磷脂组成对脱脂蛋白模型多肽与脂质体相互作用的影响

根据脱脂蛋白的脂结合序列合成了两个两亲性多肽Ａｍｐ１和Ａｍｐ２,在Ａｍｐ２在缬氨酸残基取代了Ａｍｐ１第４位的赖氨酸残基。用内源荧光谱发射峰的蓝移,包埋的钙氯黄素在脂质体中的渗漏,丙烯酰胺对多肽色氨酸残基的淬灭等手段比较了Ａｍｐ１与Ａｍｐ２与具有不同磷脂组成的脂质体的相互作用,并研究了温度的影响。     

脱脂蛋白模型多肽与脂质体相互作用的高效液相色谱…

应用凝胶过滤高效相色谱，测定了两个两亲性多肽Ａｍｐ１和Ａｍｐ２进入磷脂酰甘油／磷脂酰胆碱脂双层的表观分配常数，并利用三硝基苯磺酸分析研究了与脂持体结合的多态的氨基暴露状况。由结果推测，处于结合状态的多肽的氨基端是暴露于水相的；Ａｍｐ１与脂双层相互作用强于Ａｍｐ２，一方面表现为Ａｍｐａ比Ａｍｐ２埋膜较要近另一方面表现为Ａｍｐ１与脂双层的结合能力比Ａｍｐ２强，而主要表现在于后者。此外了发现两个多肽在缓     

脱脂蛋白模型多肽与脂质体相互作用的高效液相色谱研究

应用凝胶过滤高效液相色谱,测定了两个两亲性多肽Ａｍｐ１和Ａｍｐ２进入磷脂酰甘油／磷脂酰胆碱脂双层的表观分配常数,并利用三硝基苯磺酸分析研究了与脂质体结合的多肽的氨基暴露状况。由结果推测,处于膜结合状态的多肽的氨基端是暴露于水相的;Ａｍｐ１与脂双层相互作用强于Ａｍｐ２,一方面表现为Ａｍｐ１比Ａｍｐ２埋膜较深,另一方面表现为Ａｍｐ１与脂双层的结合能力比Ａｍｐ２强,而主要表现在于后者。此外也发现两个多肽在缓冲液中处于几乎不存在暴露的氨基的聚合状态。     

牛胰多肽（BPP）与DPPC脂质体相互作用的付立叶变换红外光谱研究

本文详细报导用付立叶变换红外光谱法研究去氧胆盐(DOC)和牛胰多肽(BPP)与DPPC脂质体的相互作用.发现DOC和脂质作作用后,DPPC的CH:对称和反对称伸展振动频率向高波数方向移动,相交曲线变宽,相变温度降低;BPP和DPPC作用后,红外光谱无明显变化,但它却能抑制由DOC对DPPC脂质体的上述作用.从而对BPP具有细胞保护作用的分子机制作了进一步的阐述.     

利用天然凝胶电泳法分析多肽的相互作用

目的:建立一种改进的利用天然凝胶电泳(N-PAGE)分析多肽间相互作用的方法。方法:主要对上样缓冲液和染色液做了改进。其中,上样缓冲液中除去了SDS和还原剂(DTT或β-巯基乙醇);染色液中加入了0.1%的CuSO4.5H2O,并含有25%的异丙醇。结果:在经过约3h的电泳后,上样量约10μg的多肽(相对分子质量为4000)可与其复合物清晰分离。结论:改进的N-PAGE法可用于研究多肽的相互作用。     

多肽、蛋白类药物脂质体的研究进展

脂质体做为多肽、蛋白类药物一种新型给药载体有控制药物释放、降低药物的毒性、提高药物的靶向性等突出优点,具有广阔的应用前景。本文通过查阅近10年来多肽和蛋白类药物脂质体研究的相关资料,总结论述了脂质体作为多肽、蛋白类药物载体在新的制备方法、新型脂质体、给药途径、产业化进展四个方面的最新研究动向,指出了多肽、蛋白类药物脂质体在研究应用中存在的不足,并展望了多肽、蛋白类药物脂质体未来发展的方向。     

大肠杆菌葡糖醇通透酶信号肽及其类似物与脂质体的相互作用

合成了大肠杆菌葡糖醇通透酶的N端信号肽(Gut22)和它的一个类似物(Gut22Ana),原第7位组氨酸残基在类似物中为脯氨酸残基所替换,且第10位谷氨酸残基为缬氨酸残基所替换.信号肽及其类似物的内源荧光光谱表明Gut22结合脂双层的能力远强于Gut22Ana,包埋钙氯黄素的脂质体的渗漏实验表明Gut22能强烈扰动脂双层而Gut22Ana不能扰动脂双层.也测定了Gut22与磷脂酰胆碱/磷脂酰丝氨酸脂双层的表观分配常数,研究了膜电位于Gut22与脂双层相互作用的影响,并利用圆二色谱分析研究了Gut22和Gut22Ana在加入脂质体后的构象变化.     

脂质体重组和脂蛋白体在植物生物膜研究中的应用

脂质体是磷脂在一定条件下在水中形成的由脂质双分子层组成的内部为水相的闭合囊泡。在推动生物膜的研究进展中,它作为模式系统起着非常重要的作用,能用于研究膜蛋白的性质和功能;膜脂和膜蛋白的相互关系;膜的电化学性质等。近年来脂质体重组技术开始引入到植物学研究领域,用于对植物膜蛋白的研究。本文简要介绍了脂质体的制备和脂酶体重组的方法及其在植物生物膜研究中的应用。     

脂质体重组和脂蛋白体在植物生物膜研究中的应用

脂质体是磷脂在一定条件下在水中形成的由脂质双分子层组成的内部为水相的闭合囊泡。在推动生物膜的研究进展中,它作为模式系统起着非常重要的作用,能用于研究膜蛋白的性质和功能;膜脂和膜蛋白的相互关系;膜的电化学性质等。近年来脂质体重组技术开始引入到植物学研究领域,用于对植物膜蛋白的研究。本文简要介绍了脂质体的制备和脂酶体重组的方法及其在植物生物膜研究中的应用。     

蛋白质密码--有义多肽与反义多肽间的相互作用

一维的遗传密码不足以解释蛋白质高级结构和功能之间的关系。总结并探讨有义多肽和由有义多肽的反义核苷酸序列编码的反义多肽间的相互作用,提出二维密码即蛋白质密码的存在。蛋白质密码与遗传密码的结合,可以解释蛋白质间的在连续空间中的相互作用。有义多肽与反义多肽相互作用在生物学上的潜在应用是巨大的,但仍需进一步深入研究。     

磷脂酸(PA)-磷脂酰乙醇胺(PE)相互作用有利于脱血红素细胞色素c跨脂质体的运送

细胞色素c的前体 -脱血红素细胞色素c(Apocyt.c)在细胞质中核糖体合成 ,之后跨线粒体膜运送 ,在线粒体内、外膜间隙中经酶催化与血红素Heme结合形成成熟型的细胞色素c定位于线粒体内膜外侧     

牛胰多肽与CL／PC脂质体作用后二级结构的变化

用傅立叶变换红外光谱研究了ＢＰＰ与膜作用后其二级结构的变化,通过对红外光谱中酰胺Ｉ谱带进行解卷积、微分及曲线拟合等处理,结果表明,ＢＰＰ与脂膜作用后,其二级结构中α－螺旋成分增多,无规卷曲成分减少。     

脂质体与磷脂单分子层相互作用的研究

本文尝试通过脂质体与磷脂单分子层(LB膜)相互作用去研究与膜间作用有关的问题。实验结果表明,脂质体的尺度、相状态,脂质体与LB膜的表面电荷性质,均对脂质体向LB膜的转变率有显著影响。本文尝试的方法有可能为人工膜研究膜间作用问题提供一条新的途径。     

多肽靶向脂质体的表面配体修饰密度及其体内肿瘤靶向效果的研究

脂质体作为一种药物载体广泛应用于肿瘤药物输送中。配体修饰的靶向脂质体,其靶向配体分子在脂质体表面修饰的构象和密度等参数,对脂质体本身的特性及其体内的靶向效果,有很大的影响。但有关其中的具体相互关系,以及可能的最优条件,国内外文献都尚无定论。据此我们建立了多肽靶向脂质体表面配体修饰的分析方法,并通过影像学手段来研究不同靶向肽含量对脂质体在荷瘤裸鼠中的靶向行为的影响。首先采用孵育插入法将带有多肽的脂质分子插入脂质体表面,用分子筛色谱法分离修饰后的脂质体和未插入的多肽脂质,再用HPLC-ELSD定量各脂质成分,得到多肽靶向脂质体表面的靶向肽密度。而后将修饰有不同密度靶向多肽的荧光脂质体经荷瘤小鼠尾静脉注射,分别在给药前后各时间点对小鼠进行扫描,对扫描得到的图像进行处理并计算AUC、T1/2和MRT等相关药代动力学参数。结果表明,随着脂质体表面多肽密度的增加,即多肽密度大于1.298%的靶向脂质体,其肿瘤部位的荧光AUC、T1/2和MRT都较未修饰的隐形脂质体有所提高,显示其在肿瘤组织中的聚集量增多、停留时间延长,针对肿瘤细胞的特异性作用机制得以彰显。     

牛胰多肽（BPP）抑制CL／PC脂质体的膜融合

Ｃａ＾２＋能诱发ＣＬ／ＰＣ脂质体的聚集,漏出及进一步的融合,其作用大小随着Ｃａ＾２＋浓度的增高而增强。吸收、荧光和冷冻断裂电镜等方法所得结果证明了这一点。ＢＰＰ抑制由Ｃａ＾２＋诱发的ＣＬ／ＰＣ脂质体的聚集和融合,其作用的大小随ＢＰＰ的增加而增大。上述三种方法从不同角度都给出了同样结果,肯定了ＢＰＰ抑制ＣＬ／ＰＣ脂质体由Ｃａ＾２＋诱发的聚集和融合作用。     

免疫脂质体与人胃癌细胞的相互作用

我们把抗人胃癌细胞M85的单克隆抗体3Hll插入脂质体的脂双层做成免疫脂质体,研究了这些免疫脂质体与M85细胞的相互作用.结果表明,M85细胞对免疫脂质体的吸收与温育时间、温度密切相关.在37℃温育10小时,细胞吸收的免疫脂质体的量是在4℃时的7倍左右.37℃温育5小时,靶向脂质体结合在M85靶细胞上的量是非靶向脂质体的2倍多;与非靶细胞—人皮肤成纤维细胞Fb32的结合量只有与M85靶细胞结合量的1/6.游离单抗3Hll能够抑制靶向脂质体与靶细胞的结合,而专一性与3Hll抗体不同的单抗3G9则不能.NH_4Cl和NaN_3等内吞作用抑制剂使靶细胞吸收免疫脂质体的量分别减少58%和79%.与此同时,NH_4CI还能抑制包入脂质体的ADM,而不能抑制游离ADM的细胞毒作用.因此我们的结论是,3Hll免疫脂质体能够与靶细胞专一地结合,并把所荷载的物质主要经内吞作用输送到细胞内,杀伤靶细胞.用荧光显微镜对与荧光免疫脂质体温育的M85细胞进行的形态观察也支持上述结论.     

正义-反义多肽的相互作用

遗传学中心法则指出,ＤＮＡ有义链（即正义链,ｓｅｎｓｅＲＮＡｓｔｒａｎｄ）可转录为单链ｍＲＮＡ,其核苷酸序列决定蛋白质的氨基酸序列。虽然ＤＮＡ无义链（即反义ＤＮＡ链,ａｎｔｉｓｅｎｓｅＤＮＡｓｔｒａｎｄ）能以框转录方式转录成反义ｍＲＮＡ,甚至能以框翻...