魔芋葡甘露聚糖定量分析

用0.1M甲酸缓冲液(pH3.0-3.2)溶胀魔芋粉,在4000转/分离心分离提取魔芋葡甘露聚糖(KGM)溶液,通过比色测定以上溶液中的游离糖和用2N硫酸水解KGM提取液后的总糖,计算出KGM含量。此法不需要純化KGM,且重现性好,准确度高,因此本法简单、准确,很适用于不同等级魔芋粉中的KGM定量分析。     

黄杆菌(Flavobacterium sp.)几丁质酶的纯化和性质

黄杆菌(Flavobacteium sp.)在几丁质的诱导下产生几丁质酶.通过(NH_4)_2SO_4沉淀、DEAE纤维素柱层析、Sephacryl 300柱层析及Sephadex G-75柱层析,从Flavobacterium sp.培养上清液中分离纯化了几丁质酶.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)纯度分析表明,纯化后的几丁质酶达到了均一的程度.用SDS-PAGE测得该酶的分子量约45D00道尔顿.该酶水解几丁质的最适pH为 7.0,最适温度为50℃,-20C贮存两年以上仍有活性.水解几丁质的Km值为5.0mg/ml.金属离子对几丁质酶活性影响较大,Ca^(2+) 、Co^(2+)’和Cu^(2+)对酶有激活作用.而NH_4^-、Ba^(2+)、Mg^(2+)、Mn^(2+)对酶有抑制作用.几丁质酶水解几丁质的产物是几丁质二糖.     

多头绒泡菌中动蛋白的免疫化学鉴定

动蛋白(kinesin)是一种微管系统的运动蛋白(motor protein),它能通过水解ATP将化学能转化为机械能,推动微管产生运动.微管系统作为一种主要的细胞骨架存在于所有真核细胞中,它们对于维持细胞形态,细胞的分裂,染色体的运动及细胞内的物质运输起着重要作用.细胞质力蛋白(dynein)和动蛋白是公认的推动这类运动的运动蛋白.自从1985年Vole首次在鱿鱼大轴突(squidgiant axon)中发现动蛋白以来,人们先后在许多种动物细胞中发现有动蛋白存在,甚至在低等真核生物棘状变形虫,盘基网柄茵和高等植物烟草花粉管中发现有动蛋白的存在.研究结果表明,动蛋白参与了真核细胞中的许多重要生命活动,如细胞中的细胞器及囊泡的运动,染色体排裂和分离等运动.动蛋白很可能是普通存在于所有真核细胞中的一种运动蛋白.多头绒泡菌(Physarum poly-cephalum)属于粘菌纲(Myxomycetes)的一种低等真核生物,它表现出许多显著的细胞运动特征如原生质团迁移,细胞质的穿梭运动(shuttle streaming)等,是研究非肌细胞运动和收缩蛋白的经典材料.在多头绒泡菌胞质中也具有微管系统,它们构成其纺锤丝等,参与染色体的运动及其它胞质运动,但至今国内外尚无人证明其中有与微管作用的运动蛋白——动蛋白的存在,作者利用抗牛脑动蛋白的单克隆抗体,     

生理卫生的几个实验

实驗一:簡单电极制作一、目的:用于刺激动物的组织二、材料及装置: 1.两条较粗的普通漆包綫(或銀絲,电爐盘絲)。 2.一根玻璃管或毛笔管。 3.两条普通細电綫。装置: (一)普通电极: 使两条普通細电綫穿过玻璃管(长10厘米,直径1—2厘米),使露出短的一头做为刺激用。为了使电线在管內固定可以用胶泥堵塞管口或用胶布粘住。     

焦磷酸在植物细胞能量代谢中的作用(综述)

ADVANCESINRESEARCHONTHEROLESOFPYROPHOSPHATEINCELLULARENERGYMETABOLISMOFPLANTSWangYixing(DepartmentofBiology,JinanUniversity,Guangzhou510632)LiMingqi(DepartmentofAgriculturalBiology,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510642)焦磷酸（PPi）是一种高能化合物,其水解的G为-33．4kJmol,即PPi水解释放的自由能与ATP相似（ATP水解为ADP和Pi的G为-31．3kJmol）。但是对于焦磷酸代谢的传统观点是：细胞内焦磷酸水平很低,代谢中的焦磷酸,主要是在大分子如蛋白质、淀粉等生…     

黄杆菌(Flavobacterium sp.)几丁质酶的纯化和性质

黄杆菌(Flavobacteium sp.)在几丁质的诱导下产生几丁质酶.通过(NH_4)_2SO_4沉淀、DEAE纤维素柱层析、Sephacryl 300柱层析及Sephadex G-75柱层析,从Flavobacterium sp.培养上清液中分离纯化了几丁质酶.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)纯度分析表明,纯化后的几丁质酶达到了均一的程度.用SDS-PAGE测得该酶的分子量约45D00道尔顿.该酶水解几丁质的最适pH为 7.0,最适温度为50℃,-20C贮存两年以上仍有活性.水解几丁质的Km值为5.0mg/ml.金属离子对几丁质酶活性影响较大,Ca~(2+) 、Co~(2+)’和Cu~(2+)对酶有激活作用.而NH_4~-、Ba~(2+)、Mg~(2+)、Mn~(2+)对酶有抑制作用.几丁质酶水解几丁质的产物是几丁质二糖.     

木瓜蛋白酶水解柞蚕蛹蛋白试验

<正> 一、前言酶法水解蛋白质设备简便,工艺简单,只是水解不彻底,产物为水解蛋白,若采用食品允许的原料及酶制剂,则水解产物可直接应用于食品及医药工业。二、材料与方法(一)材料1.脱脂柞蚕蛹蛋白;取自本所综合利用后的蛹蛋白渣,经脱脂、粉碎备用。2.木瓜蛋白酶:     

Xterra RP18柱高效液相色谱法快速分离测定氨基酸

建立了一种用XterraRP1 8色谱柱快速分离测定水解氨基酸的方法。所采用的色谱条件是 :WatersAlliance系统 ,柱温 5 6℃ ,流速 1 .8ml/min ,检测波长 2 4 8nm ,梯度分离 ,运行周期 2 5min,柱反压低于 2 0 0 0Psi。在 1 7.5min内分离了包括AMQ、NH3 和牛磺酸在内的 2 1种氨基化合物 ,适应于复合氨基酸注射液、含牛磺酸的氨基酸口服液及水解氨基酸样品的分析测定     

综合利用薯芋淀粉生产肌苷的研究

本文报道综合利用野生薯芋属植物盾叶薯芋(Dioscorea zingibensisC.H.wright)和穿龙薯芋(Dioscorea nipponica Makino)中的淀粉生产肌苷(Inosine)的方法。将薯芋原料带水磨碎,在水中筛分得到皂甙淀粉浆,用稀酸水解该物质使淀粉糖化,分离后得到糖液和糖渣。糖液加氮源和无机盐,发酵生产肌苷。糖渣再水解提取薯芋皂甙元。     

徒手切片夹持物的制备

生物的细胞、组织,大都要切成透明的薄片,让光线透过,在显微镜下才能看清楚,徒手切片是中学常用的一种简易实用的切片方法,较硬的材料,如植物的根、茎、松树的针叶、动物的骨骼等可直接用刀切薄。但有很多细薄柔嫩、幼小的材料,如叶片、花瓣、各种组织等要用夹持物。材料可用: (1)植物茎的髓心,如接骨木、向日葵等。(2)地下茎、马铃薯、菊芋的块     

金铁锁的三萜化合物

金铁锁(Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu)为石竹科金铁锁属植物,该属仅此一种,特产于我国西南部,是云南民间重要药用植物,常用于止血止痛,活血祛瘀等。其根部富含皂甙,有镇痛、抗炎和抑菌等生理活性。我们将金铁锁根总皂甙用酸水解后分离到多种皂甙元成分,本文报告其中六个皂甙元的分离和结构鉴定,它们均为齐墩果烷型五环三萜化合物。     

牛黄培植试验

牛黄(Calculue Bovis)是一种珍贵药材,具有清热、解毒和镇惊等功效。它是牛胆囊、胆管或肝管中的结石。(如图)     

cPLA2与中枢神经系统损伤的研究进展

细胞内磷脂酶A2(cytosolic phospholipaseA2, cPLA2)是催化甘油磷酸脂二位酰基水解的一种酶,亦是花生四烯酸(AA)、前列腺素及血小板活化因子(PAF)等生物活性物质的生成限速酶.生理情况下,其参与细胞膜重塑、脂质过氧化的解毒、神经突起的生长、离子通道的调节,以及神经递质释放等过程.病理情况下,cPLA2参与多种中枢神经系统疾病的发生发展,如脑缺血、脊髓损伤、神经退行性疾病中cPLA2活性升高、表达增加,作用于磷脂分子产生AA和游离脂肪酸的释放增加,从而导致了一系列的病理生理变化.     

导管、木纤维离析方法的改进

利用铬酸 硝酸离析法解离植物木质化的组织 ,如导管、管胞、纤维和石细胞等是大学《植物学》课程中的一个重要实验。但因其须在 3 0～ 40℃的条件下保温 1～ 2d ,甚至更长时间 ,故只能让学生观察事先准备好的材料或永久装片 ,而不能让学生自己动手准备材料 ,影响学生对这一方法的掌握。我们对此实验做了改进 ,克服了需时长 ,离析难的问题 ,收到了非常好的实验效果。改进后的方法是 :1 )将材料切成直径为 0 .2～ 0 .5mm ,长约 0 .5cm的小段。2 )将切好的材料置小试管中 ,加入材料体积 1 0～ 2 0倍的铬酸 硝酸离析液 ,在酒精灯火焰上煮沸约 …     

羧肽酶Y标记蛋白质羧基端方法的优化及应用（英文）

蛋白质水解是一种重要的翻译后修饰,它在许多生化过程(如细胞凋亡和肿瘤细胞转移等)中起着极其重要的作用。鉴定蛋白质水解位点可以进一步加深我们对这些生化过程的认识。尽管蛋白质氨基端标记方法和蛋白质组学在复杂生物体系中鉴定获得了许多蛋白质的水解位点,但这种方法存在固有的缺陷。羧基端标记方法是另一种可行的鉴定蛋白质水解位点的方法。本文优化了蛋白质羧基端生物酶标记方法,提高了亲和标记效率,从而可以更好地利用正向分离方法对蛋白质羧基端多肽进行分离并用质谱鉴定。我们用优化后的羧基端标记方法来标记大肠杆菌Escherichia coli复杂蛋白样品后鉴定到了120多个蛋白质羧基端多肽和内切多肽。在其所鉴定的蛋白质水解位点中,我们发现了许多已知和未知的位点,这些新的水解位点有可能在正常生化过程的调控中发挥着重要的作用。该研究提供了一个可以与蛋白质氨基端组学互为补充、可在复杂体系中鉴定蛋白质水解的方法。     

羧肽酶Y标记蛋白质羧基端方法的优化及应用

蛋白质水解是一种重要的翻译后修饰,它在许多生化过程 (如细胞凋亡和肿瘤细胞转移等) 中起着极其重要的作用。鉴定蛋白质水解位点可以进一步加深我们对这些生化过程的认识。尽管蛋白质氨基端标记方法和蛋白质组学在复杂生物体系中鉴定获得了许多蛋白质的水解位点,但这种方法存在固有的缺陷。羧基端标记方法是另一种可行的鉴定蛋白质水解位点的方法。本文优化了蛋白质羧基端生物酶标记方法,提高了亲和标记效率,从而可以更好地利用正向分离方法对蛋白质羧基端多肽进行分离并用质谱鉴定。我们用优化后的羧基端标记方法来标记大肠杆菌Escherichia coli复杂蛋白样品后鉴定到了120多个蛋白质羧基端多肽和内切多肽。在其所鉴定的蛋白质水解位点中,我们发现了许多已知和未知的位点,这些新的水解位点有可能在正常生化过程的调控发挥着重要的作用。该研究提供了一个可以与蛋白质氨基端组学互为补充、可在复杂体系中鉴定蛋白质水解的方法。     

野生纤毛虫同工酶微量等电聚焦分析探索

微量电泳是用来分离和表征提取于少量生物材料中的核酸和蛋白质的分析技术。作者以缘毛目螅状独缩虫(Carchesium polypinum Linne,1758)为材料,用微量等电聚焦(Microisoelectric focussing)探索了分析野生纤毛虫同工酶的可行性。实验结果表明:(1) 样品量小至两个群体螅状独缩虫(约200个个体)即可进行酯酶同工酶微量等电聚焦分析;(2) 自野外采集材料中立即分离制备的螅状独缩虫匀浆上清液的酯酶同工酶酶谱与实验室内放置10h后分离制备的酶谱几乎一致。因此,野生纤毛虫同工酶可用微量等电聚焦进行分析。     

对日光氨酸生产技术交流会资料

<正> 日方工厂生产胱氨酸的详细工艺参数及操作过程一胱氨酸及氨基酸液工程图(调味液) 二各工序详细今数(一)水解1.配比:人发:盐酸二1; I.s c w/ir)(每料人发400ogg); HC16000L)2.水解缸:F.R.P或H.R I3mex23.工艺操作:先将人发直接投入水解缸内(投料时间约2小时)然后将所需盐酸经\"石墨交换器\"予热至60℃送至水解缸内,立即用吹入蒸汽方式(5Kg}/cm2)在40分钟内将缸内水解液温度上升至103 C,待液温稳定在I08℃---110℃,水解6小时,然后停止吹入蒸     

西洋参总皂苷酶水解产物成分研究

西洋参总皂苷经β-糖苷酶催化水解,采用HPLC检测分析确定西洋参总皂苷中的主要原人参二醇型皂苷Rb1、Rd、Rc和Rb2已经完全被水解。水解产物通过反复硅胶柱层析和反向硅胶柱层析分离纯化得到7个皂苷,通过NMR谱图分析分别鉴定为人参皂苷compound K(1)、人参皂苷Mc(2)、人参皂苷Rg1(3)、人参皂苷Rg2(4)、人参皂苷Re(5)、人参皂苷F1(6)和拟人参皂苷F11(7)。β-糖苷酶催化西洋参总皂苷水解实验表明,西洋参中原人参二醇型皂苷的水解产物是人参皂苷compound K和人参皂苷Mc。     

"观察植物细胞质壁分离和复原"的好材料

现行高中生物教材 (人教版 )实验二“观察植物细胞质壁分离和复原”所用材料是紫色洋葱。此材料效果虽好 ,但在许多地方都不容易及时买到。通过 3年的实践 ,我采用市售蔬菜——紫茎红油菜。通过比较有以下几方面的体会。1)茎表皮易于剥取 ,细胞呈长方形 ,单层且排列整齐。紫色越深的红油菜越便于观察。用镊子取 2～ 3mm大小即可。质壁分离和复原效果与紫色洋葱比较没有区别。2 )农村城市各地菜市场均能买到 ,材料广泛且价格成本比洋葱低得多。这样还启发学生灵活选取身边材料做科学实验。许多学生由此想到用其他有色植物(如紫鸭趾草茎 )表皮…