伤。神经发育测试数据采用重复测量方差分析方法,免疫组织化学实验数据采用方差分析方法。结果:对新生乳鼠进行神经生长发育测试后发现,LPS处理组乳鼠在平面翻正测试、悬崖回避测试、前肢抓握测试及睁眼时间测试(P<0.05),活动力测试(P<0.01),其他几项比较无差异(P>0.05),悬吊实验(P>0.05),旷野实验(P<0.05)。前少突胶质细胞标志物CNP在LPS处理乳鼠组中是增多的(P<0.01),髓鞘碱性蛋白(MBP)在LPS处理乳鼠组中是减少的(P<0.01)。结论:对新生乳鼠腹腔注射脂多糖可以引起鼠脑白质损伤,但是并不能出现与缺血缺氧模型一致的脑性瘫痪表型。     

肾缺血再灌注损伤大鼠肾内AQP2表达水平降低

目的了解肾脏缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury, IRI)时肾内水通道蛋白-2(aquaporin 2, AQP2)免疫组织化学表达特点。方法建立大鼠右侧肾IRI 45min模型,随机分为缺血再灌注1d、3d、5d、7d组和假手术1d组,检测尿常规、尿比重、尿素氮、血肌酐;HE染色观察肾脏病理形态学变化;免疫组织化学染色观察IRI时肾脏AQP2表达的变化。结果 IRI后,大鼠出现尿量增多,尿比重降低,血肌酐、尿素氮均增加;HE染色示右侧肾充血,水肿以及肾小管上皮细胞肿胀、坏死和脱落;免疫组织化学染色显示AQP2免疫反应性在右肾降低,左肾增强。肾组织的变化在第7d基本恢复正常。结论肾IRI时肾内AQP2表达降低,可能与IRI后尿量增多、尿比重降低相关。     

大鼠心肌线粒体缺血再灌损伤及SOD抗缺血再灌损伤作用的形态计量研究

研究了在体大鼠心肌缺血再灌模型心肌线粒体再灌损伤和SOD抗缺血再灌损伤的作用。实验分为:A组(缺血再灌组)B组(SOD组)和C组(假手术组)。电镜见A组线粒体高度肿胀、外膜缺损、嵴断裂溶解,出现无定形致密体、四膜嵴和杆状嵴等改变。B组线粒体轻度或中度肿胀、少数有轻度嵴溶解。个别线粒体内出现无定形致密体。三组线粒体超微结构立体计量数据比较,A组线粒体密度、线粒体体密度与肌原纤维体密度比率增高((P<0.01),线粒体比表面和比膜面降低(P<0.01)。自身动图像分析仪检测SDH反应灰度值A组呈强损伤反应,B组反应较轻,二者差别有显著性(P<0.05)。结果表明,心肌缺血再灌可致线粒体发生不可逆性损伤,SOD能减轻线粒体缺血再灌性损伤。     

何首乌提取物减轻大鼠脑缺血再灌注损伤和上调脑内UCP4蛋白水平

目的研究何首乌提取物对脑缺血再灌注损伤UCP4的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法健康雄性SD大鼠采用线栓法复制局灶性脑缺血(MCAO)再灌注损伤模型,缺血2h后再灌注6h或24h,部分缺血再灌注模型大鼠分别灌胃不同浓度何首乌口服液。免疫组织化学染色和Western blot检测脑内UCP4表达,TTC染色检测脑梗死面积。结果在脑缺血再灌注6h后损伤,UCP4蛋白在海马内表达增高,再灌注24h后表达降低;何首乌提取物能浓度依赖性减少脑缺血再灌注损伤的脑梗死面积和上调UCP4表达。结论何首乌提取物能明显改善大鼠脑缺血再灌注损伤,其机制可能与脑内线粒体蛋白UCP4表达升高,保护神经元有关。     

缺血缺氧脑损伤大鼠NSE和S-100β蛋白的变化及其临床意义

目的探讨缺血缺氧脑损伤大鼠神经元特异性烯醇化酶（NSE）和S-100β蛋白（S-100β）的变化及其临床意义。方法75只Wistar大鼠随机分为对照组和实验组,再将实验组按造模后4 h、8 h、12 h和24 h不同时点分为4个亚组。利用夹闭双侧颈总动脉,并进行缺氧的方法制备模型。以放射免疫法（RIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）分别测定血清和脑组织中NSE和S-100β蛋白的变化。结果造模后24 h内,血清和脑组织中NSE和S-100β的含量是一个动态变化过程,呈同步变化的趋势,在12 h时均达到峰值。而且,实验组中各亚组的二者含量明显高于对照组（P〈0.01或P〈0.05）。结论缺血缺氧后不同时点NSE和S-100β的含量呈动态变化;二者可作为缺血缺氧后脑组织损伤程度及修复的一个临床参考指标。     

短暂缺氧致新生大鼠海马内β-连环素、神经源性分化因子1和胰岛素受体表达动态改变

目的 探讨短暂缺氧对新生大鼠海马β-连环素(β-catenin)、神经源性分化因子1(NeuroD1)、胰岛素受体(insulin receptor)表达的影响.方法 将3日龄SD大鼠置于8％O2+92％N2的混合气体中2h,采用尼氏染色及透射电镜观察海马结构病理变化;于缺氧后2h、4h、24h断头取脑,免疫荧光染色法...     

电磁脉冲对大鼠学习和脑内神经递质的影响

探讨电磁脉冲（ＥＭＰ）对大鼠神经系统的效应。实验采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠,ＥＭＰ辐照后不同时间用Ｙ－型迷宫测其学习能力,高效液相色谱法检测脑不同部位的神经递质含量。与假照射组（对照组）相比,照后三天内各测定组大鼠学习能力降低（Ｐ＜０．０５）,其中照射后第１天组的海马内５－羟色胺（５－ＨＴ）和多巴酸（ＤＯＰＡＣ）含量升高（Ｐ＜０．０５）,下丘脑多巴胺（Ｄｏｐａｍｉｎｅ）含量升高（Ｐ＜０．０５）,肾上腺素（Ａｄｒ）含量降低;照后２天组海马Ａｄｒ含量降低（Ｐ＜０．０５）,海马５－ＨＴ含量升高（Ｐ＜０．０５）;照后３天组海马内Ａｄｒ含量降低（Ｐ＜０．０５）。ＥＭＰ能够改变大鼠不同脑区神经递质的含量,降低大鼠学习能力