固相人工合成睡眠肽的δ和σ活动增强作用的研究

从山羊、大白鼠和兔等动物的脑中曾提取睡眠促进物质,但直到目前为止,仅DSIP是唯一被搞清楚具体化学结构的睡眠促进物质。本文报告了静脉注射(25μg/kg)或脑室注射(5μg/兔)(5μg/25μl/6min)固相合成的DSIP能引起兔脑的δ和σ活动的增强作用,并初步发现[Phe~5]-DSIP也能在兔脑引起δ和σ活动的增强作用。     

固相人工合成睡眠肽的δ和σ活动增强作用的研究

从山羊、大白鼠和兔等动物的脑中曾提取睡眠促进物质,但直到目前为止,仅DSIP 是唯一被搞清楚具体化学结构的睡眠促进物质。本文报告了静脉注射(25μg/kg)或脑室注射(5μg/兔)(5μg/25μl/6min)固相合成的DSIP 能引起兔脑的δ和σ活动的增强作用,并初步发现[Phe~5]-DSIP 也能在兔脑引起δ和σ活动的增强作用。     

脑池注射促甲状腺素释放激素可诱发大鼠胃损伤

电刺激或损毁脑的某些部位可引起胃溃疡和/或影响应激引起的胃损伤。脑内的调节肽与胃肠道损伤以及抗损伤过程也有密切关系。据报道,脑室注射促甲状腺素释放激素(TRH)(3～10μg)可加重由消炎痛、5-羟色胺和阿斯匹林等诱发的大鼠胃损伤,脑池或脑室注射TRH(10～30μg)亦加重冷冻加束缚产生的胃损伤。Goto 和Tache 最近报道,不加束缚的大鼠给禁食24小时在室温下脑池注射TRH,可在4小时后诱发胃损伤。TRH 在0.01～1μg 的剂量范围内呈量效关系。另外,一种稳定的TRH 类似物,RX 77368[焦性     

模拟空间节律(L:D=0.75h:0.75h)对树鼩(Tupaia belangeri chinensis)“24h 昼夜节律”的影响

模拟地球外层空间400—500km 处的空间节律(L:D=0.75h:0.75h)显著打乱灵长类原宗树鼩(Tupaia belangeri chinensis)固有的昼夜节律。其表现为晨间活动量的最高峰(0600—1200显著跌落,而在晚间(1800—2400)出现活动量显著增高的新峰,24h 活动总量(A)的显著降低和恢复缓慢。本研究又表明给予上述空间节律前两天和给予空间节律期间的每天清晨(0600)或傍晚(1800)注射纯 α 型内源性促眠神经肽 Asp~5-α-DSIP(30μg/kg,i.p.),虽固有节律被打乱,但未见 A 的显著降低,同时恢复也较快。     

反相HPLC分离N-苄氧羰基-L-天门冬氨酸慢心律衍生物的α和β异构体及非对映异构体

<正> N-保护的L-天门冬氨酸的两个羧基与氨基反应(构成酰胺或肽)时,由于通过生成环状中间体而得到α和β两种异构体。若它与DL-慢心律反应,则α和β异构体中均包含一对非对映异构体。用反相HPLC成功地分离了α和β异构体,其洗脱顺序相似于甜肽(二肽)和δ-睡眠诱导肽(DSIP,九肽)的α和β异构体反相HPLC分离的洗脱次序。α和β异构体中的非对映异构     

内源性催眠因子

自1910～1913年间,Legendre和Piéron报告了在剥夺睡眠狗的血液、脑和脑脊液中可能存在某种具有催眠作用的物质后,许多工作者相继对这种物质进行了大量的研究,这些工作从不同的动物、不同的组织中成功地得到了多种具有催眠作用的活性物质。 Monnier及其同工刺激家兔丘脑的睡眠区使其入睡,然后对它们的血液进行透析,得到了一个分子量849的九肽,命名δ睡眠肽(DSIP)。随着放射免疫方法的发展,这种肽又先后在人的血液、大鼠的丘脑和松果腺中被测到。Pappenheimer等从剥夺睡眠的山羊脑和脑脊液中获得了“S因子”,将这种因子给大鼠和家兔作脑室灌流可增加慢波睡眠(SWS),进一步的工作证明了这是一种分子量350～500的多肽。Yanagisawa等从人的脑脊液中分离到一种2-辛基-γ-溴乙酰乙酸盐,给猫静脉注射可引起快波睡眠(PS)。Inoué等从剥夺睡眠的大鼠脑干中提取到一种含有两个以上活性片段的多肽,可以增加大鼠与小鼠的SWS和PS,     

第三脑室注射组胺及其受体激动剂对五肽促胃液素诱导的大鼠胃酸分泌的影响

本文报道第三脑室注射组胺(0.25—2.0μg/5μl)对五肽促胃液素诱导的胃酸分泌的双重影响。雄性Wistar大鼠,重200—300g,戊巴比妥钠腹腔麻醉。用37℃生理盐水通过恒流泵进行连续胃灌流。在静脉恒速灌注五肽促胃液素(7.5μg/kg·h)的基础上,第三脑室注射组胺(0.25μg/5μl)或H_1受体激动剂2-Pyridylethylamine(PEA,10μg/5μl),10min后总酸排出量即开始减少,90min仍未恢复。组胺剂量增至1.0μg或2.0μg时,出现双重效应。部份动物(分别占73％或50％)胃酸分泌减少,另一部分动物(27％或50％)胃酸分泌增多。H_2受体激动剂dimaprit(10μg/5μl)或impromidine(0.1μg/5μl)对胃酸分泌无明显影响。苯海拉明(16μg/0.2ml或32μg/0.2ml,i.m.)预处理可分别取消组胺和PEA的抑胃酸效应。这些结果提示:脑内组胺可能参与胃酸分泌中枢调节。其抑制效应似通过H_1受体介导;双重效应的机制有待进一步研究。     

刺激大鼠迷走神经向中端对其不同脑区5-HT含量的影响

采用荧光分光光度法,测定脑内5-HT的含量,观察电刺激两侧颈迷走神经向中端对大鼠海马、下丘脑和中-桥脑内5-HT含量的影响,结果如下:(1)刺激迷走神经向中端后,三脑区的5-HT含量均显著增加(P<0.05-0.005);(2)侧脑室内注射新斯的明(10μg/10μl)或烟碱(10μg/10μl)后,刺激迷走神经向中端使三脑区5-HT含量增多的效应显著提高(p<0.01-0.001);(3)侧脑室内注射六烃季胺(250μg/10μl)后,刺激迷走神经向中端使三脑区5-HT含量增多的效应显著下降(p<0.05-0.005);(4)侧脑室内注射阿托品(10μg/10μl)或纳洛酮(10μg/10μl)后,不影响刺激迷走神经向中端引起的三脑区5-HT含量增多的效应(p>0.05)。由此看来,迷走传入冲动很可能先使脑内Ach释放增多,然后,Ach作用于N-胆碱受体而导致海马、下丘脑和中-桥脑内5-HT含量增加。以上结果表明,在脑内,迷走传入纤维和5-HT能神经元之间可能存在着机能联系。     

八肽胆囊收缩素对抗阿片肽的中枢性降血压作用

过去的工作已经证明八肽胆囊收缩素(CCK-8)能够对抗阿片肽的镇痛作用,本工作探讨CCK-8是否能够对抗阿片肽的心血管抑制作用。给戊巴比妥钠麻醉大鼠脊髓蛛网膜下腔(ith)注射 CCK-8可以对抗 ith 注射 mu(μ)型阿片受体激动剂[NMePhe~3,D-Pro~4]Morphiceptin(PL017)(5μg)、delta(δ)型受体激动剂[D-Ala~2,D-Leu~5]Enkephalin(DADLE)(25μg)和 Kappa(K)型受体激动剂[N-Me Tyr,N-Me Arg~7,D-Leu~8]Dynorphin 1-8 ethyla-mide(66A-078)(1μg)引起的降低血压和减慢心率作用。在 MAP 的表现上,CCK-8的拮抗作用(10μg及以下剂量)具有量-效关系,并可被 CCK 受体阻断剂丙谷胺(Proglumide)(100μg)翻转。在 HR 的表现上,上述剂量的 CCK-8也显示了一定的拮抗作用,但量-效关系不如 MAP 表现得明显。单纯将 CCK-8或 Proglumide ith 注射,可见大剂量(50μg)CCK-8可以引起明显的降血压作用和短时的降心率作用,小剂量(0.05μg)CCK-8则表现出明显的降心率作用;ith 注射 Proglumide 100μg,30 min 后也表现出减慢心率的作用。以上结果提示:在脊髓水平,一定剂量范围内的 CCK-8能够对抗阿片肽的心血管抑制效应,此对抗作用是通过 CCK 受体实现的。本工作的结果支持关于 CCK-8是一种抗阿片物质的设想。     

侧脑室注射胰高血糖素对兔血浆自由脂肪酸、血糖及胰岛素浓度的影响

胰高血糖素是一种脑-肠肽,但它在脑中的生理作用尚不清楚。本工作在家兔侧脑室埋藏慢性套管,并通过注射20μl含0.5—5μg的胰高血糖素溶液,在注射后的15、45、75、105分钟各取血样测定血糖、血浆自由脂肪酸(FFA)和胰岛素的浓度。结果发现:(1)对血糖及血浆胰岛素浓度无明显影响;(2)能引起血浆 FFA 浓度降低,且与剂量有依赖关系,在注射后的45分钟,FFA 降低最明显,以后逐渐恢复;(3)皮下注射阿托品(0.2mg/kg)或静脉注射酚妥拉明(5mg/kg)均不能消除侧脑室注射胰高血糖素降低 FFA 的作用;(4)静脉注射心得安(5mg/kg)能阻断侧脑室注射胰高血糖素的降低 FFA 的作用。这似表明脑中的胰高血糖素可能参与脂代谢的调节,并可能是通过肾上腺素β-受体起作用的。     

腺苷A_1R在高压氧致中枢神经系统氧中毒发生中的作用研究

目的:探讨腺苷A1受体(A1R)在高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)致中枢神经系统氧中毒(central nervous system oxygen toxicity,CNS-OT)发生中的作用。方法:(1)大鼠侧脑室注射A1R选择性激动剂CCPA后观察氧惊厥潜伏期。采用随机数字法将大鼠分为对照组和5μg、10μg以及20μg CCPA给药组。采用侧脑室注射方法分别给予生理盐水和不同剂量CCPA后,进行0.6MPa HBO暴露,记录大鼠的CNS-OT潜伏期。(2)大鼠侧脑室注射A1R选择性抑制剂DPCPX后观察氧惊厥潜伏期。采用随机数字法将大鼠分为对照组和15μg、30μg以及60μg DPCPX给药组。采用脑室注射方法分别给予DMSO和不同剂量DPCPX后,进行0.6 MPa HBO暴露,记录大鼠的CNS-OT潜伏期。结果:脑室注射5μg CCPA组(32.15分±0.8392分)、10μg CCPA组(60.50分±3.150分)和20μg CCPA组(70.91分±2.975分)惊厥潜伏期显著延长,差异有统计学意义(P0.05)。脑室注射30μg DPCPX组(14.09分±1.363分)和60μg DPCPX组(8.564分±0.645分)惊厥潜伏期显著缩短,差异有统计学意义(P0.05)。结论:中枢局部给予腺苷A1R选择性激动剂CCPA可以有效延长CNS-OT的潜伏期;中枢局部给予腺苷A1R选择性抑制剂DPCPX可以有效缩短CNS-OT的潜伏期。     

脑室注射P物质对大鼠血压、心率及交感传出活动的影响

给乌拉坦麻醉六鼠侧脑室注射P物质(SP)10μg,引起动脉血压、心率和内脏交感神经放电增加。同样剂量的SP静脉注射后却引起血压降低。阿托品预处理不影响SP的开心率作用。预先脑室注射0.25,4,64μg阿片受体拮抗剂纳洛酮,对SP的升压效应有剂量依赖式对抗作用。以上说明脑室注射SP 引起的血压升高是交感神经活动增强,导致心率加快及外周血管紧张性增加的结果,并提示SP的中枢升压效应可能与脑内释放内源性阿片样物质有关。     

家兔第四脑室内注射血管紧张素Ⅱ产生加压效应的机理

实验在53只乌拉坦(1g/kg)麻醉,肌肉麻痹,人工呼吸的家兔进行,(1)第四脑室微量注射5μg血管紧张素Ⅱ(AⅡ)使平均动脉血压升高,肾神经放电频率增加,心率减慢;但注射前先去除减压反射,心率就不出现减慢。(2)预先在第四脑室注射1μg哌唑嗪可减弱AⅡ的加压作用和阻断肾神经放电频率的增加,加用3μg育亨宾后,AⅡ的加压作用无进一步减弱。(3)但预先在第四脑室注射1μg哌唑嗪和10μl精氨酸加压素抗血清,就可完全抑制AⅡ的加压作用。结果提示:第四脑室注射的AⅡ具有中枢加压作用,此作用是通过增加外周血管阻力实现的,且由中枢α_1受体和加压素介导。     

延龄草总皂苷对LPS诱导炎症大鼠的抗炎效果

为了探讨延龄草总皂苷对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导急性炎症大鼠的保护作用,将SD大鼠随机分成(2, 1, 0.5) g/kg剂量组、模型组、地塞米松磷酸钠(dexamethasone, DEX)对照组及空白对照组,每组10只。剂量组按(2, 1, 0.5) g·kg~(~(-1))·d~(-1)延龄草总皂苷灌胃一次,模型组、空白对照组灌胃等量蒸馏水。连续灌胃5 d,末次灌胃0.5 h后,剂量组、模型组按200μg/kg腹腔注射LPS;DEX对照组连续灌胃4 d,第5天腹腔注射DEX (100μg/kg),0.5 h后按200μg/kg腹腔注射LPS,空白对照组注射等量生理盐水。末次注射LPS 8 h后,处死大鼠,检测碱性磷酸酶(ALP)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、一氧化氮合酶(NOS)活性及总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、一氧化氮(NO)、白细胞介素6 (IL-6)、IL~(-1)0、IL~(-1)β、IL-4、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、5-羟色胺(5-HT)、组胺(HIS)、环氧化物酶(COX-2)、前列腺素E2 (PGE2)含量。结果显示:(2, 1, 0.5) g/kg组ALP、AST活性及IL-6、IL~(-1)β、IL-8、TNF-α、HIS、COX-2、PGE2含量降低;(1, 0.5) g/kg组ALT活性降低;2 g/kg组NOS活性与NO含量降低,IL~(-1)0含量升高;(2, 1) g/kg组5-HT含量降低。延龄草总皂苷能有效降低LPS所致炎症大鼠ALP、AST、ALT、NOS活性及TC、TG含量,减少NO生成,降低IL-6、IL~(-1)β、IL-8、TNF-α、5-HT、HIS、COX-2及PGE2过量分泌、提升IL~(-1)0、IL-4含量,抗炎效果明显。     

GLT-1在高压氧致中枢神经系统氧中毒发生中的作用研究

目的:探讨谷氨酸及其转运体在高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)致中枢神经系统氧中毒(central nervous system oxygen toxicity,CNS-OT)发生中的作用。方法:(1)大鼠侧脑室注射谷氨酸转运体(Glutamate Transporter-1,GLT-1)选择性激动剂Ceftriaxone后观察氧惊厥潜伏期。采用随机数字法将大鼠分为对照组和50μg、100μg以及200μg Ceftriaxone给药组。采用侧脑室注射方法分别给予生理盐水和不同剂量Ceftriaxone后,进行0.6 MPa HBO暴露,记录大鼠的惊厥潜伏期。(2)大鼠侧脑室注射GLT-1选择性抑制剂DHK后观察氧惊厥潜伏期。采用随机数字法将大鼠分为对照组和5μg、10μg以及20μg DHK给药组。采用脑室注射方法分别给予生理盐水和不同剂量DHK后,进行0.6 MPa HBO暴露,记录大鼠的惊厥潜伏期。结果:脑室注射100μg Ceftriaxone组(33分4.2秒4分12.4秒)和200μg Ceftriaxone组(47分4.2秒5分5.2秒)惊厥潜伏期显著延长,差异有统计学意义(P 0.05),并存在一定量效关系。脑室注射5μg DHK组(16分44.4秒±2分4.7秒)、10μg DHK组(12分51秒±1分23.3秒)和20μg DHK组(7分31.1秒±53秒)惊厥潜伏期显著缩短,差异有统计学意义(P 0.05),并存在一定量效关系。结论:中枢局部给予GLT-1激动剂可以有效延长CNS-OT的潜伏期;中枢局部给予GLT-1抑制剂可以有效缩短CNS-OT的潜伏期。     

葡萄糖与胰岛素能减少大鼠快速眼动睡眠时间

使内源性胰岛素增高或腹腔注射低于惊厥剂量的胰岛素(1.01U/kg)均可使大鼠脑中5-羟色胺(5-HT)与色氨酸浓度增高。含5-HT的脑神经元可能对睡眠的控制、温度调节、运动、食物消耗、痛觉和性活动起作用。实验用30只成年雄性大鼠分成3组,将不锈钢圆头螺旋电极钉入实验鼠颅骨,引导额-枕叶脑电图(EEG),腹腔内注射高剂量葡萄糖(2.5g/kg)和非-惊厥剂量胰岛素的合并给药,使大鼠睡眠—觉醒周期改变:在整个EEG连续记录8h中,第1～第5个小时,快速眼动(REM)睡眠时间明显减少,在第3、第4     

心房钠尿肽的中枢性心血管和肾效应

在麻醉大鼠观察了颈动脉、脊髓蛛网膜下腔和侧脑室内注射心房钠尿肽(Atrial natri-uretic peptide,ANP)后,血压,心率或/和尿量、尿钠和尿钾的变化,并观察了 ANP 对血管紧张素Ⅱ(AGⅡ)中枢效应的影响。结果如下:(1)在大鼠头部交叉循环条件下,经受血鼠颈总动脉内注射α-人心房钠尿多肽(α-human atrial natriurctic polypeptide,α-hANP)(15μg/kg)后,受血鼠平均动脉压(MAP)无改变,而供血鼠的 MAP 降低,⊿MAP为-2.4±0.84kPa(-18±6.3mmHg,P<0.05),(2)脊髓蛛网膜下腔注射心房肽,Ⅱ(AtriopeptinⅡ,APⅡ)(5μg/kg)对血压、心率和尿量无明显影响;(3)侧脑室注射 APⅡ(20μg/kg)后血压和心率无显著改变,尿量仅在注射后第30至50min 时显著增加,而尿钠无改变;(4)侧脑室注射 AGⅡ(1μg/kg),血压升高,⊿MAP 为1.3±0.17kPa(10±1.3mmHg,n=10,P<0.001)。注射1h 后,尿量增加106%(P<0.01),尿钠增加642%(P<0.01);(5)事先侧脑室注射 APⅡ(20μg/kg),2min 后再注入 AGⅡ(1μg/kg),AGⅡ的中枢升压效应不受影响,⊿MAP为1.5±0.25kPa(11±1.9mmHg,n=7,P<0.01),而尿量和尿钠的增值明显减小。以上结果表明,ANP 难于透过血脑脑脊血屏障,可能与其分子量较大有关。在静脉注射 ANP 所致降压效应中,似无中枢机制的参与。ANP 对 AGⅡ     

延髓中线区微量注射5-羟色胺、吗啡等药物对刺激兔下丘脑诱发室性期前收缩的影响

兔廷髓中线区微量注射5-羟色胺(10μg溶于2μl中)或吗啡(10μg溶于2μl中)可减少刺激下丘脑诱发的室性期前收缩(HVE),微量注射肉桂硫胺(4μg溶于2μl中)或纳络酮(4μg溶于2μl中)可在多数动物中引起 HVE 短时内增多。先微量注射肉桂硫胺(2μg溶于1μl中)再微量注射吗啡(10μg溶于1μl中)或先微量注射纳络酮(2μg溶于1μl中)再微量注射5-羟色胺(10μg溶于1μl中),均不能明显影响吗啡、5-羟色胺对 HVE 的抑制效应。延髓中线区微量注射去甲肾卜腺素(2—4μg溶于2—4μl中)不能象在中脑中央灰质微量注射那样使 HVE 增多。对照组动物延髓中线区微量注射生理盐水(2μl)对 HVE 无明显影响。结果提示:延髓中线区5-羟色胺受体和阿片受体的活动对 HVE 有抑制作用。     

γ-氨基丁酸对鳜摄食和食欲的影响(英)

为阐明γ-氨基丁酸(GABA)对鳜(Siniperca chuatsi)摄食和食欲的影响,对鳜脑室注射生理盐水和不同剂量的GABA(50、125、500和2000μg)。结果显示,注射125μg GABA组的鳜在2h内摄食量显著升高。实时荧光定量PCR(RT-q PCR)结果显示,注射125μg GABA 0.5h后,鳜鱼脑中Ag RP和NPY m RNA表达量上调,CART和POMC m RNA表达量下调,都和鳜摄食量增加相一致。相比于对照组,注射GABA后Leptin-R的m RNA表达量在0.5h和2h都有显著下降。这些结果表明GABA可能通过leptin的信号通路来影响食欲,进而影响摄食量。研究结果可以为GABA在水产饲料中的应用提供理论依据。     

头端延髓腹外侧区注射5-羟色胺对应激性高血粘度及血压升高的影响

实验用Wistar大鼠62只,采用束缚加悬吊的方法引起应激性高血粘度和血压升高。结果观察到,清醒大鼠束缚加悬吊二天可引起应激性高血粘度和血压升高。第四脑室内注射5-羟色胺(5-HT25μg/10μl)或在双侧延髓腹外侧区头端(rVLM)微量注射5-HT(4μg/0.5μl/每侧)均可抑制应激性高血粘度和血压升高,若预先在双侧rVLM微量注射5-HT受体阻断剂肉桂硫胺(4μg/0.5μl/每侧)后再在第四脑室或延髓腹外侧区内注入上述同剂量的5-MT,则5-HT降低应激性高血粘度和血压升高的作用消失。看来上述5-HT的作用是通过rVLM内5-HT受体的激活来实现的。