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1.
细菌内毒素作用机理的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
细菌内毒素对机体免疫系统的影响具有双重性,内毒素(LPS)通过诱导机体内的单核巨噬细胞释放多种介质分子而发挥其生物学效应,其中细胞因子在感染性休克中起重要作用。内毒素结合蛋白(LBP)有促进LPS与单核巨噬细胞表面的相应受体发生结合的作用。而在LPS诱导单核巨噬细胞产生细胞因子过程中,细胞表面LBP受体(CD14)的存在具有一定的意义。 相似文献
2.
天花粉蛋白Y14F/R22L定点突变及其活性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用多聚酶链式反应(PCR)技术,对天然天花粉蛋白(nTCS)基因在Tyr14和Arg22两个保守残基处同时进行定点突变,即Tyr14变成Phe,Arg22变成Leu,然后克隆到pET-8c高效表达载体上,构建成重组质粒pETY14F/R22L.经序列分析,定点突变的结果与预先设计的完全一致,突变后的天花粉蛋白命名为Y14F/R22LTCS.将pETY14F/R22L转化到E.coliBL21(DE3,pLysS)中,进行表达.经CM-SepharoseCL-6B柱纯化,SDS-PAGE鉴定,纯度可达90%.RIP活性测定显示,Y14F/R22LTCS的活性比nTCS降低了7.5倍,活性变化不显著,因此,TCS的Try14和Arg22对维持其活性部位构象并不是必需的.但由于Y14F/R22LTCS在E.coli中的表达量与nTCS相比明显下降,因此,Tyr14和Arg22可能与TCS翻译后的折叠有关. 相似文献
3.
脂多糖(LPS)结合蛋白(LBP)是存在于下沉人和动物血清中的种糖蛋白,人血清中LBP的正常浓度为5~10μg/ml,急性反应期可升高到200μg/ml,LPB与LPS中的类脂A具有高度亲和性,可作为LPS载体蛋白,催化LPS与CD14结合,刺激单核细胞、内皮细胞等,促进T痰性介绍的释放;LBP还可作为调理素,促进单核细胞等吞噬调理后的LPS和甘兰阴性细菌,故LBP可以调节LPS所致的炎症反应。B 相似文献
4.
采用聚合酶链反应(PCR)技术和DNA体外重组方法,克隆出579bp的丙型肝炎病毒(HCV)NS4b基因片段,插入到原核高效表达载体pET-28a中,构建重组质粒pET/NS4b,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导培养后,获得了目的蛋白的高效表达。SDS-PAGE分析显示在30kD处有一条表达的目的蛋白区带。通过固定化金属配体亲和层析(IMAC)纯化目的的蛋白,ELESA检测结果表 相似文献
5.
糖基化对乙型肝炎表面抗原疫苗的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
哺乳动物(CHO)细胞表达的三种糖基化程度不同的乙肝表面抗原(HBsAg)A(含GP30,GP27,P23),B(含GP27及P23),C(只有P23),在免疫原性、放置后抗原的稳定性以及对不同单克隆抗体亲和力等方面都有明显的差异;(1)免疫BALB/C小鼠后血清中抗体工(ED50)。平均结果为A=1:80,B=1:117,C=1:14,表明有糖基的HBsAg疫苗对小鼠的免疫力明显高于无糖基的HB 相似文献
6.
沈炳福 《植物生理与分子生物学学报》1994,(2)
苜蓿根瘤菌(Rhizobiummeliloti)nodC蛋白是结瘤基因nodC编码的43kD多肽(NodC)。应用噬菌体T7RNA聚合酶/启动子表达系统.pT7-5作为载体质粒.构建了带有nodC基因的PBF6克隆.经诱导在大肠杆菌JAKE中获得表达,过量生成NodC,占细胞总蛋白量的5%。经细胞膜蛋白组份的分离,Bio-gel柱层析,SDS-PAGE电泳等获得了比较纯化的NodC。 相似文献
7.
本文采用超声破碎TritonX—100和超速离心技术提取了鼠伤寒杆菌(Salmonellatyphimurium,STM)的外膜蛋白(Outermembraneproteins,OMPs),并发现OMPs中脂多糖LPS的含量约为5%,OMPs经SDS—PAGE显示10余条蛋白带。对OMPs诱发BALB/C小鼠产生典型迟发型变态反应DTH和IL—2的水平进行了检测。经腹腔免疫的小鼠用500LD50鼠伤寒杆菌(50115)攻击,100%可得到保护;用500LD50伤寒杆菌(E686)攻击,33.3%可得到交叉保护。免疫BALB/C小鼠的T淋巴细胞,经尾静脉注射给非免疫小鼠,可使后者得到85.7%的被动免疫保护,上述结果说明OMPs能诱发BALB/C小鼠细胞免疫和保护性免疫,并提示成为分子疫苗的可能性。 相似文献
8.
以霍乱毒素B亚基(CTB)基因为载体,构建了含不同抗原表位的恶性疟原虫的融合基因CTB/ATE和CTB/AWTE。前者除含有恶性疟原虫裂殖子表面主要抗原表位杂合多肽基因SPf66外,还含有很强的T辅助细胞表位CST3和Tc细胞表位;后者在此基础上将我国发现的B细胞表位NKNDD基因经8次串联后融合其中。两种形式的融合基因经测序正确后转入大肠杆菌TK1046中,产量分别为10mg/L及5mg/L。表达产物CTB/AWTE经亲和层析纯化双抗夹心ELISA测定表明,该融合蛋白在保留了与抗CTB抗体结合的同时,与抗NKNDD单抗的结合效价达1:8000。 相似文献
9.
霍乱毒素B亚单位基因(CtxB)的克隆及其表达 总被引:7,自引:0,他引:7
从霍乱弧菌中抽提基因组DNA,用PCER方法获取霍乱毒素B亚单位基因(CtxB)。序列分析结果表明,CtxB基因编码124个氨基酸,其中编码62位Thr的密码子与文献报道有差异。将CtxB基因插入质粒pGEX-4T-2,构建pGEX-CTXB表达质粒,转化大肠相菌BL21(DE30,筛选表达菌株CTXB/BL21。工程株经IPTG诱导表达,可产生大量的表达蛋白,经SDS-PAGE分析,融合蛋白分子 相似文献
10.
有氧运动对高胆固醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体活性调节的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
本文研究了实验性高胆固醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体(LDLR)活性变化及有氧运动时LDLR活性调节的影响。发现,高脂(HC)组肝组织匀浆LDLR活性较正常对照(NC)组降低37%(P<0.05),同时血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)及血清载脂蛋白B(ApoB)均显著高于NC组(P<0.01);高脂+运动(HE)组TC、LDLC及ApoB均明显低于HC组,而LDLR活性则较HC组增高26%(P<0.05)。结果提示:(1)高胆固醇负荷时细胞可通过下行调节影响LDLR活性;(2)运动可能通过增加对细胞内胆固醇利用和降解,反馈作用于下行调节过程影响LDLR的合成,增加对LDLC摄取而显著改善血脂水平。 相似文献