荧光定量PCR辐照食品鉴定技术的优化研究

为优化荧光定量PCR辐照食品鉴定技术方法,实现对假阳性样本的鉴别能力,降低模板量对鉴定结果的干扰效应。选择马铃薯作为研究材料,分别进行1-12 kGy的60Co辐照、加热和冻融处理,通过转座子引物筛选、检出限分析、DNA损伤特征比较和剂量曲线回归等方法,探究转座子引物的应用对马铃薯辐照鉴定结果的优化效果。结果显示,转座子引物组合LTR2-5\18S-8与LTR2-2\ACT-5可用于假阳性样本的鉴别,引物组合LTR2-5\18S-5可用于辐照鉴定。优化后方法中"初始循环数差值的指数函数-辐照剂量"标准曲线方程为Y=-0.1581X+4.611,线性关系R2为99.24%,优于"初始循环数差值-辐照剂量"的原有模式。通过转座子引物的应用与方法优化,增强了假阳性鉴别能力,消除了模板差异,增强了荧光定量PCR辐照鉴定技术的"剂量-效应关系"。     

重离子及电子辐照沙打旺(Astragalus Adsurgens Pall)干种子的辐射生物学效应

本文采用80MeV/u12C6+和50keV的电子辐照沙打旺干种子,研究沙打旺干种子不同注量的辐照生物学效应,检测其生理生化指标。结果表明:无论是碳离子辐照还是电子辐照,发芽势都随注量的增加先升高后降低,发芽率都随注量增加逐渐降低。其次,碳离子辐照样品,其超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性变化随注量增加先升高后降低,即存在一个峰值,过氧化氢酶(CAT)在高于5×106ions/cm2注量的离子辐照中其活性基本不发生变化;不同注量的电子辐照,样品的CAT、SOD、GSH-Px活性都是先升高后降低。第三,无论是碳离子辐照还是电子辐照样品的谷胱甘肽(GSH)含量变化不显著,与注量的变化没有明显的相关性。总而言之,本工作发现碳离子及电子辐照样品,其多个生理生化指标均随注量的增加呈先升高后降低的趋势,但GSH变化对碳离子或电子辐照都不敏感。     

γ射线辐照灭菌剂量的模糊优化

γ射线辐照灭菌处理的关键性技术是辐照剂量的优化和确定。通过对照射后的SPF试验动物饲料的理化、微生物和感官指标的分析,提出γ辐照灭菌处理的模糊综合质量评价方法,进而实现对辐照剂量的模糊优化。     

数学建模用于激光辐照微藻生物学效应的研究

目的：用数学建模模拟激光辐照扁藻细胞的增殖情况,研究激光辐照微藻生物学效应的参数规律。方法：在不同激光参数条件下照射亚心形扁藻,分为不同照射剂量实验组,以各实验组的细胞增殖数目为建立模型数据源。根据单细胞藻类在培养过程中生长及繁殖的规律构造高斯生长曲线,构建线性双目标规划模型,利用逐步回归法从辐照激光参量及三者的衍生量中分别筛选出与细胞增殖数、生长速率相关度较大的参量,并利用模型优化软件得到最优策略。分析结果表明用构建模型对不同激光处理的微藻样本生长曲线的仿真,达较高拟合度,SSE：2．383e-005,R—square：0．9997,验证了模型的正确性。对于给定的激光波长和照射时间,可以预测辐射后扁藻藻种的平均生长速率和生长期的变化趋势。结论：数学建模可以作为寻找激光辐照微藻的参数与其生物学效应之问的规律的分析方法。     

中水回用反渗透系统中微生物污染的解决方案

文章对某钢铁厂中水回用车间反渗透膜系统的微生物污染状况进行现场采样(包括水样和反渗透膜系统中的黏滞性物质)，并对样品进行全面的微生物污染评估，从中找出主要污染源。同时针对污染微生物开展杀菌实验，找出合适的非氧化性杀菌剂（在此之前多用氧化性杀菌剂进行反渗透系统的杀菌，但是因为氧化性杀菌剂易氧化反渗透膜导致膜的脱盐率下降，尤其余氯，因此反渗透膜系统不建议使用氧化性杀菌剂）并探索该杀菌剂的最适添加量和作用时间。根据以上结果，基于节约成本的要求，结合微生物污染对反渗透膜系统清洗和周期影响的了解，设计性价比高的非氧化性杀菌剂添加方案，以解决钢厂中水回用车间反渗透膜系统的微生物污染问题，降低反渗透膜系统的清洗频率，延长反渗透膜的使用寿命，节约运行成本。该方案在实施过程中取得了良好的处理效果。     

低能离子束辐照下水稻中与ABA相关基因的差异表达

本文检测了用基因芯片筛选出水稻种子被低能N＋辐照后引起的差异表达的ABA代谢和信号途径相关基因。结果显示,与ABA合成相关的ZDS、Lyc-β、ZEP、NCED、SDR这五种酶的基因表达量均为上调;受ABA调控的的H＋-ATPase、NR、Rubisco的基因表达变化显著;ABA依赖的逆境应答蛋白DREB和ASR的表达量上调;受ABA信号转导调控的蛋白LEA的表达量下调,GAD和P5CS的表达量上调。这些结果表明,6×1017N＋·cm-2剂量的辐照可能促进了ABA的合成和幼苗气孔的开放,同时促进了ABA信号系统并激活或抑制了一些相关基因的表达。     

低剂量~(60)Co-γ射线辐照对梨小食心虫羽化、繁殖和成虫寿命的影响

【目的】本研究采用低剂量的⁽⁶⁰⁾Co-γ射线辐照梨小食心虫Grapholitamolesta雄蛹,分析辐照对梨小食心虫繁殖的影响,为利用(60)Co-γ射线辐照梨小食心虫Grapholitamolesta雄蛹,分析辐照对梨小食心虫繁殖的影响,为利用⁽⁶⁰⁾Co-γ射线防治梨小食心虫提供理论依据。【方法】设置辐照剂量为0、25、50和75 Gy的(60)Co-γ射线防治梨小食心虫提供理论依据。【方法】设置辐照剂量为0、25、50和75 Gy的⁽⁶⁰⁾Co-γ射线对梨小食心虫羽化前1 d的雄蛹进行辐照处理,分析辐照对其羽化率、繁殖能力及寿命的影响。【结果】不同辐照剂量处理的梨小食心虫羽化率均有下降,但与对照组相比无显著性差异,说明辐照对其羽化率影响较小。辐照组雄蛾与正常雌蛾的交配率与对照组无显著性差异。与对照组相比,经25、50和75 Gy辐照处理羽化的雄蛾与正常雌蛾交配后,其单雌产卵量无显著性差异。随着辐照剂量的升高,梨小食心虫的孵化率逐渐下降。与对照组孵化率74.38%±6.15%相比,75Gy处理组的孵化率明显降低,仅为22.68%±7.20%。与对照组相比,随着辐照剂量的升高,辐照组雄虫的平均寿命均有不同程度的下降。【结论】利用低剂量的(60)Co-γ射线对梨小食心虫羽化前1 d的雄蛹进行辐照处理,分析辐照对其羽化率、繁殖能力及寿命的影响。【结果】不同辐照剂量处理的梨小食心虫羽化率均有下降,但与对照组相比无显著性差异,说明辐照对其羽化率影响较小。辐照组雄蛾与正常雌蛾的交配率与对照组无显著性差异。与对照组相比,经25、50和75 Gy辐照处理羽化的雄蛾与正常雌蛾交配后,其单雌产卵量无显著性差异。随着辐照剂量的升高,梨小食心虫的孵化率逐渐下降。与对照组孵化率74.38%±6.15%相比,75Gy处理组的孵化率明显降低,仅为22.68%±7.20%。与对照组相比,随着辐照剂量的升高,辐照组雄虫的平均寿命均有不同程度的下降。【结论】利用低剂量的⁽⁶⁰⁾Co-γ射线辐照可影响梨小食心虫繁殖,为进一步优化辐照条件和利用(60)Co-γ射线辐照可影响梨小食心虫繁殖,为进一步优化辐照条件和利用⁽⁶⁰⁾Co-γ射线防治梨小食心虫提供理论指导。     

杀菌剂TJ-A2264对白湿皮防腐效果的研究

考察了不同用量的杀菌剂TJ-A2264对白湿皮制作过程和存放期间的防腐效果。通过细菌总数测试法、抑菌圈法和高效液相色谱法等检测方法的分析,结果表明,白湿皮制作工段中加入足够量的杀菌剂能很好的避免白湿皮在储存过程中的腐败现象,杀菌剂TJ-A2264的最低使用浓度为0.2%,而且杀菌剂的添加并没有影响防霉剂的吸附。     

玉米黑粉菌cyp51基因结构分析与克隆表达

通过生物信息学手段分析cyp51基因结构,并根据GenBank登记的玉米黑粉茼cyp51 DNA序列,设计cyp51引物和两对分别截短不同跨膜区的突变体引物,构建了多种重组表达质粒及突变体重组表达质粒.选用不同宿主菌包括Escherichia coli BL21(DE3).BL21(DE3)pLysS和Rosetta(DE3)诱导表达并优化条件.SDS-PAGE分析结果表明:只有突变体pET32-YH-35能够在E. coli BL21(DE3)中高效表达(30℃,0.5 mmol/L IPRG诱导).通过与戊唑醇等4种商品化杀菌剂农药和14种XF系列农药先导化合物的紫外结合光谱分析表明:重组蛋白具有生物学活性.其中一种XF系列化合物的结合常数接近商品化杀菌剂,有可能开发为新的杀菌剂,为设计开发新型高效抗真菌新药提供了理论依据.     

软膏剂γ辐照灭菌初探

通过用不同剂量的￣（６０）Ｃｏ—γ射线辐照硫磺软膏、鞣酸软膏、土肥氏软膏及辐照后贮藏效应的研究表明,γ辐照对软膏剂灭菌效果显著,杂菌存活量随辐照剂量及辐照后的贮藏时间增加而降低。对于上述三种软膏,最适辐照剂量为２．０—４．０ＫＧｙ。     

响应面优化超声辅助法提取拐枣种子中二氢杨梅素的工艺

二氢杨梅素和杨梅素是拐枣种子中的重要成分。通过超声辅助法从拐枣种子中提取二氢杨梅素，采用单因素法考察乙醇体积分数、超声辐照功率、提取温度、液料比和超声辐照时间影响参数的基础上，并选用Box-Behnken响应面设计法分析建立了超声辐照功率、超声辐照时间和液料比的二次多项式模型，优化提取工艺。结果得到超声辅助法提取拐枣种子中二氢杨梅素的最佳工艺参数为：乙醇体积分数为60%、超声辐照功率140 W、超声辐照时间30 min、液料比20.5 mL·g^-1，提取温度40℃。在此最佳条件下，二氢杨梅素得率为2.14±0.09 mg·g^-1。本提取方法简单快速，效率高，有利于拐枣资源的综合加工利用。     

苯扎氯铵对单克隆抗体亲和层析填料的杀菌效果及其残留量的检测

通过菌悬液定量杀菌实验和亲和层析凝胶蛋白吸附量测定,最终从众多杀菌剂中筛选出一种既能有效杀死亲和层析介质中感染的细菌,又不影响其蛋白吸附量的理想杀菌剂苯扎氯铵;建立了利用反相离子对高效液相色谱测定层析柱中苯扎氯铵残留量的方法。采用C18色谱柱,流动相为乙腈-0.2 mol/L庚烷磺酸钠,于210 nm紫外波长下检测,检出限为0.000 25 mg/mL,实际样品中苯扎氯铵含量测定结果的相对标准偏差为0.63%,本方法具有良好的灵敏度和精密度。     

杂交油菜高产栽培多因素组合数学模型的研究

试验采用五因素五水平二次回归正交旋转组合设计,对影响油菜产量的播种期、密度、施氮肥量、施磷肥量和施钾肥量五个可控因子进行了研究,利用微机处理技术建立了油菜产量对五个栽培因子反应的数学模型．研究中运用数学模型优化筛选出油菜不同产量水平的各项栽培因子技术指标,为指导油菜生产、满足不同产量水平的需要,提供一系列切实可行的优化技术方案．通过大面积示范,效果很好．     

枯草芽孢杆菌BI1产抗真菌脂肽培养条件的优化

采用Plackett—Burman设计对枯草芽孢杆茵BI1产抗菌脂肽培养条件中相关影响因素(即种龄、接种量和pH值)的效应进行评价并筛选出重要的影响因素,然后用Box-Behnken设计及响应面分析确定了重要影响因素的最佳条件,优化后的溶血透明圈直径达到17.5 mm,比优化前的13.75 mm提高了27.27%。     

红油金针菇产品的辐照加工技术研究

研究了红油金针菇的辐照加工技术,通过正交试验确定了红油金针菇的最佳调味配方,结果表明：红油添加量10%、蔗糖添加量0.1%、食盐添加量3%、柠檬酸添加量0.2%为最佳调味配方。研究红油金针菇的防腐杀菌技术的结果表明：添加0.015%的脱氢乙酸钠和0.015%的山梨酸钾复配防腐剂比单一防腐剂更有效提高了红油金针菇的防腐效果,辐照剂量为4kGy杀菌后的红油金针菇可达到完全灭菌的效果。将上述杀菌处理后的红油金针菇进行常温贮藏,180d后红油金针菇产品细菌总数仍然很少并且保持有令人满意的色泽、脆度和口感。辐照处理对红油金针菇的营养成分影响不大。     

12C6＋离子束辐照对大青叶生理生化特性的影响

利用辐射能量为100 MeV/u的12C6＋ 重离子束辐照大青叶种子,辐照剂量分别为20、40、50和80 Gy研究其对大青叶M1代的生物学效应.研究结果表明,随着辐照剂量的增大,大青叶的根系活力和叶绿素含量显著降低,发现辐照损伤主要抑制了根的生长及营养吸收;酚酸类化合物含量随着辐照剂量的增大而升高的趋势,表明辐照可提高大青叶的抗氧化和抗病虫害能力;可溶性糖、丙二醛、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）含量变化的总体趋势为随着辐照剂量的增大先升后降.表明重离子辐照能改变大青叶的一些生理生化特征,其中40 Gy的12C6＋离子束辐照有利改善大青叶抗逆性和一些有效化学成分的积累.     

γ-射线对新菠萝灰粉蚧辐照效应的转录组测序与分析

检疫辐照处理通过电离辐射来灭杀进出口货物中的检疫性害虫。明确辐照处理的分子机制,找到既能有效灭杀处理对象,而又能量消耗经济,且不会对货物质量造成损伤的合适辐射剂量是研究辐照处理的关键基础性问题。本研究对检疫性害虫——新菠萝灰粉蚧分别采用100 Gy和240 Gy两种辐照剂量处理,经饲养24 h后采用高通量测序技术来研究其基因表达水平的变化。结果表明低剂量组和高剂量组中分别有3.3%和4.4%的基因相对与对照组产生了差异表达,而且有2.4%基因在两组处理中都表现出了表达差异,占差异表达基因总量的一半以上,且这些基因的表达量大多发生下调。聚类分析显示,这些差异表达的基因主要富集在各种细胞组分、基因表达调控等功能类别中,说明检疫辐照主要通过损伤细胞结构和干扰生物的基因表达调控过程来实现害虫不育,且辐照强度越大,对处理虫体的损伤越大。     

芦苇^60Coγ辐照降解副产物的分析

通过^60Coγ射线处理芦苇以及分析辐照前后芦苇中的基本成分含量、副产物含量,研究辐照预处理对芦苇木质纤维素的影响.采用国标法测定了辐照前后芦苇中的纤维素、半纤维素、木质素含量;采用气质联用（GC-MS）法对芦苇^60Coγ辐照后降解副产物进行了分析.结果表明：芦苇经^60Coγ射线辐照预处理之后,纤维素和半纤维素的降解程度较大,在2 000 KGy处理处理条件下降解率分别达到83.07％和79.86％.在辐照前和辐照后的芦苇中,一共检测出42种脂肪酸类化合物、27种芳香类化合物和8种呋喃类化合物.     

高功率微波急性辐照对家兔视网膜睫状神经营养因子表达的影响

目的:探讨高功率微波(HPM)急性辐照后家兔视网膜组织睫状神经营养因子(CNTF)表达量在不同时间的变化规律。方法:采用RT-PCR的方法检测90 W/cm2×15 min辐照后0,3,6,12,24和72 h不同时相点家兔视网膜组织CNTF mRNA表达的情况。结果:微波辐照后即刻,家兔视网膜CNTF mRNA表达含量极显著升高(P<0.01),并达最高峰值;3 h后家兔视网膜CNTF mRNA表达含量开始下降;微波辐照后6 h、12 h家兔视网膜CNTF mRNA含量继续下降,但均仍显著高于对照组水平(P<0.05);24 h、72 h时的家兔视网膜CNTF mRNA表达含量与对照组的CNTF mRNA含量相比基本持平。结论:HPM急性辐照能即刻显著性的增强家兔视网膜CNTF mRNA的表达,其表达量与损伤时间之间存在时效关系。HPM辐照引起的CNTF mRNA表达上调可能参与了微波辐照所致的家兔视网膜组织损伤,为利用外源型CNTF治疗微波辐照所致的家兔视网膜组织损伤提供理论依据。     

低能离子束辐照植物样品质量损失研究

采用50 keV的N+对100 滋m厚的芸豆切片和75 滋m厚的Mylar(聚乙烯对苯二酸酯)高分子膜辐照,辐照剂量从1×1015 ions/cm2到1×1017 ions/cm2。利用高灵敏度的天平测量样品辐照前后的质量,得到了辐照后样品的质量变化。结果表明,当离子剂量大于3×1016 ions/cm2时,切片样品的质量明显减少,并且质量损失随辐照剂量增加而增加;但Mylar膜样品在辐照剂量达到7×1016 ions/cm2时仍没有测量出明显的质量变化。由测量的质量损失计算出50 keV的N离子轰击切片样品时溅射产额约为560 atoms/ion。结合植物样品的结构和分子组成特性对这种辐照引起的高溅射产额现象作了分析。