番红O和固绿FCF

番红O和固绿FCF二种染料与苏木素并列为植物组织学三种最常用的染料.番红与固绿对染是植物制片中最普通的二重染色法,染色手续简单并能清晰的显示出细胞的结构.但番红与固绿作二重染色,其结果有好有坏,成绩很不理想,原因是固绿在碱性溶液中,变成蓝色或蓝绿色,所以如用来染水生植物的茎、叶及大多数裸子植物的茎、叶,其结果往往为蓝绿色,很少成绿色.此时如不知其原因,往往误认为染色的技术不良所致,却不知     

人结肠切片三种特殊染色的比较

目的比较人结肠组织切片阿利辛蓝AB染色(Alcian Blue)、过碘酸雪夫氏PAS染色(Periodic Acid Schiff)及洋红三种染色方法及镜下特点。方法取人结肠,Carnoy氏固定液固定,对结肠组织进行阿利辛蓝AB染色、PAS染色及洋红染色,光学显微镜下观察染色效果。结果三种染色都能清晰显示结肠组织的结构,尤其对结肠的粘膜层进行了观察。阿利辛蓝染色使结肠上皮吸收细胞的细胞核染为红色,杯状细胞中的黏液染为蓝紫色;洋红染色使结肠上皮吸收细胞的细胞核染为蓝紫色,杯状细胞中的黏液染为红色。结论阿利辛蓝和洋红染色均能清楚显示杯状细胞中的黏液,且染色后的细胞质和细胞核成为互补色,结构清晰,对比明显。     

肥大细胞标本的快速简易制作方法

肥大细胞是大多数脊椎动物疏松结缔组织中常见的细胞 ,常成群地沿着小血管分布。该细胞胞质内充满着粗大的嗜碱性颗粒 ,其颗粒具有水溶性 ,用碱性染料染色时呈现异染性。通常在制作肥大细胞标本时先取皮下组织或肠系膜进行铺片 ,风干后经过固定液固定 ,再用甲苯胺蓝、硫堇等染色方法显示胞质内颗粒 ,然后再经脱水 ,透明和封片等常规操作程序完成标本制作。近年来 ,笔者根据该细胞胞质内嗜碱性颗粒具有异染性和水溶性特点 ,采用以酒精为溶剂的甲苯胺蓝染色液对风干后肥大细胞铺片标本不经固定而直接染色 ,染色后只经一道酒精洗去浮液 ,风干后…     

人毛乳头细胞组织化学研究

毛乳头细胞是一种高度特殊化的成纤维细胞。本文通过对体外培养的毛乳头细胞进行组织化学染色研究发现,它对阿新蓝、甲苯胺蓝和PAS染色均呈阳性,并对甲苯胺蓝显异染性．与原位时的细胞染色结果相同,表明在体外培养下．毛乳头细胞合成和分泌酸性、中性粘多糖的能力仍能维持较长时间;在细胞聚集区和多层化细胞团中有丰富的细胞外基质,阿新蓝和PAS染色呈强阳性,说明细胞外基质的存在与毛乳头细胞的聚集有很大关系;另外毛囊真皮鞘细胞对阿新蓝、甲苯胺蓝染色呈阳性反应．无甲苯胺蓝的异染性,PAS染色阴性,而真皮成纤维细胞这些染色均阴性,说明它与毛乳头细胞关系密切。     

小肠上皮分泌细胞特性的组织学观察

目的寻找一种可以替代人体消化管的动物标本,并通过特殊染色方法,使得小肠上皮分泌细胞的形态特征能够明显地显示出来。方法随机采集成年猫小肠的新鲜标本,经Bouin液灌注固定24h后,石蜡包埋切片脱蜡入水。分别采用Gomori染色法、PAS反应、Gomori＋PAS反应、阿利新蓝（alcian blue,AB）染色法、AB＋PAS反应、HE染色法和苏木精-焰红染色法进行染色。结果在各种染色的切片标本上,能够观察到杯状细胞的形态、分布和染色特性以及肠内分泌细胞的特点,并发现在它们之间还存在一种绿色颗粒细胞和嗜酸性颗粒细胞。结论通过特殊染色可以肯定猫的小肠杯状细胞合成的是中性粘蛋白和酸性粘蛋白;绿色颗粒细胞为未成熟杯状细胞;嗜酸性颗粒细胞为Paneth细胞,其特点是单个分散分布。肠内分泌细胞与周围其他上皮细胞的染色对比明显而容易识别。     

嗜粘蛋白阿克曼菌在糖尿病和肥胖中的作用

肠道微生物在平衡健康与疾病的过程中起着重要作用。嗜粘蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila)是肠道微生物中的一种,其在降解肠道粘蛋白方面的特性使其成为肠腔与宿主细胞黏膜界面的关键生物。嗜粘蛋白阿克曼菌与肥胖、糖尿病、心血管代谢疾病和低度炎症呈负相关。口服嗜粘蛋白阿克曼菌可改善小鼠代谢疾病的相关症状,嗜粘蛋白阿克曼菌有望成为治疗2型糖尿病和肥胖的候选药物。本综述通过总结现有关于嗜粘蛋白阿克曼菌在糖尿病和肥胖症中发挥作用的研究,指出嗜粘蛋白阿克曼菌调节宿主和肠道微生物群之间相互作用可能存在的机制,为嗜粘蛋白阿克曼菌的进一步研究和糖尿病的新药研发提供思路。     

嗜酸粒细胞过氧化物酶快速染色的研究

目的建立嗜酸粒细胞过氧化物酶快速染色方法,完善包括嗜酸粒细胞脱颗粒或中性粒细胞粗颗粒等各种情况下嗜酸粒细胞准确并快速计数的质量控制。方法随机选取75例血液病患者的骨髓涂片标本,要求常规瑞-姬染色骨髓分类嗜酸粒细胞≥3.5%,取材3d内。每份标本中选取两张,分别划入实验组和对照组。实验组标本进行嗜酸粒细胞过氧化物酶快速染色,对照组标本进行常规瑞-姬染色。分别计数嗜酸粒细胞百分数。结果实验组嗜酸粒细胞颗粒染成黑色,对包括中性粒细胞在内的其他细胞染色效果同瑞-姬染色,显微镜下嗜酸粒细胞显示醒目,可快速准确计数。结果与对照组比较,经t检验,P0.05,无统计学差异。结论嗜酸粒细胞过氧化物酶快速染色方法比较常规瑞-姬染色具有快速染色,对嗜酸粒细胞的显示更加醒目的优点,且对包括中性粒细胞在内的其他细胞染色兼有瑞-姬染色的效果。该方法值得推广用于快速骨髓细胞染色,且适用于包括嗜酸粒细胞形态不典型及中性粒细胞颗粒粗大等各种情况下的嗜酸细胞计数的质量控制,从而准确有效地服务于临床诊治。     

嗜硷性芽孢杆菌硷性蛋白酶的研究——Ⅲ.产品的急性毒性及微核试验

为了解嗜硷性芽孢杆菌(Bacillus basophilus)硷性蛋白酶用于洗涤剂中的安全性,对该酶进行了急性毒性及微核试验的研究。结果表明,嗜硷性芽孢杆菌硷性蛋白酶由小鼠经口剂量达10g/kg时,未见动物死亡;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,未见微核率有异常增加。所以,认为嗜硷性芽孢杆菌硷性蛋白酶可广泛应用于洗涤剂中。     

大口鲶外周血细胞的结构笔组化反应的研究

用光镜和电镜观察大口鲶外周血细胞的形态结构２,过氧化物酶和糖原在血细胞内的分布,结果表明在大口鲶外周血细胞中可区分出红细胞,淋巴细胞,单核细胞,嗜中性白细胞和血栓细胞。在血涂片和超薄切片上都没发现嗜酸细胞和嗜硷细胞。描述了各种血细胞在光,电镜观察下的形态结构和组化反应。     

鸡中枢淋巴器官肥大细胞的组织化学与形态学

对哺乳动物的,特别是啮齿动物和人类肥大细胞已有了比较深入的研究, 但关于家禽肥大细胞的研究很少.本研究旨在阐明鸡中枢淋巴器官中肥大细胞的组织化学与形态学特征.本研究证实Carnoy 氏液是鸡肥大细胞的优良的固定液,而中性缓冲福尔马林(NBF) 却阻断了大多数肥大细胞的着染力.甲苯胺蓝和阿尔新蓝是鸡肥大细胞的良好的染料,但阿尔新蓝能使更多的肥大细胞着染,虽然其也可使杯状细胞着染.作者的一种新的染色法, 长时间阿尔新蓝染色(LAB-S)可用于NBF固定的组织中肥大细胞的染色,因为其着染的细胞数与Carnoy 氏液固定甲苯胺蓝染色的细胞数无显著差异(P<0.001).在胸腺髓质中见有大量的肥大细胞,而胸腺皮质仅可见个别肥大细胞位于血管周围及小叶间结缔组织中.腔上囊的皮质与髓质中很少见有肥大细胞.肥大细胞有血管周围分布的倾向,但一个有趣的发现是血管内偶尔也有个别肥大细胞.电镜下可见肥大细胞的胞浆颗粒内充满无定形的颗粒状基质,但其电子密度有的较高,有的较低.少数胞浆颗粒内有旋涡状及网状亚微结构.但未见有人类肥大细胞胞浆颗粒内特征性的晶格状和卷轴状的亚微结构,也未见到在绵羊肥大细胞中描述过的特殊亚微结构.     

大口鲶外周血细胞的结构和组化反应的研究

用光镜和电镜观察大口鲶外周血细胞的形态结构、过氧化物酶和糖原在血细胞内的分布。结果表明在大口鲶外周血细胞中可区分出红细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜中性白细胞和血栓细胞。在血涂片和超薄切片上都没发现嗜酸细胞和嗜硷细胞。描述了各种血细胞在光、电镜观察下的形态结构和组化反应。     

乙醇对超氧化物歧化酶活性邻联〔二〕茴香胺染色法的影响

超氧化物歧化酶(SOD)活性染色法有硝基四氮唑蓝染色法(又称负染法)和邻联[二]茴香胺染色法(又称正染法)两种,后者是由 Misra 在邻联[二]茴香胺 SOD 活力测定法的基础上建立的。虽然该法具有许多优点,但是普遍认为其染色效果较难掌握,故应用不及负染法广泛,迄今我们仅见一篇应用报道。通     

大肠杆菌感染与人巨噬细胞系U937 细胞凋亡的关系及NF-κB的变化

目的探讨大肠杆菌(E.coli)感染与人巨噬细胞系U937细胞凋亡的关系及核转录因子(nuclear factorkappa B,NF-κB)表达的变化。方法以Annexin V FITC/PI双染流式细胞仪检测及Hoechst 33258荧光染色观察为指标,研究E.coli感染对人巨噬细胞系U937细胞凋亡的诱导作用;用Western blot方法检测NF-ΚB的表达。结果Ho-echst 33258荧光染色结果表明当细胞与细菌浓度比较低时(1:10)可引起部分细胞凋亡,Annexin V FITC/PI双染流式细胞仪结果表明,当细胞与细菌浓度比为1:20,1:50及1:100时,细胞凋亡率与对照组相比明显增高,有显著性差异(P<0.001)。NF-κB的表达随着E.coli浓度的增加而逐渐降低。结论E.coli以剂量依赖的方式诱导U937细胞凋亡,在此过程中NF-κB的表达逐渐降低。     

电穿孔导入的LacZ基因在人肺癌细胞中的表达

选用LacZ基因作为报告基因,用电穿孔法与pSV2neo质位共转化导入人肺巨细胞癌高转移细胞株,经G418及X－gal组化法双重筛检,获得LacZ基因表达阳性的细胞克隆。经X－gal组化染色,该克隆70％细胞蓝染,再经软琼脂培养后,形成的集落蓝染率约为65％,单个集落中的细胞蓝染率可达100％,在裸小鼠皮下或尾静脉接种这一LacZ基因表达阳性的克隆细胞后,在形成的肿瘤及肺内转移灶的冰冻切片中,X－gal染色可观察到蓝染的癌细胞。但由于细胞周期不同步、遗传稳定性以及表达调控因素的影响,则可能是本实验中部分细胞染色阴性的原因。我们的实验表明,LacZ基因有可能在肿瘤转移的研究中作为一种理想标志基因。     

黄石爬(鱼兆)外周血液指标特征的观察

黄石爬(鱼兆)(Euchiloglanis kishinouyei)属于较为原始的高原鱼类。通过生化分析仪测定红细胞数及血红蛋白含量,Wright′s染色及细胞化学方法,即过碘酸雪夫(PAS)、酚氧化酶(PO)、苏丹黑B(SBB)和过氧化物(POX)染色,观察其外周血细胞的显微结构及细胞化学特征。黄石爬(鱼兆)的红细胞数为(0.55±0.06)×1012个/L,血红蛋白含量为(73.00±5.57)g/L;血细胞中红细胞占98.03%,且其细胞体积较大,白细胞中血栓细胞占比例最多,为37.06%,异嗜性粒细胞最少,为9.64%,异嗜性粒细胞分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。细胞化学染色显示,红细胞均呈阴性,白细胞存在染色特性差异,其中白细胞过碘酸雪夫(PAS)染色均为阳性,过氧化物(POX)染色除Ⅰ型和Ⅲ型异嗜性粒细胞外均为阴性。     

长鬣蜥脑垂体的组织学结构观察

用HE、尼氏染色和Holmes银染法对长鬣蜥脑垂体的显微结构进行了观察.发现其脑垂体分腺垂体、神经垂体两部分,为背腹型.HE染色观察到腺垂体分为嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞3种类型,另外还观察到室管膜细胞和神经垂体内的垂体裂;尼氏染色显示神经垂体的赫令氏体以及排列致密的腺垂体中间部细胞;Holmes银染法显示神经垂体的无髓神经纤维、垂体门脉系统的血管.首次发现垂体裂与中脑视叶的水管系统相连通.     

环氧二十碳三烯酸抑制剂通过AKT/FoxO1信号通路抑制棕榈酸诱导的心肌细胞凋亡

目的观察14,15-环氧二十碳三烯酸(14,15-epoxyeicosatrienoic acid,14,15-EET)及其抑制剂14,15-环氧二十碳-5(Z)-烯酸(14,15-epoxyeicosa-5(Z)-enoic acid,14,15-EEZE)对棕榈酸(palmitate acid,PA)诱导心肌细胞凋亡的作用及机制。方法 14,15-EET和14,15-EEZE单独或联合作用于PA诱导后的H9c2细胞,采用噻唑蓝比色法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹法测定细胞p-AKT和p-Fox O1蛋白表达水平。结果流式细胞术检测显示,PA诱导下H9c2细胞凋亡率上升,14,15-EET的作用可降低细胞凋亡率,而加用14,15-EEZE使细胞凋亡率上升,14,15-EEZE的单独作用也可提高PA诱导下H9c2细胞的凋亡率。免疫印迹分析显示,PA可降低H9c2细胞p-AKT和p-Fox O1蛋白表达水平,14,15-EET的作用可使p-AKT和p-Fox O1蛋白表达水平明显上升,而加用14,15-EEZE后p-AKT和p-Fox O1的蛋白表达水平明显下降,14,15-EEZE的单独作用可使PA诱导下H9c2细胞的p-AKT和p-Fox O1的表达水平明显下降。结论 14,15-EET可能通过促进AKT/Fox O1信号通路活性抑制棕榈酸诱导的H9c2细胞凋亡,而其抑制剂14,15-EEZE可能通过抑制AKT/Fox O1信号通路活性抑制14,15-EET的抗棕榈酸诱导H9c2心肌细胞凋亡的作用。     

贴壁培养细胞台盼蓝拒染试验的方法学探讨

本工作旨在探讨贴壁培养细胞台盼蓝拒染试验的方法,为其合理应用提出建议.用正常培养及NaN3作致死处理的人视网膜色素上皮细胞株-19,进行原位贴壁细胞和培养体系上悬液中细胞的台盼蓝拒染实验,并比较其原位法与计数板法所测活细胞率.与计数板法相似,随染液浓度增高或染色时间延长,原位台盼蓝拒染实验的活细胞率检测值逐渐增加.培养...     

多种特殊染色法在骨关节炎组织形态学研究中的应用比较

目的探讨多种特殊染色法在骨关节组织中的染色规律及其在骨关节炎形态学研究中的应用价值。方法 6月龄健康新西兰大白兔20只,随机分为正常组和造模组各10只,根据改良Hulth法造模,6周后膝关节取材。对标本固定、脱钙后进行石蜡包埋和切片。分别采用HE、番红-固绿、AB-PAS、甲苯胺蓝、Van Gieson染色和Mallory染色,观察骨关节组织的形态学变化,并对几种染色方法进行比较。结果 HE染色显示关节一般组织形态结构,可见模型组关节软骨和软骨下骨发生骨性关节炎病理变化;番红-固绿染色法中软骨和软骨下骨的界限（黏合线）以及潮线显示清晰,软骨基质中糖胺聚糖含量减少,纤维成分增多;AB-PAS染色显示骨关节炎软骨基质糖胺聚糖尤其是酸性糖胺聚糖含量减少;甲苯胺蓝染色显示骨关节炎软骨的酸性糖胺聚糖减少;Van Gieson染色和Mallory染色可显示骨关节组织中的胶原纤维,但组织结构界限不够清晰。结论在骨性关节炎的组织形态学研究中,通过常规HE染色,结合番红-固绿染色法和AB-PAS染色法,能较客观全面地获得关节组织形态学相关信息。     

变应性鼻炎鼻黏膜组织重塑的研究及转化生长因子β1 在鼻黏膜中 的表达*

目的:探讨变应性鼻炎(allergic rhinitis AR)鼻黏膜组织是否存在重塑并检测与组织重塑密切相关的转化生长因子β1(TGF-β1)在AR患者鼻黏膜组织中的表达及意义。方法:取健康自愿者、轻度间歇性AR患者、重度持续性AR患者的中鼻甲黏膜组织各10例。苏木素伊红(HE)染色法观察嗜酸细胞浸润并测定上皮损伤情况;阿辛蓝-过碘酸-希夫(AB-PAS)染色法计数杯状细胞数;三色胶原(MT)染色测定细胞外基质沉积面积百分比。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定组织中TGF-β1的表达。结果:①对照组无明显嗜酸细胞浸润,两鼻炎组较多嗜酸细胞浸润(P<0.01),②轻度AR组中仅上皮细胞损伤1级比对照组明显(P<0.01),重度AR组上皮损伤1、2、3级均比对照组明显(P<0.01),③两鼻炎组杯状细胞数明显多于对照组(P值均<0.01),④与对照组相比,轻度AR组胶原沉积面积增多,但无统计学意义(P>0.05),重度AR组明显增多(P<0.01),⑤TGF-β1在两鼻炎组黏膜中的表达均比对照组显著增高(P<0.01);重度AR组TGF-β1的表达均比轻度AR组增高,具有统计学意义(P<0.05)。结论:AR的鼻黏膜组织发生了重塑,表现为:上皮细胞损伤,杯状细胞化生,细胞外基质沉积,重度AR患者的鼻黏膜重塑更强,更广泛。TGF-β1积极参与了AR鼻黏膜组织的重塑过程。