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相似文献
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1.
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采用脱氨再生几丁质凝胶亲和层析从萝卜叶中获得了PAGE圆盘电泳均一的溶菌酶,并通过微量蒸发扩散法获得其结晶。用pH动力学研究方法和化学修饰法对该酶的活性中心进行了初步研究,实验结果表明:-COOH(Glu/Asp)基团、Trp及His残基可能为酶活性所必需。采用对Tyr、Cys、Arg、Ser/Thr残基专一的修饰剂对酶作用后,酶活性基本上不受影响。同时,酶活性受到组胺和GlcNAc抑制。讨论了萝卜溶菌酶与鸡蛋清溶菌酶和木瓜溶菌酶的活性中心的相互差异。  相似文献   

2.
萝卜贮藏期可溶性蛋白及同工酶研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
试验以4个萝卜(Raphanus sativus L.)品种为试标,研究了贮藏期可溶性蛋白含量及PAGE蛋白图谱、酯酶和淀粉酶的同工酶谱。试验结果表明,在贮藏期蛋白浓度随贮存时间延长而下降,PAGE蛋白谱带显示不仅有品种之间蛋白种类的差异而且有贮藏期不同阶段的差异,淀粉酶同工酶谱显示随贮藏时间延长,酶活性下降,同工酶谱带增加,酯酶在贮藏过程中酶活性呈现先升高再下降然后再升高的变化,同工酶谱带贮藏中  相似文献   

3.
彭天剑  郭礼和 《遗传学报》1994,21(2):155-160
本研究用缺口以链法对肠杆菌青霉素G酰化酶(PGA)基因Ser177进行寡核苷酸定点突变。通过NIPAB(2-硝基-5-苯乙酰胺苯甲酸)试纸法筛选和测序鉴定,获得突变体Cys177,Gly177,Arg177和Asn177。它们的PGA活性均已丧失。酶蛋白电泳分析表明突变体蛋白在体内正常表达。推测PGA Ser177秀可能位于酶底物结合中心,是酶活性所必需,不能被置换。  相似文献   

4.
温度对蜥蜴腓肠肌ATP酶活性影响的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
本文研究了荒漠沙蜥(phrynocephalus Przewalskii Strauch)和密点麻蜥(Eremias multiocellataGuenther)腓肠肌肌球蛋白钙激活ATP酶活性对温度的依赖关系。结果表明,荒漠沙蜥腓肠肌ATP酶的最适温度为37℃,密点麻蜥腓肠肌ATP酶的最适温度为35℃。两种蜥蜴ATP酶最适温度的不同与它们所喜好的温度有很好的相关性。ATP酶活性在同种个体大小之间也存在差异。ATP酶的生化调节可能在蜥蜴对温度适应上起重要作用。  相似文献   

5.
识别未衍生化的13—羟化GAs及其葡萄糖苷的单克隆抗体   总被引:21,自引:0,他引:21  
抗GA3 及其葡萄糖苷的MAB10单克隆抗体源于以GA3 中的3 位羟基(3-OH)为偶联位点,人血清白蛋白(HSA)为载体合成的GA3-3-HSA 免疫原. 该抗体对13-羟化GAs(13-OHGAs、GA1、GA3、GA5 等)和GA3 葡萄糖苷具有高亲和力. 7 位羧基的甲酯化可显著降低MAB10 对13-OH GAs的亲和力,而3-OH 的糖苷化却未降低其亲和力. 用该抗体建立的两种分别用于GA3 及其葡萄糖苷测定的酶联免疫吸附法(ELISA),其检测线性范围均为0.2~20 pm ol. 借助这两种ELISAs,研究了羊蹄(Rum ex japonicus)叶片中GA3 及其类似GAs和葡萄糖苷的动态变化.结果表明,叶片衰老与游离态GAs的糖苷化有关;而6-BA 延缓衰老则可能与其减缓GAs的糖苷化有关  相似文献   

6.
菜心(BrassicacampestrisL.ssp.chinensisvar.utilis)叶子高速捣碎后,滤液经酸碱处理,硫酸铵分步沉淀,凝胶柱层析等步骤分离纯化溶菌酶,酶比活力达3414.6U/mg,纯化倍数为197.4。菜心溶菌酶在较宽的温度或pH值范围均有活性,最适温度为60℃,最适pH值为5.8,底物Km值为87μg/mL。该酶对热和酸碱的稳定性较高,巯基和酪氨酸残基不是该酶活性中心的必需基团。  相似文献   

7.
用九种化学修饰剂研究了粘质赛氏菌SerratiaMarcescens41003(2)胞外蛋白酶分子中氨基酸侧链基团与酶催化活性的关系,结果表明组氨酸、丝氨酸、赖氨酸、精氨酸、谷氨酸及天冬氨酸等残基与酶活性无关;半胱氨酸残基与酶活性也无直接关系;而酪氨酸和色氨酸残基侧链的修饰引起酶活力大幅度下降,说明酪氨酸和色氨酸残基为酶活力必需.  相似文献   

8.
江均平  严自正 《真菌学报》1996,15(4):288-291
海枣曲霉木聚糖酶Ⅲ经PAGE和SDS-PAGE后用Schiff′s试剂染色证明为糖蛋白。经硅胶薄层层析和毛细管毛相色谱测定,每分子酶约含4个葡萄糖和1个甘露糖残基,木聚糖酶Ⅲ经β-消除反应后在241nm处出现一个新的吸收峰,在N2保护下用含NaBH4的NaOH溶液处理后,其Ser和Thr减少,相对应丙氨酸增加,并出现α-氨基丁酸,估测酶分子中存在约3个O-糖苷键,糖残基通过O-糖苷键连接于肽链中丝  相似文献   

9.
番茄叶片胞外β-N-乙酰氨基己糖苷酶的部分性质研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
用从系统感染TMV(tobacco m osaic virus)的番茄叶胞外蛋白提取液中纯化的β-N-乙酰氨基己糖苷酶为材料,研究了该酶的部分性质。以p-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-β-D-GlcNAc)或p-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷(pNP-β-D-GalNAc)为底物,该酶的最适pH在4.8—5.0 之间,最适温度在44—47℃之间。对酶的热稳定性研究表明,温度对酶的热变性作用表现为两相变性曲线,Km 值分别为0.36 m m ol/L (pNP-β-D-GlcNAc为底物)和0.67 m m ol/L (pNP-β-D-GalNAc 为底物),N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)和N-乙酰氨基半乳糖(GalNAc)是酶活性的竞争性抑制剂,Ag+ 和Hg2+ 是酶活性的强抑制剂,金属离子Fe2+ 、Fe3+ 和Cu2+ 也抑制酶活性。  相似文献   

10.
逆转录病毒载体介导诱导型NO合酶在神经细胞中表达   总被引:4,自引:0,他引:4  
为了深入研究诱导型一氧化氮合酶基因表达产物在阿片耐受和依赖中作用,采用脂质体介导基因转染技术,将iNOS cDNA重组逆转录病毒载体导入NG108-15神经细胞,获得G418抗性克隆,命名为NG-LNCXiNOS细胞。DNA印迹杂交,PCR扩增及RT-PCR和蛋白质免疫印迹杂交分析,证实NG-LNCXiNOS细胞有外源iNOS基因整合,转录和表达;NADPH黄递酶(NADPH diaphorase  相似文献   

11.
雪花莲外源凝集素基因转化番茄   总被引:20,自引:0,他引:20  
将含有雪花莲外源凝集素基因(GNA)的质粒pRSSGNA1通过冻融法转化到根癌土壤杆菌9Agrobacterium tumefaciens(Smith et Townsend)Conn)菌株LBA4404中。采用叶盘法转化番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)栽培品种“C8”、“A39”和“A53”,获得了含GNA基因的43株转化植物株。通过卡那霉素抗性鉴定、NPTⅡ基  相似文献   

12.
紫云英细胞转化条件的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
研究了紫云英(AstragalussinicusL.)细胞遗传转化的条件。根癌农杆菌(Agrobacteriumtum efaciens)经含乙酰丁香酮的低pH/PO3-4 诱导培养后,用来感染紫云英下胚轴原生质体,随后的细胞GUS瞬间表达活性显著提高,间接证明了上述预培养诱导活化了细菌vir基因,促进了T-DNA 向植物细胞转移。在PEG介导的DNA 转移中,较高的pH 和Ca2+ 浓度能够提高细胞GUS活性。质粒DNA 浓度及启动子类型对外源基因在植物细胞内表达也有一定影响。采用外植体-农杆菌共培养法,获得GUS和NPT Ⅱ基因稳定表达的紫云英转化植株  相似文献   

13.
家蚕滞育生物钟蛋白质Ease A4的纯化及其分子结构分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
EaseA4是家蚕卵的一种滞育生物钟蛋白质.产下后2d的家蚕C108品种滞育性卵,经过丙酮脱脂、85℃热处理、硫酸铵沉淀和SephadexG-25凝胶过滤层析初步分离,进一步经过Sep-PakC18脱盐浓缩,HPLC(柱为YMC-PackProtein-RP)分离,通过SDS-PAGE和MALDIMS方法鉴定,纯化得到EaseA4蛋白质.从10g蚕卵最终得到了11.8μgEaseA4.EaseA4由从His到Tyr的155个氨基酸残基构成,蛋白质部分的分子量为16601.其22位氨基酸残基Asn处有一个Asn-X-Thr糖基化场所,并有糖基结合在该部位,糖基的分子量约为760.EaseA4的61位和150位的两个Cys氨基酸残基之间存在二硫键.糖基和二硫键的存在不仅有利于酶蛋白的分离,还可能与酶活性有关  相似文献   

14.
X. C. ZHANG 《植物研究》1998,18(1):107-117
GENUSANTROPHYUMKAULF.FROMCHINAANDNEIGHBORINGREGIONSX.C.ZHANG(Theherbarium(PE),InstituteofBotany,ChineseAcademyofSciences,Bei...  相似文献   

15.
莱氏衣原体膜上Mg~(2+)-ATPase用DOC溶解后,经Sepharose-6B和DEAE-CelluloseDE-52离子交换柱,得到了部分纯化的Mg~(2+)ATPase,并将此ATPase与不同极性头部的磷脂和膜糖脂重组,研究了不同的极性头部的磷脂和膜糖脂对ATPase活性的影响。此酶的活性不依赖酸性磷脂,PG、DPG、大豆磷脂等明显抑制酶活性,中性磷脂DMPC、PE、PC则能增加酶活性,其中尤以非双层脂PE的作用最为明显。从莱氏衣原体膜上提取的糖脂(MGDG,DGDG)单独和ATPase重组时,酶活性增加并不明显,当MGDG和DGDG以等比例混合时,能大大地增加酶活性。这表明Mg~(2+)-ATPase的活性很大程度上与磷脂的表面电荷及磷脂的组成相关。  相似文献   

16.
SYSTEMATICPALEONTOLOGYGenusCelsigondolellaKozur ,196 8  Typespecies Gondolella (Celsigondolella)watznauriKozur ,196 8Celsigondolellabaiyunensissp .nov .(PlateⅠ ,figs .1— 5 )  Etymology NamedfromitsoccurrenceinBaiyunsection ,Guizhou .Diagnosis ArepresentativeofCelsiog…  相似文献   

17.
萝卜贮藏期过氧化物酶活性及同工酶谱研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
为了研究萝卜贮藏期过氧化物酶的活性变化和作用 ,利用愈创木酚法和聚丙烯酰胺凝胶电泳方法检测在贮藏期萝卜过氧化物酶的活性及同工酶谱 ,实验结果表明 :不同品种的萝卜在不同贮藏时期其过氧化物酶活性及同工酶谱存在差异。贮藏时间越长过氧化物酶活性越高 ,同工酶谱酶带增多。萝卜色素含量越高 ,POD活性也越高 ,因此 ,在萝卜贮藏期有可能过氧化物酶在清除细胞内H2 O2 方面起主要作用  相似文献   

18.
SELF—TRAININGNEURALNETWORKMODELFORREALTIMETOMOGRAPHYDATAPROCESSINGYu.Kulchin;O.Kameney(Departmentofphysics,FarEasternStateTec...  相似文献   

19.
采后GA_3诱导菠萝多酚氧化酶活性升高的机理   总被引:2,自引:0,他引:2  
在多酚氧化酶(PPO)提取过程中,直接加入GA3溶液,不能使PPO活性增加。采后GA3诱导菠萝(Ananascomosus(L.)Mer.)PPO活性升高的同时,显著提高了酸性磷酸酯酶的活性,这是果实组织的Pi浓度明显升高的主要原因。随着果实的后熟,磷脂酶D活性不断下降,GA3处理显著延缓了该酶的下降速度。虽然采后ABA处理使果实PPO活性有小幅度增加,但ABA处理能使GA3对PPO活性的诱导明显加强。  相似文献   

20.
大鼠鼻粘膜肽能神经末梢分布的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
用免疫组化技术(ABC法)系统研究了大鼠鼻粘膜9种肽能神经末梢分布的特征,这9种神经肽分别是P物质(substanceP,SP),神经激肽A(neurokininA,NKA),神经激肽B(neurokininB,NKB),降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP),血管活性肠多肽(vasoactiveintestinalpolypeptide,VIP),神经肽Y(neuropeptideY,NPY),甘丙肽(galanin,GAL),生长抑素(somatostatin,SOM)及神经降压素(neurotensin,NT),同时选择与鼻粘膜神经肽(NP)作用密切相关的三叉神经节(TG)细胞进行上述NP的定位。用重组PSP65质粒(400SOMcDNA)制备SOMmRNA单链探针,以地高辛精标记,在鼻粘膜及TG细胞进行SOMmRNA的原位杂交组化研究。结果提示大鼠鼻粘膜有丰富的肽能神经末梢;TG细胞含有多种NP并且可以合成SOM。该研究结果对重新认识鼻粘膜神经分布规律有一定意义。  相似文献   

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