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1.
采用荧光分光光度计法检测维甲酸(RA)、1,25(OH)2VD3及佛波酯(PMA)诱导CCL229细胞分化后[Ca2+]i变化,并观察内质网(ER)特异的Ca2+-ATPase抑制剂Thapsigargin(TG)、IP3受体抑制剂Heparin对RA诱导[Ca2+]i变化的影响,从而探讨RA诱导[Ca2+]i变化与ER的关系。结果显示:RA和1,25(OH)2VD3在数秒内引起[Ca2+]i显著升高。在EGTA和Verapamil预处理细胞条件下,TG不能抑制RA引起Ca2+从细胞内钙池中外流,RA作用后TG仍能升高[Ca2+]i。另外,Heparin也不能完全抑制RA升高[Ca2+]i。提示RA诱导大肠癌细胞升高[Ca2+]i可能通过ER上IP3敏感性和非敏感性钙池,亦可能细胞内存在除ER外对RA敏感的钙池。 相似文献
2.
本工作采用荧光探针Fura-2AM观察了外源性神经节苷脂GM3和GD3对SMMC-7721人肝癌培养细胞钙的影响,证明GM3和GD3均能升高细胞内钙浓度([Ca2+]i),但程度上有极大差异。10nmol/mLGM3或1.0nmol/mLGD3可使[Ca2+]i上升高是明显,与对照相比[Ca2+]i分别增加215~250%和42%。进一步用Verapamil阻断钙通道和内质网钙释放、去除细胞外Na+以抑制Na+-Ca2+交换以及去除细胞外Ca2+在无外钙内流等系统观察了GM3和GD3的作用方式,结果提示GM3升高[Ca2+]i的机制是一个同时增加内质网钙释放、激活钙通道并伴有质膜Ca2+-ATP酶激活的综合结果;而GD3则主要抑制Na+-Ca2+交换系统。 相似文献
3.
DMSO对人胃腺癌MGC80—3细胞的诱导分化作用 总被引:5,自引:0,他引:5
用光镜、电镜和生化分析方法研究DMSO在体外对MGC80-3细胞的作用,不同浓度DMSO对MGC80-3细胞有不同的生长抑制作用。1.5%DMSO是本研究较适合的浓度。1.5%DMSO处理7天后细胞生长率、分裂指数、克隆形成率和Con-A凝集率分别下降35.15%、18%、90%和55.8%。处理后,癌细胞膜的碱性磷酸酶(不存在于正常人胃粘膜)比活性下降了90%,接种裸鼠致瘤率亦下降75%。处理后 相似文献
4.
1,25—二羟维生素D3的免疫调节作用 总被引:6,自引:0,他引:6
1,25(OH)2D3是维生素D3的形式,其生物效应是由1,25(OH)2D3受体(VDR)介导的。单核细胞、激活的淋巴细胞等免疫系统细胞均有VDR的表达,1,25(OH)2D3对免疫系统功能有重要调节作用,主要表现于:在分子水平上抑制白细胞介素2(IL-2)、γ-干扰素(INF-γ)及粒单系集落刺激因子(GM-CSF)等细胞因子的表达;细胞水平上调节免疫系统细胞的增殖分化及其免疫功能;在整体水平 相似文献
5.
氧化修饰HDL刺激培养人主动脉平滑肌细胞增殖 总被引:2,自引:0,他引:2
平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)增殖在动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成中起着重要作用。氧化修饰HDL(oxidixed HDL,OX-HDL)可刺激^3H-TdR掺入培养人动脉SMC的DNA,促进SMC增殖。以四甲工偶氮唑盐9MTT)法直接观察OX-HDL对培养人动脉SMC增殖细胞数的影响。结果显示,天然HDL(native HDL N-HDL)对 相似文献
6.
利用单克隆抗体免疫磁珠吸附方法脐血CD34+细胞,并观察了IL-3/GM-CSF融合蛋白(PIXY-321)对脐血CD34+细胞的刺激作用。PIXY-321对脐血CD34+细胞扩增作用大于IL-3和GM-CSF单独及联合应用,在液体培养条件下,每毫升20ngPIXY-321可有效地扩增脐血造血祖细胞,适宜扩增时间为5-8天,扩增后造血细胞的数量可达扩增前的8-10倍,从而初步建立了一种简单可行的脐 相似文献
7.
小麦根质膜H^+—ATPase的部分纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
以小麦(TriticumaestivumL.)根为材料,采用不连续蔗糖密度梯度离心法制备高纯度质膜微囊。质膜经TritonX100和KCl处理后,再用Zwitergent314增溶H+ATPase,最后用硫酸铵沉淀得到部分纯化的质膜H+ATPase。SDSPAGE结果表明,经过上述步骤纯化,分子量为94kD的膜蛋白组分得到富集;与质膜相比,其含量提高15.7倍。部分纯化的质膜H+ATPase可以水解ATP,受K+刺激,并被N,N′dicyclohexylcarbodimide(DCCD)抑制;ATP水解活力被Na3VO4抑制95%,但不被NaN3、NaNO3和Na2MoO4抑制。 相似文献
8.
大鼠肝窦状隙细胞培养结果显示:氧化高密度脂蛋白2(ox-HDL2)对异硫氰酸荧光素(FITC)荧光标记ox-HDL2的细胞结合有竞争抑制作用,而HDL2则无。细胞内吞FITC-ox-HDL2的荧光强度(FS)和[3H]CE-ox-HDL2(r-ox-HDL2)的放射强度分别是内吞FITC-HDL2的45.5%和rHDL2的61.4%。内吞FS主要存在于三氯醋酸(TCA)沉淀部分,而放射强度主要存在于TCA上清液部分。细胞释放的FS和放射活性分别是内吞量的67.7%和10.9%,且主要存在于TCA可沉淀部分。结果提示:(1)大鼠肝窦状隙细胞可能存在着ox-HDL受体,该受体不同于HDL受体。(2)ox-HDL2在细胞内代谢方式与HDL2相似,均没有经历溶酶体分解途径。在细胞内载脂蛋白与胆固醇酯(CE)组分经历一个解离过程。细胞截留大部分CE后,将载脂蛋白(Apo)与剩余CE重组成脂蛋白并以逆向胞饮方式释放到胞外。(3)氧化修饰减弱HDL2逆向转运胆固醇能力 相似文献
9.
抗寒锻炼对冬小麦幼苗质膜Ca^2+—ATPase的稳定作用 总被引:14,自引:0,他引:14
通过氯化铈(CeCl3)沉淀的电镜细胞化学方法,观察了抗寒锻炼对冬小麦(TriticumaestivumL.)幼苗质膜Ca2+ATPase的稳定作用,主要结果是:(1)正常温度(20℃)下生长的冬小麦幼苗(未经抗寒锻炼),其质膜上有很强的Ca2+ATPase活性反应;当经过-9℃3h的低温处理后,质膜的Ca2+ATPase活性明显降低;在处理12h后,质膜的Ca2+ATPase活性进一步降低;当处理时间延长到24h,质膜的Ca2+ATPase完全失活,同时细胞的超微结构受到破坏。(2)冬小麦幼苗在2℃低温下锻炼15d后,其质膜的Ca2+ATPase活性高于未经抗寒锻炼的小麦幼苗。抗寒锻炼后的小麦幼苗在-9℃处理3h后,质膜的Ca2+ATPase活性与低温处理前相比无明显降低;经低温处理12h,质膜仍保持较高的Ca2+ATPase活性,较同样低温处理(-9℃,12h)但未经抗寒锻炼的幼苗高;当-9℃低温处理24h后,质膜上仍可观察到Ca2+ATPase的活性反应,而且细胞的超微结构也未受到破坏。结果表明,抗寒锻炼可提高冬小麦幼苗质膜Ca2+ATPase在低温下的稳定性 相似文献
10.
水分胁迫对小麦根细胞质膜氧化还原系统的影响 总被引:18,自引:0,他引:18
水分胁迫使小麦根质膜NADH和NADPH的氧化速率及Fe(CN)6^3-和EDTA-Fe^3+的还原速率明显降低。对照与胁迫处理的质膜氧化还原系统活性均不受鱼藤酮、抗霉素A和DCN等呼吸链抑制剂的影响。在不加Fe(CN)6^-3作为电子受体时,水杨基羟肟酸(SHAM)可明显刺激质膜NADH的氧化和O2吸收速率。水分胁迫促使SHAM刺激的NADH氧化明显降低,但却使O2吸收略有上升。 相似文献
11.
两相分配法制备玉米根质膜及其纯度鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
用DextranT500,PEG3350两相体系制备玉米根质膜.首先在高盐浓度(22mmol/LNaCl)下选用五种不同的聚合物浓度(5.8%、6.0%、6.2%、6.3%、6.4%,W/W),研究了玉米根质膜在两相体系中的分配情况,在此基础上进一步研究了Na-Cl浓度(2、4、5、11、22mmol/L)对玉米根质膜的纯度及得率的影响.结果表明,制备玉米根质膜选用6.2%(W/W)聚合物浓度,7.5mmol/LNaCl的两相体系比较合适.标志酶鉴定及低pH值磷钨酸染色电镜检测均表明获得了高纯度密实的正向型的质膜囊泡,质膜标志酶VO3-4-ATPase的活性潜势达88.9%. 相似文献
12.
HCO3^—对海生颗石藻细胞表面钙化和CO2固定作用的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
颗石藻(EmilianiahuxleyiHayuandMohler)是海洋浮游生物中生物量最大的普生性种群。在添加了20mmol/LHCO-3的ESM培养液中生长的E.huxleyi,细胞表面形成颗石片落所固定的碳酸钙与细胞合成的有机质干重比达2.47∶1,在不添加HCO-3的ESM培养液中生长的E.huxleyi,细胞表面的碳酸钙与细胞合成的有机质干重比为0.05∶1,脂类含量达细胞干重的186%。细胞钙化实验和扫描电镜分析证实,培养液中HCO-3离子是控制E.huxleyi细胞钙化的主要因素,E.huxleyi细胞除了具有光合作用途径利用和固定CO2外,在一定HCO-3离子的浓度条件下还具有另一条固定CO2的途径,形成以CaCO3为主要成分的钙质片落(颗石片落)。E.huxleyi细胞热转化成烃实验结果显示,富含脂类的E.huxleyi在300℃热解时产出的“氯仿沥青A”、饱和烃和芳烃的量很高,其饱和烃产量可达细胞干重的2.8%,是一般藻类产烃量的6~15倍。研究结果初步显示,E.huxleyi是开展碳循环的环境优化研究和可再生生物能源研究良好的实验生物系统。 相似文献
13.
蛛网膜下腔注射(i.t.)强啡肽A1-17(Dyn)引起剂量依赖性后肢和尾部瘫痪及甩尾甩足抑制。脊髓背角(侧)NMDA受体和NOS/NO功能活性下降可能与Dyn镇痛作用有关,脊髓腹角(侧)NMDA受体-Ca2+-NOS/NO通路过度激活及c-fos高表达可能与Dyn致脊髓损伤(SCI)作用有关。在Dyn致SCI机制中,过量NO(细胞水平)具有神经毒性作用,脑源性NOS主要在早期,诱生型NOS主要在后期起作用,而内皮细胞源性NOS和适量NO(血管水平)可能具有保护作用。在原代培养脊髓神经元中,高浓度Dyn可通过NMDA受体和κ受体直接引起细胞内Ca2+超负荷,低浓度Dyn只通过κ受体抑制高钾刺激性Ca2+内流 相似文献
14.
缺氧诱导因子1和红细胞生成素3‘—增强子调节内皮细胞?… 总被引:22,自引:0,他引:22
目的和方法:将红细胞生成素(EPO)3'-增强子野生片断及点突变片断借脂质体主人脐静脉内皮细胞株ECV-304,用半定量RT-PCR测定正常秘缺氧诱导因子-1(HIF-1)诱导剂氧化钴(CoCl2)作用下培养6h的细胞环氧合酶2(COX-2)和血栓素合酶(TXS)的mRNA。结果:HIF-1诱导剂CoCl2可放COX-2和TXS基因转明显增强2,向细胞导入野生EPO3'增强子片断可阻断CoCl2诱 相似文献
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1,25(OH)2D3是维生素D3的激素形式,其生物效应是由1,25(OH)2D3受体(VDR)介导的。单核细胞、激活的淋巴细胞等免疫系统细胞均有VDR的表达,1,25(OH)2D3对免疫系统功能有重要调节作用,主要表现于:在分子水平上抑制白细胞介素2(IL2)、γ-干扰素(INF-γ)及粒单系集落刺激因子(GM-CSF)等细胞因子的表达;在细胞水平上调节免疫系统细胞的增殖分化及其免疫功能;在整体水平上可以减少实验性自身免疫性疾病的发病率并改善病情,并能延长实验性移植器官的存活时间。 相似文献
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氧化修饰使HDL促动脉平滑肌细胞胆固醇流出减少 总被引:6,自引:0,他引:6
为了研究氧化修饰对高密度脂蛋白(HDL)转运细胞胆固醇地^3H-胆固醇负荷的培养人动脉平滑肌细胞(SMC)分别与天然HDL及Cu^2+akg HOCl氧化修饰的HDL在37℃温育不同时间后,分别测定细胞^3H-胆固醇清除率。结果发现,温育24h后,经Cu^2+或HOLl氧修饰后的HDL其细胞胆因醇清除率分别较天然HDL下降了30.0%和43.1%(p〈0.01)。结果还发现,Cu^2+或HOCl氧 相似文献
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本文的目的是研究长时间低氧对离体培养的大鼠颈动脉体球细胞(golmus cell)的影响。对实验组Sprague-Dawley(SD)大鼠,首先将其置于模拟5000m高度低氧环境的低压舱中饲养了-10d,然后麻醉动物,取出颈动脉体,将其分离成单个细胞和细胞群体(clusters)。这些细胞在低氧条件(11%O2,5%CO2,845N2)下培养2-3d。取自正常SD大鼠的颈动脉全细胞被分为两组,分别 相似文献
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天然及氧化修饰脂蛋白对人动脉平滑肌细胞原癌基因… 总被引:8,自引:1,他引:8
动脉平滑肌细胞(SMC)的增殖在动脉粥样硬化(AS)的形成过程中极其重要。我们在建立人主动脉SMC体外培养方法的基础上,观察了LDL,VLDL及HDL和相应的氧化修饰型脂蛋白对培养人SMC sis,jun,H-ras原癌基因及Rb抗癌基因转录表达的影响。结果表明:(1)HDL对SMCsis,jun,ras基因表达无影响;(2)LDL和VLDL有使这些基因表达增加的趋势;(3)ox-LDL,ox-V 相似文献
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提高菜心离体植株再生频率的研究 总被引:42,自引:0,他引:42
AgNO3与ABA 相配合,在离体培养条件下从3个菜心(Brassica parachinensisBail.)品种(“49-19”、“60D”和“70D”)获得了高频率的植株再生。结果表明:在试验的3种外植体中,子叶-子叶柄再生能力最强。实生苗龄及接种方式影响植株再生频率。MS附加不同浓度的BAP和NAA,BAP 2 m g/L与NAA 1 m g/L配合效果最好,植株再生频率可达26.8% 。培养基中单独添加AgNO3 或ABA 均能促进植株再生,且AgNO3 作用优于ABA。AgNO3(4 m g/L)和ABA(0.5 m g/L)相配合获得了更高的植株再生频率:“49-19”达89% ,“60D”达84.3% ,“70D”达86% 。组织学研究表明,在本实验条件下菜心离体培养植株再生方式为外植体直接出芽。不定芽起源于子叶柄切口端维管组织的薄壁细胞;由此种细胞分裂形成分生细胞团,继而分化成芽。试管苗移入盆中获得成熟植株 相似文献