胃肠道间质瘤的分子分型及靶向治疗

胃肠道间质瘤（gastrointestinal stromal tumors,GISTs）是消化道常见的间叶肿瘤,不同于消化道真正的平滑肌瘤、神经源性肿瘤,其发生主要与Kit基因和血小板衍生生长因子受体α（platelet-derived growth factor receptor alpha,PDGFRα）基因突变有关。KIT靶点的发现使得胃肠道间质瘤治疗进入新治疗模式。伊马替尼与舒尼替尼,均为酪氨酸激酶抑制剂,分别被批准为进展期GISTs治疗的第一线及第二线靶向治疗药物。本文就GISTs的分子生物学分型以及分子靶向药物治疗进展作一概述。     

胃肠道间质瘤的分子分型及靶向治疗

胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GISTs)是消化道常见的间叶肿瘤,不同于消化道真正的平滑肌瘤、神经源性肿瘤,其发生主要与Kit基因和血小板衍生生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor alpha,PDGFRα)基因突变有关。KIT靶点的发现使得胃肠道间质瘤治疗进入新治疗模式。伊马替尼与舒尼替尼,均为酪氨酸激酶抑制剂,分别被批准为进展期GISTs治疗的第一线及第二线靶向治疗药物。本文就GISTs的分子生物学分型以及分子靶向药物治疗进展作一概述。     

肿瘤心脏病学及抗肿瘤药物的心脏毒性

随着癌症治疗水平的不断进步,使得这类患者的治愈率越来越高,也使得原来合并存在的其他疾病得到有效控制,使病人的生存时间和生活质量明显提高。然而许多现有的和新兴的癌症治疗方法都危及这类病人的心血管健康,由此引起的心血管事件明显影响肿瘤患者的长期发病率和死亡率,日益成为影响这类疾病预后的关键因素。基于此,肿瘤心脏病学专科应运而生,旨在提高患者的心血管健康,同时促进最有效的癌症治疗。本综述重点论述肿瘤心脏病学的概念、抗肿瘤药物引起的心脏毒性机制及未来发展方向。     

实时无标记细胞分析系统(RTCA)在药物心肌毒性检测和生物活性研究中的应用

实时无标记细胞分析系统(Real time xCELLigence analysis system,RTCA)是一种新型细胞检测技术,能够连续监测、记录及分析细胞活动产生的各种信息,在药物研究中的心肌毒性评估和细胞生物活性考察方面都可以发挥重要作用.文中首先对RTCA的原理与特点进行了介绍,然后分别对RTCA在心肌毒性...     

Spautin-1通过抑制自噬可增强舒尼替尼诱导的肾癌细胞凋亡

目的:研究spautin-1(一种自噬抑制剂)是否能抑制舒尼替尼诱导的肾癌细胞的自噬以及对舒尼替尼诱导的肾癌细胞凋亡的影响。方法:以肾癌细胞系786-O细胞为模型,Western Blot检测spautin-1对舒尼替尼诱导786-O细胞自噬的影响;Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测spautin-1和舒尼替尼对786-O细胞增殖的影响;应用流式细胞术,检测spautin-1对舒尼替尼诱导的786-O细胞凋亡的影响;Western Blot检测spautin-1的促凋亡作用与PI3K/AKT/GSK3β信号通路及抗凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1的关系。结果:与舒尼替尼单独处理组相比,spautin-1能通过降低Beclin-1的表达显著抑制舒尼替尼在786-O细胞中诱导的自噬;Spautin-1和舒尼替尼联合作用明显增强舒尼替尼对786-O细胞增殖的抑制作用;Spautin-1能进一步增强舒尼替尼诱导的786-O细胞的凋亡;Spautin-1和舒尼替尼联合处理786-O细胞时,可以显著降低p-AKTSer473和p-GSK3βSer9的蛋白表达水平,增强GSK3β的活性,进而下调Bcl-2、Mcl-1的表达。结论:Spautin-1能通过抑制AKT活性并活化GSK3β,进一步降低抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1的表达,增强舒尼替尼诱导的肾癌细胞凋亡。     

MTT法用于药物对L2细胞毒性的实验研究

目的：评价噻唑蓝（MTT）法检测药物对细胞的毒性作用的可靠性。方法：大鼠肺泡上皮L2细胞以叔丁基对苯二酚（TBHQ）10．100μM,BsO以1-10mM分别处理,用MTT法检测细胞活性、JC-1（5,5’,6,6’-四氯．1,1’,3,3’-四乙基苯并咪唑羰花青碘化物）荧光染料法检测细胞线粒体电位改变、台盼蓝排斥实验检测细胞死亡率,分析各指标的情况。结果：在处理剂量范围,MTT法检测到的光密度（OD）值未能达到一般判断的半数抑制浓度（ic50）水平,最高抑制率仅达到30％左右;台盼蓝排斥试验检测数据表明TBHQ的LC50值为50μM,丁硫氨酸亚砜胺（BSO）为5mM;利用JC-1荧光染料判断的半数凋亡剂量分别为50μM和7mM。结论：MTT法作为最常采用的细胞生长抑制检测手段,但在某些特定实验中可能不能客观地反映细胞的活性,建议多种方法结合进行评价。     

新型靶向治疗药物拉帕替尼的研究进展

拉帕替尼(lapatinib)是一种口服的、小分子可逆性EGFR和HER2双受体阻断剂。临床研究表明对HER2表达阳性的乳腺癌是有效的。近年来关于拉帕替尼在其他肿瘤的研究越来越多,拉帕替尼有望成为一种潜在、多肿瘤的靶向治疗药物。本文对拉帕替尼的作用机制、临床研究、药理特性及临床应用等做一综述。     

索拉非尼与舒尼替尼单药治疗晚期肝细胞癌的效果分析

目的:对比索拉非尼(Sorafenib)和舒尼替尼(Sunitinib)单药治疗晚期肝细胞癌的疗效及安全性。方法:对我院2004年1月-2010年10月收治的44例晚期肝细胞肝癌患者的临床资料进行回顾分析。根据不同给药方式,将患者分为两组。其中,索拉非尼组32例患者采取口服索拉非尼进行治疗,而舒尼替尼组12例患者给予口服舒尼替尼治疗。观察并比较两组患者的治疗效果及药物不良反应情况。结果:索拉非尼组总生存时间为6.3月,1年生存率为16%,肿瘤进展时间为3个月,疾病控制率为71%;舒尼替尼组总生存时间为4.7月,1年生存率为8%,肿瘤进展时间为3个月,疾病控制率为64%。两组临床效果差异无统计学意义(P=0.2415,0.5706,0.7132)。索拉非尼组患者手足皮肤反应、中性粒细胞减少及肝损伤等主要毒副反应的发生率均低于舒尼替尼组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:索拉非尼治疗晚期肝细胞肝癌的临床效果与舒尼替尼具有很好的一致性,药物不良反应相对较轻,患者依从性较好,值得临床推广应用。     

基于药物毒性反应等级的up-and-down自适应设计

Ⅰ期临床试验主要关心药物的毒性,目的是在给定的剂量水平中寻找最大耐受剂量（MTD）．本文提出了基于药物毒性反应等级的up-and-down自适应设计,调查了该设计在各种变化的剂量一毒性关系下的运作特征．结果表明：该设计方法对提高建议MTD的精确度,以及保护病人,防止病人暴露在较高毒性剂量下方面,对Ⅰ期临床试验的设计实现了有意义的改善．     

心肌干细胞培养和纯化的实验方法研究

目的:探讨心肌干细胞(CSC)体外分离、培养和纯化方法,以建立重复性好、稳定性高的CSC培养的方法.方法:用不同的消化方法来分C57BL小鼠心脏组织中的细胞,将获得的细胞置于自行拟定的心肌干细胞培养液中培养.以c-kit、Sca-l和Sca-l/c-kit作为干细胞标记,用免疫磁珠法纯化细胞.用流式细胞仪、免疫荧光显微镜、激光共聚焦显微镜检测分选后所得细胞表面标记表达,并对比观察分选前后细胞生长情况,进一步了解CSC的生物学特性.结果:①从小鼠心肌组织中分离培养所得的细胞中,含有一种类似于文献报道中所提及CSC形态的细胞.②用免疫磁珠法可以分选出高纯度的CSC,实验中分选出CSC分别具有c-kit+-CD34-lin-、Sea-I+-CD34low-Lin-、Sea-1+c--kit+-CD34low-Lin-的表型.③分选后的干细胞经过1~2d的滞留期后,贴壁生长的细胞形态相对均一;而传代后细胞贴壁迅速,细胞形态多样.结论:从C57BL小鼠心脏中可以分离、培养获得CSC,并可用免疫磁珠法得以纯化.     

基于药物毒性反应等级的Up-and-Down设计

Ⅰ期临床试验主要关心毒性,通常划分毒性为五个水平．简单起见,同时兼顾伦理问题,Ⅰ期临床试验通常采用up-and-down序贯设计(例如BCDⅠ,BCDⅡ,K-in-a-row,Narayana,Improved Narayana)．然而,在分配剂量水平时,该设计没有区分已经试验了的病人的严重毒性水平等级,从而有可能分配给病人更高毒性的剂量水平．因此,本文提出了基于药物毒性等级确定最大耐受剂量的up-and-down设计方法,并进一步研究了该设计方法在各种变化的剂量—毒性关系下的运作特征,并且和标准的up-and-down设计作模拟比较,结果表明该设计方法对Ⅰ期临床试验设计的剂量建议具有重要意义．     

肿瘤血管靶向药物的研究进展

肿瘤血管在实体瘤的发生发展中具有重要的作用,靶向肿瘤血管的新药研发已成为一个热点领域.抗肿瘤血管的治疗策略分为肿瘤新生血管生成抑制剂（tumor angiogenesis inhibitor,TAI）和肿瘤血管靶向药物（vascular targeting agents,VTAs）两方面的研究.肿瘤新生血管生成抑制剂旨在抑制肿瘤新生血管生成的过程,而肿瘤血管靶向药物则是通过快速而有选择性地破坏肿瘤血管功能,使肿瘤血供受阻,导致肿瘤坏死.VTA类药物分为两类：一是小分子抑制剂（small molecule agents）,利用肿瘤血管和正常组织血管存在的差别选择性地破坏肿瘤血管;另一种是生物制剂（biological agents）,借助能够特异结合肿瘤血管的配体将毒素、凝血诱导剂、凋亡诱导分子等运送到肿瘤血管,引起血管阻塞使肿瘤坏死.     

基于力达霉素的靶向药物与肿瘤治疗

作为一种抗肿瘤抗生素,力达霉素(lidamycin, LDM)对人类癌细胞显示出很强的细胞毒性。LDM由一个载体蛋白(LDP)和一个具有肿瘤杀伤活性的烯二炔发色团(AE)以非共价键方式组合而成,这一特征使得LDM成为构建肿瘤靶向药物的良好材料。通过基因重组技术将具有肿瘤靶向能力的蛋白质和(或)多肽与LDP偶联,由此获得具有肿瘤靶向能力的融合蛋白,在此基础上,再将AE整合到融合蛋白的LDP中,最终得到既具有肿瘤靶向能力,又具有LDM杀伤活性的肿瘤靶向药物。随着研究的逐步深入,可望有一批基于LDM的靶向药物能用于肿瘤的临床治疗。     

恒定磁场对小鼠精子毒性作用的实验研究

观察不同强度恒定磁场对雄鼠睾丸、附睾重量、精子数量、精子活动度及精子形态的影响. 结果显示睾丸与附睾重量各组无显著差异, 精子数量在实验组与对照组中亦无明显改变. 在 0.12T磁场环境暴露下, 雄鼠精子畸形率增加及活动率下降, 与对照组相比有显著差异. (P< 0.01), 提示磁场对小鼠精子有一定毒性, 并且毒性与其强度有关.     

中药毒性评价的技术方法与应用

中药的安全性近年来受到了广泛的关注和重视,但是相应的理论和实验研究还不够充分。中药的毒性是中药安全性的关键问题之一,参照国际惯例和西方植物药研究的标准规范,依据中医药理论,应用现代新技术新方法,结合基础研究的成果,制定相应的评价体系和研究规范,是解决这个关键问题的可行思路。对近年来课题组按照上述研究思路开展的有关中药毒性评价的技术方法与应用研究的结果进行了概述,希望能为中药毒性的评价方法和技术指导原则提供理论基础,也可为雷公藤等典型中毒中药的毒性研究提供研究示范,推动中药毒性研究的发展。     

骆驼刺提取物大鼠灌胃长期毒性实验研究

观察骆驼刺提取物对SD大鼠的长期毒性反应。采用SD大鼠120只,雌雄各半,按体重随机分为对照组及低、中、高剂量药物组,连续灌胃3个月,对照组给予羧甲基纤维素钠,检查血液学、血生化、电解质及组织病理学。结果显示各组大鼠给药期间未出现异常反应,高剂量雄性大鼠体重下降,与对照组比较,中、高剂量组的LYMPH、NEUT、RBC、HGB、PLT、BUN、K+、Na+升高,低、中、高剂量组的ALB、CHO、GLU降低,均在正常范围,组织病理学检查无明显变化,未见明显毒性反应剂量为1.0 g/(kg·d)[相当于生药22.7 g/(kg·d)]。本研究证明骆驼刺提取物对大鼠无明显毒副作用。     

100WCO2激光心肌血管再造术的实验研究

本文给出了利用１００ＷＣＯ２激光心肌血管再造术动物实验研究结果。激光器采用１００ＷＣＯ２激光,经光关节臂传输和会聚,激光孔径０．２５～０．５ｍｍ,孔间距离５ｍｍ,照射时间０．３秒,利用附加“滤波器”激光打孔技术可减轻心脏的热损伤。结果表明,在正常心肌上打孔,孔周２７０μｍ以外的心肌基本上不受损伤;高功率密度的激光束心肌打孔能够改善心肌微循环,可以明显改善打孔区的心肌缺血程度。实验犬术后六个月铸型实验证实了激光孔道仍然存在,术后三年病理切片检查充分说明了激光孔道仍然保持畅通     

姜黄素预处理通过上调miR-21缓解多柔比星心肌毒性

目的:探究miR-21是否介导姜黄素(Cur)预处理抗多柔比星(DOX)心肌毒性作用。方法:体外分离培养大鼠原代心肌细胞,用DOX处理24 h建立心肌毒性离体模型。姜黄素于DOX处理前12 h加入心肌细胞培养液中。实验分组如下:Control组;Cur组;DOX组;Cur+DOX组;miR-21i(miR-21抑制剂)+Cur+DOX组;miR-21i+DOX组。DOX处理24 h后检测miR-21表达情况、细胞活力、凋亡和氧化应激相关指标。结果:与DOX组相比,姜黄素预处理可呈剂量依赖性地提高DOX处理后心肌细胞活力,且浓度为5μM时效果最佳。此外,姜黄素预处理可以明显提高Bcl-2和miR-21表达,降低心肌Bax和cleaved Caspase-3表达、凋亡率以及心肌细胞活性氧(ROS)产量和丙二醛(MDA)含量。而用miR-21i下调miR-21表达可明显削弱姜黄素预处理对DOX心肌损伤的上述保护作用(均P0.05)。结论:姜黄素预处理可通过上调miR-21表达,缓解心肌凋亡和氧化应激损伤,进而缓解DOX心肌毒性。