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相似文献
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1.
叶绿体H^+-ATPase(CF0-CF1复合体)是光合磷酸化系统能量转换的关键装置。本工作报告,从菠菜提取、纯化了这种复合体,并成功地将其重装于平板磷脂双层膜。在电压钳位下,观察到,随着CF0-CF1复合体的参入,出现跨膜通道样活动电导变化,这种变化可被Dicyclohexl-carbodiimide(DCCD)所抑制;参入了CF0-CF1复合体的脂双层的稳态膜电导随膜两侧H^+浓度梯度的提高而  相似文献   

2.
DTT(二流苏糖醇)可解除TPT(氯化三苯锡)对叶绿体光合磷酸化的抑制、减弱TPT对类囊体跨膜△pH的抑制和对类囊体腔内质子外流的促进。由于TPT较专一作用于CF0,推测CF0受DTT修饰。这从DTT可消除TPT对去除CF1的类囊体残缺膜△pH的重建和对残缺膜光下收缩的促进得到进一步的证明。DTT的作用是还原二硫键成为游离的巯基,因而CF0可能含有二硫键。从光下DTT或暗中DTT处理残缺膜对TPT作用的影响,可以看到DTT对CF0的修饰是需光的,类囊体膜在光下发生的构象变化,使CF0的二硫键暴露而被DTT修饰。CF0的二硫键较CF1γ的二硫键更快、更敏感地被DTT所修饰。  相似文献   

3.
用专一性标记蛋白质巯基(-SH)的荧光探剂acrylodan测定含Mg2+的F0-ATP酶或F0-OSCP-F1-ATP酶的脂酶体的构象与无Mg2+者明显不同,前者的蛋白质的-SH基团处于疏水性更强的微环境中;在有Mg2+和OSCP同时存在下重建的F0-F1-ATP酶脂酶体较无OSCP者表现更高的水解活力或膜电位,表明OSCP增强Mg2+的促进作用,这进一步提示Mg2+通过改变膜脂的物理状态促进线粒体H+-ATP酶重建的间接作用。这些实验结果,从线粒体H+-ATP酶复合体的亚基水平的相关性上,对于我们提出的Mg2+通过改变膜脂的物理状态使之具有合适的流动性,诱导嵌入脂双层的H+-ATP酶复合体的F0的构象发生变化并传递至复合体的催化中心F1,从而使重建F1-F0-ATP酶具有较适合的蛋白构象,表现较高的重建酶活性的假设提供了直接的实验证据,精确地阐明了Mg2+促进线粒体F0-F1-ATP酶重建作用的分子机理。  相似文献   

4.
利用H+-ATP酶复合体(也称ATP合成酶)中的Fo的色氨酸荧光,观察了复合体中F1结合ATP或ADP(酶蛋白与底物分子比为1:1)时,Fo的荧光猝灭常数的变化(用竹红菌乙作为膜区蛋白荧光的猝灭剂)结果表明F1结合ATP或ADP时Fo可得到不同的猝灭常数(Ksv),也就是Fo会产生不同的构象变化。加入二价金属离子起动ATP水解反应结束后:ATP+H2O→ADP+Pi,这时可以在Fo观察到与ADP加Mg2+时相同猝灭常数Ksv;用荧光强度随时间进程变化的实验可观察到F1水解过程中导致Fo构象变化的动力学过程。这些结果说明了H+-ATP酶复合体ATP合成的过程中F1与Fo之间存在着构象之间的通信与传递。  相似文献   

5.
在建立大鼠肾小球系膜细胞(MC)体外培养方法的基础上,通过3H-TdR参入实验,RNA印迹分析和斑点杂交观察bFGF对MCDNA合成及原癌基因c-fos和c-myc表达的影响.结果表明,bFGF作用于MC18h,MC的3H-TdR参入率明显增加(P<0.05),24h达到高峰(P<0.01);bFGF显著诱导原癌基因c-fos和c-myc表达,其表达活性分别于30min和1h达到高峰.提示bFGF是MC的强效丝裂原,其对MCDNA合成的促进作用与诱导原癌基因c-fos和c-myc表达有关.  相似文献   

6.
Na2SO3对热-DTT活化的游离CF1及类囊体膜上CF1-ATPase活力均有显著的促进作用,NaHCO3亦有明显的促进作用。Na2SO3和NaHCO3的促进作用与它们解除Mg2+的抑制作用有关。从NaHCO3和Na2SO3及它们与Mg2+之间的竞争性关系,表明三者是结合在酶的同一部位上。Na2SO3可明显降低热-DTT活化的游禹CF1-ATPase催化反应的活化能,这可能与促进产物ADP的释放有关。  相似文献   

7.
采用3H-TdR参入法,测定碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、胰岛素和内皮素-1(ET-1)对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖的影响,以及胰岛素与bFGF或ET-1促MC增殖的协同作用。结果表明,不同浓度的bFGF(5-200ng/ml)和胰岛素(0.1-2.4U/ml)均显著升高MC的3H-TdR参入值(cpm值)(P<0.01)。ET-1对MC的cpm值的影响依剂量不同呈现两种不同的效应,在10-9-10-7mol/L时,随着浓度的升高,MC的cpm值明显升高(P<0.01),并以10-8mol/L作用最强;当升高到10-6mol/L时,MC的cpm值出现降低趋势。胰岛素与bFGF或低浓度ET-1(≤10-8mol/L)共同作用于MC时,MC的cpm值明显高于二者单独作用之和(P<0.01),与高浓度ET-1(>10-7mol/L)共同作用于MC时,MC的cpm值小于二者单独作用之和(P>0.05)。上述结果说明,胰岛素、bFGF和ET-1均能显著促进MC增殖;胰岛素与bFGF或低浓度的ET-1促MC增殖具有正协同作用,与高浓度ET-1呈现负协同作用。  相似文献   

8.
用专一性标记蛋白质巯基的荧光探剂acrylodan测定含Mg^2+的F0-ATP酶或F0-OSCP-F1-ATP酶的脂酶体的构象与无Mg^2+者明显不同,前者的蛋白质的-SH基团处于疏水性更强的微环境中;在有Mg^2+和OSCP同时存在下重建的F0-F1-ATP酶脂酶体较无OSCP者表现更高的水解活力或膜电位,表明OSCP增强Mg^2+的促进作用,这进一步提示Mg^2+通过改变膜脂的物理状态促进线  相似文献   

9.
20条正常麻醉犬经股动脉插管和枕骨下经皮穿刺在严格隔绝空气情况下,分别取得动脉血和脑脊液(CSF)样本,用IL-1303型血气分析仪和Beckman-700型生化分析仪检测酸碱变量及电解质。通过酶反应分光光度法检测乳酸(Lact)。应用(Na++K+)-(Cl-+Lact+HCO3-)公式计算阴离子隙(AG)。经统计学处理结果表明CSFPH、K+、AG<动脉血(p<0.01);CSFPCO2、HCO3-、Cl-、Lact>动脉血(p<0.01);CSFNa+同动脉血比较无明显差异(p>0.05)。  相似文献   

10.
利用H^+-ATP酶复合中的Fo的色氨酸荧光,观察了复合体中F1结合ATP或ADP时,Fo的荧光猝灭常数的变化结果表明F1结合ATP或ADP时Fo可得到不同的猝来常数,也就是Fo会产生不同的构象变化。这些结果说明了H^+ATP酶合ATP合成的过程中F1与Fo之间存在着构象之间的通信与传递。  相似文献   

11.
在应用双歧杆菌活菌制剂治疗慢乙肝期间,重点观察了T细胞亚群(CD3,CD4,CD8)、NK细胞(CD(16))、白细胞介素Ⅱ(IL-2)分泌细胞、肿瘤坏死因子(TNF)等细胞免疫指标治疗前后的动态变化,同时观察了病人血内毒素水平的动态变化和乙肝病毒标志物(HBVM)的改变。结果表明:(1)与对照组比较,双歧杆菌活菌制剂可使慢乙肝病人CD3+,CD4+数目明显增多,而对CD8+细胞数目无明显影响;(2)双歧杆菌活菌制剂可使CAH组的CD16+细胞显著增多(p<0.05);使CAH组和CPH组的IL-2分泌细胞均有非常显著和显著增加(分别p<0.01和p<0.05);(3)CAH组病人血中内毒素和TNF水平在双歧杆菌活菌制剂治疗后,匀出现非常显著降低(p<0.01);CPH组TNF水平较对照组无显著变化,但内毒素水平较对照组显著降低(p<0.05);(4)满疗程后(60天)CAH组有6例,CPH组有5例HBeAg阴转(分别为26.06%和25.0%),而对照组仅2例阴转(13.33%),两治疗组与对照组比较有显著性差异(p<0.05)。  相似文献   

12.
通过培养的人主动脉平滑肌细胞(hASMC)及脐静脉内皮细胞(hUVEC),应用3H-TdR参入、Northernblot分析、逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、放射免疫分析(RIA)、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)对hASMC和hUVECDNA合成的作用及对血小板源生长因子(PDGF)、PDGF受体、转化生长因子β(TGF-β)、内皮素-1(ET-1)或碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达和肾素-血管紧张系统(RAS)的影响,结果显示,HSPG明显抑制培养的hASMC基础的DNA合成(cpm值为:10385±3263vs,25541±6421,P<0.01)及外源性PDGF诱导的DNA合成(cpm值为:9878±1947vs.13481±44l0,P<0.05);抑制PDGFA链、TGF-Bp和ET-1mRNA表达,提高PDGFa和β受体mRNA的表达;显著降低hASMC培养液中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的浓度和血管紧张素转换酶(ACE)的活性,推测HSPG抑制PDGFA链、TGF-β及ET-1mRNA表达,降低ACE活性及AngⅡ浓度是其抑制hASMC增殖的重要机  相似文献   

13.
Na2SO3对CF1-ATPase活力的促进作用与酶所处状态有关。CF0降低CF1对Na2SO3的亲和力和Na2SO3促进的最大反应速率。在Na2SO3作用下,膜上CF1-ATPase的活化能高于游离的。膜上和游离CF1-ATPase的γ亚基上二硫键的还原可以提高Na2SO3对酶活力的促进作用。Na2SO3对甲醇活化的CF1-ATPase活力的促进作用只有在甲醇活化的亚适浓度下才能充分表现出来。Na2SO3对Mg2+抑制的解除作用因CF1-ATPase处于不同活化状态而不同。  相似文献   

14.
研究了大豆液泡膜H+-ATPase泵质子特性。液泡膜H+-ATPase泵质子活性受NEM、NBD-Cl、DCCD和NO3-的抑制。泵质子活性由二价阳离子启动,其有效性依次为Fe2+>Mg2+>Mn2+,它以ATP为最适底物,ADP为竞争性抑制剂;最适pH为7.0,最适温度为50°C。  相似文献   

15.
本文发现线粒体H^+-ATPase复合体先用0.5ug/ml的DCCD(二环已基碳二亚胺预保温处理,再经12.5%(V/V)乙醇进一步保温处理,则乙醇可完全消除DCCD引起的H^+-ATPase的抑制效应。若H^+-ATPase用DCCD和乙醇同时预保温处理,则DCCD同样消失其抑制作用。用相同浓度的甲醇代替乙醇,则仅可部分的消除DCCD的抑制作用。用相同浓度的DMSO(二甲基亚砜)代替乙醇,则不  相似文献   

16.
通过RT-PCR方法把葡萄扇叶病毒(GFLV)外壳蛋白基因(CP gene)分成两部分扩增,扩增产物克隆入pgEM-5Zf(+)载体,并通过BglⅡ位点连接成一完整的外壳蛋白基因,通过序列分析测得全长外壳蛋白基因为1512bp,编码504个AA's与国外株系GFLV-F13相比,核苷酸同源性为88.4%,氨基酸同源性为95.8%。并且这一外壳蛋白基因在大肠杆菌E. coliDH-5α中得到了表达。  相似文献   

17.
蔡惠罗  李成勇 《动物学报》1995,41(3):299-304
位于突触体质膜的外向型(ecto)Mg^2-ATP酶具有水解ATP活性,能量偶联的AC-MA荧光淬灭实验表明Mg^2+-ATP酶水解ATP时向膜内转移质子,建立跨膜质子梯度,跨膜质子梯度可以被电中性K^+/H^+离子载体Nigericin消除,利用H^+敏感的BCECF荧光分子测定突触的pHi变化,结果表明水解ATP产生的质子转移突触体pHi下降了光分子测定突触的pHi变化,结果表示水解ATP产生  相似文献   

18.
本研究用定性和定量酶组织化学方法研究了经导管射频消融(Radiofrequency catheter ablation,RFCA)对豚鼠心室肌细胞乳酸脱氢酶(LDH),琥珀酸脱氢酶(SDH),细胞色素氧化酶(CCO)和Ca(++)-ATP酶(Ca(++)-ATPase)的影响,并与其引起的病理组织学改变相比较。所用射频(500kHz)能量为20W×10s。结果:在该能量水平下,RFCA对上述四种酶均能造成明显损伤,但其损伤范围之间无统计学差异。RFCA引起的病理组织学损伤范围与其引起的酶学损伤范围之间亦无统计学差异。提示RFCA引起的酶学损伤与其引起的组织学损伤具有一致性。  相似文献   

19.
神经节苷脂GM3诱导人单核样白血病J6-2细胞沿单核/巨噬细胞途径分化.在GM3诱导分化同时,J6-2细胞磷脂代谢发生了显著变化.采用((32)P)Pi、[GH3-3H]胆碱和[CH3-3H]SAM参入实验对GM3影响J6-2细胞PC代谢的机制进行了初步的探讨.GM3促进[(32)P]Pi参入J6-2细胞PC;抑制[CH3-3H]胆碱参入PC及PC合成的前体磷酸胆碱及CDP-胆碱;GM3促进[CH3-3H]SAM参入PC,但抑制[CH3-3H]SAM参入PC合成的前体胆碱、磷酸胆碱和CDP-胆碱.上述结果提示,GM3抑制J6-2细胞PC合成的CDP-胆碱途径,促进PC合成的PE甲基化途径.  相似文献   

20.
渗透胁迫下稻苗中铁催化的膜脂过氧化作   总被引:25,自引:1,他引:25  
在-0.7MPa渗透胁迫下,水和思苗体内O2↑-.和H2O2大量产生,Fe^2+含量与膜脂过氧化产物MDA含量呈极显著的正相关。外源Fe^2+、Fe^3+、H2O2、Fe^2++H2O2、DDTC均能刺激膜脂过氧化作用,而铁离子的螯合剂DTPA则有缓解作用。OH的清除剂苯甲酸钠和甘露醇能明显地抑制渗透胁迫下Fe^2+催化的膜脂过氧化作用。这都表明渗透胁迫下水稻幼苗体内铁诱导的膜脂过氧化作用主要是由  相似文献   

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