二阶导数光谱测定复合氨基酸注射液中的L-色氨酸和L-苯丙氨酸的含量

<正> 导数光谱法是解决光谱重叠和光谱干扰的新方法,操作简便。复合氨基酸注射液是含有11种氨基酸及甘露醇的一种复方制剂。用氨基酸分析仪测定时,未能测出L—色氨酸,而测出L—苯丙氨酸数值偏高,如果采用比色法测定L—包氨酸,操作繁复,准确度较差。由于11种氨基酸仅L—色氨酸和L—丙氨酸具有特征吸收光谱,     

氨基酸快速薄膜层析法

纤维素薄膜层析法是60年代发展起来的,用于分离和鉴定氨基酸,具有灵敏度高,分辨力强,操作简便等优点,比过去分析这类化合物使用的纸层析方法有了进一步的发展。我们采用微晶型纤维素粉,铺成的薄板应用于植物样品内氨基酸的分离和鉴定,性能良好,优点显著,在氨基酸的定性和定量分析工作上具有一定的成效。     

冷原子荧光法测定氨基酸中的痕量汞

本文报道冷原子荧光法测定由猪血制取的氨基酸中痕量的汞。操作简便、灵敏度高,选择性好。样品采用H_2SO_4—N_2O_2—HNO_3湿法消化。回收率达97.2%,检测为0.01ppb。     

一种灵敏实用的DNase Ⅰ定量测活方法

DNase I的测活方法有紫外吸收法、同位素法和荧光法等.紫外吸收法简便,但灵敏度较低.同位素法灵敏度高,但实验条件要求高,且操作复杂.荧光法灵敏度较高,也简便,但影响因素较多.我们建立了一种以固定化DNA为底物的微量紫外吸收法,它较简便,灵敏度也较高.材料与方法材料:DNase I (Seravac Laboratories出     

氨基酸酯化方法的比较及其红外光谱研究

在合成氨基酸酯锗类化合物时,制备了八种氨基酸酯,对文献提供的六种方法进行了实验比较,选出经济简便、产率高的方法。并对氨基酸及其酯的红外光谱的变化特征进行了研究。     

LC-MS/MS检测癫痫患者神经递质类氨基酸

目的：建立液相色谱串联质谱同位素内标法检测神经递质类氨基酸并用于癫痫患者临床评价。方法：选用AAA-C18柱色谱柱,以乙腈水（含有0.01%七氟丁酸、0.1%甲酸）为流动相,采用梯度洗脱进行分离,血浆样品用iTRAQ-115衍生化试剂处理后,加入iTRAQ-114衍生化的氨基酸内标并进样,选用3200QTRAP型质谱仪的多重反应监测（MRM）扫描方式进行检测。疾病组与健康组的统计采用t检验和主成份分析。结果：疾病组和健康组氨基酸测定结果显示：Trp、GABA两组间没有显著性差异（P〉0.05）,Arg、Gly、Ser、Tau、Asp、Glu、EtN、两组间有显著性差异（P〈0.05）,通过PCA分析显示,疾病组与健康组之间差异明显,Asp、Glu、Ser等是引起差异的主要氨基酸。结论：试验方法灵敏、专属性强,并初步的用于癫痫患者体内氨基酸评价。     

茶叶中茶氨酸及其它游离氨基酸的定量测定

本文报道了在日立835—50型氨基酸分析仪上,采用2.6×250mm 分离柱和标准分析用Na~+盐缓中液,自设120分钟分析程序,一次完成茶叶中茶氨酸及其它游离氨基酸的测定。该方法重现性好,分辨率高,茶氨酸(约占60%)并相邻氨基酸的分辨率均在95%以上,取得令人满意的分析结果。茶叶中游离氨基酸的构成和含量是决定茶叶品质优劣的重要因素之一,其中茶氨酸又是影响较大的重要非蛋白氨基酸。随着氨基酸分析仪的广泛使用,有关分析方法也在不断改进和发展。一般来说,植物中的游离氨基酸需采用生体液分析法进行测定,但生体分析时间长达240分钟,Li~+盐缓冲液价格昂贵,操作条件也较复杂,且不易与标准分析法简便地转换,使应用受到一定限制。若采用2.6×150mm 分离柱来分析,则由于茶氨酸的保留时间与较难分离的酸性氨基酸的保留时间十分接近,含量又高。对其出峰附近的其它氨基酸峰复盖严重。分离困难,不易达到理想的分离效果。为了既便分析操作,降低费用,又能满足定量分析的要求,我们对本文所述的方法进行了初步研究。现扼要介绍如下。     

LC-MS/MS 检测癫痫患者神经递质类氨基酸

目的:建立液相色谱串联质谱同位素内标法检测神经递质类氨基酸并用于癫痫患者临床评价.方法:选用AAA-C18柱色谱柱,以乙腈水(含有0.01%七氟丁酸、0.1%甲酸)为流动相,采用梯度洗脱进行分离,血浆样品用iTRAQ-115衍生化试剂处理后,加入iTRAQ-114衍生化的氨基酸内标并进样,选用3200QTRAP型质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测.疾病组与健康组的统计采用t检验和主成份分析.结果:疾病组和健康组氨基酸测定结果显示:Trp、GABA两组间没有显著性差异(P＞0.05),Arg、Glv、Ser、Tau、Asp、Glu、EtN、两组间有显著性差异(P＜0.05),通过PCA分析显示,疾病组与健康组之间差异明显,Asp、Glu、Ser等是引起差异的主要氨基酸.结论:试验方法灵敏、专属性强,并初步的用于癫痫患者体内氨基酸评价.     

氨基酸纸层析中茚三酮显色改良法

本文报道氨基酸纸层析中茚三酮显色与展层同时进行的改良方法,此方法克服了以前操作上的烦琐和斑点模糊等不足点。自1944年Consdon、Gordon和Mortain提出用滤纸来分离氨基酸、糖、肽类等物质以来,在国内外均用茚三酮喷雾法和浸湿法来显色,作为定性、定量的检测方法之一。目前国内在氨基酸研制和生产方面大多数还是采用纸层析法、而层析法中其重要的环节是显色,显色主要采用茚三酮喷雾和浸湿二法,此法不易掌握,我们根据目前生产上和氨基酸研制工作上急需解决的问题,提出了一个改良的显色法,即展层和显色同时进行,达到了较满意的效果。     

虫草多糖含量测定方法的研究

目的:选择一种适合于北虫草提取物中多糖含量的测定方法。方法:采用水杨酸法和苯酚-硫酸法测定虫草多糖的含量,比较两种方法的优缺点。结果:两种方法精密度上均符合要求,但在样品处理时间、稳定性、回收率等方面水杨酸法优于苯酚-硫酸法。结论:水杨酸法操作简便、稳定、回收率高、重现性好,更适用于虫草多糖的质量控制。     

磷脂脂肪酸分析中内标物的使用及数据处理建模

【目的】评估未知样品内标进样量的参考范围,优化数据处理方法。【方法】采用C19为内标,不同进样量进行分析;编写数据分析程序优化数据处理模型。【结果】随着内标进样量的增加,检测到的PLFA数量和响应值等指标均有增加,但进样量超过16 nmol/g时反而下降;25组数据显示采用响应值计算PLFA含量比百分比值计算所得含量略高;采用Dot Net C#语言编写数据分析模型。【结论】初步确定了未知样品内标进样量的参考范围,得出最优处理方法;采用响应值计算PLFA含量可避免由于百分比值缺失带来的误差;校准系数的引入可减少仪器参数条件改变等因素带来的误差;通过编写谱图数据分析程序获得一定自动化操作,提高了数据分析效率和准确性。     

简便实用的琼脂糖凝胶回收DNA片段方法

介绍一种简便实用的DNA片段回收方法,与以前所报道的DEAE-纤维素膜电泳法、透析袋电洗脱法、低融点琼脂糖凝胶法、凝胶冻融法等相比,所需器材简单、操作简便、回收率高、成本低。回收的DNA片段在进一步克隆和测序中表现出较好的效果,是一种适合于科研和教学的实验方法。     

鸭毛梗制备复合氨基酸工艺条件的研究

采用正交试验方法 ,研究了鸭毛梗水解制备复合氨基酸的工艺条件 ,结果表明 :温度 /压力是影响氨基酸转化率最主要的因素。鸭毛梗水解制备的复合氨基酸转化率盐酸法最高 (82 .36 % ) ,氢氧化钠法最低 (5 8.4 6 % ) ,硫酸法与盐酸法接近(79.4 4 % )。硫酸法产率较高 ,操作方便 ,环境污染和设备腐蚀均小 ,适合大量生产 ,确定为水解制备复合氨基酸介质 ,其最佳工艺条件为 :水解时间 8.0h ,硫酸浓度 3.0mol·L-1,水解温度 12 5℃。氨基酸分析表明 ,水解液中均含有 18种以上氨基酸。     

用DANS反应-聚酰胺薄膜层析-荧光扫描法测定大白鼠脑中氨基酸

本文介绍采用改进的DANS反应一聚酰胺簿膜层析一荧光扫描方法,分离了22种氨基酸,并对大鼠脑中六种氨基酸进行了超微量测定,此法简便、灵敏。     

木瓜中齐墩果酸的提取分离及含量测定

有渗漉法对木瓜中的齐墩果酸进行了提取,用层析柱法对提取物进行分离,方法较简便。并以标准品作对照,采用薄层比色法对其进行含量测定,该法操作简便,结果稳定。经测定木瓜中的游离齐墩果酸的含量为0．935％。     

蝮蛇肌肉中次黄嘌呤的鉴定与含量测定

目的建立一种高效液相色谱法测定蝮蛇肌肉中次黄嘌呤的新方法。方法采用Venusil MP-C18柱分离和LC—MS技术联用鉴定蝮蛇肌肉中存在次黄嘌呤,并测定蝮蛇肌肉中次黄嘌呤的含量。姑果该法适合于蝮蛇肌肉中次黄嘌呤含量的测定。操作简便,样品稳定。结论该法操作简便,结果准确可靠,为蝮蛇药材的质量控制提供了有效的方法。     

微量板细胞病变法滴定水痘疫苗的研究

建立了用微量板细胞病变法滴定水痘疫苗的实验方法。将适宜稀释度的病毒与2BS细胞混种于96孔板培养,种毒后第7天观察孔内细胞病变情况,以karber法计算疫苗滴度,并与蚀斑法进行比较。实验表明,微量板细胞病变法滴定水痘疫苗,结果稳定性好,精密度高,较现行的蚀斑法操作简便、误差小,能够较好的反映出水痘的真实滴度,可作为一种较为简便的滴定水痘疫苗的方法。     

氨基酸纤维素小板层析

<正> 我们采用微晶型纤维素粉铺制薄板(12×12cm~2),对20种氨基酸混合样品、蛋白水解样品及血浆游离氨基酸进行分离和鉴定。实验结果表明,此法灵敏度高、分辨力强、分析时间短以及操作程序简便,与大     

异硫氢酸苯酯法(PITC)分析氨基酸

<正> 自从1958年Moore等人建立氨基酸测定方法以来,氨基酸分析方法发展迅速,日新月异。除采用阳离子交换柱,茚三酮柱后反应测定氨基酸方法外,70年代起,各种采用柱前衍生,反相色谱法分离测定氨基酸方法相继问世,为氨基酸分析开辟了新的领域。异硫氢酸苯酯(PITC)法作为其中一种,以其灵敏度高(可检测,1Pmal),分析速度快(水解液为10分钟,生理体液40～60分     

高效液相色谱法对农业样品中氨基酸含量的测定

介绍了采用一种新型的国产氨基酸色谱柱ＹＷＧＡ—Ａ柱,对与农业有关的多种样品进行氨基酸测定的方法。这种色谱柱可使全部氨基酸得到完全的分离,且柱效高,柱压低,价格便宜。农业样品的品种多,比较复杂,文中还对不同样品的前处理做了简要叙述。氨基酸的分析方法采用的是柱前衍生ＯＰＡ法,还对此方法测定中的一些问题进行了讨论。