氨基酸的毛细管电泳检测研究新进展

氨基酸是生命有机体的重要组成部分,参与人体各项生理活动和新陈代谢,在人体中发挥着特殊的作用,是人体必不可少的营养成分之一。近年来,生命科学的研究与食品、药品和保健品的开发,以及麻醉药品、精神药品对兴奋性神经递质的影响的研究,促进了对存在于各种检验材料中的氨基酸的分析方法的研究,探索高灵敏度和高选择性的氨基酸分析检测方法引起了人们极大的兴趣,所以建立快速、准确的氨基酸的检测方法越来越重要。毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)是继高效液相色谱之后发展起来的一种新的分离和分析方法,具有分离效率高、分析速度快、样品及试剂用量少等特点,本文参考近几年的相关文献,对氨基酸进行毛细管电泳检测使用紫外检测器、荧光检测器、电化学检测器和质谱检测器的方法作一综述。     

高效毛细管电泳在蛋白质分析上的应用

高效毛细管电泳（ＨＰＣＥ）是继高效液相色谱技术之后的又一新型分析及分离技术。本文应用高效毛细管电泳技术对基因工程干扰素、疫苗、动物脏器提取物等蛋白质产品进行了分离分析和纯度鉴定,并与凝胶电泳的分析结果进行对比。实验结果表明,ＨＰＣＥ可以用于生物产品分离、生物遗传研究和医学临床等领域的蛋白质定量分析、组分测定和纯度鉴定,是一种很有应用前途的新技术。     

高效毛细管电泳法测定甘草中甘草酸的含量

采用高效毛细管电泳法成功地分离测定了甘草中甘草酸的含量, 在pH=5.8 的50mmol/L 磷酸缓冲液, 检测波长252nm, 分离电压25KV, 进样压力20 mm 汞柱, 温度30℃的检测条件下, 标准溶液在0.0448mg/ml~0.224mg/ml 范围内与峰面积成良好的线性关系, 回归方程为:Y=4.16×10⁶x-8.94×10⁴, 相关系数r=0.9939, 具有较高的灵敏度和准确度。该法操作简便、迅速、可靠、测试费用低。     

毛细管电泳在氨基酸分析检测中的应用进展

对毛细管电泳技术的主要原理及其在氨基酸分析检测中的应用作了综述     

用毛细管电泳在飞克分子水平分析PTH-氨基酸

毛细管电泳近年来的发展颇受各方面的重视,除在多肽和蛋白质化学,临床检测等方面广泛应用外,最近资料显示,它在核酸结构分析方面也有很广阔的前景。基于它的分离机理和HPLC不同,因此将是和HPLC同样重要的     

高效毛细管电泳在DNA序列分析中的应用

高效毛细管电泳在ＤＮＡ序列分析中的应用种康（兰州大学化学系,兰州７３００００）ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＯＦＨＩＧＨ－ＰＥＲＦＯＲＭＡＮＣＥＣＡＰＩＬＬＡＲＹＥＬＥＣＴＣＴＯＲＨＯＲＥＳＩＳＯＮＤＮＡＳＥＱＵＥＮＣＩＮＧ￥ＣｈｏｎｇＫａｎｇ（Ｄｅｐａｒｔ...     

高效毛细管电泳在蛋白质分析上的应用

高效毛细管电泳（ＨＰＣＥ）是继高效液相色谱技术之后的又一新型分析及分离技术,本文应用高效毛细管电泳技术对基因工程干扰素、疫苗、动物脏器提取物等蛋白质产品进行了分离分析和纯度鉴定,并与凝胶电泳的分析结果进行对比。实验结果表明,ＨＰＣＥ可以用于生物产品分离、生物遗传研究和医学临床等领域的蛋白质定量分析、组分测定和纯度鉴定,是一种很有应用前途的新技术。     

高效毛细管电泳地测定高山红景天中红景天甙含量的比较研究

采用高效毛细管电泳法对采集于两个野生产地不同居群和两个人工栽培地的高山红景天中红景天甙的含量进行了对比研究,实验结果表明,该方法高效,简便,灵敏,可靠;人工栽培高山红景天和自然生境下高山红景天中红景天甙含量有差异,不同天然居群高山红景天中红景天甙含量也有差异。     

连钱草药材的高效毛细管电泳指纹图谱研究

建立了不同产地连钱草药材的高效毛细管电泳(HPCE)指纹图谱,并进行了比较。连钱草药材采用体积分数75%乙醇蒸馏提取;采用毛细管区带电泳法制定指纹图谱,电泳条件如下:未涂层融熔石英毛细管50μm I.D.×375μm O.D.(总长62 cm,有效长度53.5 cm),电泳缓冲液为含体积分数15%乙腈的50 mmol.L-1硼酸缓冲液(pH9.2),检测波长278 nm,操作电压25 kV,柱温25℃;以对乙酰氨基酚为参照物,建立了连钱草药材的数据化指纹图谱(相对迁移时间和相对峰面积)。结果表明:5种连钱草药材(4个产地和对照药材)具有16个共有指纹峰,不同产地连钱草药材指纹图谱的峰重叠率都低于60.3%,共有峰相对峰面积及8强峰均差异较大;连钱草药材的主要化学成分种类和质量分数均因产地不同而有差异;HPCE指纹图谱法具有较好的稳定性、精密度和重现性,简便,快速,可作为连钱草药材的质量控制方法。     

高效毛细管电泳法测定高山红景天中红景天甙含量的比较研究

采用高效毛细管电泳法对采集于两个野生产地不同居群和两个人工栽培地的高山红景天中红景天甙的含量进行了对比研究,实验结果表明,该方法高效、简便、灵敏、可靠;人工栽培高山红景天和自然生境下高山红景天中红景天甙含量有差异,不同天然居群高山红景天中红景天甙含量也有差异。     

用高效液相色谱定量分析分支链氨基酸

目的：周2,4-二硝基氟苯（DNFB）对分支链氨基酸衍生后,采用优化的高效液相色谱（HPLC）对其进行定量分析。方法：色谱柱为AgilentZORBAXEclipsAAA（4．6mm×150mm,5-Micron）,流动相为乙酸盐缓冲液（pH6．4）-乙腈,流速1．0mL／min,检测波长360nm。结果：用HPLC法测定分支链氨基酸的浓度为20-200mg／L时线性关系良好,3种分支链氨基酸的R。均在0．9997以上,平均回收率高,RSD≤0．56％（n=6）。结论：此方法快速、准确、重现性好,适合于对发酵液中分支链氨基酸的定量分析。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定绞股蓝茶叶中17种游离氨基酸含量

建立2,4-二硝基氟苯柱前衍生化-反相高效液相色谱法测定绞股蓝茶叶中17种游离氨基酸的含量。以Phenomenex Gemini NX C18(4.6mm×250mm,5μm)为分析柱,采用梯度洗脱,流动相A为0.05mol·L-1乙酸钠(pH=6.4,含0.1%N,N-二甲基甲酰胺),流动相B为乙腈-水(1∶1,v/v),检测波长为360nm,柱温35℃;经方法学考察,该方法具有良好的稳定性和重现性。测定结果表明,绞股蓝茶叶中17种游离氨基酸总量为39.79mg·g-1,其中人体必需氨基酸占游离氨基酸总量的36.57%。从氨基酸含量考虑,绞股蓝茶叶具备一定的开发利用价值。     

当归静脉注射液中氨基酸的含量测定

应用外标法测定当归静脉注射液中游离氨基酸和总氨基酸的含量。当归静脉注射液中含有15种氨基酸,其中游离氨基酸最高的是精氨酸,游离氨基酸最低的是甘氨酸。总氨基酸最高的是谷氨酸,总氨基酸最低的是赖氨酸。当归静脉注射液中氨基酸种类丰富,特定氨基酸如精氨酸、谷氨酸含量较高,是其临床特定一些疗效的基础之一。     

反相高效液相色谱法测定烟叶中的游离氨基酸

用不同浓度的乙醇溶液提取烟样中的游离氨基酸 ,结果显示 ,存在最佳的乙醇溶液浓度 ,使烟样中被提取的游离氨基酸总量最大 ;对比了活性炭、乙醚、5 %磺基水杨酸、阳离子交换柱的纯化效果 ,发现阳离子交换柱的纯化效果较其它三种试剂要好。在提取和纯化之后 ,采用OPA、FMOC联合在线衍生反相高效液相色谱法测定了烟样中的游离氨基酸 ,该方法使烟样中的氨基酸和亚氨基酸能被同时测定 ,并且分析方法的重现性和回收率均令人满意。最后用该方法对云南B2 F98(上部、橘黄、二等烟叶 ,98年产 )烟叶中的游离氨基酸进行了测定 ,有 15种氨基酸被测出 ,其中Pro含量最高 ,约占总量的 2 5 % ,Thr含量最低 ,约占总量的 1%。     

Xterra RP18柱高效液相色谱法快速分离测定氨基酸

建立了一种用XterraRP1 8色谱柱快速分离测定水解氨基酸的方法。所采用的色谱条件是 :WatersAlliance系统 ,柱温 5 6℃ ,流速 1 .8ml/min ,检测波长 2 4 8nm ,梯度分离 ,运行周期 2 5min,柱反压低于 2 0 0 0Psi。在 1 7.5min内分离了包括AMQ、NH3 和牛磺酸在内的 2 1种氨基化合物 ,适应于复合氨基酸注射液、含牛磺酸的氨基酸口服液及水解氨基酸样品的分析测定     

Inhibitory Activities of Aromatic Amino Acid Esters and Peptides against Ovalbumin Permeation through Caco-2 Cell Monolayers

Trp, Phe, and Tyr ethyl esters and their dipeptides with Gly at the C-terminals inhibited ovalbumin (OVA) permeation through Caco-2 monolayers. The inhibitory activity of Trp ethyl ester was the highest at near the concentration of 10^-6 M. It was suggested that Trp ethyl ester inhibited transcellular permeation of OVA.     

山东栽培瓜蒌氨基酸的含量测定

利用氨基酸自动分析仪对10个山东栽培瓜蒌样品中的水解氨基酸和游离氨基酸进行含量测定.结果发现山东栽培瓜萎中氨基酸的种类较为丰富,均含有19种相同的游离氨基酸和水解氨基酸;氨基酸含量在各个样品之间差异显著,从游离总氨基酸的含量考虑,糖瓜蒌略优于仁瓜萎,仁瓜蒌优于地瓜萎.     

葡萄色顶枝瑚菌中矿质元素及氨基酸含量的测定

采用原子吸收分光光度法和FDBN柱前衍生高效液相色谱等方法测定了葡萄色顶枝瑚菌中的矿质元素、氨基酸和蛋白质的含量。矿质元素K、Ca、Mg、Cu、Zn、Fe的含量分别是 :4 2 .5 0 0 0mg/g、0 .90 0 0mg/g、0 .4 1 3 0mg/g、0 .0 1 1 2mg/g、0 .0 64 3mg/g、0 .0 3 1 7mg/g、0 .0 73 7mg/g;蛋白质含量为 2 8.1 7% ;氨基酸总量为 2 2 6.91mg/g,其中七种必需氨基酸含量占氨基酸总量的 4 9.2 5 %     

松乳菇中氨基酸及其它营养素含量的测定

以秦巴山区野生松乳菇子实体为材料 ,分别对其菌盖和菌柄样品中氨基酸、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、总糖、灰分及微量元素的含量进行了测定。结果表明 :在所测定的 1 7种氨基酸中 ,菌盖含有 1 7种 ,菌柄含 1 6种 ,氨基酸总含量分别为 1 9.89%和 1 3 .79% ;必需氨基酸分别占氨基酸总量的 3 6.75 %和 3 5 .95 %。菌盖和菌柄中粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、总糖、灰分含量分别为 2 4 .2 7% ,1 9.0 3 % ;6.84 % ,5 .0 2 % ;1 1 .5 2 % ,1 5 .2 6% ;3 7.4 1 % ,2 3 .89%和 7.4 2 % ,5 .2 8%。钙、铁、锌、铜、锰 5种微量元素中 ,铁含量最高 ,在菌盖和菌柄样品中分别为 0 .1 68% ,0 .1 2 %     

测定荔枝核中的游离氨基酸

采用氨基酸自动分析仪测定荔枝核水提取液、醇提取液样品。在醇提取液中游离氨基酸的含量高于水提取液,在两种提取液中共检出了21种游离氨基酸(其中4种为未知氨基酸,6种必需氨基酸);已知游离氨基酸的质量分数为307μg.kg-1(醇提取液)和269μg.kg-1(水提取液),总游离氨基酸的质量分数为500μg.kg-1,必需氨基酸的量占总游离氨基酸量的44%。结论:荔枝核中的游离氨基酸具有利用价值。